野生盤羊·家羊及其雜交F1代的血液生化指標(biāo)比較

烏蘭，鄭文新*，高維明，阿布力孜·阿布力米提，宮平，呂雪峰，魏佩玲，丁新民，朱玉玲

(1．新疆種羊與羊毛羊絨質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗(yàn)中心，新疆烏魯木齊830000;

2．新疆天山野生動(dòng)物園，新疆烏魯木齊830000)

盤羊(Ovis ammon)，別稱盤角羊，在動(dòng)物學(xué)分類上隸屬動(dòng)物界偶蹄目、?？啤⒀騺喛?、綿羊?qū)伲址Q為大頭羊、大角羊、大頭彎羊、亞洲巨野羊等，是體形最大的野生羊類，在我國古代則稱為蟠羊。軀體肥壯，體長150～180 cm，肩高50～70 cm，體重110 kg左右，體色一般為褐灰色或污灰色。我國主要分布在新疆、青海、甘肅、西藏、四川、內(nèi)蒙古地區(qū)。由于體格健壯，頭角俊美，具有較高的藥用價(jià)值和觀賞價(jià)值，與阿拉斯加大駝鹿的角和北美洲落基山區(qū)的大馬鹿的角合稱為世界傳統(tǒng)狩獵動(dòng)物珍品中的三絕而受到非法獵殺，數(shù)量在逐年銳減［1－2］。因此，開展盤羊種質(zhì)資源的保護(hù)與開發(fā)利用具有重要的生態(tài)、社會(huì)和科學(xué)研究意義。同時(shí)，綿羊在動(dòng)物學(xué)分類上，隸屬洞角科的綿羊山羊亞科(Caprovinae)的綿羊?qū)?Ovis)。與家綿羊(Ovis aries)血緣關(guān)系最近的野生祖先有摩弗倫羊(Muflon ovismusimon)、阿卡爾羊(Ovisorientalis)和羱羊(Ovis ammon)。與綿羊相比，盤羊具有顯著的體格與體重的優(yōu)勢。為了探索利用盤羊的資源培育綿羊新品種，筆者開展了盤羊與家羊的雜交試驗(yàn)。

血液生理生化值在一定程度上反映了動(dòng)物的新陳代謝及生理機(jī)能狀況，是衡量動(dòng)物健康標(biāo)準(zhǔn)及遺傳穩(wěn)定的重要指標(biāo)，也是臨床疾病診斷的重要依據(jù)，對科學(xué)研究具有重要參考價(jià)值，正常血液生理生化指標(biāo)能反映物種的屬性和正常的生理狀態(tài)［3］。朱曉光等進(jìn)行盤羊血液生理生化指標(biāo)的測定以及盤羊及其雜交后代血液中礦物元素的測定［4－5］。筆者對新疆野生盤羊、家養(yǎng)綿羊及其雜交F1代的血液生理生化指標(biāo)進(jìn)行了對比測定，以期補(bǔ)充合完善新疆野生盤羊極其雜交后代血液生理生化指標(biāo)數(shù)據(jù)庫，了解其生理機(jī)能特性，為今后的飼養(yǎng)管理和雜交改良、培育新品種提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1．1 材料

1．1．1 試驗(yàn)動(dòng)物。新疆天山野生動(dòng)物園野生盤羊公羊(屬于天山亞種)6只，盤羊與綿羊雜交一代30只。

1．1．2 樣品采集。分別用抗凝管和促凝管，每只羊無菌頸靜脈采血5 ml，冷藏帶回。

1．1．3 儀器與設(shè)備。PE-6800Vet全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀，為深圳市普康電子有限公司產(chǎn)品;SBA－733型半自動(dòng)生化分析儀，為長春賽諾邁德醫(yī)學(xué)技術(shù)有限責(zé)任公司產(chǎn)品。

1．2 方法

1．2．1 生理指標(biāo)的測定。白細(xì)胞總數(shù)、紅細(xì)胞總數(shù)、血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積、血小板總數(shù)等生理指標(biāo)使用PE－6800Vet全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行測定。

1．2．2 生化指標(biāo)的測定。葡萄糖、總膽紅素、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、鈣、磷和鎂等生化指標(biāo)使用SBA－733型半自動(dòng)生化分析儀測定。

1．2．3 數(shù)據(jù)處理。試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SPSS11．0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與分析。

