呼吸道感染苛養(yǎng)菌的分布及耐藥特點

楊曉波，周璐坤，張方瓊

（1.中國人民解放軍第二五三醫(yī)院檢驗科，內(nèi)蒙古呼和浩特 010051；2.湖北秭歸縣人民醫(yī)院檢驗科，湖北秭歸 443600）

呼吸道感染苛養(yǎng)菌的分布及耐藥特點

楊曉波1，周璐坤1，張方瓊2

（1.中國人民解放軍第二五三醫(yī)院檢驗科，內(nèi)蒙古呼和浩特 010051；2.湖北秭歸縣人民醫(yī)院檢驗科，湖北秭歸 443600）

目的了解該院呼吸道感染苛養(yǎng)菌的分布及耐藥性分析，更好地服務(wù)臨床，為臨床診療提供參考依據(jù)。方法該院2012年1月至2014年11月從呼吸道感染患者痰共分離培養(yǎng)得到173株病原菌，選用法國梅里埃公司的API鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定；藥敏試驗使用K-B法，選用英國Oxoid公司的MH瓊脂、血瓊脂平板和藥敏紙片進(jìn)行。結(jié)果在1 374株呼吸道感染患者痰培養(yǎng)中分離出苛養(yǎng)菌173株，其中未發(fā)現(xiàn)對青霉素中介或耐藥的肺炎鏈球菌?？ㄋ?、流感嗜血桿菌對四環(huán)素的敏感率達(dá)80%以上，然而對肺炎鏈球菌的耐藥率則高達(dá)80%；肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌對環(huán)丙沙星和左氧氟沙星的敏感率為100%；流感嗜血桿菌對第三代頭孢菌素的敏感率為100%。結(jié)論對于苛養(yǎng)菌的感染，臨床治療應(yīng)根據(jù)藥敏試驗結(jié)果，合理選用抗菌藥物，以有效提高治愈率。

呼吸道感染； 苛養(yǎng)菌； 卡他莫拉菌； 肺炎鏈球菌； 流感嗜血桿菌； 耐藥性分析

苛養(yǎng)性菌是一類生長需要特殊營養(yǎng)物質(zhì)的細(xì)菌，與許多感染性疾病有關(guān)，其分離培養(yǎng)較為困難，又稱為“難培養(yǎng)的細(xì)菌”?？ㄋ?、流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌都是臨床上較為常見的呼吸道感染的苛養(yǎng)菌，當(dāng)機(jī)體免疫力低下時，可引起呼吸道相關(guān)性疾病，如肺炎、支氣管炎、急性中耳炎等，另外這些苛養(yǎng)菌還可以隨著血液循環(huán)侵入到組織內(nèi)部，引發(fā)腦膜炎、菌血癥和心內(nèi)膜炎等［1］。因此，對苛養(yǎng)性細(xì)菌的分離鑒定和藥敏試驗不僅是臨床迫切的需要，也是衡量臨床微生物實驗室技術(shù)水平的重要標(biāo)志。筆者對本院2012年1月至2014年11月分離得到的173株苛養(yǎng)菌的臨床特點及耐藥性進(jìn)行分析，旨在為臨床合理選用抗菌藥物提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2012年1月至2014年11月，本院臨床共對門診和住院的呼吸道感染患者的痰標(biāo)本共1 374例進(jìn)行分離培養(yǎng)，苛養(yǎng)菌共計173株，卡他莫拉菌53株，肺炎鏈球菌89株，流感嗜血桿菌31株。其中門診患者66例（4.8%），住院患者1 308例（95.2%）；男性共145例，女性共28例，平均年齡為76.8歲。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 門診患者在采集痰標(biāo)本前先用清水或雙氧水（30.0 mL/L）漱口，住院患者需在晨起后先用清水和雙氧水（30.0 mL/L）漱口，然后進(jìn)行深咳，棄用第一口痰，保留第二口痰，進(jìn)行痰涂片鏡檢，合格標(biāo)本的要求：白細(xì)胞大于25個/低倍鏡視野、鱗狀上皮細(xì)胞小于10個/低倍鏡視野或者鱗狀上皮細(xì)胞/白細(xì)胞小于0.4，或者是經(jīng)過無菌毛刷刷取的痰標(biāo)本。采集的標(biāo)本應(yīng)迅速接種到血瓊脂平板和巧克力瓊脂平板，放入35℃、5%CO2的培養(yǎng)箱孵育18～24 h，再進(jìn)行常規(guī)分離培養(yǎng)。

