• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    燒傷對血管內(nèi)皮細胞屏障的影響及其保護藥物的研究進展

    2015-03-20 17:27:03唐富波白曉東
    感染、炎癥、修復 2015年4期
    關(guān)鍵詞:肌動蛋白通透性屏障

    唐富波 白曉東 胡 森

    (1.解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院全軍創(chuàng)傷修復與組織再生重點實驗室暨皮膚損傷修復與組織再生北京市重點實驗室,北京 100048;2. 武警總醫(yī)院燒傷整形科,北京 100039)

    綜述

    燒傷對血管內(nèi)皮細胞屏障的影響及其保護藥物的研究進展

    唐富波1,2白曉東2胡 森1

    (1.解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院全軍創(chuàng)傷修復與組織再生重點實驗室暨皮膚損傷修復與組織再生北京市重點實驗室,北京 100048;2. 武警總醫(yī)院燒傷整形科,北京 100039)

    血管內(nèi)皮細胞屏障的完整性對于維持體內(nèi)循環(huán)平衡和各臟器生理功能至關(guān)重要。燒傷后,毛細血管擴張、血管通透性增加,體液滲出,引起組織、器官水腫和功能障礙。保護燒傷后血管內(nèi)皮細胞屏障,減輕燒傷后損傷,是長期以來燒傷的研究重點。本文就近年來燒傷對血管內(nèi)皮細胞屏障的影響及機制、血管內(nèi)皮細胞屏障的保護藥物研究進展綜述如下。

    1 血管內(nèi)皮細胞屏障與燒傷

    1.1血管內(nèi)皮細胞屏障血管內(nèi)皮是由一層緊密連接的內(nèi)皮細胞單層和基膜構(gòu)成的半選擇性通透屏障,控制血液和組織之間的體液、蛋白質(zhì)、電解質(zhì)交換[1]。這一屏障的破壞可以直接引起血管內(nèi)皮通透性增加。血管內(nèi)皮細胞屏障功能與細胞骨架蛋白、細胞間連接、基底膜等關(guān)系密切。

    內(nèi)皮細胞骨架蛋白對于維持細胞正常形態(tài)起關(guān)鍵作用。它由微絲、微管、中間絲等成分組成[2]。微絲的主要組成成分是肌動蛋白(actin)、肌球蛋白(myosin)和肌動蛋白結(jié)合蛋白(actin-binding protein),其中以肌動蛋白的量最大[3]。在這些結(jié)構(gòu)中,肌動蛋白對調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細胞屏障功能具有重要作用。各種炎癥介質(zhì)誘導肌球蛋白輕鏈(MLC)的磷酸化和內(nèi)皮細胞骨架蛋白的收縮,導致細胞向心張力增加和細胞間黏附減弱,使細胞間的間隙形成,細胞間通透性增加[4]。

    細胞間連接包括緊密連接、縫隙連接、黏附連接等[2]。緊密連接(tight junctions)是細胞屏障的重要組成部分,只存在于內(nèi)皮細胞間,環(huán)繞整個細胞形成閉鎖小帶或閉鎖斑。細胞通透性的調(diào)節(jié)主要通過緊密連接蛋白連接復合物與胞內(nèi)肌動蛋白骨架的相互作用來實現(xiàn)[5]。黏附連接存在于內(nèi)皮細胞間、內(nèi)皮細胞和基底膜之間。黏附連接是由具有鈣依賴的血管內(nèi)皮鈣黏著蛋白(VE-cadherin, VE-cad)和胞漿內(nèi)的黏附蛋白形成的特異性復合體[6]?;啄さ闹饕煞譃槟z原蛋白、纖維連接蛋白、層黏連蛋白等,大分子物質(zhì)通過基底膜進出血管[7]。內(nèi)皮細胞與基底膜間的黏附由整合素及相關(guān)蛋白介導,形成附著斑。整合素的胞外N末端與細胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)相連,胞內(nèi)C末端通過尾蛋白、α輔肌動蛋白等與骨架蛋白連接[3]。

    1.2燒傷對血管內(nèi)皮細胞屏障的影響及機制燒傷后,機體受到嚴重的致傷因子打擊,產(chǎn)生強烈持久的應激反應,同時組織的缺血缺氧、再灌注損傷、燒傷毒素、內(nèi)毒素、炎性介質(zhì)、內(nèi)環(huán)境紊亂、免疫損傷等多種因素的作用,導致血管內(nèi)皮細胞的破壞、內(nèi)皮細胞間隙增寬等,引起血管內(nèi)皮細胞屏障的破壞。近年來研究發(fā)現(xiàn),一些信號途徑或分子參與燒傷后血管內(nèi)皮細胞屏障功能障礙的過程。