2 結(jié)果與分析

2．1 血液生理指標(biāo)的比較 由表1可知，與家養(yǎng)綿羊相比，盤羊和雜交F1代的血紅蛋白含量高于家養(yǎng)綿羊，且差異極顯著(P＜0．01)。盤羊的紅細(xì)胞總數(shù)、紅細(xì)胞壓積和淋巴細(xì)胞高于家養(yǎng)綿羊和雜交F1代，差異極顯著(P＜0．01)，而家養(yǎng)綿羊與雜交F1之間差異不顯著(P＞0．05);雜交F1代白細(xì)胞和粒細(xì)胞數(shù)目極顯著高于野生盤羊(P＜0．01)，顯著高于綿羊(P＜0．05)。雜交F1代的血小板數(shù)目高于盤羊和家養(yǎng)綿羊，且差異極顯著(P＜0．01)。雜交F1代和綿羊中間細(xì)胞差異不顯著，而盤羊中間細(xì)胞低于雜交F1代和綿羊，差異極顯著(P＜0．01)。綿羊、盤羊及其雜交F1代的平均紅細(xì)胞體積和紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量差異不顯著(P＞0．05)。

表1 盤羊、綿羊及其雜交F1代的血液生理指標(biāo)比較

2．2 血液生化指標(biāo)的比較 由表2可知，盤羊、雜交F1代、家養(yǎng)綿羊的葡萄糖、鎂、磷和鉀含量差異不顯著(P＞0．05);盤羊的總膽紅素、直接膽紅素、氯含量低于雜交F1代和家養(yǎng)綿羊，差異顯著(P＜0．05)，而雜交F1代與綿羊之間差異不顯著(P＞0．05)。盤羊及其雜交F1代的堿性磷酸酶含量低于綿羊，差異極顯著(P＜0．01)。盤羊的谷丙轉(zhuǎn)氨酶和鈉含量高于雜交F1代與綿羊，差異極顯著(P＜0．01)，而雜交F1代與綿羊之間差異不顯著(P＞0．05)。雜交F1代的鈣含量低于盤羊與綿羊，差異顯著(P＜0．05)。

表2 盤羊、綿羊及其雜交F1代的血液生化指標(biāo)比較

3 結(jié)論與討論

該試驗(yàn)結(jié)果表明，盤羊、雜交F1代、家養(yǎng)綿羊的血液生化指標(biāo)并無明顯差異，都在正常范圍內(nèi)。這表明3種羊身體健康狀況都非常良好。由此可見，獲得1個(gè)物種或種群的正常指標(biāo)參考值是非常重要的。該試驗(yàn)結(jié)果反映了盤羊與家養(yǎng)綿羊、雜交F1代的生理機(jī)能特性，初步建立了血液生理生化指標(biāo)的參考值，為今后盤羊的雜交繁育研究提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

3．1 血紅蛋白 與家養(yǎng)綿羊相比，盤羊和雜交F1代的血紅蛋白含量高于家養(yǎng)綿羊，差異極顯著(P＜0．01)。盤羊的紅細(xì)胞總數(shù)、紅細(xì)胞壓積、淋巴細(xì)胞高于家養(yǎng)綿羊和雜交F1代，差異極顯著(P＜0．01)，而家養(yǎng)綿羊與雜交F1代之間差異不顯著(P＞0．05)。這與這些動(dòng)物的行為性可能有著較強(qiáng)的相關(guān)性:雜交F1代表現(xiàn)出比家綿羊更強(qiáng)的運(yùn)動(dòng)性能，總體也更加活潑好動(dòng)。這可能說明品種對血紅蛋白含量有影響，盤羊的血紅蛋白含量可能通過雜交遺傳給雜交后代。

