楊映霞,仇一晶,孫玉濱,王丹輝,董小紅,孟多佳
(1.吉林天藥藥物研發(fā)有限公司,長春 130012; 2.吉林天藥本草堂制藥有限公司,長春 130012;3.吉林省中醫(yī)藥科學院第一臨床醫(yī)院,長春 130012; 4.長春生物制品研究所有限責任公司,長春 130062)
鹿哈膠囊來源于名老中醫(yī)多年的臨床經(jīng)驗方,是由鹿骨等幾味中藥組成的膠囊劑。該方具有補腎益精、強筋壯骨的功效[1]。臨床上用于治療絕經(jīng)后骨質疏松癥。處方中鹿骨等藥材均含有大量的蛋白質。為了控制產品質量,選擇制劑中的總氮量為控制指標,并進行了方法學考察,為鹿哈膠囊質量標準的制定提供了保證。
鹿哈膠囊中試樣品(批號:20130516、20130518、20130520,為吉林天藥本草堂制藥有限公司中試車間生產)。
凱氏定氮蒸餾裝置(天長市長城玻璃儀器制造廠);酸式滴定管(50mL,廣西南寧融儀實驗設備有限公司)。
鹿骨提取干燥物參照物(吉林天藥研發(fā)有限公司實驗室自制);無水碳酸鈉(基準物質,天津市光復科技發(fā)展有限公司);硫酸、硫酸銅、硫酸鉀、硼酸、甲基紅、溴甲酚綠、氫氧化鈉均為分析純。
總氮量測定:取10粒鹿哈膠囊內容物,混勻,研細,取粉末約1.0g,按照《中國藥典》2010年一部附錄IXL氮測定法第一法測定[2]。
按處方比例和制備工藝制備鹿哈膠囊(去除鹿骨和其他藥材的輔料)的陰性對照樣品;取批號為20130516中試樣品。按照上述總氮量測定方法測定總氮量,結果,陰性對照樣品無干擾。
精密稱取鹿骨提取干燥物參照物測定總氮量,以參照物取樣量為橫坐標、總氮量為縱坐標繪制標準曲線,得回歸方程y=0.0651x+1.772,R2=0.9994(圖1)。
圖1 線性關系考察
結果表明,總氮量在24.98mg~29.89mg范圍內,標準曲線線性關系良好,符合測定的要求。
取不同劑量的樣品,按上述總氮量測定方法測定不同劑量樣品中總氮量。當取樣量約為1.0g時在標準曲線范圍內,且消耗滴定液的量也較合適。
對批號為20130516的同一批樣品,按上述總氮量測定方法獨立進行6次測定,計算其相對標準偏差,結果平均值為2.682%,RSD為1.29%,表明方法重復性良好(表1)。
表1重復性考察
Table 1 The repeatability investigate
對批號為20130516的同一批樣品,按上述總氮量測定方法測定,不同人員、不同時間進行6次測定,計算其相對標準偏差。結果平均值為2.679%,RSD為1.35%,表明方法中間精密度良好(表2)。
表2中間精密度考察
Table 2 Intermediate precision investigate
取批號為20130516的樣品,按上述總氮量測定方法測定,于0min、10min、20min、30min、40min連續(xù)測定5次,計算其相對標準差。結果平均值為2.671%,RSD為1.22%,在規(guī)定的限度內。表明在40min內供試品穩(wěn)定性良好(表3)。
表3穩(wěn)定性考察
Table 3 The stability investigate
精密稱取樣品6份(批號為20130516,其中總氮量按重復性6次測定平均值計算為26.82mg/g),每份稱樣量約為0.5g,置凱式燒瓶中,精密加入鹿骨提取干燥物參照物(N含量0.0697mg/mg)192mg,按上述總氮量測定方法操作測定,計算回收率。結果平均回收率98.29%,RSD 1.06%。結果表明準確度良好(表4)。
表4準確度考察
Table 4 Accuracy investigate
測定3批樣品,每批取10粒鹿哈膠囊內容物,混勻,研細,取粉末約1.0g,精密稱定,按照上述總氮量測定方法測定。每個樣品單獨測定2次,結果見表5。
通過以上方法學考察,說明鹿哈膠囊總氮量測定方法穩(wěn)定可行,故列入鹿哈膠囊質量標準正文。
本試驗采用經(jīng)典的氮測定法對鹿哈膠囊進行總氮量測定,方法簡便準確、穩(wěn)定可行,為制定鹿哈膠囊的質量標準提供了可靠依據(jù),對控制鹿哈膠囊的藥品質量和廣泛開發(fā)吉林省鹿產品具有一定意義。
表53批樣品總氮量測定
Table5Thethreebatchoftotalnitrogeninsamplesizedetermination
批號Batchnumber稱樣量(g)Thesamplevolume總氮量(%)Thetotalamountofnitrogen平均總氮量(mg/粒)Theaveragetotalamountofnitrogen(mg/pellet)201305161.00021.00182.69112.06201305181.00091.00012.64611.81201305201.00110.99902.87112.88
[1]衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準:中藥材第一冊[M].北京:衛(wèi)生部藥典委員會,1992.
[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典版:一部[K].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010.