    1.2.1肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)與肌球蛋白輕鏈(MLC)途徑MLCK的磷酸化調(diào)節(jié)內(nèi)皮細胞通透性,MLCK 通過磷酸化MLC的第18位絲氨酸和第19位蘇氨酸激活肌球蛋白重鏈頭部ATP 酶,產(chǎn)生的能量引起內(nèi)皮細胞肌動蛋白與肌球蛋白Ⅱ相互作用,使細胞收縮,細胞間隙形成,通透性增加[8]。MLCK在腸道內(nèi)皮屏障功能調(diào)節(jié)中起著重要作用。MLCK的磷酸化引起肌動蛋白絲與腸上皮細胞緊密連接相關(guān)蛋白和肌動蛋白纖維的破壞,導致緊密連接中斷,從而影響內(nèi)皮細胞屏障通透性[9]。MLCK的激活也導致其他關(guān)鍵緊密連接蛋白如咬合蛋白(occludin)和帶狀閉合蛋白-1(ZO-1)等的降解,從而影響內(nèi)皮細胞通透性[10]。Tinsley等[11]的實驗顯示,燒傷血清刺激肺微血管內(nèi)皮能誘導MLC的磷酸化,并伴隨血管內(nèi)皮通透性增高;同時,MLCK抑制劑可減少MLC磷酸化,能降低燒傷血清誘導的內(nèi)皮細胞通透性增高。Reynoso等[12]在小鼠燙傷實驗中發(fā)現(xiàn),與含MLCK-210基因的燙傷小鼠比較,敲除MLCK-210基因的燙傷小鼠血管通透性顯著降低,其生存率也得到明顯改善。Guo等[13]敲除小鼠的非肌肌球蛋白輕鏈(nonmuscle myosin light chain kinase,nmMLCK)后進行燒傷實驗,發(fā)現(xiàn)其中性粒細胞黏附受到抑制,腸旁滲漏明顯減少,燒傷后的腸道血管內(nèi)皮細胞屏障功能得到了保護。

    1.2.2p38/MAPK途徑絲裂原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinase,MAPK)是一類絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,作為高度保守的真核細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導通路,可以被廣泛的細胞外信號或刺激所激活[14]。MAPK包括細胞外信號調(diào)節(jié)激酶、p38激酶和c-Jun氨基末端激酶3種成員[15]。研究表明,p38激酶是燒傷后引起炎癥反應和細胞凋亡的重要途徑。p38激酶參與燒傷后血管內(nèi)皮細胞應力纖維形成和ZO-1的解離和內(nèi)化,抑制p38激酶能逆轉(zhuǎn)燒傷后內(nèi)皮細胞屏障功能紊亂[3]。

    1.2.3其他信號通路Toll樣受體(Toll-like receptors,TLR)與燒傷后血管內(nèi)皮細胞屏障功能障礙有關(guān)。TLR是機體免疫反應的重要因子,其中TLR-4主要識別革蘭陰性菌的內(nèi)毒素(LPS)。Murphy等[16]的研究表明,燒傷后大鼠TLR-4表達增強,在LPS的誘導下死亡率增高。Breslin等[17]在實驗中,使野生型小鼠和TLR-4基因缺失型小鼠接受25%TBSA燙傷,野生型小鼠血管通透性和白細胞黏附數(shù)量明顯高于TLR-4基因缺失型小鼠,表明TLR-4在非膿毒癥的燒傷炎癥條件下,對于微血管通透性及白細胞黏附起重要調(diào)節(jié)作用。Peterson等[18]觀察到,TLR-4基因缺失小鼠在燙傷后較正常小鼠燙傷后腸道通透性減弱,滲透性降低,腸屏障功能破壞減少,說明腸屏障的損傷具有TLR-4依賴性。Krzyzaniak等[19]在燒傷實驗中將敲除TLR-4基因的小鼠與正常基因組的小鼠進行比較,證實了燒傷介導的小鼠急性肺損傷是一個TLR-4依賴性過程,燒傷后缺乏TLR-4基因的小鼠肺血管通透性和肺損傷明顯輕于燒傷后的正常對照小鼠。

    近年來的研究也證實,Rho蛋白是內(nèi)皮細胞屏障功能的重要調(diào)節(jié)因子。Rho蛋白通過影響細胞內(nèi)以肌球蛋白為主的收縮成分和內(nèi)皮間連接的功能,調(diào)節(jié)內(nèi)皮細胞屏障的通透性[20]。Zheng等[21]研究發(fā)現(xiàn),Rho特異性抑制劑能夠抑制燒傷后細胞骨架蛋白的破壞,降低內(nèi)皮通透性,保護內(nèi)皮細胞屏障功能。

    Tinsley等[22]的研究表明,蛋白激酶C(PKC)參與了燒傷后肺血管內(nèi)皮細胞黏附連接(AJ)的重組和血管內(nèi)皮細胞屏障的功能調(diào)節(jié)。燒傷血清刺激血管內(nèi)皮細胞,導致VE-鈣黏蛋白或β-連環(huán)蛋白的絲氨酸磷酸化,從而使細胞間隙增寬,內(nèi)皮通透性增加。

    2 藥物對燒傷后血管內(nèi)皮細胞屏障的保護作用

    隨著對燒傷血管內(nèi)皮細胞屏障研究的逐步深入,研究發(fā)現(xiàn),某些藥物對上述通路具有直接或間接的作用,可以減少血管通透性,保護血管內(nèi)皮細胞屏障功能。

