孕婦外周血游離胎兒DNA用于無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢測(cè)的研究進(jìn)展

王慶琴　焦保權(quán)　蘇鐸　郝明吳小華

作者單位: 050081石家莊市，中國(guó)人民解放軍白求恩國(guó)際和平醫(yī)院婦產(chǎn)科

孕婦外周血游離胎兒DNA用于無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢測(cè)的研究進(jìn)展

王慶琴焦保權(quán)蘇鐸郝明吳小華

作者單位: 050081石家莊市，中國(guó)人民解放軍白求恩國(guó)際和平醫(yī)院婦產(chǎn)科

【關(guān)鍵詞】無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢測(cè);外周血游離胎兒DNA;大規(guī)模平行測(cè)序

產(chǎn)前檢查的主要目的對(duì)出生之前胎兒的染色體及基因的異常進(jìn)行確診，對(duì)家庭的優(yōu)生優(yōu)育以及預(yù)防控制新生兒發(fā)病都有十分重要的臨床意義。傳統(tǒng)的侵入性產(chǎn)前檢查，包括:羊膜穿刺、絨毛取樣(chorionic villous sampling，CVS)和臍帶血穿刺，都可能對(duì)胎兒及孕婦產(chǎn)生一定的危害，并存在0.5%～1%流產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn)。利用微創(chuàng)或非創(chuàng)傷性的方法檢測(cè)胎兒遺傳性狀的方法一直是科研及臨所求追的目標(biāo)，孕婦外周血游離胎兒DNA(cell-free fetal DNA，cffDNA)的發(fā)現(xiàn)則為無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢測(cè)(non-invasive prenatal testing，NIPT)技術(shù)提供了一個(gè)全新的策略，并且在臨床上得到廣泛的應(yīng)用。特別是近年來(lái)快速發(fā)展的大規(guī)模平行測(cè)序(massively parallel sequencing，MPS)技術(shù)，更加提高了檢測(cè)的靈敏度和特異性，使得外周血cffDNA應(yīng)用于胎兒性別、血型、單基因病、染色體相關(guān)疾病的檢測(cè)方面，都得到了長(zhǎng)足的發(fā)展。本文將對(duì)孕婦外周血cffDNA作簡(jiǎn)要介紹及近年來(lái)在臨床的應(yīng)用作一綜述。

1　什么是cffDNA

1.1CffDNA的性質(zhì)游離DNA(cell-free DNA，cfDNA)是可以自由循環(huán)于孕婦外周血，由小片段的細(xì)胞外DNA組成的遺傳物質(zhì)。cfDNA的主要來(lái)源于母體血細(xì)胞的破裂，而來(lái)自胎兒的DNA(cffDNA)平均只占10%。研究發(fā)現(xiàn)，通過(guò)cffDNA碎片可以整合胎兒全部基因組，其半衰期只有16 min，可以分娩2 h后迅速的消除，提示cffDNA具有一定的特異性，由此可見(jiàn)對(duì)cfDNA的分析在產(chǎn)前檢測(cè)方面具有重要的意義。研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)胎兒遺傳物質(zhì)比例(fetal fraction，ff)小于4%時(shí)，研究結(jié)果缺乏一定的可信性［1］。但ff隨著孕周的增加而升高，研究表明，cffDNA最早可在孕齡4周時(shí)被檢測(cè)到，懷孕約7周的孕婦外周血ff已達(dá)到檢測(cè)的濃度要求［1］。但為了檢測(cè)的準(zhǔn)確性，檢測(cè)時(shí)間一般選擇孕中期以后。

