犬瘟熱的診斷技術(shù)

隨著社會的發(fā)展和人民生活水平的日益提高，我國的寵物飼養(yǎng)量逐年增加，但是同時也出現(xiàn)了許多疾病，如犬瘟熱、犬細小病毒感染和犬傳染性肝炎等。犬瘟熱以其復雜的臨床癥狀使臨床診斷非常困難，特別是在后期出現(xiàn)神經(jīng)癥狀后更加難以治療。所以，快速、準確診斷是關(guān)鍵。

1　鑒別診斷

由于犬瘟熱的臨床癥狀復雜多樣，容易與感冒、犬傳染性氣管支氣管炎、犬細小病毒性腸炎等混淆，所以在臨床診斷時應加以區(qū)別。

（1）犬瘟熱與感冒的鑒別診斷。二者的共性是眼、鼻都有分泌物?；既翢岬牟∪〕跞菀滓虮橇髑逄椤⑹秤麥p退、在病前1～2天有過洗澡經(jīng)歷而容易被誤診為感冒。但與感冒不同的是，犬瘟熱患犬呈典型的雙向熱型，并有流淚現(xiàn)象，有的病犬腹部及股內(nèi)側(cè)皮膚有丘疹和膿皰，足掌皮膚有過度角質(zhì)化病變，以及同時出現(xiàn)咬肌顫動。而患感冒的病犬無此癥狀。

（2）犬瘟熱與犬傳染性氣管支氣管炎的鑒別診斷。二者的共性是咳嗽和鼻孔內(nèi)有分泌物。而犬傳染性氣管支氣管炎則以劇烈的干咳為特征，且咳嗽隨運動或環(huán)境刺激而加重，夜晚尤為明顯，人工誘咳可引起患犬猛烈的咳嗽?；既畟魅拘詺夤苤夤苎椎牟∪〕醴魏粑粽?，體溫不高，若治療不當，炎癥蔓延到細支氣管，則體溫升高，脈搏加速，呼吸明顯困難，鼻孔內(nèi)可出現(xiàn)漿液性和膿性分泌物。

（3）犬瘟熱與犬細小病毒性腸炎的鑒別診斷。首先犬瘟熱的嘔吐遠不如犬細小病毒性腸炎那樣頻繁和頑固。犬瘟熱病犬飲水后較少發(fā)生嘔吐，而大多數(shù)患犬細小病毒性腸炎的病犬不僅口渴明顯，并且飲水后往往立即發(fā)生嘔吐。其次，犬瘟熱的血便次數(shù)和排泄量少，而犬細小病毒性腸炎的病犬排出血便次數(shù)多、數(shù)量大、呈番茄汁樣，且有特殊的腥臭味。另外，犬瘟熱的患犬呈現(xiàn)雙相熱型，而犬細小病毒感染的患犬無此癥狀。

總體來說，犬瘟熱的發(fā)病過程和臨床表現(xiàn)具有典型特征。抓住病犬特征性的雙相熱型，流淚、腹部及股內(nèi)側(cè)皮膚有丘疹和膿皰、足掌皮膚呈過度角質(zhì)化病變，以及病犬同時出現(xiàn)咬肌顫動等特征，就可初步診斷為犬瘟熱，從而將該病與其他常見相似疾病區(qū)分開來。

2　 CDV試紙檢測

CDR試紙檢測法是目前診斷犬瘟熱最快速、最準確的方法，檢測正確率在98%以上。方法是用消毒棉簽取眼分泌物、鼻液和唾液少許，置入裝有稀釋液的樣品管中，充分攪拌混勻，用吸管取上清液，滴4滴在測試條樣本孔中，待5～15分鐘觀察結(jié)果。根據(jù)檢測線與對照線的結(jié)果判斷陰性和陽性。陰性：只有對照線（C）呈紅色或者紫色時，此情況表示沒有感染犬瘟熱病毒。陽性：若在檢測線（T）與對照線（C）上都呈現(xiàn)紅色或紫色，此情況表示已經(jīng)感染犬瘟熱病毒。

3　包涵體檢查

在犬瘟熱病毒感染的細胞中出現(xiàn)一種特征性的形態(tài)學變化—包涵體(inclusionbody)。這是犬瘟熱病毒感染的重要標志之一，可通過診斷病理學進行檢查，這是診斷犬瘟熱病毒的重要輔助方法。生前采取鼻黏膜、眼結(jié)膜、皮膚刮取物、陰道黏膜或外周血液等制成涂片，檢查細胞的胞漿內(nèi)包涵體和核內(nèi)包涵體。包涵體經(jīng)蘇木素-伊紅染色后，在光學顯微鏡下可見其呈紅色或暗紅色，具有清晰的邊界和勻質(zhì)的邊緣。通常多見于細胞漿內(nèi)，1個細胞中?？砂l(fā)現(xiàn)1～10個多形性包涵體，一般呈圓形或橢圓形，也有見到呈鐮刀形而緊貼于細胞核上的。

4　熒光抗體檢查

生前采血分離白細胞涂片，死后采取脾、肝、腎和淋巴結(jié)等組織涂片。涂片用冷丙酮固定，自然干燥，按犬瘟熱熒光抗體的使用效價，用0.01%的伊文斯蘭溶液稀釋后滴于涂片上。置于37℃濕潤條件下染色30分鐘。水洗，自然干燥，封固后在熒光顯微鏡下檢查。犬瘟熱陽性細胞鮮明可辨，細胞漿內(nèi)有蘋果綠熒光，細胞核清晰可見呈暗黑色。陰性者，細胞漿為紫紅色或暗黃色無熒光，細胞核不清晰。

5　電子顯微鏡檢查

取早期病犬糞便或死犬肝、脾等病料，用電子顯微鏡可直接觀察到病毒粒子。根據(jù)以往經(jīng)驗，電子顯微鏡觀察的最佳病料是糞便。