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    大蒜素抗氧化活性及其生物效應(yīng)的研究進(jìn)展

    2015-03-23 11:20:11楊融輝吳晗張寧
    關(guān)鍵詞:研究進(jìn)展氧化應(yīng)激抗氧化

    楊融輝 ,吳晗 ,張寧

    (1.中國醫(yī)科大學(xué) 臨床醫(yī)學(xué)七年制,遼寧 沈陽 110000; 2.哈爾濱醫(yī)科大學(xué) 臨床醫(yī)學(xué)院,黑龍江 哈爾濱 150000;3.中國醫(yī)科大學(xué) 病理生理教研室,遼寧 沈陽 110000)

    ·綜 述·

    大蒜素抗氧化活性及其生物效應(yīng)的研究進(jìn)展

    楊融輝1,吳晗2,張寧3

    (1.中國醫(yī)科大學(xué) 臨床醫(yī)學(xué)七年制,遼寧 沈陽 110000; 2.哈爾濱醫(yī)科大學(xué) 臨床醫(yī)學(xué)院,黑龍江 哈爾濱 150000;3.中國醫(yī)科大學(xué) 病理生理教研室,遼寧 沈陽 110000)

    大蒜素是蔥屬植物大蒜內(nèi)一類防御性分子,具有高度的生物活性。在自然情況下,大蒜素產(chǎn)生于大蒜組織損傷時,是由前體物質(zhì)蒜氨酸轉(zhuǎn)化而產(chǎn)生的。大蒜素是硫代亞磺酸類有機(jī)物,所含的巰基能與含硫蛋白質(zhì)和谷胱甘肽發(fā)生氧化還原反應(yīng),并能通過多種途徑抑制氧化應(yīng)激,具有明顯抗氧化的能力,在抑菌消炎、心腦血管疾病及抗腫瘤中有著重要作用。作者就大蒜素抗氧化活性及其生物效應(yīng)的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

    大蒜素; 抗氧化; 綜述

    大蒜是百合科蔥屬植物,在中國具有上千年的食用和藥用歷史,在《本草經(jīng)集注》中已有記載。大蒜素(allicin)是從蔥科植物大蒜中提取的具有生物活性的含硫化合物總稱,具有特殊氣味,即蒜味。1944年Cavallito等從大蒜中分離出有效成分大蒜素[1],從而開始了數(shù)十年來對大蒜素藥效及作用機(jī)制的研究?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)已證明大蒜素具有明顯的抗氧化作用,具有消炎抑菌,抗高血壓、高血脂等心腦血管疾病及抑制腫瘤生長等生物學(xué)效應(yīng),且無明顯不良反應(yīng)。作者就大蒜素抗氧化作用機(jī)制及其應(yīng)用的研究進(jìn)展作一綜述。

    1 大蒜素化學(xué)結(jié)構(gòu)及性質(zhì)

    大蒜素存在于新鮮大蒜、洋蔥等植物中,具有很強(qiáng)揮發(fā)性。蒜氨酸由半胱氨酸或絲氨酸合成,是大蒜素的前體物質(zhì),通常情況下蒜氨酸以無臭的形式穩(wěn)定存在。當(dāng)大蒜受到機(jī)械破碎后,大蒜中的蒜氨酸-蒜氨酸酶系統(tǒng)被激活,催化蒜氨酸分解為大蒜素[2]。大蒜素是大蒜內(nèi)一類含硫化合物的總稱,分子式為C6H10S3,即三硫化二丙烯,純品為無色油狀物,具有大蒜異味,稍溶于水,溶于乙醇、苯、乙醚等有機(jī)溶劑[3],在熱、堿中不穩(wěn)定,在酸中較穩(wěn)定(尤其在pH5~7);通常情況下很難保存,研究發(fā)現(xiàn)大蒜素在-70 ℃的稀水溶液中可以穩(wěn)定保存超過1年[4]。自然界中大蒜素多在植物被損傷后產(chǎn)生,而在實驗室大蒜素可通過二烯丙基二硫化物(DADS)與過氧化氫或氯甲酸化合而成[5]。