1.2CffDNA的大小通過(guò)二代測(cè)序?qū)fDNA檢測(cè)發(fā)現(xiàn)［2］，cfDNA片段大多在160 bp左右，只有極少數(shù)能達(dá)到340 bp，而Y染色體相關(guān)序列則一般小于150 bp由此提示cffDNA多數(shù)都小于母源性的cfDNA。正因如此，在設(shè)計(jì)NIPT實(shí)驗(yàn)時(shí)，需要將目的片段長(zhǎng)度加以考慮，例如檢測(cè)單基因突變型疾病時(shí)，設(shè)置較小的擴(kuò)增子(小于150 bp)則足以完成對(duì)目的突變檢測(cè)。但是某些疾病，并不是因?yàn)閱位虻耐蛔兓蛘叨绦蛄械淖兓鶎?dǎo)致，而是因?yàn)橄噜徣齻€(gè)核苷酸的重復(fù)導(dǎo)致基因功能的喪失，例如脆性X綜合征(fragile X syndrome) 因(CGG) n的重復(fù)導(dǎo)致其功能基因FMR1長(zhǎng)度可以達(dá)到1 kb。另外對(duì)亨廷頓舞蹈癥(huntington disease HD)雖有成功診斷報(bào)道，但只有三聯(lián)核苷酸(CAG) 在HTT基因外顯子1區(qū)時(shí)，才成功被檢測(cè)。Fan等［2研究發(fā)現(xiàn)，亨廷頓病(huntington disease，HD)患者的三聯(lián)體重復(fù)都大于40，但由于cffDNA片段大小的原因只有重復(fù)數(shù)值在40～60才能被檢測(cè)，而大于60時(shí)NIPT則顯得有些乏力。

2　CffDNA的來(lái)源

2.1體內(nèi)試驗(yàn)證明cffDNA來(lái)源于胎盤(pán)許多年來(lái)對(duì)cffDNA的來(lái)源，科學(xué)家們一直持有不同的意見(jiàn)，而目前被大多數(shù)接受的觀點(diǎn)是，cffDNA主要來(lái)自于胎盤(pán)上一些特定細(xì)胞的核小體。研究表明，這些核小體是來(lái)自胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞凋亡所裂解的物質(zhì)，并且孕期cffDNA的濃度一定程度上代表了滋養(yǎng)層的健康狀態(tài)從細(xì)胞層面來(lái)說(shuō)，胎盤(pán)是一個(gè)動(dòng)態(tài)器官，在滋養(yǎng)層細(xì)胞的增殖分化過(guò)程中，發(fā)生著持續(xù)動(dòng)態(tài)的細(xì)胞更替，并將凋亡的細(xì)胞物質(zhì)排到母體，但此過(guò)程并不會(huì)引起炎癥反應(yīng)。Bischoff等［3］將從母體血漿中分離出的凋亡物質(zhì)進(jìn)行分類(lèi)，并通過(guò)電子顯微鏡發(fā)現(xiàn)這些凋亡物質(zhì)中存在核小體和染色質(zhì)。有研究［3］發(fā)現(xiàn)，通過(guò)氧應(yīng)激試驗(yàn)，將足月的胎盤(pán)組織培養(yǎng)在不同的氧分壓濃度下(正常組10%和缺氧組0.5%)，20 h培養(yǎng)以后發(fā)現(xiàn)游離β-球蛋白DNA(cell-free β-globin DNA)的濃度在缺氧組中有了顯著的提高。Gupta等［4］的一項(xiàng)研究同樣證明了cffDNA的胚胎來(lái)源，他們直接從胎盤(pán)組織中分離得到合體滋養(yǎng)層微粒子(syncytiotrophoblast microparticles，SMs)，而SMs是合體滋養(yǎng)層融合過(guò)程中釋放的產(chǎn)物，并且在SMs和培養(yǎng)上清中都能檢測(cè)到胎兒的DNA。而臨床中也發(fā)現(xiàn)，在母體血漿和血清中，cffDNA不管是作為游離分子還是存在于微粒的載體中，都成功被檢測(cè)到。

2.2cffDNA來(lái)源于胎盤(pán)除了假性妊娠或胎盤(pán)血液循環(huán)未建立之外，只有當(dāng)胚胎存在時(shí)才能檢測(cè)到cffDNA。當(dāng)存在病理性妊娠時(shí)，由于炎性反應(yīng)會(huì)加速胎盤(pán)細(xì)胞的凋亡，進(jìn)而導(dǎo)致母體血漿中cffDNA的濃度相對(duì)升高。在正常妊娠時(shí)，cffDNA會(huì)在分娩后迅速的消除，治療性流產(chǎn)手術(shù)后，如果胎盤(pán)分離不完全，母體血漿中也同樣會(huì)檢測(cè)到cffDNA的存在。有些妊娠期胎盤(pán)組織存在不完全胚胎嵌合性(confined placental mosaicism，CPM)，使得胎盤(pán)組織與胎兒有著不同的基因型。Faas等［5］研究的1例妊娠中發(fā)現(xiàn)，通過(guò)cffDNA分析提示胎兒核型為45X，對(duì)滋養(yǎng)層細(xì)胞分析的核型同樣為45X，但間充質(zhì)核心組織的核型卻是46XX，該現(xiàn)象充分證明了cffDNA的胎盤(pán)來(lái)源。有研究［5］報(bào)道，與對(duì)照組相比，進(jìn)行CVS手術(shù)孕婦血漿的cffDNA濃度并沒(méi)有顯著性變化，而對(duì)雙胞胎輸血(twin-to-twin transfusion)癥狀的胎兒進(jìn)行激光消融手術(shù)后，cffDNA的濃度會(huì)有明顯的升高，該結(jié)果也同樣印證了cffDNA來(lái)源于胎盤(pán)的事實(shí)。

