清音丸改劑型前后抗炎鎮(zhèn)痛作用比較

李雪梅，周建平，孫建寧

清音丸改劑型前后抗炎鎮(zhèn)痛作用比較

李雪梅1，2，周建平2，孫建寧1

目的 對比分析清音丸由蜜丸改成片劑后的抗炎、鎮(zhèn)痛作用。方法 采用ICR小鼠，SD大鼠，隨機分為空白對照組，清喉利咽顆粒組，布洛芬組，清音丸、片高、中、低劑量組(按生藥量計，0.910，0.455，0.228 g/kg)，1次/d，連續(xù)給藥10 d。比較清音丸、片兩個不同劑型對小鼠毛細(xì)血管通透性急性滲出性炎性反應(yīng)、大鼠棉球肉芽腫炎性增殖抑制及腹腔注射醋酸致小鼠扭體的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果 與空白對照組相比，清音片、清音丸各劑量組小鼠腹腔滲出液的吸光度值明顯減少，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。清音丸抑制作用更強；清音丸、片各劑量組對肉芽的增生有明顯的抑制作用，與空白對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。清音片各劑量組對肉芽腫組織生長抑制率數(shù)值分別為56.80%、47.14%、54.18%，明顯高于清音丸各劑量組抑制率數(shù)值；清音丸、片兩種劑型各劑量組的鎮(zhèn)痛百分率都達(dá)到了50%，且清音丸各劑量組的鎮(zhèn)痛百分率分別為64.52%、64.52%、48.60%，其鎮(zhèn)痛作用效果強于清音片。結(jié)論 清音丸由蜜丸劑型改為片劑后仍具有抗炎、鎮(zhèn)痛作用。

清音丸；清音片；改劑型；抗炎；鎮(zhèn)痛

清音丸現(xiàn)收載于《中華人民共和國藥典》2010年版一部，主要由訶子肉、川貝母、百藥煎、烏梅肉、葛根、茯苓、甘草、天花粉組成，具有清熱利咽，生津潤燥的功效，主要用于治療肺熱津虧導(dǎo)致的咽喉不利、口舌干燥、聲啞失音等癥。清音丸為傳統(tǒng)的原粉水蜜丸劑或大蜜丸劑，服用不便，阻礙了該品種的發(fā)展。清音片是在清音丸原劑型-水蜜丸、大蜜丸的基礎(chǔ)上改變劑型而成，產(chǎn)品提取率為2.5 g生藥/g清音片藥粉，制成片劑。清音片擬定具有與原劑型清音丸相同的功能主治，其臨床使用量與清音片相同(折合生藥量)。筆者深入研究了清音片抗炎、鎮(zhèn)痛作用，并與清音丸的作用相比較。

1 材料與方法

1.1 藥物 清音片藥粉(批號A20Y0819)，清音丸蜜丸藥粉(批號B20Y0627)，由北京同仁堂股份有限公司科學(xué)研究所提供；參芪顆粒(批號20120302，江西山高制藥有限公司)，清喉利咽顆粒(批號130802，天津中新藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司樂仁堂制藥廠)，布洛芬片(批號20130106,北京太平洋藥業(yè)有限公司)。

1.2 材料 SD大鼠(150～170)g，ICR小鼠(18～20) g，均為無特定病原體(SPF)級，購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司，許可證號：SCXK(京)2012-0001號。

1.3 主要儀器與試劑 TU-1901雙光束紫外可見分光光度計：北京普析通用儀器有限責(zé)任公司； 伊文思蘭(批號871225，中國醫(yī)藥公司北京采購供應(yīng)站)、冰醋酸(批號20130725，北京現(xiàn)代東方精細(xì)化學(xué)品有限公司)、水合氯醛(批號120308，北京化學(xué)試劑公司)、碳酸氫鈉(批號120318，北京化學(xué)試劑公司)、氨基甲酸乙酯(批號100125，北京化學(xué)試劑公司)、抗生素藥敏紙片青霉素G(批號1304121，北京天壇藥物生物技術(shù)開發(fā)公司)。

