血漿SCUBE1水平與新疆哈薩克族原發(fā)性高血壓的相關(guān)性研究＊

王美方，王 忠，趙若飛，鄭麗華，王 麗，陳少澤，段軍倉(cāng)

（1.石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院，新疆石河子832002；2.石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院心內(nèi)二科，新疆石河子832002）

近年來(lái)，高血壓的發(fā)病率逐年升高，其嚴(yán)重危害性在于并發(fā)癥，如心、腦、腎等靶器官的病變，以其血栓性并發(fā)癥尤重。目前多因素共同影響導(dǎo)致原發(fā)性高血壓的發(fā)病機(jī)制已被普遍認(rèn)知。Lip［1］研究表明高血壓患者血液處于血栓前狀態(tài)（PTS），PTS成為引發(fā)靶器官損傷的重要始動(dòng)環(huán)節(jié)。最近研究發(fā)現(xiàn)，新型血小板相關(guān)血管內(nèi)皮分泌蛋白——血漿內(nèi)皮生長(zhǎng)因子樣單鏈蛋白1相關(guān)補(bǔ)體Clr/Cls單肽（SCUBE1）濃度同血小板的激活呈正相關(guān)，可能參與PTS，進(jìn)而參與EH發(fā)生、發(fā)展。哈薩克族（以下簡(jiǎn)稱哈族）是原發(fā)性高血壓（EH）的高發(fā)民族，關(guān)于哈族EH與血漿SCUBS1的相關(guān)性研究，國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)報(bào)道。本項(xiàng)研究通過(guò)病例對(duì)照試驗(yàn)比較哈族EH患者與同族健康對(duì)照人群一般情況、生化指標(biāo)及血漿中SCUBE1水平變化的表達(dá)差異，以探討SCUBE1參與EH發(fā)生的機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究選擇2013年11月在新疆瑪納斯縣旱卡子灘鄉(xiāng)進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查所獲得的哈族EH患者73例為EH 組，男32例、女41例，平均年齡（57.29±11.89）歲；選擇同期哈族血壓正常者73例為對(duì)照組，男33例，女40例，平均年齡（55.44±11.83）歲。比較兩組間的年齡、性別、體質(zhì)量等一般資料，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。高血壓的診斷采用2010年中國(guó)高血壓防治指南標(biāo)準(zhǔn)［2］：均初診為高血壓，收縮壓（SBP）大于140mm Hg和（或）舒張壓（DBP）大于或等于90mm Hg。根據(jù)病史，符合條件的入選者實(shí)驗(yàn)前2周未服用任何降壓藥及抗血小板藥物，并維持飲食和體質(zhì)量的相對(duì)穩(wěn)定。排除嚴(yán)重肝、腎功能不全、腫瘤、繼發(fā)性高血壓、糖尿病、出血性疾病、腦卒中、不穩(wěn)定型心絞痛、心肌梗死、心功能2級(jí)或以上、妊娠、哺乳期或長(zhǎng)期服用避孕藥物者。根據(jù)知情同意原則，參與本研究的所有研究對(duì)象均簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法 所有受檢者血壓測(cè)量使用汞柱式血壓計(jì)，測(cè)量坐位右上臂血壓，取Korikoff第1和第5音的SBP和DBP，連續(xù)測(cè)量3次，每次間隔不少于2min，取3次讀數(shù)的平均值作為受試者血壓。均脫鞋、免冠、著單衣褲準(zhǔn)確收集參與者身高、體質(zhì)量等基礎(chǔ)資料。所有受檢者均于隔夜禁食12h后晨起空腹時(shí)采取肘靜脈血10mL，置于乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝離心管，現(xiàn)場(chǎng)離心（4 000r/min，離心5min），吸管吸取上層血漿分裝到EP管中，所有標(biāo)本統(tǒng)一進(jìn)行編號(hào)，置于－80℃冰箱保存?zhèn)溆?，用于檢測(cè)血漿SCUBE1活性及糖脂代謝等生化指標(biāo)。采用石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科的日立7100全自動(dòng)生化分析儀分別檢測(cè)標(biāo)本的空腹血糖（FBG）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL－C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL－C）、尿酸、肌酐等。血漿SCUBE1濃度的測(cè)定采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），試劑盒（購(gòu)自上海西塘有限責(zé)任公司）的板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%，操作經(jīng)過(guò)多次練習(xí)，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，所收集的計(jì)量資料符合正態(tài)分布，計(jì)量資料用±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，相關(guān)分析采用Pearson直線相關(guān)及多元線形回歸分析，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 生化指標(biāo)檢測(cè) 經(jīng)過(guò)對(duì)所收集數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，EH組和對(duì)照組之間FBG差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其他生化指標(biāo)無(wú)差異。對(duì)EH組和對(duì)照組間血壓及血漿SCUBE1水平比較，顯示出EH組SBP、DBP及血漿SCUBE1等水平均高于對(duì)照組，比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），見(jiàn)表1、2。