2.3CffDNA主要來(lái)源于凋亡細(xì)胞而非胎盤(pán)本體

2005年，Wataganara等［6］研究母體cffDNA的濃度是否受到胎盤(pán)體積的影響，并將測(cè)量懷有男胎母體血漿中Y染色體特異基因確定cffDNA濃度并與模型比較發(fā)現(xiàn)，胎盤(pán)體積不會(huì)引起cffDNA濃度的變化，研究同樣提示說(shuō)明了胎兒DNA的釋放是一種受到控制的過(guò)程，且此過(guò)程與胎盤(pán)大小無(wú)關(guān)。進(jìn)而可以推測(cè)細(xì)胞凋亡似乎是胎兒DNA從胎盤(pán)進(jìn)入母體的主要控制因素。研究發(fā)現(xiàn)，合體滋養(yǎng)層的炎性反應(yīng)和胎盤(pán)的氧化作用也同樣加速了細(xì)胞凋亡，進(jìn)而導(dǎo)致cffDNA的釋放。Hahn等［7］認(rèn)為胎兒DNA的釋放，為細(xì)胞凋亡和壞疽共同所致，實(shí)驗(yàn)證明細(xì)胞凋亡的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路會(huì)進(jìn)而引起合體滋養(yǎng)層組織的壞疽，而此過(guò)程直接導(dǎo)致cffDNA最終釋放到母體。綜上所述，結(jié)合體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)可以充分的證明cffDNA來(lái)源于胎盤(pán)組織，并且cffDNA母體外周血濃度對(duì)胎盤(pán)的健康狀況有著良好的指導(dǎo)意義。

3　CffDNA的臨床應(yīng)用

3.1胎兒性別鑒定NIPT首次應(yīng)用于臨床是進(jìn)行胎兒性別檢測(cè)，傳統(tǒng)檢測(cè)方法(如絨毛膜取樣、羊水穿刺、超聲)可以準(zhǔn)確檢測(cè)胎兒性別要求孕齡至少在1周以后，而利用外周血胎兒DNA進(jìn)行檢測(cè)可以減少到7周［8］，因此利用cffDNA進(jìn)行胎兒性別對(duì)預(yù)防和控制性連鎖疾病有重要的意義。對(duì)于X連鎖隱形遺傳病(如血友病、杜氏肌營(yíng)養(yǎng)不良)，如果母親為攜帶者，則男胎有50%的概率患有該疾病，而對(duì)于經(jīng)由cffDN確定懷有女胎的孕婦，可以免去傳統(tǒng)有創(chuàng)檢查確定性別的風(fēng)險(xiǎn)，且更早的作出診斷［9］。對(duì)于先天性腎上腺皮質(zhì)增生(congenital adrenal hyperplasia，CAH)高風(fēng)險(xiǎn)妊娠的孕婦，產(chǎn)前的地塞米松治療可以有效減輕女胎的生理畸形，而對(duì)于懷有男胎的孕婦，則無(wú)需過(guò)多治療，因此通過(guò)cffDNA早期進(jìn)行性別檢測(cè)可以有效的消除孕婦的過(guò)度治療。

最初NIPT技術(shù)檢測(cè)胎兒性別是通過(guò)是否發(fā)現(xiàn)染色體特異性基因DSY14和SRY，但此方法只有在懷有男胎時(shí)才能被檢測(cè)，而并非所有的孕婦的cffDNA濃度都能達(dá)到檢測(cè)閾值，且其靈敏度只有80% 90%［9］。近年來(lái)隨著QPCR和MPS技術(shù)應(yīng)用，孕前期性別檢測(cè)的準(zhǔn)確度提升到97%～100%［10］。盡管在美國(guó)作為父母有權(quán)了解胎兒特征信息，并提供非醫(yī)療目的的性別選擇，但國(guó)內(nèi)由于傳統(tǒng)觀念及社會(huì)倫理因素胎兒的性別信息仍需要進(jìn)行嚴(yán)格的控制。