    大蒜素對皮膚有刺激性,具有抗氧化作用,能調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝,能調(diào)節(jié)心腦血管系統(tǒng)功能,也能發(fā)揮抗高血壓、抗高血脂、抗腫瘤等功效。與此同時,大蒜素具有廣譜殺菌作用,能抑制或殺滅革蘭陰性和革蘭陽性細(xì)菌,對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌等耐藥病菌也具有很好的抑制作用。目前大蒜素已經(jīng)在疾病預(yù)防和治療以及醫(yī)療保健中廣泛應(yīng)用[6]。

    2 大蒜素抗氧化作用機(jī)制

    一般情況下,健康的細(xì)胞具有負(fù)性氧化還原電位,表明細(xì)胞溶膠處于還原反應(yīng)狀態(tài),而當(dāng)細(xì)胞內(nèi)氧化還原電位升高,表明細(xì)胞內(nèi)氧化反應(yīng)增加,細(xì)胞內(nèi)氧自由基增高,細(xì)胞則可能出現(xiàn)衰老、癌變等變化[7]。 細(xì)胞的氧化還原電勢主要由GSH/GSSG、NADPH/NADP+間轉(zhuǎn)化,以及硫氧還蛋白作用實現(xiàn)調(diào)控,而GSSG增多將導(dǎo)致細(xì)胞的氧化還原電位升高。大蒜素是具有抗氧化性能的活性硫物質(zhì),通過與GSSG反應(yīng),降低細(xì)胞內(nèi)氧化還原電位。大蒜素在細(xì)胞內(nèi)外均能與含巰基的分子反應(yīng),如谷胱甘肽和含半胱氨酸殘基的蛋白質(zhì),而且可以通過與蛋白質(zhì)間形成二硫鍵,改變蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),進(jìn)而導(dǎo)致蛋白質(zhì)功能的損失或增益。這種功能改變方式在酵母菌的研究中得到證實,酵母菌內(nèi)有一種誘發(fā)對病原體免疫的關(guān)鍵酶植物蛋白NPR1,大蒜素通過作用于酵母菌內(nèi)對氧化還原反應(yīng)敏感的轉(zhuǎn)錄因子YAP1,實現(xiàn)對NPR1的調(diào)控[8]。

    近期研究發(fā)現(xiàn),大蒜素能降低誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)表達(dá),也能在mRNA和蛋白質(zhì)水平顯著增加熱休克蛋白70(HSP 70)表達(dá),顯著減少谷氨酸誘導(dǎo)的乳酸脫氫酶(LDH)的釋放和活性氧自由基產(chǎn)生,同時能減少脂質(zhì)過氧化和抗氧化酶活性,最終通過介導(dǎo)HSP70/iNOS途徑,抑制氧化應(yīng)激,保護(hù)受損神經(jīng),治療脊髓損傷[9]。大蒜素也可通過AKT/內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶(eNOS)途徑實現(xiàn)抗氧化應(yīng)激功能,能降低MDA和蛋白質(zhì)羰基的表達(dá)水平,通過增加AKT和eNOS磷酸化,阻斷AKT/eNOS途徑,從而實現(xiàn)抗氧化和抗炎活性,發(fā)揮對大鼠創(chuàng)傷性腦損傷的保護(hù)功能[10]。自由基對DNA的攻擊也是導(dǎo)致細(xì)胞衰老的重要原因,大蒜素通過對氧化應(yīng)激的抑制作用,降低自由基水平,起到延緩衰老的作用。

    3 大蒜素的生物效應(yīng)

    細(xì)胞正常代謝和生化過程需要在相對穩(wěn)定且適宜的pH值、離子濃度和氧化還原電位下進(jìn)行。研究證明大蒜素對細(xì)胞內(nèi)外氧化還原反應(yīng)的進(jìn)行具有干預(yù)功能,產(chǎn)生抗氧化效果。而氧自由基損傷及所致的脂質(zhì)過氧化,是導(dǎo)致癌癥、動脈硬化、冠心病、臟器損傷及衰老的主要原因。大蒜素通過其抗氧化功能,對上述疾病治療和預(yù)防起到重要作用,并能通過抗氧化功能對細(xì)菌及真菌生長起明顯抑制和殺滅作用。