    2.1MLCK/MLC途徑藥物MLC磷酸化導致血管內(nèi)皮細胞收縮和細胞間隙增寬,通透性增加,使血管內(nèi)皮細胞屏障遭到破壞。減少MLC磷酸化,可以減輕內(nèi)皮細胞屏障的損傷。Costantini等[23]發(fā)現(xiàn),己酮可可堿可以通過抑制大鼠燒傷后MLCK水平的增高,減少MLC的磷酸化,從而降低燒傷引起的腸道微血管內(nèi)皮通透性增加,對腸道血管內(nèi)皮細胞屏障具有一定的保護作用。Zahs等[24]在小鼠燒傷后給予MLCK抑制劑PIK(peptide inhibitor of myosin light chain kinase),可以減少腸道炎癥細胞浸潤,減少腸旁滲漏,保護腸道微血管內(nèi)皮細胞屏障功能。Chen等[25]在實驗中給予燒傷小鼠MLCK特異性抑制劑ML-9,結(jié)果減輕了燒傷后腸道通透性的增加和腸黏膜損傷,減少了緊密連接蛋白的降解,降低了MLC磷酸化,保護了腸道血管內(nèi)皮細胞屏障功能。Cao[26]等發(fā)現(xiàn),小檗堿通過抑制低氧誘導因子-1α(HIF-1α),減少了MLCK介導的MLC磷酸化,對腸上皮屏障功起到了一定的保護作用。Luo等[27]發(fā)現(xiàn),組蛋白去乙?;敢种苿┍焖徕c可以抑制HIF-1α,減少血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和MLCK的表達,減少MLC磷酸化水平和緊密連接間帶狀閉合蛋白ZO-1的降解,保護燒傷后動物模型腸道血管內(nèi)皮細胞屏障功能。

    2.2p38/MAPK途徑藥物p38/MAPK作為影響內(nèi)皮細胞屏障的另一重要途徑,也是研究保護燒傷血管內(nèi)皮細胞屏障的一大熱點。使用p38MAPK抑制劑SB202190的燒傷小鼠與不使用SB202190的燒傷小鼠比較,肺水腫形成和肺微血管損傷可以顯著減輕[28]。Costantini等[29]給燒傷小鼠腹腔注射p38MAPK抑制劑SB203580,從而減少了腸道微血管內(nèi)皮細胞通透性,保護了腸屏障功能。他們還證明,使用己酮可可堿可以抑制燒傷小鼠的p38MAPK磷酸化,維持腸屏障的穩(wěn)定性,并可減輕肺血管通透性,減輕急性肺損傷[30]。

    2.3其他保護藥物對體外培養(yǎng)的燒傷早期內(nèi)皮細胞使用Rho蛋白特異性抑制劑Y-27632后,可以使F肌動蛋白的分布逐漸恢復到正常水平,減輕細胞間隙的形成,保護血管內(nèi)皮細胞屏障功能。對游離的燒傷皮膚微血管使用Y-27632,血管內(nèi)皮通透性明顯降低,也起到保護血管內(nèi)皮細胞屏障功能的作用[20]。使用Rho激酶抑制劑法舒地爾(fasudil)可以降低失血性休克動物模型內(nèi)皮細胞和白細胞的相互作用,減少白細胞浸潤,減少血管炎癥反應,保護血管內(nèi)皮細胞屏障功能[31]。Tinsley等[22]在燒傷實驗中使用蛋白激酶C特異性抑制劑雙吲哚基順丁烯二酰亞胺(bisindolylmaleimide),可以抑制燒傷后血管內(nèi)皮細胞VE-鈣黏蛋白和β-連環(huán)蛋白的絲氨酸磷酸化水平,保護血管內(nèi)皮通透性。

    3 展 望

    機體在燒傷后受到嚴重致傷因子打擊,產(chǎn)生強烈應激反應,高溫、缺血缺氧、毒素、各種炎癥因子等使血管內(nèi)皮通透性增高,血管內(nèi)皮細胞屏障破壞,引起體液外滲、組織水腫,造成機體循環(huán)血量下降,形成低血容量性休克,各臟器缺血、灌注不足,最終造成多器官功能障礙。因此,保護血管內(nèi)皮細胞屏障功能,對于防治燒傷休克和維持臟器功能、提高燒傷救治的成功率具有重要意義。近年來,研究者們對燒傷后血管內(nèi)皮細胞屏障功能障礙的分子機制進行了深入研究,發(fā)現(xiàn)了許多血管內(nèi)皮細胞屏障功能調(diào)節(jié)的作用靶點,為實驗研究提供十分廣闊的研究空間。研究調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細胞屏障功能的藥物,可以保護血管內(nèi)皮細胞屏障,為不同條件下燒傷救治提供更多的選擇和思路。

    [1]Goddard LM, Iruela-Arispe ML. Cellular and molecular regulation of vascular permeability[J]. Thromb Haemost, 2013, 109(3)∶ 407-415.

    [2]Dejana E. Endothelial cell-cell junctions∶ happy together[J]. Nat Rev Mol Cell Biol, 2004, 5(4)∶ 261-270.

    [3]張家平, 黃躍生, 汪仕良. 燒傷后早期血管通透性增高研究進展[J]. 中華燒傷雜志, 2010, 26(5)∶ 343-346.

    [4]Shen Q, Wu MH, Yuan SY. Endothelial contractile cytoskeleton and microvascular permeability[J]. Cell Health Cytoskelet, 2009,7(1)∶ 43-50.

