• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    燒傷對血管內(nèi)皮細胞屏障的影響及其保護藥物的研究進展

    2015-03-20 17:27:03唐富波白曉東
    感染、炎癥、修復 2015年4期
    關(guān)鍵詞:肌動蛋白通透性屏障

    唐富波 白曉東 胡 森

    (1.解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院全軍創(chuàng)傷修復與組織再生重點實驗室暨皮膚損傷修復與組織再生北京市重點實驗室,北京 100048;2. 武警總醫(yī)院燒傷整形科,北京 100039)

    綜述

    燒傷對血管內(nèi)皮細胞屏障的影響及其保護藥物的研究進展

    唐富波1,2白曉東2胡 森1

    (1.解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院全軍創(chuàng)傷修復與組織再生重點實驗室暨皮膚損傷修復與組織再生北京市重點實驗室,北京 100048;2. 武警總醫(yī)院燒傷整形科,北京 100039)

    血管內(nèi)皮細胞屏障的完整性對于維持體內(nèi)循環(huán)平衡和各臟器生理功能至關(guān)重要。燒傷后,毛細血管擴張、血管通透性增加,體液滲出,引起組織、器官水腫和功能障礙。保護燒傷后血管內(nèi)皮細胞屏障,減輕燒傷后損傷,是長期以來燒傷的研究重點。本文就近年來燒傷對血管內(nèi)皮細胞屏障的影響及機制、血管內(nèi)皮細胞屏障的保護藥物研究進展綜述如下。

    1 血管內(nèi)皮細胞屏障與燒傷

    1.1血管內(nèi)皮細胞屏障血管內(nèi)皮是由一層緊密連接的內(nèi)皮細胞單層和基膜構(gòu)成的半選擇性通透屏障,控制血液和組織之間的體液、蛋白質(zhì)、電解質(zhì)交換[1]。這一屏障的破壞可以直接引起血管內(nèi)皮通透性增加。血管內(nèi)皮細胞屏障功能與細胞骨架蛋白、細胞間連接、基底膜等關(guān)系密切。

    內(nèi)皮細胞骨架蛋白對于維持細胞正常形態(tài)起關(guān)鍵作用。它由微絲、微管、中間絲等成分組成[2]。微絲的主要組成成分是肌動蛋白(actin)、肌球蛋白(myosin)和肌動蛋白結(jié)合蛋白(actin-binding protein),其中以肌動蛋白的量最大[3]。在這些結(jié)構(gòu)中,肌動蛋白對調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細胞屏障功能具有重要作用。各種炎癥介質(zhì)誘導肌球蛋白輕鏈(MLC)的磷酸化和內(nèi)皮細胞骨架蛋白的收縮,導致細胞向心張力增加和細胞間黏附減弱,使細胞間的間隙形成,細胞間通透性增加[4]。

    細胞間連接包括緊密連接、縫隙連接、黏附連接等[2]。緊密連接(tight junctions)是細胞屏障的重要組成部分,只存在于內(nèi)皮細胞間,環(huán)繞整個細胞形成閉鎖小帶或閉鎖斑。細胞通透性的調(diào)節(jié)主要通過緊密連接蛋白連接復合物與胞內(nèi)肌動蛋白骨架的相互作用來實現(xiàn)[5]。黏附連接存在于內(nèi)皮細胞間、內(nèi)皮細胞和基底膜之間。黏附連接是由具有鈣依賴的血管內(nèi)皮鈣黏著蛋白(VE-cadherin, VE-cad)和胞漿內(nèi)的黏附蛋白形成的特異性復合體[6]?;啄さ闹饕煞譃槟z原蛋白、纖維連接蛋白、層黏連蛋白等,大分子物質(zhì)通過基底膜進出血管[7]。內(nèi)皮細胞與基底膜間的黏附由整合素及相關(guān)蛋白介導,形成附著斑。整合素的胞外N末端與細胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)相連,胞內(nèi)C末端通過尾蛋白、α輔肌動蛋白等與骨架蛋白連接[3]。

    1.2燒傷對血管內(nèi)皮細胞屏障的影響及機制燒傷后,機體受到嚴重的致傷因子打擊,產(chǎn)生強烈持久的應激反應,同時組織的缺血缺氧、再灌注損傷、燒傷毒素、內(nèi)毒素、炎性介質(zhì)、內(nèi)環(huán)境紊亂、免疫損傷等多種因素的作用,導致血管內(nèi)皮細胞的破壞、內(nèi)皮細胞間隙增寬等,引起血管內(nèi)皮細胞屏障的破壞。近年來研究發(fā)現(xiàn),一些信號途徑或分子參與燒傷后血管內(nèi)皮細胞屏障功能障礙的過程。

