膨化豆粕替代不同比例魚粉對黃鱔生長性能、體成分、腸道消化酶活力及血清生化指標(biāo)的影響

張俊智 呂 富 郇志利 劉莊鵬 胡 毅 ＊＊ 王 萍 謝 駿

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長沙 410128;2.水產(chǎn)高效健康生產(chǎn)湖南省協(xié)同創(chuàng)新中心，常德415000;3.鹽城工學(xué)院海洋與生物工程學(xué)院，鹽城 224051;4.淮安新希望飼料有限公司，淮安 223005;5.農(nóng)業(yè)部淡水漁業(yè)和種質(zhì)資源利用重點實驗室，中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心，無錫 214081)

目前，魚粉價格昂貴，已成為限制水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)發(fā)展的關(guān)鍵因素［1－2］。由于豆粕中抗?fàn)I養(yǎng)因子的存在以及蛋氨酸的缺乏，飼料過量添加豆粕會影響水產(chǎn)動物的生長，降低飼料利用率［3］，破壞腸道形態(tài)［4］，降低消化酶活力及機體免疫力［5］。與豆粕相比，膨化豆粕經(jīng)過了膨化工藝，其內(nèi)部的抗?fàn)I養(yǎng)因子部分被破壞，對水產(chǎn)動物的負(fù)面影響降低［6］。

黃鱔屬亞熱帶魚類，主要分布于亞洲東部及南部，尤其在我國分布較廣，主要棲息于湖泊、水庫、池塘、溝渠、稻田等淡水水域中，具有較高的營養(yǎng)和藥用價值，在國內(nèi)外市場供不應(yīng)求，是重要的出口創(chuàng)匯產(chǎn)品，也是我國目前大力推廣養(yǎng)殖的重要名特優(yōu)水產(chǎn)品之一。然而，有關(guān)黃鱔營養(yǎng)學(xué)研究較少，目前國內(nèi)外研究報道主要見于蛋能比［7］、膽堿［8］、維生素 E［9］、肉骨粉替代魚粉［10］等方面的研究，本試驗通過研究飼料中不同比例膨化豆粕替代魚粉對黃鱔生長性能、體成分、腸道消化酶活力及血清生化指標(biāo)的影響，探索膨化豆粕的最佳替代比例，為降低黃鱔飼料成本提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗飼料

參照黃鱔商品飼料配方，配制一種以魚粉為蛋白質(zhì)源，魚油為脂肪源的基礎(chǔ)飼料，用膨化豆粕(益海嘉里集團產(chǎn)品)分別替代基礎(chǔ)飼料中0、12%、24%、36%和48%的魚粉，配制成膨化豆粕含量分別為 0(對照)、9.3%、18.6%、28.0%、37.2%的5種等氮等脂的試驗飼料，試驗飼料組成及營養(yǎng)水平見表1，試驗飼料氨基酸組成見表2。飼料原料粉碎過80目篩，準(zhǔn)確稱取各原料后混合均勻，在室溫條件下風(fēng)干至水分含量低于10%，置于－20℃冰柜中保存?zhèn)溆茫段骨凹?0%水調(diào)成面團狀使用。