    [5]Steed E, Balda MS, Matter K. Dynamics and functions of tight junctions[J]. Trends Cell Biol, 2010, 20(3)∶ 142-149.

    [6]張慶芝, 閔銳. 血管內(nèi)皮通透性調(diào)節(jié)機制新進展[J]. 中國微循環(huán), 2009, 13(6)∶585-588.

    [7]Yurchenco PD, Patton BL. Developmental and pathogenic mechanisms of basement membrane assembly[J]. Curr Pharm Des, 2009, 15(12)∶ 1277-1294.

    [8]吳潔, 張偉金, 黃巧冰. 肌球蛋白輕鏈激酶介導內(nèi)皮細胞屏障功能變化的研究進展[J]. 中國病理生理雜志, 2015, 31(3)∶ 572-576.

    [9]Costantini TW, Loomis WH, Putnam JG, Kroll L, Eliceiri BP, Baird A, Bansal V, Coimbra R. Pentoxifylline modulates intestinal tight junction signaling after burn injury∶ effects on myosin light chain kinase[J]. J Trauma, 2009, 66(1)∶ 17-24; discussion 24-25.

    [10]Shen L, Black ED, Witkowski ED, Lencer WI, Guerriero V, Schneeberger EE, Turner JR. Myosin light chain phosphorylation regulates barrier function by remodeling tight junction structure[J]. J Cell Sci, 2006, 119(Pt 10)∶ 2095-2106.

    [11]Tinsley JH, Teasdale NR, Yuan SY. Myosin light chain phosphorylation and pulmonary endothelial cell hyperpermeability in burns[J]. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol, 2004, 286(4)∶ L841-L847.

    [12]Reynoso R, Perrin RM, Breslin JW, Daines DA, Watson KD, Watterson DM, Wu MH, Yuan S. A role for long chain myosin light chain kinase (MLCK-210) in microvascular hyperpermeability during severe burns[J]. Shock, 2007, 28(5)∶589-595.

    [13]Guo M, Yuan SY, Frederich BJ, Sun C, Shen Q, McLean DL, Wu MH. Role of non-muscle myosin light chain kinase in neutrophil-mediated intestinal barrier dysfunction during thermal injury[J]. Shock, 2012, 38(4)∶ 436-443.

    [14]張奇, 白曉東, 付小兵. p38MAPK信號通路研究進展[J]. 感染、炎癥、修復, 2005, 6(2)∶121-123.

    [15]Goldsmith CS, Bell-Pedersen D. Diverse roles for MAPK signaling in circadian clocks[J]. Adv Genet, 2013, 84∶ 1-39.

    [16]Murphy TJ, Paterson HM, Kriynovich S, Zang Y, Kurt-Jones EA, Mannick JA, Lederer JA. Linking the "two-hit" response following injury to enhanced TLR4 reactivity[J]. J Leukoc Biol, 2005, 77(1)∶ 16-23.

    [17]Breslin JW, Wu MH, Guo M, Reynoso R, Yuan SY. Toll-like receptor 4 contributes to microvascular inflammation and barrier dysfunction in thermal injury[J]. Shock, 2008, 29(3)∶349-355.

    [18]Peterson CY, Costantini TW, Loomis WH, Putnam JG, Wolf P, Bansal V, Eliceiri BP, Baird A, Coimbra R. Toll-like receptor-4 mediates intestinal barrier breakdown after thermal injury[J]. Surg Infect (Larchmt), 2010, 11(2)∶ 137-144.

    [19]Krzyzaniak M, Cheadle G, Peterson C, Loomis W, Putnam J, Wolf P, Baird A, Eliceiri B, Bansal V, Coimbra R. Burn-induced acute lung injury requires a functional Toll-like receptor 4[J]. Shock, 2011, 36(1)∶ 24-29.

    [20]黃巧冰. 內(nèi)皮細胞屏障與燒傷后血管通透性的關(guān)系及機制[J].中華燒傷雜志,2007,23(5)∶ 324-326.

    [21]Zheng HZ, Zhao KS, Zhou BY, Huang QB. Role of Rho kinase and actin filament in the increased vascular permeability of skin venules in rats after scalding[J]. Burns, 2003, 29(8)∶ 820-827.

    [22]Tinsley JH, Breslin JW, Teasdale NR, Yuan SY. PKC-dependent, burn-induced adherens junction reorganization and barrier dysfunction in pulmonary microvascular endothelial cells[J]. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol, 2005, 289(2)∶ L217-L223.

    [23]Costantini TW, Loomis WH, Putnam JG, Kroll L, Eliceiri BP, Baird A, Bansal V, Coimbra R. Pentoxifylline modulates intestinal tight junction signaling after burn injury∶ effects on myosin light chain kinase[J]. J Trauma, 2009, 66(1)∶ 17-24; discussion 24-25.

    [24]Zahs A, Bird MD, Ramirez L, Turner JR, Choudhry MA, Kovacs EJ. Inhibition of long myosin light-chain kinase activation alleviates intestinal damage after binge ethanol exposure and burn injury[J]. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol, 2012, 303(6)∶ G705-G712.

    [25]Chen C, Wang P, Su Q, Wang S, Wang F. Myosin light chain kinase mediates intestinal barrier disruption following burn injury[J]. PLoS One, 2012, 7(4)∶ e34946.