    3.1 大蒜素的抑菌作用

    3.1.1對細(xì)菌的抑制作用 大蒜素對細(xì)菌具有明顯的抑菌殺菌功能,對革蘭陽性和革蘭陰性細(xì)菌,如大腸桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌等均能起到明顯的殺菌和抑制作用,在農(nóng)業(yè)及畜牧業(yè)中已經(jīng)得到一定推廣[11]。大蒜素與β內(nèi)酰胺類或氨基糖苷類抗生素具有相似的摩爾對摩爾的分子有效性,但大蒜素殺菌譜更廣。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌是常見院內(nèi)感染致病菌,具有耐藥性,一般抗生素對其無效,而大蒜素對耐甲氧西林金葡萄球菌等常見耐藥致病菌也有抑菌功能,而且這種大蒜素可以與納米級銀協(xié)同作用,增加抑菌效果[12]。

    研究發(fā)現(xiàn),與純大蒜素相比新鮮大蒜提取物對表皮葡萄球菌的殺菌作用更強(qiáng),但純大蒜素能嵌入生物膜,發(fā)揮獨特的殺菌作用[13]。大蒜素能抑制生物膜形成,能抑制變形桿菌體外的脲酶活性,但不能抑制溶血素活性[14]。大蒜素能與游離半胱氨酸殘基反應(yīng),致細(xì)菌生存微環(huán)境半胱氨酸含量改變,并通過影響一些含有巰基的酶的pKa,抑制酶活性[15]。Ranjbar-Omid等[16]通過二硫鍵交換樣反應(yīng),可以不可逆性反應(yīng)生成強(qiáng)還原劑,使細(xì)菌生活微環(huán)境中強(qiáng)還原劑增加,改變微環(huán)境狀態(tài),進(jìn)一步抑制細(xì)菌活性。

    大蒜素可能影響DNA、RNA、蛋白質(zhì)等合成。Feldberg等[17]對大蒜素在鼠傷寒沙門菌的抑菌效果進(jìn)行了研究,確定抑制鼠傷寒沙門菌的生長需要的大蒜素的最小濃度為0.3 mmol·L-1,而這種抑菌作用并不致死,處理后細(xì)菌仍可回收。他們通過用3H標(biāo)記大蒜素中尿苷、亮氨酸和胸苷,觀察到68%的3H-胸苷和65%的3H -亮氨酸被攝取,同時3H-尿苷被全部攝取,攝取的尿苷和胸苷用于DNA、RNA和蛋白質(zhì)合成,繼而認(rèn)為大蒜素可能影響大分子合成,或通過大蒜素作用影響蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn),或使更多半胱氨酸殘基暴露,使大蒜素通過與半胱氨酸殘基進(jìn)一步作用,抑制細(xì)菌生長。因為目前大蒜素分離純度較低,穩(wěn)定性較差,及其明顯的抗氧化作用干擾等,所以對大蒜素作用于DNA、RNA和蛋白質(zhì)合成的研究較少,對其作用于上述分子的證據(jù)還不明確,需要進(jìn)一步研究。

    3.1.2抑制真菌生長 大蒜素在體內(nèi)和體外對許多致病真菌生長具有抑制作用,能抑制真菌孢子萌發(fā)和菌絲生長。在含大蒜素瓊脂培養(yǎng)基內(nèi),灰霉病菌、稻瘟病菌等致病菌的生長明顯受到抑制。大蒜素也可以用于種子的消毒,可以代替某些農(nóng)藥,抑制致病菌生長,提高出芽率,在某些推崇生態(tài)農(nóng)業(yè)的發(fā)達(dá)國家已經(jīng)有了一定程度的推廣[18]。