    1.2.1肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)與肌球蛋白輕鏈(MLC)途徑MLCK的磷酸化調(diào)節(jié)內(nèi)皮細胞通透性,MLCK 通過磷酸化MLC的第18位絲氨酸和第19位蘇氨酸激活肌球蛋白重鏈頭部ATP 酶,產(chǎn)生的能量引起內(nèi)皮細胞肌動蛋白與肌球蛋白Ⅱ相互作用,使細胞收縮,細胞間隙形成,通透性增加[8]。MLCK在腸道內(nèi)皮屏障功能調(diào)節(jié)中起著重要作用。MLCK的磷酸化引起肌動蛋白絲與腸上皮細胞緊密連接相關(guān)蛋白和肌動蛋白纖維的破壞,導致緊密連接中斷,從而影響內(nèi)皮細胞屏障通透性[9]。MLCK的激活也導致其他關(guān)鍵緊密連接蛋白如咬合蛋白(occludin)和帶狀閉合蛋白-1(ZO-1)等的降解,從而影響內(nèi)皮細胞通透性[10]。Tinsley等[11]的實驗顯示,燒傷血清刺激肺微血管內(nèi)皮能誘導MLC的磷酸化,并伴隨血管內(nèi)皮通透性增高;同時,MLCK抑制劑可減少MLC磷酸化,能降低燒傷血清誘導的內(nèi)皮細胞通透性增高。Reynoso等[12]在小鼠燙傷實驗中發(fā)現(xiàn),與含MLCK-210基因的燙傷小鼠比較,敲除MLCK-210基因的燙傷小鼠血管通透性顯著降低,其生存率也得到明顯改善。Guo等[13]敲除小鼠的非肌肌球蛋白輕鏈(nonmuscle myosin light chain kinase,nmMLCK)后進行燒傷實驗,發(fā)現(xiàn)其中性粒細胞黏附受到抑制,腸旁滲漏明顯減少,燒傷后的腸道血管內(nèi)皮細胞屏障功能得到了保護。

    1.2.2p38/MAPK途徑絲裂原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinase,MAPK)是一類絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,作為高度保守的真核細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導通路,可以被廣泛的細胞外信號或刺激所激活[14]。MAPK包括細胞外信號調(diào)節(jié)激酶、p38激酶和c-Jun氨基末端激酶3種成員[15]。研究表明,p38激酶是燒傷后引起炎癥反應和細胞凋亡的重要途徑。p38激酶參與燒傷后血管內(nèi)皮細胞應力纖維形成和ZO-1的解離和內(nèi)化,抑制p38激酶能逆轉(zhuǎn)燒傷后內(nèi)皮細胞屏障功能紊亂[3]。

    1.2.3其他信號通路Toll樣受體(Toll-like receptors,TLR)與燒傷后血管內(nèi)皮細胞屏障功能障礙有關(guān)。TLR是機體免疫反應的重要因子,其中TLR-4主要識別革蘭陰性菌的內(nèi)毒素(LPS)。Murphy等[16]的研究表明,燒傷后大鼠TLR-4表達增強,在LPS的誘導下死亡率增高。Breslin等[17]在實驗中,使野生型小鼠和TLR-4基因缺失型小鼠接受25%TBSA燙傷,野生型小鼠血管通透性和白細胞黏附數(shù)量明顯高于TLR-4基因缺失型小鼠,表明TLR-4在非膿毒癥的燒傷炎癥條件下,對于微血管通透性及白細胞黏附起重要調(diào)節(jié)作用。Peterson等[18]觀察到,TLR-4基因缺失小鼠在燙傷后較正常小鼠燙傷后腸道通透性減弱,滲透性降低,腸屏障功能破壞減少,說明腸屏障的損傷具有TLR-4依賴性。Krzyzaniak等[19]在燒傷實驗中將敲除TLR-4基因的小鼠與正常基因組的小鼠進行比較,證實了燒傷介導的小鼠急性肺損傷是一個TLR-4依賴性過程,燒傷后缺乏TLR-4基因的小鼠肺血管通透性和肺損傷明顯輕于燒傷后的正常對照小鼠。

    近年來的研究也證實,Rho蛋白是內(nèi)皮細胞屏障功能的重要調(diào)節(jié)因子。Rho蛋白通過影響細胞內(nèi)以肌球蛋白為主的收縮成分和內(nèi)皮間連接的功能,調(diào)節(jié)內(nèi)皮細胞屏障的通透性[20]。Zheng等[21]研究發(fā)現(xiàn),Rho特異性抑制劑能夠抑制燒傷后細胞骨架蛋白的破壞,降低內(nèi)皮通透性,保護內(nèi)皮細胞屏障功能。

    Tinsley等[22]的研究表明,蛋白激酶C(PKC)參與了燒傷后肺血管內(nèi)皮細胞黏附連接(AJ)的重組和血管內(nèi)皮細胞屏障的功能調(diào)節(jié)。燒傷血清刺激血管內(nèi)皮細胞,導致VE-鈣黏蛋白或β-連環(huán)蛋白的絲氨酸磷酸化,從而使細胞間隙增寬,內(nèi)皮通透性增加。

    2 藥物對燒傷后血管內(nèi)皮細胞屏障的保護作用

    隨著對燒傷血管內(nèi)皮細胞屏障研究的逐步深入,研究發(fā)現(xiàn),某些藥物對上述通路具有直接或間接的作用,可以減少血管通透性,保護血管內(nèi)皮細胞屏障功能。