2.2 相關(guān)性分析 在EH組中將SCUBE1同參與者血壓、基礎(chǔ)資料及生化指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析，SCUBE1在EH組中表達(dá)明顯較高，濃度同SBP（r＝0.552）、DBP（r＝0.305）均呈正相關(guān)（P＜0.05）；SCUBE1與年齡、BMI、腰圍、腰臀比、FBG、TG等生化指標(biāo)均無(wú)相關(guān)性（P＞0.05）。在對(duì)照組中，SCUBE1與SBP、DBP有相關(guān)性（SBP：r＝0.425、DBP：r＝0.265，P＜0.05），其他各指標(biāo)與SCUBE1無(wú)相關(guān)性（P＞0.05）。該研究結(jié)果反映出EH患者血漿中新型血小板活化因子SCUBE1是升高的。所有參與者SBP、DBP與SCUBE1均存在相關(guān)性，而在EH組SCUBE1和SBP、DBP同對(duì)照組相比含量明顯升高，其相關(guān)性更加顯著。SBP、DBP和SCUBE1線性回歸分析有相關(guān)性（r2＝0.701、0.504，P＜0.05），見(jiàn)圖1。

表1 EH組和健康對(duì)照組一般資料及SCUBE1的比較

表2 EH組和健康對(duì)照組生化資料及SCUBE1的比較（±s）

表2 EH組和健康對(duì)照組生化資料及SCUBE1的比較（±s）

組別 TG（mmol/L）HDL－C（mmol/L）LDL－C（mmol/L）尿素（mmol/L）TC（mmol/L）肌酐（μmol/L）葡萄糖（mmol/L）尿酸（μmol/L）9±0.96 73.21±16.88 5.17±0.52 252.14±78.42 EH組 1.17±0.66 1.89±0.42 3.12±0.79 5.04±1.38 5.46±1.11 74.15±12.87 5.56±1.31 260.26±78.63 t 0.635 0.661 1.238 1.193 1.675 0.355 2.417 0.550 P 0.526 0.510 0.218 0.235 0.096 0.723 0.017 0.583對(duì)照組 1.10±0.73 1.85±0.39 2.96±0.89 4.79±1.34 5.1

圖1 SCUBE1與SBP、DBP線性回歸分析

3 討 論

高血壓是一種以血流動(dòng)力學(xué)改變?yōu)橹饕卣鞯娜硌苄约膊?，發(fā)病率日益增高，其導(dǎo)致的心腦血管疾病患病率逐漸增高［3］，盡管強(qiáng)調(diào)控制高血壓，但高血壓所致的靶器官損害和心腦血管事件發(fā)生率不斷攀升，這提示除了對(duì)血壓的控制力度及對(duì)其危險(xiǎn)因素的重視力度不夠外，可能還與忽視高血壓的PTS密切相關(guān)。在促進(jìn)血栓形成過(guò)程中，較高的血流側(cè)壓力下使血管內(nèi)皮發(fā)生損傷、內(nèi)皮功能發(fā)生紊亂，使抗原暴露激發(fā)血小板活化并促使聚集及黏附［4］，SCUBE1被認(rèn)為是新型血小板活化標(biāo)志物之一。

