乳腺癌脈管浸潤(rùn)檢測(cè)中雙重免疫組化染色的應(yīng)用分析

高鵬

乳腺為纖維組織、皮膚、脂肪以及乳腺腺體組成的，乳腺癌則是出現(xiàn)在乳腺上皮組織上的惡性腫瘤。乳腺雖不是人體重要的生命活動(dòng)器官，且原位的乳腺癌并不會(huì)危及患者生命[1-2]。但是乳腺癌的細(xì)胞因失去正常細(xì)胞特性，使細(xì)胞之間較為松散，出現(xiàn)脫落的癥狀，當(dāng)癌細(xì)胞脫落后，其通過(guò)淋巴液或者血液散播到患者全身，出現(xiàn)轉(zhuǎn)移，則會(huì)導(dǎo)致死亡[3-4]。癌細(xì)胞入侵到血管或者淋巴管時(shí)，才能轉(zhuǎn)移到遠(yuǎn)端部位或者局部的淋巴結(jié)，所以乳腺癌患者通過(guò)對(duì)腫瘤脈管進(jìn)行浸潤(rùn)檢測(cè)，才可指定準(zhǔn)確良好的治療方案[5]。本研究選取61例乳腺癌患者進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年8月～2014年1月南省南陽(yáng)市中心醫(yī)院收治的61例乳腺癌患者進(jìn)行研究，采取乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌的手術(shù)切除標(biāo)本，所有患者均為女性，年齡33～74歲，平均（47.31±3.18）歲，患者在手術(shù)前沒(méi)有進(jìn)行放療、化療或者抗腫瘤的其他治療，對(duì)患者給予重新切片以及HE染色，病理醫(yī)生給予確診。

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè)方法 所有患者在免疫組織化學(xué)的試劑中選擇CD 34和CKpan，以及Dako公司的雙重免疫組織化學(xué)的試劑盒。將患者的標(biāo)本采用4%的中性緩沖的甲醛給予固定，并采用常規(guī)石蠟的包埋，給予4μm的連續(xù)切片，并給予雙重免疫組織化學(xué)的染色和常規(guī)HE染色，在免疫組織化學(xué)使用SP法，使用堿性磷酸酶和DAB（二氨基聯(lián)苯胺）進(jìn)行雙重染色，并給予封固，每個(gè)步驟都按照相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行操作。并對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行詳細(xì)記錄。

1.2.2 結(jié)果判定 CD 34若為棕黃色則陽(yáng)性結(jié)果，則定位在內(nèi)皮細(xì)胞；CK若為紅色則評(píng)為陽(yáng)性，可定位在瘤細(xì)胞胞質(zhì)。HE和免疫組織化學(xué)切片要求2名病理醫(yī)生進(jìn)行獨(dú)立檢驗(yàn)，若HE切片中有明確的被覆內(nèi)皮細(xì)胞腔隙，且有腫瘤細(xì)胞時(shí)，則為L(zhǎng)VSI（+），在免疫組織化學(xué)的染色切片中，若在CD 34變?yōu)樽攸S色染成紅色的腫瘤細(xì)胞的患者內(nèi)皮細(xì)胞腔隙為L(zhǎng)VSI（+）[3]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 14.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

61例乳腺癌患者中，在HE染色判斷中，有16例判斷為L(zhǎng)VSI（+）。而在雙重免疫組織化學(xué)染色證實(shí)的有：10例患者為L(zhǎng)VSI（+），6例患者為L(zhǎng)VSI（-），而在HE染色判斷中，有45例患者沒(méi)有確定為L(zhǎng)VSI（+）的，在雙重免疫組織化學(xué)染色的檢測(cè)后，13例患者為L(zhǎng)VSI（+）。兩種檢測(cè)方法的診斷結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