    2.1MLCK/MLC途徑藥物MLC磷酸化導致血管內(nèi)皮細胞收縮和細胞間隙增寬,通透性增加,使血管內(nèi)皮細胞屏障遭到破壞。減少MLC磷酸化,可以減輕內(nèi)皮細胞屏障的損傷。Costantini等[23]發(fā)現(xiàn),己酮可可堿可以通過抑制大鼠燒傷后MLCK水平的增高,減少MLC的磷酸化,從而降低燒傷引起的腸道微血管內(nèi)皮通透性增加,對腸道血管內(nèi)皮細胞屏障具有一定的保護作用。Zahs等[24]在小鼠燒傷后給予MLCK抑制劑PIK(peptide inhibitor of myosin light chain kinase),可以減少腸道炎癥細胞浸潤,減少腸旁滲漏,保護腸道微血管內(nèi)皮細胞屏障功能。Chen等[25]在實驗中給予燒傷小鼠MLCK特異性抑制劑ML-9,結(jié)果減輕了燒傷后腸道通透性的增加和腸黏膜損傷,減少了緊密連接蛋白的降解,降低了MLC磷酸化,保護了腸道血管內(nèi)皮細胞屏障功能。Cao[26]等發(fā)現(xiàn),小檗堿通過抑制低氧誘導因子-1α(HIF-1α),減少了MLCK介導的MLC磷酸化,對腸上皮屏障功起到了一定的保護作用。Luo等[27]發(fā)現(xiàn),組蛋白去乙?;敢种苿┍焖徕c可以抑制HIF-1α,減少血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和MLCK的表達,減少MLC磷酸化水平和緊密連接間帶狀閉合蛋白ZO-1的降解,保護燒傷后動物模型腸道血管內(nèi)皮細胞屏障功能。

    2.2p38/MAPK途徑藥物p38/MAPK作為影響內(nèi)皮細胞屏障的另一重要途徑,也是研究保護燒傷血管內(nèi)皮細胞屏障的一大熱點。使用p38MAPK抑制劑SB202190的燒傷小鼠與不使用SB202190的燒傷小鼠比較,肺水腫形成和肺微血管損傷可以顯著減輕[28]。Costantini等[29]給燒傷小鼠腹腔注射p38MAPK抑制劑SB203580,從而減少了腸道微血管內(nèi)皮細胞通透性,保護了腸屏障功能。他們還證明,使用己酮可可堿可以抑制燒傷小鼠的p38MAPK磷酸化,維持腸屏障的穩(wěn)定性,并可減輕肺血管通透性,減輕急性肺損傷[30]。

    2.3其他保護藥物對體外培養(yǎng)的燒傷早期內(nèi)皮細胞使用Rho蛋白特異性抑制劑Y-27632后,可以使F肌動蛋白的分布逐漸恢復到正常水平,減輕細胞間隙的形成,保護血管內(nèi)皮細胞屏障功能。對游離的燒傷皮膚微血管使用Y-27632,血管內(nèi)皮通透性明顯降低,也起到保護血管內(nèi)皮細胞屏障功能的作用[20]。使用Rho激酶抑制劑法舒地爾(fasudil)可以降低失血性休克動物模型內(nèi)皮細胞和白細胞的相互作用,減少白細胞浸潤,減少血管炎癥反應,保護血管內(nèi)皮細胞屏障功能[31]。Tinsley等[22]在燒傷實驗中使用蛋白激酶C特異性抑制劑雙吲哚基順丁烯二酰亞胺(bisindolylmaleimide),可以抑制燒傷后血管內(nèi)皮細胞VE-鈣黏蛋白和β-連環(huán)蛋白的絲氨酸磷酸化水平,保護血管內(nèi)皮通透性。

    3 展 望

    機體在燒傷后受到嚴重致傷因子打擊,產(chǎn)生強烈應激反應,高溫、缺血缺氧、毒素、各種炎癥因子等使血管內(nèi)皮通透性增高,血管內(nèi)皮細胞屏障破壞,引起體液外滲、組織水腫,造成機體循環(huán)血量下降,形成低血容量性休克,各臟器缺血、灌注不足,最終造成多器官功能障礙。因此,保護血管內(nèi)皮細胞屏障功能,對于防治燒傷休克和維持臟器功能、提高燒傷救治的成功率具有重要意義。近年來,研究者們對燒傷后血管內(nèi)皮細胞屏障功能障礙的分子機制進行了深入研究,發(fā)現(xiàn)了許多血管內(nèi)皮細胞屏障功能調(diào)節(jié)的作用靶點,為實驗研究提供十分廣闊的研究空間。研究調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細胞屏障功能的藥物,可以保護血管內(nèi)皮細胞屏障,為不同條件下燒傷救治提供更多的選擇和思路。

    [1]Goddard LM, Iruela-Arispe ML. Cellular and molecular regulation of vascular permeability[J]. Thromb Haemost, 2013, 109(3)∶ 407-415.

    [2]Dejana E. Endothelial cell-cell junctions∶ happy together[J]. Nat Rev Mol Cell Biol, 2004, 5(4)∶ 261-270.

    [3]張家平, 黃躍生, 汪仕良. 燒傷后早期血管通透性增高研究進展[J]. 中華燒傷雜志, 2010, 26(5)∶ 343-346.

    [4]Shen Q, Wu MH, Yuan SY. Endothelial contractile cytoskeleton and microvascular permeability[J]. Cell Health Cytoskelet, 2009,7(1)∶ 43-50.