表1 試驗飼料組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets(DM basis) %

表2 試驗飼料氨基酸組成Table 2 Am ino acid composition of experimental diets

續(xù)表2

1.2 飼養(yǎng)與管理

試驗用黃鱔為規(guī)格整齊的野生黃鱔，在湖南省常德市某黃鱔養(yǎng)殖場進行池塘網(wǎng)箱養(yǎng)殖，黃鱔入箱后2 d內(nèi)不投餌料，馴化時首先少量投喂比例為1∶1的蚯蚓和鮮魚漿，依照攝食情況逐漸地增加投喂量和鮮魚漿的投喂比例，直到黃鱔能完全攝食鮮魚漿后，開始添加粉狀試驗基礎(chǔ)飼料(鮮魚漿∶試驗飼料=4∶1)，依照攝食情況逐漸增加試驗飼料的投喂比例，直到黃鱔能完全攝食粉狀試驗飼料，整個馴化過程持續(xù)20 d，饑餓24 h后挑選規(guī)格均勻、健康的黃鱔進行分組，共5個組，每個組設(shè) 3 個重復(fù)，共 15 個網(wǎng)箱(1.5 m×2.0 m×1.0 m)，每個網(wǎng)箱放養(yǎng)100尾黃鱔，以黃鱔初始體重的3%～5%投喂，日投喂1次(17:00—18:00)，根據(jù)攝食情況，投喂量每周調(diào)整1次，記錄每個網(wǎng)箱黃鱔的采食量，養(yǎng)殖試驗持續(xù)90 d。試驗期間，水溫保持 在 (28.0±3.5)℃，溶 氧 濃 度 (6.0±0.5)mg/L，氨氮濃度低于 0.5 mg/L。

1.3 樣品收集與指標(biāo)測定

1.3.1 生長性能測定

養(yǎng)殖試驗結(jié)束后，黃鱔禁食24 h后進行稱重和采樣。試驗起始和結(jié)束時分別對各網(wǎng)箱中黃鱔進行計數(shù)和稱重，計算成活率(SR)、增重率(WGR)和飼料系數(shù)(FCR)。

式中:N0為初始尾數(shù);Nt為終末尾數(shù);W0為終末體重(g);Wt為初始體重(g);F為飼料投喂總量(g)。

養(yǎng)殖試驗結(jié)束后，每網(wǎng)箱隨機取5尾黃鱔記錄體長和體重，然后解剖，分離內(nèi)臟和肝臟，計算肝體比(HSI、臟體比(VSI)和肥滿度(CF)。

式中:Wh為肝臟重(g);Wt為體重(g);Wv為內(nèi)臟重(g);Lt為體長(cm)。

1.3.2 飼料及全魚營養(yǎng)成分分析

每個網(wǎng)箱隨機取3尾黃鱔，置于－20℃保存，用于全魚水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分含量的測定。飼料及全魚常規(guī)營養(yǎng)成分測定參照AOAC(1995)［11］的方法，其中水分含量測定采用105℃烘箱干燥恒重法，粗蛋白質(zhì)含量的測定采用凱氏定氮法，粗脂肪含量的測定采用索氏抽提法，粗灰分含量的測定采用550℃灼燒法。

1.3.3 飼料及肌肉中氨基酸組成分析

氨基酸組成的測定參照 GB/T 5009.124—2003《食品中氨基酸的測定》中方法并在此基礎(chǔ)上作適當(dāng)?shù)男薷?，具體如下:將待測樣品干燥粉碎后，稱取粉碎樣品 100 mg放入水解管，加入6 mol/L鹽酸5 m L，封住水解管管口，在110℃恒溫下干燥水解22 h，取出冷卻，打開水解管，將水溶液過濾，定容至100m L，取1 m L稀釋至10m L，取樣上機分析(氨基酸自動分析儀A300，德國)。由飼料氨基酸分析結(jié)果可計算出飼料中鮮味氨基酸(delicious am ino acid，DAA)、必 需 氨 基 酸(EAA)、總氨基酸(TAA)含量及EAA/TAA和必需氨基酸指數(shù)(essential am ino acid index，EAAI)。

式中:aa為飼料中某必需氨基酸占必需氨基酸總量的百分?jǐn)?shù);AA為黃鱔肌肉［12］中該必需氨基酸占必需氨基酸總量的百分?jǐn)?shù);n為比較的必需氨基酸個數(shù)。

1.3.4 腸道消化酶活性測定

養(yǎng)殖試驗結(jié)束后，每個網(wǎng)箱隨機取5尾黃鱔，解剖取其整個腸道，去除腸道糞便及附著物，用冰雙蒸水清洗腸道，濾紙吸干，稱重，搗碎后移入勻漿器內(nèi)冰水浴勻漿，在4℃下3 000 r/m in離心15 m in，取上清液備用，于24 h內(nèi)分析完畢。腸道胰蛋白酶(trypsase)、淀粉酶(amylase)和脂肪酶(lipase)活力均采用南京建成生物工程研究所的試劑盒測定。