乳腺癌患者在早期沒(méi)有明顯的體征和癥狀，很多人是通過(guò)體檢而發(fā)現(xiàn)的，其主要癥狀有乳腺腫塊、乳頭溢乳、皮膚改變，乳腺癌會(huì)導(dǎo)致皮膚失去彈性，以及橘皮樣的改變，而且乳頭、乳暈出現(xiàn)異常，若腫瘤在乳頭深部，會(huì)使乳頭出現(xiàn)回縮，但若腫瘤與乳頭的距離較遠(yuǎn)，則會(huì)導(dǎo)致乳頭抬高或者回縮[6-7]，對(duì)患者正常的工作和生活造成嚴(yán)重的不良影響，一旦腫瘤出現(xiàn)轉(zhuǎn)移，還會(huì)造成生命危險(xiǎn)。腫瘤轉(zhuǎn)移這個(gè)過(guò)程較為復(fù)雜，且脈管浸潤(rùn)為中藥緩解，當(dāng)腫瘤細(xì)胞到達(dá)脈管腔，則就會(huì)通過(guò)淋巴和血液進(jìn)入到遠(yuǎn)處的器官和淋巴結(jié)中，造成轉(zhuǎn)移瘤的形成，所以在對(duì)實(shí)體瘤的診斷中，LVSI為重要指標(biāo)，根據(jù)其來(lái)判斷患者的病情、復(fù)發(fā)以及生存時(shí)間。腫瘤脈管浸潤(rùn)這種方法為：采用光鏡對(duì)HE切片進(jìn)行觀察，在被覆的內(nèi)皮細(xì)胞腔隙中對(duì)瘤細(xì)胞進(jìn)行明確觀察，但在有些狀態(tài)下不能給予較好判斷[8]。比如，若制片中，腫瘤細(xì)胞團(tuán)因?yàn)槭湛s導(dǎo)致的裂隙和血管真正的間隙難以辨別；如果血管腔隙的瘤細(xì)胞陶紹，則HE染色不能將其在背景血液細(xì)胞中進(jìn)行區(qū)分；而且若瘤細(xì)胞團(tuán)填滿血管的腔隙，則不能和間質(zhì)侵潤(rùn)的瘤細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行區(qū)分。為了較好避免上述的問(wèn)題，則在檢測(cè)中使用免疫組織化學(xué)雙重標(biāo)記的方法，對(duì)瘤細(xì)胞上皮性的標(biāo)志物與血管內(nèi)皮的細(xì)胞標(biāo)志物在同1張切片上展示，并和常規(guī)的HE染色給予比較，從而得出乳腺癌脈管浸潤(rùn)檢測(cè)中雙重免疫組織化學(xué)染色的應(yīng)用效果。

雙重免疫組織化學(xué)染色的原理為，利用抗體和抗原之間特異性的結(jié)合以及特殊標(biāo)記的技術(shù)，并對(duì)細(xì)胞和組織內(nèi)給予抗體或者特定抗原的定性、定位和定量檢測(cè)[9]。在HE檢測(cè)中，雖然可區(qū)分腫瘤細(xì)胞團(tuán)因收縮造成的裂隙和血管腔的間隙，可是若血管腔隙中瘤細(xì)胞較少，則會(huì)診斷為血細(xì)胞，而導(dǎo)致漏診現(xiàn)象的出現(xiàn)。而雙重免疫組織化學(xué)染色這種檢測(cè)方法，在同一張切片上對(duì)瘤細(xì)胞給予血管內(nèi)皮細(xì)胞物和上皮性的標(biāo)記，可明顯直觀地看到腫瘤組織與血管之間的關(guān)系，促進(jìn)檢出率和診斷準(zhǔn)確率的提高。

綜上所述，乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌患者在檢測(cè)中雙重免疫組織化學(xué)染色的檢出率，明顯比HE觀察的檢出率高，只有在早期判斷出癌細(xì)胞是否轉(zhuǎn)移或者復(fù)發(fā)， 才可進(jìn)行積極有效的預(yù)后治療，達(dá)到較好的預(yù)后效果，延長(zhǎng)患者的生存時(shí)間和生活質(zhì)量。

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