    [5]Steed E, Balda MS, Matter K. Dynamics and functions of tight junctions[J]. Trends Cell Biol, 2010, 20(3)∶ 142-149.

    [6]張慶芝, 閔銳. 血管內(nèi)皮通透性調(diào)節(jié)機制新進展[J]. 中國微循環(huán), 2009, 13(6)∶585-588.

    [7]Yurchenco PD, Patton BL. Developmental and pathogenic mechanisms of basement membrane assembly[J]. Curr Pharm Des, 2009, 15(12)∶ 1277-1294.

    [8]吳潔, 張偉金, 黃巧冰. 肌球蛋白輕鏈激酶介導內(nèi)皮細胞屏障功能變化的研究進展[J]. 中國病理生理雜志, 2015, 31(3)∶ 572-576.

    [9]Costantini TW, Loomis WH, Putnam JG, Kroll L, Eliceiri BP, Baird A, Bansal V, Coimbra R. Pentoxifylline modulates intestinal tight junction signaling after burn injury∶ effects on myosin light chain kinase[J]. J Trauma, 2009, 66(1)∶ 17-24; discussion 24-25.

    [10]Shen L, Black ED, Witkowski ED, Lencer WI, Guerriero V, Schneeberger EE, Turner JR. Myosin light chain phosphorylation regulates barrier function by remodeling tight junction structure[J]. J Cell Sci, 2006, 119(Pt 10)∶ 2095-2106.

    [11]Tinsley JH, Teasdale NR, Yuan SY. Myosin light chain phosphorylation and pulmonary endothelial cell hyperpermeability in burns[J]. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol, 2004, 286(4)∶ L841-L847.

    [12]Reynoso R, Perrin RM, Breslin JW, Daines DA, Watson KD, Watterson DM, Wu MH, Yuan S. A role for long chain myosin light chain kinase (MLCK-210) in microvascular hyperpermeability during severe burns[J]. Shock, 2007, 28(5)∶589-595.

    [13]Guo M, Yuan SY, Frederich BJ, Sun C, Shen Q, McLean DL, Wu MH. Role of non-muscle myosin light chain kinase in neutrophil-mediated intestinal barrier dysfunction during thermal injury[J]. Shock, 2012, 38(4)∶ 436-443.

    [14]張奇, 白曉東, 付小兵. p38MAPK信號通路研究進展[J]. 感染、炎癥、修復, 2005, 6(2)∶121-123.

    [15]Goldsmith CS, Bell-Pedersen D. Diverse roles for MAPK signaling in circadian clocks[J]. Adv Genet, 2013, 84∶ 1-39.

    [16]Murphy TJ, Paterson HM, Kriynovich S, Zang Y, Kurt-Jones EA, Mannick JA, Lederer JA. Linking the "two-hit" response following injury to enhanced TLR4 reactivity[J]. J Leukoc Biol, 2005, 77(1)∶ 16-23.

    [17]Breslin JW, Wu MH, Guo M, Reynoso R, Yuan SY. Toll-like receptor 4 contributes to microvascular inflammation and barrier dysfunction in thermal injury[J]. Shock, 2008, 29(3)∶349-355.

    [18]Peterson CY, Costantini TW, Loomis WH, Putnam JG, Wolf P, Bansal V, Eliceiri BP, Baird A, Coimbra R. Toll-like receptor-4 mediates intestinal barrier breakdown after thermal injury[J]. Surg Infect (Larchmt), 2010, 11(2)∶ 137-144.

    [19]Krzyzaniak M, Cheadle G, Peterson C, Loomis W, Putnam J, Wolf P, Baird A, Eliceiri B, Bansal V, Coimbra R. Burn-induced acute lung injury requires a functional Toll-like receptor 4[J]. Shock, 2011, 36(1)∶ 24-29.

    [20]黃巧冰. 內(nèi)皮細胞屏障與燒傷后血管通透性的關(guān)系及機制[J].中華燒傷雜志,2007,23(5)∶ 324-326.

    [21]Zheng HZ, Zhao KS, Zhou BY, Huang QB. Role of Rho kinase and actin filament in the increased vascular permeability of skin venules in rats after scalding[J]. Burns, 2003, 29(8)∶ 820-827.

    [22]Tinsley JH, Breslin JW, Teasdale NR, Yuan SY. PKC-dependent, burn-induced adherens junction reorganization and barrier dysfunction in pulmonary microvascular endothelial cells[J]. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol, 2005, 289(2)∶ L217-L223.

    [23]Costantini TW, Loomis WH, Putnam JG, Kroll L, Eliceiri BP, Baird A, Bansal V, Coimbra R. Pentoxifylline modulates intestinal tight junction signaling after burn injury∶ effects on myosin light chain kinase[J]. J Trauma, 2009, 66(1)∶ 17-24; discussion 24-25.

    [24]Zahs A, Bird MD, Ramirez L, Turner JR, Choudhry MA, Kovacs EJ. Inhibition of long myosin light-chain kinase activation alleviates intestinal damage after binge ethanol exposure and burn injury[J]. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol, 2012, 303(6)∶ G705-G712.