1.3.5 血清生化指標(biāo)測定

養(yǎng)殖試驗結(jié)束后黃鱔禁食1 d，每個網(wǎng)箱隨機取8尾黃鱔，用1 m L注射器于尾靜脈處取血，將血液混合并置于無菌離心管中，4℃靜置過夜，3 500 r/m in離心15 m in，取上層血清置于－80℃冰箱保存?zhèn)溆?。血清總膽固?TC)、葡萄糖(GLU)、尿素氮(UN)、總蛋白(TP)含量及谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活力均采用南京建成生物工程研究所試劑盒測定。

1.4 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，采用 SPSS 12.0版統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析，若組間差異顯著(P＜0.05)，則作Duncan氏多重比較分析。

2 結(jié)果與分析

2.1生長性能

由表3可知，膨化豆粕替代不同比例魚粉對黃鱔的SR無顯著影響(P＞0.05)。與對照組相比，當(dāng)飼料中膨化豆粕含量大于18.6%時，黃鱔的WGR顯著下降(P＜0.05)，F(xiàn)CR 顯著升高(P＜0.05)。各組間黃鱔的HSI和VSI無顯著差異(P＞0.05)，但當(dāng)飼料中膨化豆粕含量達(dá)到37.2%時，CF較其他組顯著下降(P＜0.05)。

表3 膨化豆粕替代不同比例魚粉對黃鱔生長性能的影響Table 3 Effects of fish meal replacement by different proportions of extruded soybean meal on grow th performance of rice field eel(Monopterus albus)

2.2 體成分及肌肉氨基酸組成

由表4可知，膨化豆粕替代不同比例魚粉對黃鱔機體水分、粗灰分和粗蛋白質(zhì)含量沒有顯著影響(P＞0.05)。與對照組相比，當(dāng)飼料中膨化豆粕含量大于18.6%時，黃鱔機體粗脂肪含量顯著下降(P＜0.05)。由表5可知，與對照組相比，當(dāng)膨化豆粕含量大于18.6%時，黃鱔肌肉中EAA含量和EAA/TAA顯著降低(P＜0.05)，而肌肉中DEE及大部分氨基酸含量在各組間無顯著差異(P＞0.05)。

表4 膨化豆粕替代不同比例魚粉對黃鱔體成分的影響Table 4 Effects of fish meal replacement by different proportions of extruded soybean meal on body com position of rice field eel(Monopterus albus) %

表5 膨化豆粕替代不同比例魚粉對黃鱔肌肉氨基酸組成的影響(鮮重基礎(chǔ))Table 5 Effects of fish meal replacement by different proportions of extruded soybean meal on am ino acid composition in muscle of rice filed eel(Monopterus albus)(fresh weight basis) %

2.3 腸道消化酶活力

由表6可知，隨著飼料中膨化豆粕含量的升高，腸道胰蛋白酶活力呈先上升后下降的趨勢，當(dāng)飼料中膨化豆粕含量為18.6%時腸道胰蛋白酶活力顯著高于對照組(P＜0.05);與對照組相比，當(dāng)飼料中膨化豆粕含量大于18.6%時腸道脂肪酶和淀粉酶活力均顯著降低(P＜0.05)。

表6 膨化豆粕替代不同比例魚粉對黃鱔腸道消化酶活力的影響Table 6 Effects of fish meal replacement by different proportions of extruded soybean meal on digestive enzyme activities in intestine of rice field eel(Monopterus albus)

2.4 血清生化指標(biāo)