3．2 白細(xì)胞和粒細(xì)胞數(shù)目 雜交F1代白細(xì)胞和粒細(xì)胞數(shù)目極顯著高于野生盤羊(P＜0．01)，顯著高于綿羊(P＜0．05)。雜交F1代的白細(xì)胞數(shù)與粒細(xì)胞數(shù)目顯著高于盤羊和綿羊，且高于正常范圍。引起白細(xì)胞與粒細(xì)胞增多的原因包括:①生理性增多。生理性增多的原因是劇烈運(yùn)動(dòng)和受刺激等［6］?？赡苡捎陔s交F1代在捕獲采血過程中受到刺激、應(yīng)激作用、心肌或骨骼肌運(yùn)動(dòng)較為劇烈導(dǎo)致這種增高現(xiàn)象。②病理性增多。當(dāng)動(dòng)物機(jī)體發(fā)生急慢性感染、創(chuàng)傷、中毒等情況時(shí)，骨髓中的粒細(xì)胞釋放增多，使外周血中白細(xì)胞增加。另外，免疫及過敏反應(yīng)、髓外造血、白血病等都可引起白細(xì)胞增多，因此建議對雜交F1代進(jìn)行全面檢查。③可能與品種、地理環(huán)境和產(chǎn)地地勢差異等因素有關(guān)［7］。該試驗(yàn)結(jié)果表明，在盤羊與家綿羊雜交對雜交F1代白細(xì)胞數(shù)與粒細(xì)胞數(shù)目有影響。由于該試驗(yàn)是對雜交F1代1～2歲的后代進(jìn)行的試驗(yàn);其隨年齡的變化規(guī)律還有待進(jìn)一步研究。

在外周血液中白細(xì)胞按3分群分類，主要是淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞、中間細(xì)胞是一個(gè)細(xì)胞群。中間細(xì)胞包括單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞。淋巴細(xì)胞源于骨髓造血干細(xì)胞，占白細(xì)胞數(shù)目的1/4，是重要的免疫活性細(xì)胞，參與動(dòng)物體的細(xì)胞免疫，具有先天性的抗病能力［8－9］。盤羊的淋巴細(xì)胞均比綿羊和雜交F1代高，說明盤羊的抗病力較強(qiáng)。這說明雜交F1代在白細(xì)胞和粒細(xì)胞數(shù)量方面可能存在雜交優(yōu)勢，且其抗病能力可能比盤羊和綿羊都要優(yōu)秀。

當(dāng)病原微生物入侵機(jī)體時(shí)，粒細(xì)胞的數(shù)量往往增多，通過變形運(yùn)動(dòng)從血管內(nèi)皮細(xì)胞間游出，趨向炎癥區(qū)，并通過細(xì)胞內(nèi)溶酶體釋放的蛋白水解酶將其消化，防止病原微生物在體內(nèi)的擴(kuò)散［9］。嗜酸性粒細(xì)胞具有吞噬作用，可吞噬帶有抗體的紅細(xì)胞和細(xì)菌等。嗜堿性粒細(xì)胞突出的特點(diǎn)就是參與超敏反應(yīng)。單核細(xì)胞的主要功能是激活淋巴細(xì)胞，使其在特異性免疫中起重要作用。單核細(xì)胞還具有吞噬殺滅病原體、抑制腫瘤生長、在中性粒細(xì)胞和自身生長過程中起到反饋調(diào)節(jié)的作用［8］。盤羊的粒細(xì)胞和中間細(xì)胞含量顯著低于家養(yǎng)綿羊，雜交F1代與綿羊之間差異不顯著。雜交F1代、家養(yǎng)綿羊與盤羊相比，生活環(huán)境相對狹小，密度較高，很容易受到病原體的互相感染和傳播，是造成雜交F1代、家養(yǎng)綿羊的粒細(xì)胞和中間細(xì)胞含量顯著高于盤羊的可能原因。

3．3 血小板 雜交F1代的血小板數(shù)目高于盤羊和家養(yǎng)綿羊，差異極顯著(P＜0．01)。血小板數(shù)目是由骨髓巨核細(xì)胞成熟后細(xì)胞漿解離而成，具有保護(hù)毛細(xì)血管完整的作用，在機(jī)體內(nèi)黏附于血管上，對毛細(xì)血管有彌補(bǔ)作用。血小板破壞分解后能促使血管和血塊收縮，與血漿中的其他凝血因子結(jié)合，可以促進(jìn)血液凝固［8］。盤羊、家養(yǎng)血小板數(shù)顯著低于雜交F1代，而盤羊與綿羊之間差異不顯著。盤羊和綿羊均為成年羊，而雜交F1代是1周歲羊，可能是由于年齡的不同而導(dǎo)致血小板數(shù)目差異較大。