3.2胎兒血型測(cè)定當(dāng)RhD陰性母親懷有RhD陽(yáng)性血的胎兒時(shí)，孕婦外周血會(huì)有一定風(fēng)險(xiǎn)產(chǎn)生RhD抗體并在母體內(nèi)長(zhǎng)期保留，進(jìn)而導(dǎo)致者胎兒或新生兒的溶血相關(guān)性疾病(haemolytic disease of the fetus and new born，HDFN)。因?yàn)镽hD陰性的母親不含有RhD基因，通過(guò)檢測(cè)外周血中是否存在RhD基因，從而判斷胎兒是否為RhD陽(yáng)性。許多國(guó)家將此項(xiàng)技術(shù)都作為患有高危險(xiǎn)HDFN孕婦的常規(guī)檢測(cè)，當(dāng)胎兒基因型為RhD陰性時(shí)，進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)前保健，而當(dāng)RhD陽(yáng)性時(shí)則需進(jìn)行早期的檢測(cè)以防止宮內(nèi)溶血和早期流產(chǎn)的發(fā)生。NIPT檢測(cè)RHD血型的常規(guī)應(yīng)用表現(xiàn)出極高的準(zhǔn)確性，并且對(duì)產(chǎn)前預(yù)防性抗-D抗體的使用有著重要的臨床指導(dǎo)意義，并且越是早期的檢測(cè)，則越有利于減少對(duì)孕婦身體和心理的傷害。研究表明，利用MPS技術(shù)可以準(zhǔn)確的鑒別孕齡11周胎兒的RHD血型［10］Clausen等［11］最近的一篇綜述提示，通過(guò)NIPT胎兒血型的基因分型，其靈敏度和特異性都能達(dá)到99%以上;近幾年的大規(guī)模臨床研究也同樣證實(shí)了其準(zhǔn)確性［12］。由于在無(wú)創(chuàng)和準(zhǔn)確方面的優(yōu)越性，此技術(shù)在臨床上檢測(cè)RhD血型已得到廣泛應(yīng)用。

3.3單基因病診斷類(lèi)似胎兒性別鑒定和胎兒血型測(cè)定的原理，通過(guò)檢測(cè)孕婦外周血的疾病相關(guān)基因序列來(lái)確定胎兒是否遺傳來(lái)自父親相關(guān)疾病的等位基因，或者是否發(fā)生額外的基因突變。通過(guò)檢測(cè)和排除此類(lèi)基因序列可幫助確定診斷和排除相關(guān)的單基因病，也可用來(lái)確定胎兒HLA分型。但是此項(xiàng)技術(shù)在臨床的應(yīng)用進(jìn)展并不快，主要因?yàn)榇嬖趥€(gè)體遺傳病風(fēng)險(xiǎn)的家庭相對(duì)較少，并且對(duì)于此類(lèi)疾病的診斷需要針對(duì)性的個(gè)體化實(shí)驗(yàn)。

目前單基因在新生兒中的發(fā)病率約為3‰，而其檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)仍為介入性的有創(chuàng)診斷。應(yīng)用于臨床的NIPT單基因病方案的限制條件是母親不能攜帶有致病基因，主要通過(guò)PCR技術(shù)對(duì)相應(yīng)位點(diǎn)進(jìn)行特異擴(kuò)增，檢測(cè)擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度、熒光值或者通過(guò)直接測(cè)序的技術(shù)比對(duì)突變點(diǎn)和野生型序列的區(qū)別，進(jìn)而檢測(cè)單個(gè)堿基的替換、缺失和插入。常見(jiàn)單基因病如肌強(qiáng)直性營(yíng)養(yǎng)不良、軟骨發(fā)育不全、亨廷頓病、地中海貧血、先天性腎上腺增生、囊性纖維化病都能夠成功被檢測(cè)。Papasavva等［13］通過(guò)49個(gè)在β球蛋白基因上的高雜合單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)位點(diǎn)，檢測(cè)101例可能患有父源性β-地中海貧血的胎兒，結(jié)果提示此方法對(duì)該疾病診斷有良好的靈敏度和特異性。