由表7可知，隨著飼料中膨化豆粕含量的升高，血清TC含量呈下降的趨勢，但各組差異不顯著(P＞0.05)。當(dāng)飼料中膨化豆粕含量大于18.6%時，血清GLU含量顯著低于對照組(P＜0.05)。當(dāng)飼料中膨化豆粕含量達(dá)到37.2%時，血清UN含量顯著高于對照組(P＜0.05)。膨化豆粕替代不同比例魚粉后血清GOT活力均顯著下降(P＜0.05)，而GPT活力呈不同程度的上升，且飼料中膨化豆粕含量為9.3%和18.6%時與對照組差異顯著(P＜0.05)。

表7 膨化豆粕替代不同比例魚粉對黃鱔血清生化指標(biāo)的影響Table 7 Effects of fish meal replacement by different proportions of extruded soybean meal on serum biochem ical indexes of rice field eel(Monopterus albus)

3 討論

3.1 膨化豆粕替代不同比例魚粉對黃鱔生長性能的影響

本試驗結(jié)果表明，以膨化豆粕替代不同比例的魚粉，當(dāng)飼料中膨化豆粕含量超過18.6%時會降低黃鱔的生長和飼料利用率，其替代比例小于齊口 裂 腹 魚 (Schizothorax prenati)［13］、金 頭 鯛(Sparus aurata L.)［14］，與 虹 鱒 (Oncorhynchus mykiss)［15］、籃子魚(Siganus guttatus)［16］、大黃魚(Pseudosciaena crocea R.)［17］相似，大于金槍魚(Thunnus orientalis)［18］。飼料中高含量的膨化豆粕影響黃鱔生長可能與以下幾方面有關(guān):1)黃鱔主要通過嗅覺來覓食，對飼料中帶特定氣味的誘食劑較敏感。楊代勤等［19］報道，由甘氨酸+丙氨酸組成的復(fù)合氨基酸對黃鱔有明顯的促攝食效果。本試驗中，對試驗飼料的氨基酸組成分析表明，隨著膨化豆粕含量的升高，飼料中甘氨酸和丙氨酸含量下降，且豆粕中的豆腥味會影響飼料風(fēng)味。養(yǎng)殖試驗期間觀察到黃鱔攝食高膨化豆粕飼料時攝食時間延長。2)膨化豆粕雖經(jīng)過高溫膨化后消除了一些熱敏性抗?fàn)I養(yǎng)因子，如胰蛋白酶抑制因子和大豆抗原物質(zhì)，但仍存在非熱敏性抗?fàn)I養(yǎng)因子，如非淀粉多糖、植酸等，非淀粉多糖影響飼料中營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收［20］，植酸能與 Zn2+、Ca2+、Cu2+及Fe2+等金屬離子螯合形成穩(wěn)定的不溶性絡(luò)合物，降低魚類對這些礦物質(zhì)元素的利用，并且植酸對淀粉酶和脂肪酶的活力有抑制作用［21］，本試驗結(jié)果證實飼料中高含量膨化豆粕會降低黃鱔腸道淀粉酶和脂肪酶活力。3)EAAI可用來評價配合飼料的營養(yǎng)價值［12］。本試驗結(jié)果表明，EAAI隨飼料中膨化豆粕含量的升高而下降，說明膨化豆粕替代魚粉后降低了黃鱔配合飼料的營養(yǎng)價值，可能與膨化豆粕中EAA比例不平衡有關(guān)，尤其是蛋氨酸的缺乏，在本試驗中，28.0%和37.2%膨化豆粕飼料組的蛋氨酸含量比對照組分別降低了44.48%和57.37%。有研究發(fā)現(xiàn)，在高植物蛋白質(zhì)飼料中添加外源晶體氨基酸可提高魚類生長［22－23］，而本實驗室前期在黃鱔的研究中并未發(fā)現(xiàn)此現(xiàn)象［24］。