3．4 平均紅細(xì)胞體積和紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量 綿羊、盤羊及其雜交F1代的平均紅細(xì)胞體積和紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量差異不顯著(P＞0．05)。紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)反映了動(dòng)物血液攜氧能力的大小，是重要的生理指標(biāo)［10］。盤羊的紅細(xì)胞總數(shù)和紅細(xì)胞壓積顯著高于家羊。紅細(xì)胞總數(shù)和紅細(xì)胞壓積顯著增高是高海拔地區(qū)動(dòng)物的共同特征。海拔越高，氧分壓越低，當(dāng)牦牛機(jī)體血液含氧量降低，對頸動(dòng)脈體和主動(dòng)脈體產(chǎn)生的強(qiáng)刺激，可引起造血機(jī)能的適應(yīng)性變異，可促使紅細(xì)胞壓積和血紅蛋白含量的增多，以滿足機(jī)體的需要［11］。盤羊處在高原缺氧地區(qū)，為了滿足機(jī)體的氧氣需要，勢必會(huì)產(chǎn)生適合需要的血紅蛋白和紅細(xì)胞數(shù)量，雜交F1代也繼承了盤羊的這些特性。紅細(xì)胞總數(shù)和紅細(xì)胞壓積顯著增高同時(shí)也說明盤羊及雜交F1代擁有較強(qiáng)的抗逆性和環(huán)境適應(yīng)性。紅細(xì)胞壓積、平均紅細(xì)胞體積、紅紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量及濃度的測定對各種貧血的診斷能以及鑒別診斷具有重要意義。盤羊、綿羊、雜交F1代的這些指標(biāo)雖然存在一定差異，但均在正常參考范圍內(nèi)。

3．5 血液生化指標(biāo) 血糖和血脂指標(biāo)主要反映機(jī)體糖和脂代謝狀況。膽紅素和轉(zhuǎn)氨酶等指標(biāo)主要反映肝膽功能狀況，可用于動(dòng)物的健康狀況監(jiān)測和動(dòng)物疾病診斷。谷丙轉(zhuǎn)氨酶主要分布在肝臟，正常時(shí)血清含量較低，當(dāng)上述組織細(xì)胞受損時(shí)導(dǎo)致酶活性升高。因此，谷丙轉(zhuǎn)氨酶是肝臟功能與疾病的重要指標(biāo)之一。該試驗(yàn)結(jié)果表明綿羊、盤羊及其雜交F1代的葡萄糖含量都在正常參考范圍內(nèi)，說明雜交后代羊的機(jī)體代謝正常，適應(yīng)性良好。盤羊的谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量最高，總膽紅素、直接膽紅素和堿性磷酸酶的含量相對較低，但都在正常范圍內(nèi)，可能是盤羊?qū)Ω吆０紊瞽h(huán)境的適應(yīng)性表現(xiàn)。此外，野生盤羊年齡較高與雜交F1代和被測綿羊有關(guān)，因?yàn)閯?dòng)物肝膽功能會(huì)隨著年齡的增長而出現(xiàn)下滑現(xiàn)象。

3．6 血液礦物元素 鈣、鎂和磷等微量元素在機(jī)體主要構(gòu)成晶體滲透壓、維持細(xì)胞的興奮性及神經(jīng)信號的傳遞。據(jù)報(bào)道，綿羊體內(nèi)的鈣沉積量越多，體重越大［12－14］。該試驗(yàn)結(jié)果表明盤羊鈣、磷含量均顯著高于家養(yǎng)綿羊和雜交F1代，盤羊生活在高海拔地區(qū)，體型大，骨骼健壯，這些指標(biāo)相對較高，正反映了盤羊?qū)ι瞽h(huán)境的適應(yīng)。雜交F1代血鈣和血磷含量的降低表明圈養(yǎng)羊存在發(fā)生鈣磷代謝障礙疾病的可能。因此，需要在雜交F1代的飼料中補(bǔ)充微量元素添加劑。據(jù)報(bào)道，血清鉀元素含量高的綿羊?qū)諝庵械难蹙哂懈叨鹊挠H和性［13－15］。該試驗(yàn)結(jié)果表明盤羊血清中鉀元素的含量較高，也正是其與高海拔地區(qū)相適應(yīng)的一種表現(xiàn)。

該試驗(yàn)結(jié)果表明各種礦物元素的含量除Na元素的含量較正常參考值偏高外，其余元素的含量雖然在盤羊、綿羊、雜交F1代之間存在一定差異，但都在正常參考范圍內(nèi)，而且雜交F1代6種元素的變化規(guī)律具有盤羊的特點(diǎn)，這說明盤羊及其雜交后代對環(huán)境的適應(yīng)性較強(qiáng)，雜交后代羊的遺傳性穩(wěn)定。

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