    [26]Cao M, Wang P, Sun C, He W, Wang F. Amelioration of IFN-gamma and TNF-alpha-induced intestinal epithelial barrier dysfunction by berberine via suppression of MLCK-MLC phosphorylation signaling pathway[J]. PLoS One, 2013, 8(5)∶ e61944.

    [27]Luo HM, Du MH, Lin ZL, Zhang L, Ma L, Wang H, Yu W, Lv Y, Lu JY, Pi YL, Hu S, Sheng ZY. Valproic acid treatment inhibits hypoxia-inducible factor 1alpha accumulation and protects against burn-induced gut barrier dysfunction in a rodent model[J]. PLoS One, 2013, 8(10)∶ e77523.

    [28]Ipaktchi K, Mattar A, Niederbichler AD, Hoesel LM, Vollmannshauser S, Hemmila MR, Su GL, Remick DG, Wang SC, Arbabi S. Attenuating burn wound inflammatory signaling reduces systemic inflammation and acute lung injury[J]. J Immunol, 2006, 177(11)∶ 8065-8071.

    [29]Costantini TW, Peterson CY, Kroll L, Loomis WH, Eliceiri BP, Baird A, Bansal V, Coimbra R. Role of p38 MAPK in burninduced intestinal barrier breakdown[J]. J Surg Res, 2009, 156(1)∶ 64-69.

    [30]Costantini TW, Peterson CY, Kroll L, Loomis WH, Putnam JG, Wolf P, Eliceiri BP, Baird A, Bansal V, Coimbra R. Burns, inflammation, and intestinal injury∶ protective effects of an antiinflammatory resuscitation strategy[J]. J Trauma, 2009, 67(6)∶1162-1168.

    [31]Wang QM, Stalker TJ, Gong Y, Rikitake Y, Scalia R, Liao JK. Inhibition of Rho-kinase attenuates endothelial-leukocyte interaction during ischemia-reperfusion injury[J]. Vasc Med, 2012, 17(6)∶ 379-385.

    10. 3969/j. issn. 1672-8521. 2015. 04. 013

    國家自然科學基金面上項目(81471872);國家發(fā)改委衛(wèi)星示范專項[發(fā)改辦高技(2013)2140號]

    胡森,研究員(E-mail∶bs0425@163.com)

    2015-07-10)

