當(dāng)歸多糖對大鼠骨關(guān)節(jié)炎的作用

劉巖松

（武漢維斯第醫(yī)用科技股份有限公司 湖北 武漢 430022）

當(dāng)歸多糖對大鼠骨關(guān)節(jié)炎的作用

劉巖松

（武漢維斯第醫(yī)用科技股份有限公司 湖北 武漢 430022）

本實(shí)驗(yàn)研究當(dāng)歸多糖（Angelica Sinensis polysaccharides，ASP）對實(shí)驗(yàn)性大鼠骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis，OA）的影響。32只wistar大鼠分為4組，每組8只。建模給藥后，評價關(guān)節(jié)軟骨的情況。發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸多糖關(guān)節(jié)腔注射在一定程度上能對抗大鼠OA，其機(jī)制可能包括保護(hù)軟骨細(xì)胞，促進(jìn)軟骨糖胺多糖合成。

當(dāng)歸多糖；骨關(guān)節(jié)炎；糖胺多糖

骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis，OA）是一種關(guān)節(jié)軟骨退行性病變，主要表現(xiàn)為軟骨表面纖維化、軟骨細(xì)胞和基質(zhì)蛋白多糖丟失、膠原基質(zhì)破壞、軟骨下骨外露及骨贅形成等當(dāng)歸多糖（Angelica Sinensis polysaccharides，ASP）是從當(dāng)歸中提取的多糖成分，多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)ASP具有較強(qiáng)的抗氧化作用。當(dāng)歸多糖主要由半乳糖、阿拉伯糖、鼠李糖等構(gòu)成［1］。在GAG合成作用中，上述單糖起主要作用［2］。

1.材料和方法

實(shí)驗(yàn)動物

32只雄性健康成年Wistar大鼠，體重250～300g，由湖北省疾病控制中心提供。

試劑

木瓜蛋白酶，上海士峰生物科技有限公司；當(dāng)歸多糖，甘肅岷縣康達(dá)生物科技有限責(zé)任公司；硫酸氨基葡萄糖，Rottapharm Ltd。

OA模型的建立及動物分組

32只雄性Wistar大鼠，分成正常對照組、當(dāng)歸多糖、模型對照和陽性對照組，每組8只。4%的木瓜蛋白酶溶液建OA模型。

當(dāng)歸多糖組雙膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)分別注射0.5g/L的ASP溶液0.1ml，每周注射兩次，連續(xù)5周；正常對照組、模型對照組大鼠雙膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射等量生理鹽水，每周注射兩次。陽性對照組大鼠每日給予硫酸氨基葡萄糖灌胃，劑量為100mg/kg。

取材及檢測

自實(shí)驗(yàn)開始的第7周，斷頭處死大鼠，取關(guān)節(jié)軟骨，行HE和番紅O染色。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法使用SPSS軟件。

2.結(jié)果

關(guān)節(jié)軟骨大體觀察

模型對照組與正常對照組相比，其軟骨表面粗糙不平，局部軟骨較薄，有的可見裂隙，邊緣見大量骨贅；當(dāng)歸多糖組較模型組軟骨狀態(tài)較好，表面平整，裂隙少，透明度好。其與陽性對照組軟骨狀態(tài)相當(dāng)。

關(guān)節(jié)軟骨HE染色、番紅O染色觀察

模型對照組與正常對照組相比，其軟骨組織結(jié)構(gòu)排列不規(guī)則，軟骨細(xì)胞增生，番紅O染色發(fā)現(xiàn)潮線消失；當(dāng)歸多糖組較模型對照組軟骨番紅O染色稍降低，潮線清晰，其與陽性對照組相比無明顯差異。

軟骨灰度值檢測

軟骨基質(zhì)主要成分為蛋白多糖，番紅O染料能特異性與GAG結(jié)合并顯色。模型對照組番紅O染色著色嚴(yán)重降低，其灰度值較正常對照組明顯增高（P＜0.01）；當(dāng)歸多糖組和陽性對照組各組番紅O染色較正常對照著色較淺，灰度值均較正常對照組高（均P＜0.01），但較模型對照組著色深，且灰度值均較模型對照組低（均P＜0.01）。

3.討論

OA的主要特點(diǎn)是關(guān)節(jié)軟骨中PG成分丟失嚴(yán)重，導(dǎo)致軟骨組織及細(xì)胞減少明顯，從而致關(guān)節(jié)功能喪失。其中GAG是PG的決定性功能基團(tuán)［］。GAG的正常含量受到影響時會導(dǎo)致軟骨組織結(jié)構(gòu)和功能的破壞。灰度值分析提示當(dāng)歸多糖對照組GAG含量與正常對照組GAG含量無明顯差異，明顯高于模型對照組。因此當(dāng)歸多糖關(guān)節(jié)腔注射在一定程度上能對抗大鼠OA，其機(jī)制可能包括保護(hù)軟骨細(xì)胞，促進(jìn)軟骨GAG合成。

ASP是當(dāng)歸水提物中的脂溶性部分，其含由多種單糖，在OA模型大鼠的膝關(guān)節(jié)中注射ASP，能夠促進(jìn)GAG的合成、保護(hù)關(guān)節(jié)滑膜和軟骨。

［1］孫元琳，申瑞玲，蔡寶玉，等.ASP的分級制備及組成分析.河南工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）.2005；26（2）：40－43.

［2］Hiroshi K，Miho U，Kazuyuki S.Developmental Changes in Serum UDP－GlcA：Chondroitin Glucuronyltransferase Activity.J Biol Chem.1996；271（12）：6583－6585.

［3］Kristian Prydz，Knut Tomas Dalen.Synthesis and sorting of proteoglycans.J Cell Sci.2000；113（2）：193－205.

［4］Wang Q，Ding F，Zhu N，et al.Determination of the compositions of polysaccharides from Chinese herbs by capillary zone electrophoresis with amperometric detection.Biomedical.Chromatography.2003；17（7）：483－488.

R282.5

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1009－6019（2015）08－0032－01