隨著技術(shù)的發(fā)展，數(shù)字PCR和MPS技術(shù)的產(chǎn)生使得通過(guò)外周血檢測(cè)胎兒母源性的單基因病成為可能。此兩項(xiàng)技術(shù)原理是通過(guò)檢測(cè)等位基因的突變型和正常型在外周血中的比例，進(jìn)而確定胎兒是否攜帶致病基因。如果胎兒攜帶致病基因，則相對(duì)突變劑量會(huì)增加。大量臨床研究提示此類(lèi)技術(shù)可準(zhǔn)確的診斷染色體隱形遺傳?。?4］。Tsui等［15］通過(guò)檢測(cè)12例孕齡11周孕婦的外周血樣本，成功檢測(cè)出血友病高風(fēng)險(xiǎn)胎兒的基因型，為X染色體隱性遺傳病的非侵入性產(chǎn)前診斷提供了藍(lán)本。Lo等［16］利用外周血中游離DNA進(jìn)行全基因組測(cè)序，整合出完整的孕婦和胎兒的基因組序列，并構(gòu)基因組遺傳圖譜，此方法為無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因診斷提供了一個(gè)新的方案，具有重大意義。

3.4非整倍體染色體病由于配子在減數(shù)分裂期間染色體分配發(fā)生異常，導(dǎo)致同源染色體發(fā)生數(shù)目上的改變，進(jìn)而配子結(jié)合產(chǎn)生非整倍體合子。研究發(fā)現(xiàn)，平均每300個(gè)新生兒中就會(huì)有1個(gè)存在染色體病，并且染色體病導(dǎo)致流產(chǎn)的比例可達(dá)到35%［17］。但患有染色體病的胎兒仍有一部分能夠成功分娩，并帶有嚴(yán)重的生理缺陷，如21三體綜合征(21-trisomy syndrome， T21)。早期的研究發(fā)現(xiàn)在懷有T21胎兒的孕婦血漿cffDNA的比例較正常組高。而近年來(lái)由于胚胎特異性標(biāo)志物和檢測(cè)技術(shù)的不斷完善，并結(jié)合技術(shù)之間的相互運(yùn)用，非整倍體染色體病的診斷取得不斷的發(fā)展Papageorgiou等［18］通胎兒特異性甲基化與QPCR技術(shù)相結(jié)合的方法，成功在40例樣本中檢測(cè)到14例21三體綜合征患兒，靈敏度和特異性都達(dá)到100%。

大規(guī)?；蚪M測(cè)序技術(shù)不僅推動(dòng)了單基因病診斷的進(jìn)步，同樣使得非整倍體的診斷取得快速的發(fā)展，原理是通過(guò)孕婦外周血cfDNA擴(kuò)增測(cè)序，讀取大量的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析整合以達(dá)到對(duì)母體和胎兒每條染色體足夠的覆蓋度，并將每條染色體的比例與正常組進(jìn)行比較從而對(duì)非整倍體病進(jìn)行診斷。近年來(lái)大規(guī)模臨床樣本研究驗(yàn)證了MPS技術(shù)在無(wú)創(chuàng)診斷染色體病的優(yōu)勢(shì)，包括對(duì)13、18、21號(hào)染色體三倍體(T13、T18、T21)的檢查，有著極高的準(zhǔn)確性，并成為最有可能替代傳統(tǒng)有創(chuàng)檢查的新興檢查方法［19，20］。作為最小的常染色體，2號(hào)染色體在MPS中往往得到的數(shù)據(jù)量相對(duì)較少，而定向測(cè)序(targeted sequencing)的技術(shù)則很好的解決了這個(gè)問(wèn)題。通過(guò)限制DNA區(qū)域，定向測(cè)序可以大大提高目的區(qū)域的覆蓋度，減少無(wú)效數(shù)據(jù)產(chǎn)生，大大提高檢測(cè)效率。Sparks等［21］通過(guò)定向測(cè)序的方法，成功從29個(gè)樣本中診斷出39例21-三倍和7例18-三體，靈敏度和特異性都為100%，而讀取的數(shù)據(jù)量只有非定向測(cè)序的5%。近年來(lái)又產(chǎn)生了基于SNP的定向測(cè)序(SNP-based targeted sequencing，S-Ts)技術(shù)同樣非常高效。研究發(fā)現(xiàn)，此方法的一個(gè)重要優(yōu)勢(shì)在于高效檢測(cè)T13、T18、T21的同時(shí)，性染色體核型異常也可同時(shí)被檢測(cè)(例如X0，XXY，XXX，XYY)［22］。雖然定向測(cè)序的數(shù)據(jù)量不能對(duì)所有染色體達(dá)到足夠的覆蓋度，但能夠在低通量測(cè)序儀同樣進(jìn)行非整倍體診斷，使得此項(xiàng)技術(shù)在一些中等規(guī)模的臨床檢測(cè)中心更受到歡迎。由于雙胞或多胎的母體外周血中cffDNA的濃度確定和區(qū)分等困難因素，使無(wú)創(chuàng)技術(shù)對(duì)雙(多)胎的檢測(cè)較少。Grmminger等［23］對(duì)16例雙胞胎樣本進(jìn)行檢測(cè)，1例整倍體和4例21三體都準(zhǔn)確檢測(cè)，而并未出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道只有Grmminger等［23［24］分別對(duì)2例三胞胎樣本進(jìn)行了檢測(cè)，但新生兒表型全部正常。雖然NIPT對(duì)單胎的染色體的數(shù)目異常診斷技術(shù)較為成熟，由于多種不可控因素，使得NIPT對(duì)雙(多)胎的檢測(cè)的準(zhǔn)確性仍需大量的臨床樣本進(jìn)行佐證。