1.2.2 細(xì)菌鑒定和藥敏試驗 按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第三版對所有標(biāo)本進(jìn)行分離、培養(yǎng)，嚴(yán)格按照無菌操作技術(shù)規(guī)范，同時接種血瓊脂平板和巧克力平板。采用上海新苗 WJ-160A-Ⅲ型CO2培養(yǎng)箱，力康HFsafe-1200生物安全柜。將分純的菌株選用法國梅里埃公司的API鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定；選用英國Oxoid公司的MH瓊脂、血瓊脂平板和藥敏紙片進(jìn)行藥敏試驗，肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌的藥敏結(jié)果按照美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會（CLSI）2013年版標(biāo)準(zhǔn)判斷結(jié)果，卡他莫拉菌的藥敏結(jié)果按照CLSI的2010年M45-A2版標(biāo)準(zhǔn)判定結(jié)果。

1.2.3 質(zhì)控菌株 采用流感嗜血桿菌ATCC49247，肺炎鏈球菌ATCC49619標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行質(zhì)控，質(zhì)控合格方可進(jìn)行藥敏試驗。

1.2.4 β-內(nèi)酰胺酶檢測 采用頭孢硝噻吩紙片定性檢測流感嗜血桿菌和卡他莫拉菌的β-內(nèi)酰胺酶。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用Whonet5.6系統(tǒng)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。

2 結(jié) 果

2.1 細(xì)菌分布 2012年1月至2014年11本院痰標(biāo)本中共分離173株苛養(yǎng)菌，其中卡他莫拉菌53株，肺炎鏈球菌89株，流感嗜血桿菌31株。各年度苛養(yǎng)菌的分布情況詳見表1。

2.2 藥敏試驗 卡他莫拉菌、肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌對15種抗菌藥物的藥敏試驗結(jié)果見表2。檢測出產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶的卡他莫拉菌41株，流感嗜血桿菌9株。

3 討 論

呼吸道感染（RTI）是一種常見多發(fā)病，高居門診就診患者人數(shù)的首位［2］?？琉B(yǎng)菌主要引起RTI，通常以冬季帶菌率較高，發(fā)病也增多。據(jù)統(tǒng)計，我國每年有近5億人感染呼吸系統(tǒng)疾病，7歲以下兒童平均每人每年患急性呼吸道感染3～4次［3］。呼吸道感染是抗菌藥物使用頻率最高、用量最多的疾病。對于肺部重癥感染的患者，至關(guān)重要的是從痰培養(yǎng)中及時找出病原菌，使臨床快速準(zhǔn)確地選擇抗菌藥物，能夠?qū)颊哌M(jìn)行有效的治療。

本次分析結(jié)果如表2所示，在1 374株呼吸道感染患者痰培養(yǎng)中分離出苛養(yǎng)菌173株，其中肺炎鏈球菌對萬古霉素的敏感率100%，并且未發(fā)現(xiàn)對青霉素中介或耐藥?？ㄋ?、流感嗜血桿菌對四環(huán)素的敏感率達(dá)80%以上，然而對肺炎鏈球菌的耐藥率則高達(dá)80%；肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌對環(huán)丙沙星和左氧氟沙星的敏感率為100%，喹諾酮類藥物適合成人使用，但由于其腎毒性作用不適合用于兒童；流感嗜血桿菌對第三代頭孢菌素和利福平的敏感率為100%。對阿莫西林/克拉維酸的敏感率為90.0%，較之氨芐西林的敏感率（68.5%）提高了21.5%左右，這與國內(nèi)相關(guān)文獻(xiàn)報道基本相近［4-6］。另外，卡他莫拉菌對紅霉素和阿奇霉素的敏感率為100.0%?？ㄋa(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶率高達(dá)77.3%，β-內(nèi)酰胺酶的產(chǎn)酶率不斷增高，在1976年前，世界上并無產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶流行菌株的報道，然而20世紀(jì)80年代后期，英國報道90.0%的卡他莫拉菌產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶。在中國臺灣有97.8%的產(chǎn)酶菌株的報道［7］。RTI疾病治療的關(guān)鍵在于及時地明確致病菌和合理使用抗菌藥物。然而，由于濫用抗菌藥物，導(dǎo)致患者菌群失調(diào)，耐藥菌株逐年增多，耐藥菌感染逐漸成為除癌癥、心腦血管疾病和AIDS外威脅人類生命健康的第四大醫(yī)學(xué)問題［8］。