    [25]Chen C, Wang P, Su Q, Wang S, Wang F. Myosin light chain kinase mediates intestinal barrier disruption following burn injury[J]. PLoS One, 2012, 7(4)∶ e34946.

    [26]Cao M, Wang P, Sun C, He W, Wang F. Amelioration of IFN-gamma and TNF-alpha-induced intestinal epithelial barrier dysfunction by berberine via suppression of MLCK-MLC phosphorylation signaling pathway[J]. PLoS One, 2013, 8(5)∶ e61944.

    [27]Luo HM, Du MH, Lin ZL, Zhang L, Ma L, Wang H, Yu W, Lv Y, Lu JY, Pi YL, Hu S, Sheng ZY. Valproic acid treatment inhibits hypoxia-inducible factor 1alpha accumulation and protects against burn-induced gut barrier dysfunction in a rodent model[J]. PLoS One, 2013, 8(10)∶ e77523.

    [28]Ipaktchi K, Mattar A, Niederbichler AD, Hoesel LM, Vollmannshauser S, Hemmila MR, Su GL, Remick DG, Wang SC, Arbabi S. Attenuating burn wound inflammatory signaling reduces systemic inflammation and acute lung injury[J]. J Immunol, 2006, 177(11)∶ 8065-8071.

    [29]Costantini TW, Peterson CY, Kroll L, Loomis WH, Eliceiri BP, Baird A, Bansal V, Coimbra R. Role of p38 MAPK in burninduced intestinal barrier breakdown[J]. J Surg Res, 2009, 156(1)∶ 64-69.

    [30]Costantini TW, Peterson CY, Kroll L, Loomis WH, Putnam JG, Wolf P, Eliceiri BP, Baird A, Bansal V, Coimbra R. Burns, inflammation, and intestinal injury∶ protective effects of an antiinflammatory resuscitation strategy[J]. J Trauma, 2009, 67(6)∶1162-1168.

    [31]Wang QM, Stalker TJ, Gong Y, Rikitake Y, Scalia R, Liao JK. Inhibition of Rho-kinase attenuates endothelial-leukocyte interaction during ischemia-reperfusion injury[J]. Vasc Med, 2012, 17(6)∶ 379-385.

    10. 3969/j. issn. 1672-8521. 2015. 04. 013

    國家自然科學基金面上項目(81471872);國家發(fā)改委衛(wèi)星示范專項[發(fā)改辦高技(2013)2140號]

    胡森,研究員(E-mail∶bs0425@163.com)

    2015-07-10)