本研究發(fā)現(xiàn)，膨化豆粕替代不同比例魚粉對黃鱔HSI和VSI無顯著影響，與在大埃及胡子鯰(Clarias fuscus)［25］和 翹 嘴 紅鲌(Erythroculter ilishaeformis)［26］上的研究結(jié)果相似，但飼料中高含量膨化豆粕使黃鱔CF降低，在大菱鲆(Scophthalmusmaximus)的研究中也得到相同的結(jié)果［27］，可能與高含量膨化豆粕會影響黃鱔的生理狀態(tài)和營養(yǎng)狀況有關(guān)。

3.2 膨化豆粕替代不同比例魚粉對黃鱔體成分及肌肉氨基酸組成的影響

本試驗結(jié)果表明，膨化豆粕替代不同比例魚粉對黃鱔機體水分、粗灰分和粗蛋白質(zhì)含量無顯著影響，與在虹鱒［28］和大西洋鮭(Salmo salar)［29］上的研究結(jié)果一致，但高含量的膨化豆粕降低了魚體粗脂肪含量，與在中華鱉(Trionyx Sinensis)［30］及金箔魚(Barbodes altus)［31］上的結(jié)果一致，可能與膨化豆粕中非淀粉多糖降低試驗魚對脂肪的消化，進而降低脂肪在魚體內(nèi)沉積有關(guān)［32］，本試驗結(jié)果也表明飼料中高含量膨化豆粕降低了黃鱔腸道脂肪酶活力。EAA/TAA可以評價蛋白質(zhì)質(zhì)量的好壞［33］，本研究結(jié)果表明，當(dāng)飼料中膨化豆粕含量高于18.6%時，黃鱔肌肉中 EAA/TAA顯著下降，表明飼料中添加高含量膨化豆粕會影響肌肉營養(yǎng)價值。而各組黃鱔肌肉DAA含量基本一致，表明飼料中高含量膨化豆粕不會影響黃鱔肌肉的鮮味。

3.3 膨化豆粕替代不同比例魚粉對黃鱔腸道消化酶活力的影響

腸道消化酶是一類由消化腺分泌的水解酶，能將大分子的蛋白質(zhì)、脂肪和淀粉分別水解為小分子的氨基酸、甘油三酯和葡萄糖，其活力在一定程度上可反映魚類對飼料營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收能力。本試驗結(jié)果表明，當(dāng)飼料中膨化豆粕含量低于18.6%時，對黃鱔生長沒有不良影響，而腸道胰蛋白酶活力逐漸升高，可能原因是水產(chǎn)動物對植物蛋白質(zhì)的消化利用率低于魚粉，機體則通過增強胰蛋白酶的合成與分泌來提高飼料的利用率。當(dāng)飼料中膨化豆粕含量大于18.6%時，黃鱔的增重率及胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活力均下降，與羅非魚(Tilapia)［34］、鱸魚(Lateolabrax japonicus)［35］及胭脂魚(Myxocyprinus asiaticus)［36］的研究結(jié)果相似，這可能與豆粕中非熱敏性抗?fàn)I養(yǎng)因子如植酸、皂苷及異黃酮的存在降低消化酶活力有關(guān)［37］。

3.4 膨化豆粕替代不同比例魚粉對黃鱔血清生化指標(biāo)的影響

魚類血液生理生化指標(biāo)能夠反映動物機體的健康狀況和生理狀況。膽固醇是皮質(zhì)類激素和性激素的前體，對機體糖、蛋白質(zhì)和脂肪代謝有著重要的作用［38］，由于植物蛋白質(zhì)中類雌激素異黃酮的存在，使得植物蛋白質(zhì)替代魚粉可降低血液中膽固醇的含量［39－40］，本試驗中也觀察到血清 TC含量隨飼料中膨化豆粕含量的升高而下降的趨勢，而各組間差異不顯著，可能與養(yǎng)殖周期短有關(guān)。血糖是體內(nèi)細(xì)胞代謝活動所需能量的直接來源，本試驗中，當(dāng)飼料中膨化豆粕含量大于18.6%時，血清GLU含量顯著降低，與在牙鲆［41］上的研究結(jié)果相似，說明飼料中過量添加膨化豆粕會影響黃鱔的能量代謝。血清GOT和GPT活力與肝功能相關(guān)，血清GPT活力上升可能是與膨化豆粕含量升高引起肝臟受到一定的損傷有關(guān)［42］，也可能與生長有關(guān)，在一定范圍內(nèi)，快速生長也可能使轉(zhuǎn)氨酶活力升高;血清GOT活力下降可能是因為飼料中膨化豆粕含量升高使蛋白質(zhì)合成下降，造成生長速度下降所致。