1.4 方法

1.4.1 對小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性影響的試驗 ICR小鼠，18～20 g，隨機分成9組，分別為空白對照組，清喉利咽顆粒10 g/kg組，布洛芬0.033 g/kg組，清音片和清音丸0.910 g生藥/kg組、0.455 g生藥/kg組、0.228 g生藥/kg組。按20 ml/kg每天灌胃給藥,對照組給予同體積去離子水，1次/d，連續(xù)10 d。末次給藥后1 h，各鼠尾靜脈注射0.5%伊文思蘭生理鹽水溶液10 ml/kg，隨即腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 ml/只，20 min后脫頸處死，剪開腹腔，用6 ml生理鹽水分?jǐn)?shù)次洗滌腹腔，收集洗滌液加生理鹽水至10 ml，3000 r/min離心15 min，取上清液于590 nm比色測定吸光度值(A)。

1.4.2 對大鼠棉球肉芽腫影響的試驗[2]SD大鼠80只，雌雄兼用，體重180～200 g，隨機分成8組，每組10只，分別為空白對照組，清喉利咽顆粒7 g/kg組，清音片和清音丸分組同1.4.1。4%水合氯醛腹腔注射麻醉,腹部切口，將重量等同的滅菌紙片(9 mg/片)置入大鼠兩側(cè)腹股溝部皮下。手術(shù)后每天按10 ml/kg灌胃給藥,對照組給予同體積去離子水，1次/d，連續(xù)14 d。末次給藥后1 h，將大鼠處死，剝離并取出紙片肉芽組織，于50 ℃烘箱內(nèi)干燥24 h后稱重，減去原紙片重量，即為肉芽腫凈重。比較各組肉芽腫重量，并計算抑制率。

1.4.3 對腹腔注射醋酸引起小鼠扭體反應(yīng)影響的試驗(鎮(zhèn)痛試驗)[3-6]ICR小鼠90只，雌雄各半，體重18～20 g，按體重隨機分成9組，每組10只，分別為空白對照組(去離子水溶液0.4 ml/20 g)，參芪顆粒1 g/kg, 布洛芬0.033 g/kg，清音片和清音丸分組同1.4.1。每天按20 ml/kg灌胃給藥,對照組給予同體積去離子水，連續(xù)5 d。各組小鼠于末次給藥1 h后腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.2 ml/只，觀察記錄每只小鼠在15 min內(nèi)因疼痛引起扭體反應(yīng)的次數(shù)和疼痛反應(yīng)的潛伏期，并計算各組的鎮(zhèn)痛百分率，結(jié)果與空白組比較。

2 結(jié) 果

2.1 對小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響 結(jié)果表明，與空白對照組相比，清音片、清音丸各劑量組小鼠腹腔滲出液的吸光度值明顯減少，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，表明清音片、清音片對炎性滲出都有一定的抑制作用。雖然兩種劑型的統(tǒng)計結(jié)果都為P<0.01，但由表中數(shù)值可見清音丸各劑量組吸光度值略低于清音片各劑量組。由此可見，清音丸對小鼠腹腔毛細(xì)血管炎性滲出具有更強的抑制作用(表1)。

表1 清音片對小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響 (n=10；±s)

注：與空白對照組比較，①P<0.01

2.2 對大鼠棉球肉芽腫的影響 表2可見，清音丸、清音片各劑量組對肉芽的增生有明顯的抑制作用，與空白對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)果表明，兩種劑型都具有抗炎作用。但從肉芽組織生長的抑制率結(jié)果可以看出，清音片各劑量組對肉芽組織生長抑制率數(shù)值都在50%左右，明顯高于清音丸各劑量組抑制率數(shù)值。由此可見，清音片對肉芽增殖期的增殖抑制作用比清音丸具有更好的作用效果(表2)。