SCUBE［signalpeptide－CUB（complement Clr/Cls，Uegf，and Bmpl）內(nèi)皮生長(zhǎng)因子樣單鏈蛋白相關(guān)補(bǔ)體Clr/Cls單肽］因子家 族 包 含 3 個(gè) 亞 型（SCUBE1－3）［5］。Tu 等［6］研究發(fā)現(xiàn)，SCUBE1在血小板內(nèi)高表達(dá)，以α－顆粒形式儲(chǔ)存在未活化的血小板，當(dāng)血小板被激活時(shí)則轉(zhuǎn)移到血小板表面，水解成小分子可溶性片段，參與血栓形成。進(jìn)一步研究證實(shí)，SCUBE1沉積在人內(nèi)皮下基質(zhì)，促使動(dòng)脈硬化發(fā)生。Tu等［7］經(jīng)大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)SCUBE1分子中EGF樣重復(fù)序列可介導(dǎo)多個(gè)SCUBE1之間的相互作用而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞之間的同嗜性黏附效應(yīng)。由此看來(lái)，SCUBE1可能作為一新的血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子而在心血管疾病中起著重要的作用。

本研究亦證實(shí)，SCUBE1在健康人血漿也有一定表達(dá)，在初診EH患者血漿水平是顯著升高的，這與Ozkan等［8］研究報(bào)道相符，但其在血漿中含量存有差異，可能由于該因子的表達(dá)受高血壓病程的影響及在不同種族人群的表達(dá)存在差異。本研究入選的研究對(duì)象不存在血糖、血脂等代謝紊亂，SCUBE1與生化指標(biāo)不存在相關(guān)性，同血壓水平呈正相關(guān)，提示SCUBE1可能參與高血壓的發(fā)病機(jī)制，且可能具有相對(duì)獨(dú)立相關(guān)性。本研究不足之處在于受檢人數(shù)相對(duì)比較少，且未能進(jìn)行長(zhǎng)期的追蹤調(diào)查高血壓患者的心腦血管事件的發(fā)生率。

SCUBE1與高血壓的發(fā)病機(jī)制尚不明確，可能機(jī)制為：（1）血管在較高的血流側(cè)壓力下，內(nèi)皮發(fā)生損傷、內(nèi)皮功能發(fā)生紊亂，激發(fā)血小板活化、黏附及聚集［9］。SCUBE1分子N－端EGF樣重復(fù)序列介導(dǎo)多個(gè)SCUBE1之間的相互作用，在外界鈣離子參與下使細(xì)胞間同嗜性黏附，導(dǎo)致血管內(nèi)皮增生、血管狹窄，外周循環(huán)阻力增加，促使血壓升高。（2）隨著血小板活化，內(nèi)皮細(xì)胞、血小板α－顆粒持續(xù)釋放SCUBE1，活化的血小板因子可能引起血管內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)NO的舒張功能減弱，兩者相互促進(jìn)、相互影響，致使血管壁處于持續(xù)收縮狀態(tài)。（3）炎癥狀態(tài)下，血管內(nèi)皮在促炎因子作用下SCUBE1表達(dá)增加［9］，可能激活炎癥BMP2/TGF－β/Hh信號(hào)通路［10－12］，進(jìn)一步促進(jìn)第二信使的級(jí)聯(lián)放大作用，血管長(zhǎng)期的慢性炎性病變促進(jìn)血管增生、血管纖維化，促使粥樣斑塊形成、血管硬化，外周阻力增加。其機(jī)制有待進(jìn)一步深入探討。

綜上所述，鑒于活化血小板在高血壓病程中的獨(dú)特作用，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)EH患者血小板活化情況對(duì)鑒別血栓卒中高風(fēng)險(xiǎn)人群及對(duì)抗血小板藥物治療效果的判定顯得尤為重要［13］。高血壓是由環(huán)境因素與遺傳因素共同影響而導(dǎo)致的一種多因素疾病，SCUBE1是否由于高血壓而促進(jìn)動(dòng)脈硬化及血栓性疾病的發(fā)生將有待今后大樣本量、多中心、多人群做進(jìn)一步研究證實(shí)，以取得更廣泛證據(jù)指導(dǎo)，為臨床合理應(yīng)用具有抗血小板活性及改善血管內(nèi)皮功能的降壓藥物提供一定的參考依據(jù)。然而在極其復(fù)雜的高血壓發(fā)病機(jī)制中，SCUBE1僅是冰山一角，針對(duì)原發(fā)性高血壓病的一級(jí)預(yù)防仍任重而道遠(yuǎn)。

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