HE4與CA125聯(lián)合檢測(cè)對(duì)卵巢腫瘤鑒別診斷的價(jià)值

胡德宇，唐振華

(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬國(guó)際和平婦幼保健院檢驗(yàn)科 200030)

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·論 著·

HE4與CA125聯(lián)合檢測(cè)對(duì)卵巢腫瘤鑒別診斷的價(jià)值

胡德宇，唐振華△

(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬國(guó)際和平婦幼保健院檢驗(yàn)科 200030)

目的 評(píng)價(jià)HE4與CA125聯(lián)合檢測(cè)對(duì)卵巢腫瘤診斷的價(jià)值。方法 將61例健康體檢婦女、20例卵巢良性疾病患者及70例卵巢癌患者作為研究對(duì)象，按照經(jīng)期情況，將151例研究對(duì)象分為絕經(jīng)組和未絕經(jīng)組，采用ELISA法與化學(xué)發(fā)光法分別對(duì)151例研究對(duì)象進(jìn)行血清人附睪上皮分泌蛋白4(HE4)和糖類抗原125(CA125)檢測(cè)，評(píng)價(jià)其診斷價(jià)值。結(jié)果 絕經(jīng)組和未絕經(jīng)組中，卵巢癌患者血清HE4水平均顯著高于卵巢良性疾病患者與健康體檢者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。受試者工作特征(ROC)曲線分析表明，絕經(jīng)組中HE4曲線下面積(AUC)為0.978，CA125 AUC為0.877，HE4的敏感度和特異度分別為97.8%和94.3%，CA125的敏感度和特異度分別為91.1%和81.1%；未絕經(jīng)組中HE4 AUC為0.989，CA125 AUC為0.877，HE4的敏感度和特異度分別為92.0%和88.6%，CA125的敏感度和特異度分別為84.0%和74.3%，二者的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。對(duì)于卵巢疾病患者，未絕經(jīng)者和絕經(jīng)者卵巢癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)計(jì)算值(ROMA)分別大于14.4%和12.5%時(shí)，可能存在卵巢癌發(fā)病的高風(fēng)險(xiǎn)。結(jié)論 HE4與CA125的聯(lián)合檢測(cè)并計(jì)算ROMA，有助于卵巢癌的診斷及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。

卵巢腫瘤； 人附睪上皮分泌蛋白4； 糖類抗原125； 卵巢癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)計(jì)算值

病死率高、預(yù)后差是卵巢癌的特點(diǎn)，臨床實(shí)踐證明，有效改善卵巢癌預(yù)后的關(guān)鍵在于早期診斷。統(tǒng)計(jì)資料顯示，90%的早期卵巢癌患者能夠存活5年以上，而已發(fā)生轉(zhuǎn)移的晚期卵巢癌患者5年生存率往往不足30%[1]，糖類抗原125(CA125)是早期診斷卵巢癌的血清標(biāo)志物，其在良性卵巢腫瘤、盆腔炎、消化道腫瘤癥等疾病中也有不同程度的升高[2-3]。人附睪蛋白4(HE4)是新型腫瘤標(biāo)志物，對(duì)于早期鑒別和診斷卵巢癌具有極其重要的價(jià)值。Hellstr?m等[4]研究發(fā)現(xiàn)，HE4可應(yīng)用于卵巢癌的早期診斷，其靈敏度和特異度均優(yōu)于CA125。本研究評(píng)估了聯(lián)合檢測(cè)HE4與CA125在中國(guó)人卵巢癌診斷中的價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本院2012年11月至2014年9月收治的未經(jīng)治療的卵巢疾病患者90例及同期體檢健康者61例作為研究對(duì)象，按照是否絕經(jīng)，分為絕經(jīng)組和未絕經(jīng)組。絕經(jīng)組77例，平均(60.5±10.2)歲，包括卵巢癌45例(A-1組)，卵巢良性疾病9例(A-2組)，體檢健康者23例(A-3組)；未絕經(jīng)組74例，平均(36.6±9.6)歲，卵巢癌25例(B-1組)，卵巢良性疾病11例(B-2組)，體檢健康者38例(B-3組)。

1.2 標(biāo)本采集及處理 所有研究對(duì)象(手術(shù)患者于術(shù)前)均空腹抽取肘靜脈血3 mL，混勻，4 ℃ 1 000×g離心15 min，收集血清-40 ℃凍存待測(cè)。

1.3 HE4測(cè)定 采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)HE4，檢測(cè)試劑由瑞典CanAg公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，檢測(cè)線性范圍為15～900 pmol/L。

1.4 CA125測(cè)定 采用Roche cobas e 601全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測(cè)定CA125，檢測(cè)試劑由德國(guó)羅氏診斷有限公司提供，檢測(cè)線性范圍為0.6～5 000 kU/L。