2.3 腹腔注射醋酸引起小鼠扭體反應(yīng)的影響(鎮(zhèn)痛試驗) 表3可見，給藥5 d，在生藥0.910 g/kg、0.455 g/kg、0.228 g/kg劑量下，與空白對照組比較，除清音片大劑量組外，清音丸、清音片各劑量組都能減少腹腔注射冰醋酸引起的小鼠扭體次數(shù)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，而清音片大劑量組減少小鼠扭體次數(shù)。清音丸中劑量組能顯著延長小鼠扭體反應(yīng)發(fā)生的潛伏期時間。清音丸、片兩種劑型各劑量組的鎮(zhèn)痛百分率都達(dá)到了50%，但由表中鎮(zhèn)痛百分率數(shù)據(jù)可見清音丸大、中、小劑量組的鎮(zhèn)痛百分率基本都在60%，而清音片各劑量組的鎮(zhèn)痛百分率則明顯低于清音丸?？梢娗逡敉鑼Ω骨蛔⑸浯姿嵋鹦∈笈んw反應(yīng)的鎮(zhèn)痛作用效果比清音片鎮(zhèn)痛作用具有更強的作用。

表2 清音片對大鼠棉球肉芽腫的影響 (n=10；±s)

注：與空白對照組比較，①P<0.01

表3 清音片、丸對腹腔注射醋酸引起小鼠扭體反應(yīng)的影響 (n=10；±s)

注：與空白對照組比較，①P<0.01，②P<0.05

3 討 論

清音丸在清代《驗方匯集》有記載，其主要成分為訶子肉、川貝母、百藥煎、烏梅肉、葛根、茯苓、甘草、天花粉。中醫(yī)認(rèn)為，咽喉為肺之門戶，是肺經(jīng)所過之處，故肺病則會引致聲音嘶啞，咽喉不利等咽喉部位的病變。本方中所含的訶子肉，具有苦降收澀的性味，既能斂肺氣，止咳逆，又能下氣降火，暢利咽喉，使肺竅無壅塞，聲音清亮；烏梅肉味酸澀、氣平，其性重在收斂。烏梅肉和訶子肉相配，斂肺利咽，生津止渴。川貝母苦甘微寒，滋潤性強，能清熱潤肺；天花粉可清肺胃之熱，養(yǎng)肺胃之陰，生肺胃之津，并兼有解毒、活血、消腫的功效；葛根具有生津止渴的作用；甘草可瀉火解毒益氣，并調(diào)和諸藥。上述藥物合用，共奏清熱利咽，生津潤燥的功效。

目前，清音丸仍為傳統(tǒng)的原粉水蜜丸劑或大蜜丸劑，生產(chǎn)工藝、工裝設(shè)備自動化、機械化水平均較低，劑型單一、服用不便，難以與國際化標(biāo)準(zhǔn)接軌，從而阻礙了該品種的國內(nèi)發(fā)展及海外拓展，因而通過對清音丸進(jìn)行二次開發(fā)研究，制備出了具有自主知識產(chǎn)權(quán)和國際競爭力的新劑型清音片。

本研究主要從抗炎、鎮(zhèn)痛作用兩個方面比較了清音丸與改變劑型后清音片藥效作用。小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的抗炎試驗結(jié)果表明清音丸、片對小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性試驗中反映出的急性滲出性炎性反應(yīng)有一定的抑制作用，且清音丸對小鼠腹腔毛細(xì)血管炎性滲出具有更強的抑制作用；在清音丸、片對大鼠棉球肉芽腫抗炎試驗中，清音丸、片對大鼠棉球肉芽腫的增生有一定的抑制作用，且清音片對肉芽增殖期的增殖抑制作用略優(yōu)于清音丸的作用效果；在扭體試驗中，清音丸、片各劑量組的鎮(zhèn)痛百分率都在50%以上，表明其有鎮(zhèn)痛作用，且清音片各劑量組的鎮(zhèn)痛百分率則明顯低于清音丸?？梢娗逡敉鑼Ω骨蛔⑸浯姿嵋鹦∈笈んw反應(yīng)的鎮(zhèn)痛作用效果比清音丸鎮(zhèn)痛作用具有更強的作用。

綜上所述，清音片在本試驗劑量和試驗條件下具有抗炎、鎮(zhèn)痛作用，其作用與清音丸的作用相當(dāng)，表明片劑保持了原丸劑的藥效。

[1] 鄭建華, 吳春福, 劉 雯，等. 清音丸抗炎鎮(zhèn)痛作用研究[J]. 中藥藥理與臨床, 2002,18(6)：7-9.