    大蒜素具有高揮發(fā)性。大蒜素可以治療肺部霉菌感染,通過吸氣的方式將大蒜素吸入肺中,可以產(chǎn)生較好的治療效果[19]。大蒜素也可以用于皮膚真菌感染,如念珠菌感染;可以破壞白假絲酵母菌生物被膜,滲透到酵母菌內(nèi),直接殺滅菌體[1],也可誘導(dǎo)酵母菌程序性死亡,誘導(dǎo)谷胱甘肽的氧化,導(dǎo)致細(xì)胞的氧化還原電位的范圍相應(yīng)移位。通過生化學(xué)、細(xì)胞學(xué)和遺傳學(xué)的分析發(fā)現(xiàn),大蒜素通過氧化途徑使酵母菌細(xì)胞凋亡,可能通過作用于YAP1、MSN2/4、RPN4、SKN7等轉(zhuǎn)錄因子,影響蛋氨酸等氨基酸代謝、鐵的攝取、硫胺素代謝和蛋白酶體蛋白質(zhì)的降解等過程發(fā)揮作用[20]。大蒜素的氧化還原作用是殺滅真菌的主要原因,但也不排除有其他作用機(jī)制,尚須進(jìn)一步研究。Khodavandi通過對全身性白色念珠菌小鼠模型的體內(nèi)和體外實驗的研究表明,在殺滅真菌所需時間上,大蒜素活性可以媲美常用抗真菌劑氟康唑,且電鏡結(jié)果顯示大蒜素可以產(chǎn)生與氟康唑相似的破壞真菌結(jié)構(gòu)的效果[21],為大蒜素推廣提供了思路。

    3.2 大蒜素保護(hù)心腦血管系統(tǒng)

    大蒜素可以通過對氧化應(yīng)激的抑制作用,對心腦血管系統(tǒng)起保護(hù)作用。研究發(fā)現(xiàn),H2O2能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,通過激活PARP裂解減少Caspase-3的水平,并激活Bax的表達(dá)發(fā)揮作用。而大蒜素能阻斷H2O2介導(dǎo)的氧化應(yīng)激過程,能抑制這些凋亡信號的每個步驟;大蒜素也能降低丙二醛的水平,增加超氧化物歧化酶含量,并且能增加一氧化氮的釋放和eNOS合成酶mRNA的水平,但對iNOS合成酶的mRNA水平?jīng)]有顯著效果。大蒜素通過對上述途徑調(diào)節(jié),防治血管內(nèi)皮細(xì)胞在H2O2誘導(dǎo)下凋亡,起到保護(hù)血管內(nèi)皮的作用[22]。

    低密度脂蛋白(LDL)的氧化是引起動脈硬化的常見原因,大蒜素能減少LDL氧化,并在生理水平上能降低體內(nèi)低劑量氧化劑水平,減少血管損傷[1]。轉(zhuǎn)錄因子中的Nrf2/Keap1系統(tǒng)對大蒜素敏感,大蒜素能通過對Nrf2/Keap1作用,調(diào)節(jié)各種抗氧化酶的表達(dá)[23]。大蒜素在衰老和記憶的調(diào)節(jié)上也有重要作用,可以通過對Nrf2的調(diào)節(jié),降低血管緊張素Ⅱ水平,增加心肌供血,防治并改善心臟重構(gòu)的發(fā)展和心肌肥厚進(jìn)程[24]。近期研究發(fā)現(xiàn),大蒜素還可以保護(hù)血管內(nèi)皮,通過抑制H2O2介導(dǎo)的氧化應(yīng)激,阻斷PARP裂解,抑制炎癥因子及凋亡因子表達(dá),降低丙二醛水平并增加超氧化物歧化酶水平,抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡,起到保護(hù)作用[25]。

    高膽固醇是引起動脈硬化的另一危險因素,而動脈硬化是引起心絞痛、心肌梗死、中風(fēng)等缺血性疾病的重要原因[26]。大蒜素還可通過作用于角鯊烯單加氧酶和乙酰輔酶A,控制膽固醇水平。乙酰輔酶A內(nèi)含有巰基,而大蒜素與巰基間可以直接作用,可以推測大蒜素與含乙酰輔酶A的所有反應(yīng)均有調(diào)節(jié)能力,阻斷其反應(yīng)正常進(jìn)行[1]。大蒜素對高血壓也有調(diào)節(jié)作用,大蒜素與谷胱甘肽的級聯(lián)反應(yīng)能產(chǎn)生硫化氫,而硫化氫具有擴(kuò)張血管平滑肌的作用,使血壓降低。