目前，本院仍然存在以下問題：由于臨床對微生物學(xué)檢驗的重要性認(rèn)識不足，導(dǎo)致留取標(biāo)本的合格率低；對于回報的檢驗結(jié)果，臨床總以個人的“標(biāo)準(zhǔn)”加以衡量，受控于經(jīng)驗性用藥的理念，致使耐藥菌株不斷增多的問題更加棘手，還時常被能夠選擇的抗菌藥物較少而困擾；相應(yīng)的檢驗設(shè)備和科研條件不足等，以上都是限制本院病原學(xué)診斷發(fā)展的重要影響因素。綜上所述，苛養(yǎng)菌引起的呼吸道感染，臨床治療應(yīng)按照《抗菌藥物臨床應(yīng)用管理辦法》，根據(jù)藥敏試驗結(jié)果，合理使用抗菌藥物，以有效提高治愈率［9-12］。

［1］ 王晶，韓麗霞，張鳳華，等.兒童呼吸道感染病原菌分布與耐藥分析［J］.中國感染控制雜志，2007，6（3）：180-182.

［2］吳洪巧，紀(jì)明宇，裴鳳艷，等.146株鏈球菌屬臨床感染特征及耐藥性分析［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，21（12）：2607-2609.

［3］ 胡利春，傅雅濃，呂火烊.兒童呼吸道分離的肺炎鏈球菌耐藥性分析［J］.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2014，24（17）：2570-2571.

［4］楊青，陳曉，孔海深，等.Mohnarin 2010年度報告：0～14歲兒童細(xì)菌耐藥監(jiān)測［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012，22（3）：497-502.

［5］聶波麗.兒童感染肺炎鏈球菌臨床分布及耐藥性分析［J］.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（1）：109-110.

［6］ 袁錦屏，楊靈，邱桂霞，等.呼吸道苛養(yǎng)菌對頭孢妥侖匹酯等10種抗菌藥物的藥敏監(jiān)測［J］.中國感染控制雜志，2011，10（4）：289-291.

［7］Hsu SF，Lin YT，Chen TL，et al.Antimicrobial resistance of Moraxella catarrhailis isolates in Taiwan［J］.J Microbiol Immunol Infect，2012，45（2）：134-140.

［8］唐翠連.某醫(yī)院臨床分離細(xì)菌菌株耐藥檢測結(jié)果與分析［J］.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（8）：927-928.

［9］殷波濤，周明權(quán)，岳艷玲，等.2006～2010年武漢同濟(jì)醫(yī)院呼吸道苛養(yǎng)菌的耐藥性分析［J］.華中科技大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版，2012，41（2）：226-229.

［10］劉蓉，朱文磊，潘露，等.下呼吸道標(biāo)本苛養(yǎng)菌的分離培養(yǎng)及耐藥性研究［J］.四川省衛(wèi)生管理干部學(xué)院學(xué)報，2004，23（3）：161-162.

［11］胡云建，胡繼紅，張秀珍，等.對一些苛養(yǎng)菌引起相關(guān)感染的抗生素治療［J］.中國新藥雜志，2000，9（4）：285.

［12］葉惠芬.廣州地區(qū)苛養(yǎng)菌耐藥現(xiàn)狀調(diào)查［J］.臨床檢驗雜志，2000，18（6）：333-335.

10.3969/j.issn.1673-4130.2015.17.049

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1673-4130（2015）17-2566-02

2015-04-08）