    猜你喜歡
    肌動蛋白通透性屏障
    咬緊百日攻堅 筑牢安全屏障
    屏障修護TOP10
    一道屏障
    甲基苯丙胺對大鼠心臟血管通透性的影響初探
    肌動蛋白結(jié)構(gòu)及生物學功能的研究進展
    維護網(wǎng)絡(luò)安全 筑牢網(wǎng)絡(luò)強省屏障
    紅景天苷對氯氣暴露致急性肺損傷肺血管通透性的保護作用
    豬殺菌/通透性增加蛋白基因siRNA載體構(gòu)建及干擾效果評價
    肌動蛋白清除系統(tǒng)與凝血—纖溶系統(tǒng)在子癇前期患者外周血中的變化
    主動免疫肌動蛋白樣蛋白7a蛋白引起小鼠睪丸曲細精管的損傷
    亚洲熟女精品中文字幕| 久久99热6这里只有精品| 狠狠精品人妻久久久久久综合| kizo精华| 国产精品成人在线| 青春草亚洲视频在线观看| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产日韩欧美在线精品| 国产高清不卡午夜福利| 最黄视频免费看| 综合色丁香网| 特大巨黑吊av在线直播| 国产在线免费精品| 人人妻人人澡人人看| 一级毛片久久久久久久久女| 久热久热在线精品观看| 99国产精品免费福利视频| 国产精品国产三级专区第一集| 亚洲内射少妇av| 男人和女人高潮做爰伦理| av在线app专区| h日本视频在线播放| 成人黄色视频免费在线看| 丰满迷人的少妇在线观看| 亚洲国产色片| 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲精品亚洲一区二区| 国产日韩一区二区三区精品不卡 | 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 丰满饥渴人妻一区二区三| 欧美变态另类bdsm刘玥| 91久久精品电影网| 97在线视频观看| 国产精品一区www在线观看| 成人综合一区亚洲| 日韩av在线免费看完整版不卡| 大片电影免费在线观看免费| 熟女人妻精品中文字幕| 亚洲无线观看免费| 最黄视频免费看| 国精品久久久久久国模美| 国产精品蜜桃在线观看| 99re6热这里在线精品视频| 国产精品福利在线免费观看| 日日爽夜夜爽网站| 又爽又黄a免费视频| 波野结衣二区三区在线| 亚洲自偷自拍三级| 在线 av 中文字幕| 久久婷婷青草| 国产黄频视频在线观看| 日韩三级伦理在线观看| 偷拍熟女少妇极品色| 亚洲国产最新在线播放| 视频中文字幕在线观看| 热99国产精品久久久久久7| 18禁动态无遮挡网站| 国产免费一区二区三区四区乱码| 国产美女午夜福利| 久久久国产欧美日韩av| 国产在线视频一区二区| 人妻夜夜爽99麻豆av| 午夜av观看不卡| 精品一区二区免费观看| 日韩大片免费观看网站| 亚洲自偷自拍三级| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 国产在视频线精品| 久久久久久久大尺度免费视频| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 亚洲人成网站在线观看播放| 国产av码专区亚洲av| 久久久久国产网址| 国产精品99久久久久久久久| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 免费观看a级毛片全部| 国产一区亚洲一区在线观看| 国产日韩一区二区三区精品不卡 | a级毛片在线看网站| 欧美日韩精品成人综合77777| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 欧美国产精品一级二级三级 | 亚洲中文av在线| 老司机影院毛片| 亚洲精品视频女| 亚洲av成人精品一二三区| 26uuu在线亚洲综合色| 日韩中文字幕视频在线看片| 日韩强制内射视频| 青青草视频在线视频观看| 午夜免费鲁丝| 91精品国产国语对白视频| 老司机影院成人| 国产精品久久久久久精品古装| 亚洲人成网站在线播| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产深夜福利视频在线观看| 中文字幕免费在线视频6| 欧美高清成人免费视频www| 亚洲欧美日韩东京热| 22中文网久久字幕| 哪个播放器可以免费观看大片| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 伦理电影免费视频| 亚洲高清免费不卡视频| 日韩一区二区三区影片| av线在线观看网站| 免费黄频网站在线观看国产| 国产又色又爽无遮挡免| 国产精品99久久久久久久久| 男的添女的下面高潮视频| 69精品国产乱码久久久| 国产精品免费大片| 久久6这里有精品| 简卡轻食公司| 国产日韩欧美亚洲二区| 国产午夜精品一二区理论片| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 69精品国产乱码久久久| 丰满乱子伦码专区| 中文字幕av电影在线播放| 亚洲国产精品成人久久小说| 丁香六月天网| a级片在线免费高清观看视频| 欧美最新免费一区二区三区| 蜜臀久久99精品久久宅男| 哪个播放器可以免费观看大片| 黑人高潮一二区| 精品少妇久久久久久888优播| 曰老女人黄片| 亚洲国产成人一精品久久久| 久久av网站| 国产熟女欧美一区二区| 国产精品无大码| 亚洲欧洲日产国产| 久久 成人 亚洲| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 久久精品国产亚洲av天美| 中国美白少妇内射xxxbb| 熟女电影av网| 亚洲欧洲国产日韩| 午夜福利视频精品| 国产 精品1| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 久久久久久久久久成人| 免费高清在线观看视频在线观看| 久久人人爽人人爽人人片va| 热re99久久国产66热| 免费在线观看成人毛片| 一级爰片在线观看| 免费观看av网站的网址| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 日本与韩国留学比较| 久久久午夜欧美精品| 日韩中字成人| 色视频在线一区二区三区| 99热全是精品| 日本欧美视频一区| 成年人免费黄色播放视频 | 五月玫瑰六月丁香| 最后的刺客免费高清国语| 国产在线一区二区三区精| 日韩成人伦理影院| 中文天堂在线官网| 97在线视频观看| 日韩一区二区三区影片| 另类亚洲欧美激情| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 日韩精品有码人妻一区| 国产亚洲91精品色在线| 午夜福利视频精品| 秋霞在线观看毛片| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产成人一区二区在线| 亚洲av日韩在线播放| 九色成人免费人妻av| 国产免费视频播放在线视频| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲综合色惰| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 亚洲精品国产色婷婷电影| 久久精品国产亚洲网站| 亚洲丝袜综合中文字幕| 在线天堂最新版资源| 国产成人免费观看mmmm| 91久久精品国产一区二区成人| 特大巨黑吊av在线直播| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 在线观看av片永久免费下载| 日韩伦理黄色片| 欧美另类一区| 亚洲精品日本国产第一区| 