    猜你喜歡
    肌動蛋白通透性屏障
    咬緊百日攻堅 筑牢安全屏障
    屏障修護TOP10
    一道屏障
    甲基苯丙胺對大鼠心臟血管通透性的影響初探
    肌動蛋白結(jié)構(gòu)及生物學功能的研究進展
    維護網(wǎng)絡(luò)安全 筑牢網(wǎng)絡(luò)強省屏障
    紅景天苷對氯氣暴露致急性肺損傷肺血管通透性的保護作用
    豬殺菌/通透性增加蛋白基因siRNA載體構(gòu)建及干擾效果評價
    肌動蛋白清除系統(tǒng)與凝血—纖溶系統(tǒng)在子癇前期患者外周血中的變化
    主動免疫肌動蛋白樣蛋白7a蛋白引起小鼠睪丸曲細精管的損傷
    欧美精品高潮呻吟av久久| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 国产乱人偷精品视频| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 老司机影院成人| 久久精品国产综合久久久| 国产精品女同一区二区软件| 国产亚洲最大av| 亚洲国产欧美在线一区| 人成视频在线观看免费观看| 99久国产av精品国产电影| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 欧美精品一区二区大全| 免费黄频网站在线观看国产| 性色avwww在线观看| 在线天堂最新版资源| 99久久精品国产国产毛片| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 一边摸一边做爽爽视频免费| 精品久久蜜臀av无| 男女免费视频国产| 一级片免费观看大全| 国产 一区精品| 精品久久久久久电影网| 国产精品国产三级专区第一集| 午夜福利视频在线观看免费| 99久国产av精品国产电影| 老司机亚洲免费影院| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 在线观看免费高清a一片| 亚洲色图综合在线观看| 热re99久久国产66热| 91精品伊人久久大香线蕉| 老司机影院成人| 丝袜在线中文字幕| 久久久久久人妻| 青青草视频在线视频观看| 人人妻人人澡人人看| 最新中文字幕久久久久| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 2018国产大陆天天弄谢| 午夜激情久久久久久久| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 国产成人免费无遮挡视频| 啦啦啦在线免费观看视频4| 日韩伦理黄色片| 交换朋友夫妻互换小说| 精品久久久久久电影网| 免费人妻精品一区二区三区视频| 亚洲av国产av综合av卡| 国产黄频视频在线观看| av片东京热男人的天堂| 十分钟在线观看高清视频www| 日本色播在线视频| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 亚洲欧美清纯卡通| 在线观看三级黄色| 欧美精品一区二区免费开放| 欧美黄色片欧美黄色片| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 两个人看的免费小视频| 精品一区二区三区四区五区乱码 | av又黄又爽大尺度在线免费看| 热99久久久久精品小说推荐| 成年av动漫网址| 99久久精品国产国产毛片| 中文字幕最新亚洲高清| 26uuu在线亚洲综合色| 天天操日日干夜夜撸| 人妻人人澡人人爽人人| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 国产精品嫩草影院av在线观看| 制服丝袜香蕉在线| 蜜桃在线观看..| 精品一品国产午夜福利视频| 久久毛片免费看一区二区三区| 欧美+日韩+精品| 99re6热这里在线精品视频| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 黄频高清免费视频| av网站免费在线观看视频| av网站免费在线观看视频| 男人操女人黄网站| 免费在线观看黄色视频的| 成年女人毛片免费观看观看9 | 久久韩国三级中文字幕| 亚洲伊人久久精品综合| 性少妇av在线| 久久久久久久久免费视频了| 超碰97精品在线观看| 熟女av电影| 欧美日韩成人在线一区二区| 久久综合国产亚洲精品| 五月天丁香电影| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲欧美一区二区三区国产| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 亚洲 欧美一区二区三区| 我要看黄色一级片免费的| 最近的中文字幕免费完整| 97人妻天天添夜夜摸| 一区二区三区激情视频| 国产av一区二区精品久久| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 一区二区三区四区激情视频| 少妇精品久久久久久久| 亚洲av中文av极速乱| 日本vs欧美在线观看视频| 亚洲精品国产色婷婷电影| 国产激情久久老熟女| 五月伊人婷婷丁香| 久久99蜜桃精品久久| 免费高清在线观看视频在线观看| 日韩伦理黄色片| 少妇的丰满在线观看| 国产1区2区3区精品| 狂野欧美激情性bbbbbb| 91成人精品电影| kizo精华| 极品少妇高潮喷水抽搐| 晚上一个人看的免费电影| 欧美成人午夜免费资源| 精品人妻一区二区三区麻豆| 日韩在线高清观看一区二区三区| www.av在线官网国产| 日韩av不卡免费在线播放| 成人国产麻豆网| 少妇人妻久久综合中文| 国产国语露脸激情在线看| 国产极品粉嫩免费观看在线| 成人国语在线视频| www.熟女人妻精品国产| 午夜免费鲁丝| 97精品久久久久久久久久精品| 飞空精品影院首页| 亚洲av在线观看美女高潮| 性高湖久久久久久久久免费观看| 熟女av电影| 日韩一区二区视频免费看| 岛国毛片在线播放| 成人毛片60女人毛片免费| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国产极品粉嫩免费观看在线| 丰满迷人的少妇在线观看| 91精品国产国语对白视频| 久久 成人 亚洲| 亚洲综合精品二区| 成年人午夜在线观看视频| 秋霞在线观看毛片| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 欧美+日韩+精品| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 最近2019中文字幕mv第一页| 亚洲人成77777在线视频| 久久久久国产一级毛片高清牌| 亚洲欧美一区二区三区国产| 亚洲av电影在线进入| 女人精品久久久久毛片| 91精品国产国语对白视频| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 老司机亚洲免费影院| 成年人午夜在线观看视频| 国产亚洲一区二区精品| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 久久久欧美国产精品| 五月开心婷婷网| av网站免费在线观看视频| 大码成人一级视频| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 在线免费观看不下载黄p国产| 丝袜在线中文字幕| 另类亚洲欧美激情| 极品人妻少妇av视频| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产伦理片在线播放av一区| 国产精品亚洲av一区麻豆 | 国产精品亚洲av一区麻豆 | 成人亚洲精品一区在线观看| 十八禁网站网址无遮挡| 永久网站在线| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 亚洲内射少妇av| 男人爽女人下面视频在线观看| 亚洲,欧美精品.| 亚洲国产av影院在线观看| 下体分泌物呈黄色| 国产精品.