    3.3 大蒜素的抗腫瘤作用

    大蒜素可以通過抗氧化過程對腫瘤生長起抑制作用。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)自由基含量增多,超過細(xì)胞自凈能力時,自由基將損傷細(xì)胞內(nèi)DNA分子,產(chǎn)生的基因突變正是細(xì)胞癌變的基礎(chǔ)。大蒜素能通過其分子內(nèi)巰基和親電子基團(tuán),與自由基間反應(yīng)并將其清除。研究證實,大蒜素能通過對氧活性自由基作用,抑制轉(zhuǎn)錄因子NF-κB活性,改變細(xì)胞內(nèi)某些基因表達(dá)水平,進(jìn)而達(dá)到抑制癌細(xì)胞增長的作用,還能通過JNK信號通路誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,更能增強(qiáng)機(jī)體對抗癌藥物的敏感性[27]。

    胃癌是消化系統(tǒng)常見腫瘤。最近通過對人類胃癌MGC-803細(xì)胞系的研究發(fā)現(xiàn),大蒜素能明顯抑制胃癌細(xì)胞增殖,并能顯著促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡,具有一定的處理時間和濃度依賴性,而凋亡的促進(jìn)作用與蛋白激酶/Caspase-3信號通路密切相關(guān),且毒性作用較小[28]。應(yīng)用流式細(xì)胞儀對胃癌SGC-7901細(xì)胞系的研究中發(fā)現(xiàn),大蒜素使癌細(xì)胞周期停滯在G2/M期,進(jìn)一步證明了大蒜素的抑癌作用機(jī)制。大蒜素對肝癌細(xì)胞也具有抑制作用,能誘導(dǎo)人肝癌 HepG2細(xì)胞自噬性死亡,并能通過作用于蛋白酶依賴性和蛋白酶非依賴性產(chǎn)生的ROS,使大量肝癌Hep3B細(xì)胞凋亡,并通過敲除HepG2細(xì)胞的p53基因,發(fā)現(xiàn)HepG2細(xì)胞與Hep3B細(xì)胞具有相似的凋亡效果,證明其在誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞自噬和凋亡中的應(yīng)用價值[29]。

    4 展 望

    大蒜素具有顯著的抗氧化作用,在降血壓、降血脂、抗腫瘤等方面扮演重要角色,并且能有效抑菌,且殺菌譜廣,無明顯副作用。但大蒜素合成過程尚不完全明確,工業(yè)大量生產(chǎn)出更為純凈的大蒜素的方法還須探究;大蒜素易揮發(fā)、穩(wěn)定性差,難以長期保存,又因為合成大蒜素純度不足的原因,使某些對大蒜素作用機(jī)制研究的實驗并不具有說服性,因而對大蒜素的保存和純化方法仍須優(yōu)化。大蒜素抗氧化原理也有很多不明確之處,對生命大分子的合成是否有調(diào)節(jié)功能還需進(jìn)一步研究。大蒜素能通過多種通路抑制氧化應(yīng)激,能抑制腫瘤發(fā)生發(fā)展,但其中量效關(guān)系仍不明確,而且對大蒜素的研究均停留在實驗室階段,尚未在臨床上得到推廣使用??蒲腥藛T也在開發(fā)與大蒜素作用相似且更加穩(wěn)定的新藥物,更好為人類健康服務(wù)。

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    2015-06-06

    2015-08-20

    遼寧省自然科學(xué)基金資助項目(201102287);遼寧省科技廳重點課題項目(2006225001-4)

    楊融輝(1993-),女,黑龍江克山人,在讀碩士研究生。E-mail:youki_yang@163.com

    張寧 E-mail:binning665@sina.com

    楊融輝,吳晗,張寧.大蒜素抗氧化活性及其生物效應(yīng)的研究進(jìn)展[J].東南大學(xué)學(xué)報:醫(yī)學(xué)版,2015,34(6):1037-1040.

    R282.71

    A

    1671-6264(2015)06-1037-04

    10.3969/j.issn.1671-6264.2015.06.040

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