1.5 卵巢癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估 根據(jù)HE4和CA125的檢測(cè)值計(jì)算卵巢癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，按女性月經(jīng)狀態(tài)的不同分別計(jì)算預(yù)示值(PI)和卵巢癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)計(jì)算值(ROMA)[5]：絕經(jīng)者，PI=-8.09+1.04×ln(HE4)+0.732×ln(CA125)；ROMA(%)=exp(PI)/[1+exp(PI)]×100；未絕經(jīng)者，PI=-12.0+2.38×ln(HE4)+0.626×ln(CA125)；ROMA(%)=ePI/(1+ePI)×100。分別以75%的卵巢良性疾病患者為低風(fēng)險(xiǎn)時(shí)所對(duì)應(yīng)的ROMA(特異度為75%)為絕經(jīng)和未絕經(jīng)女性的臨界值，患者的ROMA值高于臨界值判斷為高風(fēng)險(xiǎn)。分別計(jì)算出絕經(jīng)組和未絕經(jīng)組的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。用中位數(shù)(四分位數(shù))表達(dá)呈偏態(tài)分布的定量資料，組間比較采用非參數(shù)Kruskai-WallisH檢驗(yàn)，再采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)進(jìn)一步做兩兩比較，采用受試者工作特征(ROC)曲線，計(jì)算曲線下面積(AUC)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組血清HE4檢測(cè)結(jié)果比較 在絕經(jīng)組中，A-1組45例卵巢癌患者血清HE4水平顯著高于A-2組的卵巢良性疾病患者與A-3組的體檢健康者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U值分別為38.6和45.5，P<0.05)；未絕經(jīng)組中，B-1組25例卵巢癌患者血清HE4水平顯著高于B-2組的卵巢良性疾病患者和B-3組的體檢健康者，差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U值分別為73.5和100.0，P<0.01)；而A-2組與A-3組、B-2組與B-3組HE4水平分別比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U值分別為154.6、66.4，P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 未絕經(jīng)與絕經(jīng)組血清HE4檢測(cè)結(jié)果比較[pmol/L,中位數(shù)(四分位數(shù))]

2.2 血清HE4與CA125的診斷價(jià)值比較 絕經(jīng)組中，當(dāng)HE4臨界值為70.2 pmol/L時(shí)，約登指數(shù)最大(為0.978)，AUC為0.978；當(dāng)CA125的臨界值為18.6 kU/L時(shí)，AUC為0.877，兩項(xiàng)指標(biāo)的AUC差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，此時(shí)HE4診斷卵巢癌的靈敏度和特異度分別為92.8%和98.3%，CA125診斷卵巢癌的靈敏度和特異度分別為91.1%和81.1%。在未絕經(jīng)組中，當(dāng)HE4臨界值為66.3 pmol/L時(shí)，約登指數(shù)最大(為0.920)，AUC為0.989，當(dāng)CA125臨界值為20.5 kU/L時(shí)，AUC為0.877，兩項(xiàng)指標(biāo)的AUC差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，此時(shí)HE4診斷卵巢癌的靈敏度和特異度分別為88.6%和97.8%，CA125診斷卵巢癌的靈敏度和特異度分別為84.0%和74.3%。

2.3 ROMA的診斷價(jià)值 對(duì)卵巢癌患者的ROMA值進(jìn)行ROC曲線分析，絕經(jīng)組中，選取16.25%作為ROMA的臨界值，此時(shí)敏感度和特異度分別為97.7%和90.5%。未絕經(jīng)組中，選取23.8%作為ROMA的臨界值，此時(shí)敏感度和特異度分別為94.3%和89.5%。以70例卵巢癌患者為病例組，20例卵巢良性疾病做對(duì)照組，當(dāng)特異度為75%時(shí)，未絕經(jīng)組和絕經(jīng)組的ROMA臨界值分別為12.5%和14.4%，以此臨界值為標(biāo)準(zhǔn)，未絕經(jīng)組的ROMA陰性預(yù)測(cè)值為91.7%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為84.5%，絕經(jīng)組的ROMA陰性預(yù)測(cè)值為93.5%、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為86.8%。