又爽又黄a免费视频| 国产免费福利视频在线观看| 七月丁香在线播放| 卡戴珊不雅视频在线播放| 涩涩av久久男人的天堂| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 久久久久精品久久久久真实原创| 毛片一级片免费看久久久久| 中文字幕制服av| 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲成人av在线免费| 日本wwww免费看| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产日韩欧美视频二区| 赤兔流量卡办理| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 另类亚洲欧美激情| 欧美日韩综合久久久久久| 午夜激情久久久久久久| 欧美xxxx性猛交bbbb| 亚洲三级黄色毛片| 欧美最新免费一区二区三区| 少妇被粗大猛烈的视频| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 色网站视频免费| 在线观看三级黄色| 欧美xxxx性猛交bbbb| 日日啪夜夜爽| 三级国产精品欧美在线观看| 大码成人一级视频| 少妇人妻精品综合一区二区| 亚洲在久久综合| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 久久久久精品久久久久真实原创| 色视频在线一区二区三区| 免费看日本二区| 欧美激情国产日韩精品一区| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 午夜久久久在线观看| 日韩欧美精品免费久久| 免费黄网站久久成人精品| 欧美日韩综合久久久久久| 国产男人的电影天堂91| 国内精品宾馆在线| 久久久国产欧美日韩av| 欧美区成人在线视频| 日韩三级伦理在线观看| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 国产色爽女视频免费观看| 久久鲁丝午夜福利片| 亚洲精品日韩av片在线观看| 亚州av有码| 国内精品宾馆在线| 晚上一个人看的免费电影| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 久久99蜜桃精品久久| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 国产精品久久久久久精品古装| 99国产精品免费福利视频| 欧美日韩在线观看h| 国精品久久久久久国模美| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 性高湖久久久久久久久免费观看| 久久精品国产自在天天线| 国模一区二区三区四区视频| 亚洲国产精品国产精品| 久久久国产精品麻豆| 亚洲国产欧美在线一区| 韩国av在线不卡| 另类亚洲欧美激情| 国产精品一区二区性色av| 一级片'在线观看视频| 丰满饥渴人妻一区二区三| 免费观看在线日韩| 久久影院123| 高清毛片免费看| 岛国毛片在线播放| 伊人亚洲综合成人网| 久久久国产一区二区| 国产片特级美女逼逼视频| a级片在线免费高清观看视频| 午夜福利网站1000一区二区三区| 人人妻人人澡人人看| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 国产淫片久久久久久久久| 久久精品国产亚洲av天美| 成年人免费黄色播放视频 | 国产精品国产三级国产av玫瑰| 日本欧美国产在线视频| 成人综合一区亚洲| a级毛片在线看网站| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 美女福利国产在线| 久久久久久久大尺度免费视频| 全区人妻精品视频| 三上悠亚av全集在线观看 | 午夜免费鲁丝| 免费在线观看成人毛片| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 91精品伊人久久大香线蕉| videos熟女内射| 久久久久久久久久久久大奶| 国产av国产精品国产| 乱人伦中国视频| 国产免费一级a男人的天堂| 多毛熟女@视频| 男男h啪啪无遮挡| 日韩一本色道免费dvd| 国产综合精华液| 曰老女人黄片| 国产精品国产av在线观看| 91aial.com中文字幕在线观看| 卡戴珊不雅视频在线播放| 丝袜喷水一区| 交换朋友夫妻互换小说| 久久午夜综合久久蜜桃| 亚洲美女搞黄在线观看| 精品人妻偷拍中文字幕| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 午夜视频国产福利| 搡女人真爽免费视频火全软件| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 国产伦理片在线播放av一区| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产精品久久久久久av不卡| 国产在线免费精品| 日本爱情动作片www.在线观看| 97超碰精品成人国产| 亚洲内射少妇av| 欧美97在线视频| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 伊人久久国产一区二区| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 欧美性感艳星| 免费看不卡的av| 国产精品免费大片| h视频一区二区三区| 一级片'在线观看视频| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲国产精品国产精品| 日韩大片免费观看网站| 久久久a久久爽久久v久久| av免费在线看不卡| 高清毛片免费看| 日韩伦理黄色片| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 91久久精品国产一区二区成人| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 亚洲欧美日韩东京热| 国产综合精华液| 国产毛片在线视频| 免费大片18禁| 久久久久久久久久成人| 久久青草综合色| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 青青草视频在线视频观看| 久久亚洲国产成人精品v| 在线观看国产h片| 99久久精品一区二区三区| 国产精品三级大全| 国产伦精品一区二区三区四那| 多毛熟女@视频| 精品一品国产午夜福利视频| av天堂久久9| 18+在线观看网站| 国产视频首页在线观看| 另类亚洲欧美激情| av天堂久久9| 蜜桃在线观看..| 国产亚洲最大av| 国产在线男女| 99九九线精品视频在线观看视频| 日本黄色日本黄色录像| 在线观看免费高清a一片| 五月开心婷婷网| 久久青草综合色| 精品酒店卫生间| av在线播放精品| 伦理电影大哥的女人| 91久久精品国产一区二区成人| 成人亚洲精品一区在线观看| 一区二区三区免费毛片| av.