[2] 陳 奇. 中藥藥理研究方法學(xué)[M]. 北京：人民衛(wèi)生出版社, 1993，305-367.

[3] 李 前，邵先舫，劉志軍，等. 治療巴布劑的鎮(zhèn)痛作用及對大鼠炎性疼痛模型背根神經(jīng)節(jié)Nav1.7表達(dá)的影響[J].世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2013，15(8)：1787-1790.

[4] 張淑瑜，閆良國，于燕莉.退燒顆?？寡祖?zhèn)痛作用研究[J].藥學(xué)實踐，2013，31(6)：464-466.

[5] 程 濤，趙國英，張 彤,等.鐵牛七生品與炮制品抗炎鎮(zhèn)痛作用比較研究[J].上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2014，28(1)：74-76.

[6] 趙啟鵬，朱亞飛，趙云生.回回蒜的急性毒性和抗炎鎮(zhèn)痛作用研究[J].時珍國醫(yī)藥，2014，25(6)：1345-1346.

(2014-09-30收稿 2014-10-22修回)

(責(zé)任編輯 岳建華)

Comparison study of anti-inflammatory and analgesic effects of Qingyin pills and Qingyin tablet

LI Xuemei1,2，ZHOU Jianping2，and SUN Jianning1.

1.College of Traditional Chinese Medicine，Beijing University of Traditional Chinese Medicine，Beijing 100102，China；2. Department of Pharmacology，Beijing Institute for Drug Control，Beijing 100035，China

Objective Comparison of two different dosage of anti-inflammatory and analgesic effects of Qingyin honey pills and Qingyin tablets. Methods ICR mice and SD rats were divided into blank control group, Qinghou Liyan granules group and ibuprofen group at random. The high-dose, the middle-dose and the low-dose groups of qingyin pills were treated by gavage for 10 d(according to the crude drug,0.910，0.455，0.228 g/kg). Comparison of analgesic effect of two different dosage-honey pills and tablets on the capillary permeability in mice with acute exudative inflammation, rat granuloma inflammatory proliferation inhibition and acetic acid writhing test. Results All groups of Qingyin pills and tablets showed that optical density of peritoneal exudates in mice were be significantly reduced. There was significant differences in optical density, compared with the control group (P<0.01).In Qingyin pills groups, inhibitory effects on the capillary permeability in mouse abdominal cavity with acute exudative inflammation was stronger. All groups of Qingyin pills and tablets showed some inhibitory effects on granuloma inflammatory proliferation. There was significant differences in inhibition rate，compared with blank control group(P<0.01).The inhibition rates were 56.80%，47.14%， and 54.18%，respectively, in all groups of Qingyin pills. The inhibition rate of Qingyin tablets was higher than those of Qingyin pills groups. Both groups of Qingyin tablets’ analgesic effect ratios were higher than 50%, analgesia percentages of Qingyin pills were 64.52%,64.52%, and 48.60%,respectively. Analgesic effect of Qingyin pills was stronger than analgesic effect of Qingyin tablets. Conclusions Qingyin pills and tablets show anti-inflammatory and analgesic effects, and Qingyin pills and tablets show their respective advantages in different inflammatory types. Qingyin pills still maintain the anti-inflammatory and analgesic effects as original pills after change in dose form.

Qingyin pills; Qingyin tablets; dose form changed; anti-inflammatory; analgesic

李雪梅，本科學(xué)歷，主管藥師，E-mail:cai_di_48@163.com

1.100102，北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院；2.100035，北京市藥品檢驗所藥理室

孫建寧，E-mail:jn-sun@sina.com

R285.5