3 討 論

HE4基因最早是由Kirchhoff等[6]在人附睪上皮細(xì)胞中發(fā)的，定位于染色體20q12～13.1上，全長(zhǎng)只有12 kb左右，其編碼的蛋白質(zhì)被認(rèn)為是附睪特有的、與精子成熟有關(guān)的蛋白質(zhì)。后來(lái)的免疫組化和基因芯片研究證實(shí)，在人體正常組織中，HE4主要在生殖道和近端氣管上皮中有表達(dá)，唾液腺中也有較高表達(dá)，而正常卵巢組織幾乎無(wú)表達(dá)；而在卵巢惡性腫瘤中常見(jiàn)表達(dá)上調(diào)，是最常見(jiàn)的上調(diào)表達(dá)基因之一，在大多數(shù)非卵巢惡性腫瘤中不表達(dá)或低表達(dá)[6]。這些結(jié)果提示，HE4具有作為腫瘤標(biāo)志物的前提條件。本研究通過(guò)對(duì)151例婦女血清HE4檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)其在卵巢癌組的血清水平呈高表達(dá)，卵巢癌婦女血清HE濃度明顯高于卵巢良性疾病婦女和健康婦女(P<0.05)，而卵巢良性疾病婦女與健康婦女之間HE濃度差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。分別選取70.2、66.3 pmol/L作為絕經(jīng)組和未絕經(jīng)組的HE臨界值，此時(shí)HE在絕經(jīng)組中的敏感度和特異度分別為97.8%、88.6%，在未絕經(jīng)組中分別為98.3%、92.8%，AUC分別為0.978和0.989，顯示出很高的診斷價(jià)值。通過(guò)與傳統(tǒng)的卵巢癌標(biāo)志物CA125比較發(fā)現(xiàn)，在相同特異度的情況下，HE4的敏感度高于CA125，HE的ROC AUC也高于CA125。

臨床上婦女盆腔腫塊的發(fā)病逐年增多，為了早期對(duì)隱匿病灶的卵巢癌患者進(jìn)行治療，有必要對(duì)患者進(jìn)行卵巢癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)估。在確定未絕經(jīng)組和絕經(jīng)組在特異度為75%的情況下，在絕經(jīng)組中，ROMA臨界值為14.4%時(shí)，其陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為93.5%和86.8%；在未絕經(jīng)組，ROMA臨界值為12.5%時(shí)，其陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為91.7%和84.5%，進(jìn)一步說(shuō)明ROMA在卵巢癌的臨床診斷中有較高的實(shí)用價(jià)值。由此可見(jiàn)，HE4與CA125聯(lián)合檢測(cè)并計(jì)算ROMA，大大提高了單項(xiàng)HE4或CA125的檢測(cè)價(jià)值。

綜上所述，HE4作為一種卵巢癌新的腫瘤相關(guān)標(biāo)志物，具有比CA125更好的鑒別診斷價(jià)值。血清HE4、CA125的聯(lián)合檢測(cè)及ROMA的計(jì)算有助于評(píng)估卵巢癌患者的風(fēng)險(xiǎn)性。

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Value of combined detection of CA125 and HE4 in differentiation diagnosis of ovarian tumor

HUDe-Yu，TANGZhen-Hua△

(DepartmentofClinicalLaboratory,InternationalPeaceMaternityandChildHealthCareHospital,SchoolofMadicine,ShanghaiJiaotongUniversity,Shanghai200030,China)

Objective To evaluate the value of the combined detection of carbohydrate antigen 125(CA125) and human epididymis secretory protein 4(HE4) in the diagnosis of ovarian tumor.Methods 70 cases of ovarian cancer,20 cases of benign ovarian diseases and 61 healthy women of healthy physical examination were collected as the research subjects and divided into the menopause group and the non-menopause group according to the menstrual situation.The concentrations of serum CA125 and HE4 were detected by using the enzyme linked immunosorbent assay(ELISA) and chemiluminescence method.Results In the menopause group and the non-menopause group,the serum HE4 level in the ovarian cancer group was significantly higher than that in the benign ovarian diseases group and the healthy control group,the difference was statistically significant(P<0.05).The receiver operating characteristic(ROC) curve analysis indicated that the area under curve(AUC) of HE4 in the menopause group was 0.978,AUC of CA125 was 0.877,the sensitivity and specificity of HE4 were 97.8% and 94.3% respectively,which of CA125 were 91.1% and 81.1% respectively;in the non-menopause group,AUC of HE4 was 0.989 and which of CA125 was 0.877,the sensitivity and specificity of HE4 were 92.0% and 88.6% respectively,which of CA125 were 84.0% and 74.3% respectively,the differences were statistically significant(P<0.05).For the patients with ovarian diseases,if the calculated value of ovarian cancer risk(ROMA) in the menopause patients and the non-menopause patients was more than 14.4% and 12.5% respectively,the high risk of ovarian cancer onset could exist.Conclusion The combined detection of HE4 and CA125 and ROMA calculation conduce to the diagnosis of ovarian cancer and the risk evaluation.

ovarian tumor; HE4; CA125; ROMA

胡德宇，男，本科，檢驗(yàn)師，主要從事臨床免疫學(xué)檢測(cè)。

△通訊作者,E-mail:labtang910@hotmail.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.19.020

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1672-9455(2015)19-2863-02

2015-04-25

2015-08-15)