在线天堂| 99久久精品国产国产毛片| 日本黄大片高清| 国产精品熟女久久久久浪| 男女免费视频国产| 日韩 亚洲 欧美在线| 亚洲精品自拍成人| 人妻系列 视频| 亚洲欧美精品专区久久| 婷婷色av中文字幕| 亚洲美女视频黄频| 免费黄频网站在线观看国产| 国产精品免费大片| 亚洲欧美成人精品一区二区| 一区二区三区四区激情视频| 波野结衣二区三区在线| 老司机亚洲免费影院| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 亚洲精品成人av观看孕妇| 国产精品国产三级专区第一集| 天堂俺去俺来也www色官网| 中文欧美无线码| 丰满饥渴人妻一区二区三| 日本午夜av视频| 久久久久久久国产电影| 97超视频在线观看视频| 日韩精品免费视频一区二区三区 | freevideosex欧美| 成人二区视频| 亚洲av成人精品一二三区| 久久久久久久久久久丰满| 最近最新中文字幕免费大全7| 少妇精品久久久久久久| 97在线视频观看| kizo精华| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 大陆偷拍与自拍| 我要看黄色一级片免费的| 亚洲av欧美aⅴ国产| 97精品久久久久久久久久精品| 中文欧美无线码| 极品教师在线视频| 精品一区二区免费观看| 国产色婷婷99| 搡老乐熟女国产| 国产伦在线观看视频一区| 日日摸夜夜添夜夜爱| 亚洲成色77777| 2021少妇久久久久久久久久久| 成人毛片60女人毛片免费| 少妇人妻精品综合一区二区| 少妇人妻一区二区三区视频| 极品少妇高潮喷水抽搐| 一边亲一边摸免费视频| 久久久久久久久久成人| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 亚洲第一区二区三区不卡| 老司机影院成人| 最新的欧美精品一区二区| 成人二区视频| 我的女老师完整版在线观看| 在线观看免费视频网站a站| 一级毛片电影观看| 免费大片黄手机在线观看| 国产免费一区二区三区四区乱码| 中文天堂在线官网| 啦啦啦啦在线视频资源| 日韩制服骚丝袜av| 青春草视频在线免费观看| 成人影院久久| 岛国毛片在线播放| 亚洲av免费高清在线观看| 中文字幕亚洲精品专区| 日本vs欧美在线观看视频 | 偷拍熟女少妇极品色| 国产欧美亚洲国产| 91久久精品国产一区二区成人| 波野结衣二区三区在线| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 亚洲精品,欧美精品| 亚洲美女搞黄在线观看| 一边亲一边摸免费视频| 国产伦在线观看视频一区| 亚洲高清免费不卡视频| 成人毛片60女人毛片免费| 色视频www国产| 日韩中字成人| 丝袜喷水一区| 国产亚洲最大av| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 精品熟女少妇av免费看| 欧美精品亚洲一区二区| 欧美日韩精品成人综合77777| 国产日韩欧美亚洲二区| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 欧美 亚洲 国产 日韩一| 久久久久久久久久久久大奶| 国产美女午夜福利| 男女啪啪激烈高潮av片| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 特大巨黑吊av在线直播| 97超视频在线观看视频| 亚洲精品一二三| 一二三四中文在线观看免费高清| 久久人妻熟女aⅴ| 乱系列少妇在线播放| 日本与韩国留学比较| 97在线人人人人妻| 国产精品欧美亚洲77777| 亚洲国产日韩一区二区| 国产精品久久久久成人av| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 国产深夜福利视频在线观看| 有码 亚洲区| 黄色配什么色好看| 2021少妇久久久久久久久久久| 在线观看免费日韩欧美大片 | 精品国产露脸久久av麻豆| 简卡轻食公司| 精品久久久久久久久亚洲| 午夜影院在线不卡| 校园人妻丝袜中文字幕| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 丰满饥渴人妻一区二区三| 精品一区二区免费观看| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 六月丁香七月| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 国产一级毛片在线| 国产精品人妻久久久影院| 日韩成人伦理影院| 午夜福利影视在线免费观看| av播播在线观看一区| 国产深夜福利视频在线观看| av一本久久久久| 看十八女毛片水多多多| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产欧美日韩综合在线一区二区 | 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产精品人妻久久久久久| 精品少妇内射三级| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 日韩av免费高清视频| 大香蕉久久网| a 毛片基地| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 日本欧美视频一区| 久久青草综合色| 寂寞人妻少妇视频99o| 国产精品久久久久久久久免| 国产男人的电影天堂91| 岛国毛片在线播放| 狂野欧美激情性bbbbbb| 亚洲美女视频黄频| 久久久欧美国产精品| 精品少妇内射三级| 午夜日本视频在线| 国产乱人偷精品视频| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 免费av不卡在线播放| 国产中年淑女户外野战色| 日韩精品有码人妻一区| 久久毛片免费看一区二区三区| 嫩草影院入口| 只有这里有精品99| 国产日韩欧美在线精品| 久久精品久久精品一区二区三区| 男的添女的下面高潮视频| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 黑人猛操日本美女一级片| 亚洲成色77777| 久久精品国产亚洲网站| 亚洲精品乱久久久久久| 亚洲久久久国产精品| 国产老妇伦熟女老妇高清| 哪个播放器可以免费观看大片| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 日本wwww免费看| 午夜免费男女啪啪视频观看| 丰满少妇做爰视频| 日本av免费视频播放| 精品久久久噜噜| 久久国产亚洲av麻豆专区| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 十八禁高潮呻吟视频 | 国产av码专区亚洲av| 韩国高清视频一区二区三区| 在线观看三级黄色| www.av在线官网国产| 精品人妻熟女av久视频| 国产一区二区在线观看av| 亚洲国产精品999| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 欧美精品一区二区免费开放| av在线老鸭窝| 久久青草综合色| 日韩一本色道免费dvd| 97在线人人人人妻| 日本av手机在线免费观看| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 国产在线一区二区三区精| 一级毛片久久久久久久久女| 久久99一区二区三区| av线在线观看网站| 国产日韩一区二区三区精品不卡 | 日本av免费视频播放| 男人添女人高潮全过程视频| 久久韩国三级中文字幕| 在线观看免费日韩欧美大片 | 在线观看av片永久免费下载| 日日啪夜夜爽| 久久99热这里只频精品6学生| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 久久久久久久久久久丰满| 国产精品女同一区二区软件| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 免费黄网站久久成人精品| 偷拍熟女少妇极品色| 美女大奶头黄色视频| av线在线观看网站| 色视频在线一区二区三区| 91久久精品电影网|