久久久| 日韩中文字幕视频在线看片| 韩国av在线不卡| 岛国毛片在线播放| 97在线视频观看| 三上悠亚av全集在线观看| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 天天影视国产精品| 最黄视频免费看| 久久国内精品自在自线图片| 一区二区日韩欧美中文字幕| 男女啪啪激烈高潮av片| 国产精品三级大全| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 丝袜美足系列| 性色avwww在线观看| 黑人欧美特级aaaaaa片| 亚洲伊人久久精品综合| 亚洲av欧美aⅴ国产| 久久精品国产亚洲av高清一级| 日本免费在线观看一区| 国产一区二区三区综合在线观看| 欧美+日韩+精品| 亚洲av电影在线进入| 免费观看av网站的网址| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 日韩一区二区三区影片| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 国产在线视频一区二区| 日本色播在线视频| 色视频在线一区二区三区| 欧美日韩精品网址| 超碰97精品在线观看| 欧美在线黄色| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 欧美bdsm另类| 激情五月婷婷亚洲| 9热在线视频观看99| 免费黄频网站在线观看国产| 永久免费av网站大全| 国产精品免费大片| 婷婷色综合www| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 丁香六月天网| 少妇被粗大的猛进出69影院| 国产成人精品久久二区二区91 | 亚洲精品一二三| 久久99精品国语久久久| 色视频在线一区二区三区| 在线免费观看不下载黄p国产| 久久久久久久大尺度免费视频| 一个人免费看片子| 亚洲成av片中文字幕在线观看 | 亚洲精品自拍成人| 一级毛片电影观看| 午夜影院在线不卡| 久久久久久伊人网av| 亚洲精品在线美女| 日韩一本色道免费dvd| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 午夜福利,免费看| 精品久久蜜臀av无| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 日本91视频免费播放| 91国产中文字幕| 热99国产精品久久久久久7| 不卡视频在线观看欧美| 国产精品一区二区在线不卡| 精品一品国产午夜福利视频| 国产麻豆69| 97精品久久久久久久久久精品| 国产免费现黄频在线看| 天堂8中文在线网| 精品一区二区三卡| 欧美日韩视频精品一区| 人妻人人澡人人爽人人| 午夜福利一区二区在线看| 视频在线观看一区二区三区| 男女高潮啪啪啪动态图| 人妻人人澡人人爽人人| 国产一级毛片在线| 欧美av亚洲av综合av国产av | 爱豆传媒免费全集在线观看| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 亚洲av.av天堂| 黄片无遮挡物在线观看| 亚洲精品,欧美精品| 久久久久精品久久久久真实原创| 亚洲内射少妇av| 最近2019中文字幕mv第一页| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 哪个播放器可以免费观看大片| 中文字幕最新亚洲高清| 亚洲欧美清纯卡通| 精品少妇一区二区三区视频日本电影 | 日本午夜av视频| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 麻豆av在线久日| 久久99蜜桃精品久久| 少妇被粗大猛烈的视频| 热re99久久国产66热| 熟妇人妻不卡中文字幕| 美女高潮到喷水免费观看| 国产精品 欧美亚洲| av在线app专区| 99香蕉大伊视频| 亚洲欧美精品综合一区二区三区 | 精品一区在线观看国产| 秋霞伦理黄片| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 日本爱情动作片www.在线观看| 日韩免费高清中文字幕av| 成年av动漫网址| 99国产综合亚洲精品| 国产精品三级大全| 久久久精品区二区三区| 亚洲精品一二三| 91aial.com中文字幕在线观看| av卡一久久| 国产日韩欧美在线精品| 国产97色在线日韩免费| 丝瓜视频免费看黄片| 久久99蜜桃精品久久| 水蜜桃什么品种好| 精品福利永久在线观看| 老司机影院成人| 亚洲,欧美,日韩| 久久久久久伊人网av| 国产精品嫩草影院av在线观看| 亚洲欧美色中文字幕在线| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 90打野战视频偷拍视频| 亚洲视频免费观看视频| 国产在线一区二区三区精| 男人操女人黄网站| 少妇熟女欧美另类| av网站免费在线观看视频| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 欧美最新免费一区二区三区| 大片免费播放器 马上看| 中文字幕人妻丝袜一区二区 | 两个人看的免费小视频| 亚洲精品国产av蜜桃| 女性生殖器流出的白浆| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 色视频在线一区二区三区| 中文字幕制服av| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 丝袜人妻中文字幕| 久久青草综合色| 久久久久久人妻| 亚洲成色77777| 久久久久视频综合| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 99国产综合亚洲精品| 黄色怎么调成土黄色| 宅男免费午夜| 久久久久人妻精品一区果冻| kizo精华| 国产精品一区二区在线不卡| 久久久精品免费免费高清| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 99久久综合免费| 日本91视频免费播放| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 满18在线观看网站| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 老司机亚洲免费影院| 国产毛片在线视频| 国产激情久久老熟女| 国产色婷婷99| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 国产日韩欧美视频二区| 看十八女毛片水多多多| 日本wwww免费看| 久久精品国产综合久久久| 亚洲精品国产av蜜桃| 国产成人精品福利久久| av免费在线看不卡| 超碰成人久久| 18+在线观看网站| 制服诱惑二区| 又黄又粗又硬又大视频| 熟女电影av网| 2021少妇久久久久久久久久久| 人体艺术视频欧美日本| 最近手机中文字幕大全| 91在线精品国自产拍蜜月| 久久精品国产a三级三级三级| 国产成人精品久久久久久| 丰满迷人的少妇在线观看| 飞空精品影院首页| 高清视频免费观看一区二区| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 青青草视频在线视频观看| 日日啪夜夜爽| 午夜福利网站1000一区二区三区| 黑人欧美特级aaaaaa片| 美女午夜性视频免费| 各种免费的搞黄视频| av在线老鸭窝| 高清av免费在线| 在线观看免费视频网站a站| 国产精品三级大全| 国产av一区二区精品久久| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲人成网站在线观看播放| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 国产成人午夜福利电影在线观看| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产成人一区二区在线| 国产成人免费无遮挡视频| 国产免费现黄频在线看| 又黄又粗又硬又大视频| 亚洲av欧美aⅴ国产| 欧美日韩av久久| 母亲3免费完整高清在线观看 | 啦啦啦啦在线视频资源| 伦理电影大哥的女人| 国产精品 欧美亚洲| 国产在线一区二区三区精| 母亲3免费完整高清在线观看 | 欧美人与性动交α欧美软件| 久久婷婷青草| 成人国产麻豆网| 少妇人妻精品综合一区二区| 日韩,欧美,国产一区二区三区| av片东京热男人的天堂| 国产在线一区二区三区精| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 亚洲精品第二区| 天堂中文最新版在线下载| 观看美女的网站| 久久毛片免费看一区二区三区| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产黄色视频一区二区在线观看| 国产成人精品在线电影| 伦理电影免费视频| 精品国产国语对白av| 亚洲在久久综合| 久久ye,这里只有精品| 欧美黄色片欧美黄色片| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 欧美日韩综合久久久久久| 亚洲四区av| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 亚洲精品第二区| 午夜日本视频在线| 热99国产精品久久久久久7| 欧美 日韩 精品 国产| 亚洲精品一区蜜桃| 午夜激情久久久久久久| 熟女av电影| 一区二区三区四区激情视频| 叶爱在线成人免费视频播放| 国产片特级美女逼逼视频| 午夜日本视频在线| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 美女国产视频在线观看| 久久久久久久亚洲中文字幕| 99热网站在线观看| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 精品国产乱码久久久久久小说| 一边摸一边做爽爽视频免费| 伊人亚洲综合成人网| 人妻人人澡人人爽人人| 久久久久久久久久人人人人人人| 国精品久久久久久国模美| 免费在线观看完整版高清| √禁漫天堂资源中文www| 在线观看人妻少妇| 99热网站在线观看| 高清在线视频一区二区三区| 日本wwww免费看| 丰满饥渴人妻一区二区三| 亚洲国产日韩一区二区| 日本vs欧美在线观看视频| 午夜日韩欧美国产| 久久精品国产a三级三级三级| 国产一区二区激情短视频 | 性色avwww在线观看| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲成人av在线免费| 高清av免费在线| 亚洲欧美色中文字幕在线| 日日撸夜夜添| 亚洲av在线观看美女高潮| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 男人添女人高潮全过程视频| 天美传媒精品一区二区| 99精国产麻豆久久婷婷| 午夜激情av网站| 一区在线观看完整版| 伊人久久国产一区二区| www.熟女人妻精品国产| 久久久久久久久久久免费av| 女性被躁到高潮视频| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 三级国产精品片| 婷婷色麻豆天堂久久| 亚洲一区中文字幕在线| 老汉色av国产亚洲站长工具| 中文字幕色久视频| 免费看av在线观看网站| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产成人a∨麻豆精品| 中文字幕人妻丝袜一区二区 | 亚洲综合色惰| 如何舔出高潮| 中文字幕色久视频| 高清视频免费观看一区二区| 亚洲综合精品二区| 免费人妻精品一区二区三区视频| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| www.熟女人妻精品国产| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 男人爽女人下面视频在线观看| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 在线观看人妻少妇| 9色porny在线观看| 最近中文字幕2019免费版| 国产精品免费视频内射| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 国产xxxxx性猛交| 国产成人精品婷婷| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 中文字幕色久视频| 男人舔女人的私密视频| 超色免费av| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 日本黄色日本黄色录像| 欧美另类一区| 日韩电影二区| 日韩三级伦理在线观看| 欧美成人午夜免费资源| 99香蕉大伊视频| 亚洲成人一二三区av| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 国产精品国产三级国产专区5o| 男女边摸边吃奶| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 大片电影免费在线观看免费| 亚洲精品一二三| 黑人欧美特级aaaaaa片| 国产探花极品一区二区| 黄片播放在线免费| 国产探花极品一区二区| 中文字幕最新亚洲高清| 热99久久久久精品小说推荐| 久久久久视频综合| 国产在线一区二区三区精| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| a级毛片黄视频| av网站免费在线观看视频| 男人爽女人下面视频在线观看| 亚洲av日韩在线播放| 老司机亚洲免费影院| 男的添女的下面高潮视频| 国产 精品1| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 下体分泌物呈黄色| 国产精品 国内视频| 9热在线视频观看99| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 婷婷成人精品国产| 亚洲国产av新网站| 国产成人精品一,二区| 黑人猛操日本美女一级片| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 午夜福利影视在线免费观看| 精品福利永久在线观看| 韩国高清视频一区二区三区| 日韩伦理黄色片| 精品亚洲成a人片在线观看| 国产成人精品婷婷| 欧美在线黄色| 极品人妻少妇av视频| 老汉色∧v一级毛片| 午夜福利网站1000一区二区三区| 色哟哟·www| 18禁观看日本| 伊人亚洲综合成人网| 国产成人免费无遮挡视频| 老女人水多毛片| 国产黄色免费在线视频| 99九九在线精品视频| 欧美激情 高清一区二区三区| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 国产精品99久久99久久久不卡 | 一级爰片在线观看| 色哟哟·www| 久久狼人影院| 日本vs欧美在线观看视频| 欧美成人精品欧美一级黄| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 日韩欧美一区视频在线观看| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 老汉色∧v一级毛片| 亚洲av中文av极速乱| 男人爽女人下面视频在线观看| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 最近最新中文字幕免费大全7| 成人午夜精彩视频在线观看| 综合色丁香网| 国产成人精品无人区| 熟妇人妻不卡中文字幕| av一本久久久久| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 国产亚洲一区二区精品| av网站在线播放免费| 午夜福利在线免费观看网站| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 黄色毛片三级朝国网站| 人成视频在线观看免费观看| 亚洲图色成人| 丰满迷人的少妇在线观看| 永久免费av网站大全| 高清在线视频一区二区三区| 黄色怎么调成土黄色|