3.5染色體片段異常診斷對(duì)于不平衡易位，理論上NIPT的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)該是部分的染色體三體和單體在一項(xiàng)回顧性分析中，對(duì)已經(jīng)確定的6例胎兒不平衡的孕婦外周血游離DNA進(jìn)行檢測(cè)，Srinivasan等［25］通過(guò)深度測(cè)序的方法全部成功識(shí)別，其中2例樣本傳統(tǒng)核型分析不能說(shuō)明易位來(lái)源，而測(cè)序的方法則很容易解決，可以說(shuō)明NIPT技術(shù)相對(duì)于傳統(tǒng)核型分析更有優(yōu)越性。但進(jìn)行更小的易位則需要更加大量的測(cè)序數(shù)據(jù)和更高的數(shù)據(jù)分析能力。例如S-Ts技術(shù)，則需要足夠多且有效的SNP才能完成對(duì)目標(biāo)區(qū)域的準(zhǔn)確檢測(cè)。

而對(duì)拷貝數(shù)的變化，如核苷酸重復(fù)和缺失，通過(guò)NIPT技術(shù)也有成功的報(bào)道，例如在1例12號(hào)染色體的4-Mb的缺失［26］和2例22號(hào)染色體的3-Mb的缺失［27］都準(zhǔn)確的被檢測(cè)。Srinivasan等［25］對(duì)11例孕婦血漿cffDNA樣本進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)其中8例樣本的染色體拷貝異常，并通過(guò)流產(chǎn)組織的核心分析得到驗(yàn)證。因此，NIPT檢測(cè)核酸拷貝數(shù)變化的臨床應(yīng)用，仍需要技術(shù)檢測(cè)手段的創(chuàng)新。

孕婦外周血cffDNA的發(fā)現(xiàn)為NIPT提供了一個(gè)全新的方向，臨床上檢測(cè)胎兒性別、血型，cffDNA都發(fā)揮了重要的作用。盡管cffDNA在檢測(cè)單基因病和染色體病是有一定的局限性，但隨著技術(shù)檢測(cè)方法的進(jìn)步，相信此項(xiàng)技術(shù)可能會(huì)逐步添補(bǔ)或取代現(xiàn)有的檢測(cè)方法。當(dāng)前NIPT的臨床應(yīng)用雖然有限，但NIPT有著無(wú)創(chuàng)、廣泛、早期等傳統(tǒng)檢測(cè)所不具有的特點(diǎn)，并可大大減低孕婦的痛苦，使得NIPT在臨床方面有良好的應(yīng)用前景。

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(收稿日期:2014－11－25

doi:10.3969/j.issn.1002－7386.2015.09.042

【文章編號(hào)】1002－7386(2015) 09－1394－04

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【中圖分類(lèi)號(hào)】R 714.5