4 結(jié)論

在本試驗條件下，以膨化豆粕替代魚粉，當(dāng)飼料中膨化豆粕含量低于18.6%時，黃鱔生長、飼料效率、體成分、腸道消化酶活力及肌肉營養(yǎng)價值不會受到影響，因此，黃鱔飼料中可添加18.6%的膨化豆粕，從而降低黃鱔養(yǎng)殖成本，提高經(jīng)濟效益。

［1］ FAO.The state of world fisheries and aquaculture［R］.Rome:Food and Agriculture Organization of the United Nations，2009.

［2］ TANTIKITTIC，SANGPONG W，CHIAVAREESAJJA S.Effects of defatted soybean protein levels on grow th performance and nitrogen and phosphorus excretion in Asian seabass(Lates calcarifer)［J］.Aquaculture，2005，248(1/2/3/4):41－50.

［3］ REFSTIE S，STOREBAKKEN T，ROEM A J.Feed consum ption and conversion in A tlantic salmon(Salmo salar)fed diets w ith fish meal，extracted soybean meal or soybean meal w ith reduced content of oligosaccharides，trypsin inhibitors，lectins and soya antigens［J］.Aquaculture，1998，162(3/4):301－312.

［4］ BAKKE-MCKELLEP A M，PRESSCM，BAEVERFJORD G，et al.Changes in immune and enzyme histochem ical phenotypes of cells in the intestinal mucosa of Atlantic salmon，Salmo salar L.，w ith soybean meal-induced enteritis［J］.Journal of Fish Diseases，2000，23(2):115－127.

［5］ LIN SM，MAIK S，TAN B P.Effect of soybean meal replacement by rapeseed-cottonseed compound on grow th，body composition and immunity of tilapia Oreochromis niloticus × O.aureus［J］.Oceanologia Et Limnologia Sinica，2007，38(2):168－173.

［6］ OPAPEJU FO，GOLIAN A，NYACHOTIC M，et al.Animo acid digestibility in dry extruded-expelled soybean meal fed to pigs and poultry［J］.Journal of Animal Science，2006，84(5):1130－1137.

［7］ 楊代勤，陳芳，李道霞，等.黃鱔的營養(yǎng)素需要量及飼料最適能量蛋白比［J］.水產(chǎn)學(xué)報，2000，24(3):259－262.

［8］ 楊代勤，陳芳，阮國良.飼料中添加膽堿對黃鱔生長、組織脂肪含量及消化酶活性的影響［J］.水產(chǎn)學(xué)報，2006，30(5):676－682.

［9］ 張國輝，何瑞國，張世萍，等.維生素E對黃鱔繁殖性能的影響［J］.水生生物學(xué)報，2007，31(2):196－200.

［10］ 曹志華，羅靜波，文華，等.肉骨粉代替不同水平的魚粉對黃鱔生長的影響［J］.湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，48(8):1971－1972.

［11］ AOAC.Officialmethods of analysis of AOAC international［M］.16th ed.Arlington，VA:AOAC International，1995.

［12］ 陳愛蓮，蘇婭.利用微軟EXCEL計算必需氨基酸指數(shù)［J］.糧食與飼料工業(yè)，1998(10):29－30.

［13］ 向梟，周興華，陳建，等.飼料中豆粕蛋白替代魚粉蛋白對齊口裂腹魚幼魚生長性能、體成分及血液生化指標(biāo)的影響［J］.水產(chǎn)學(xué)報，2012，36(5):723－731.

［14］ KOKOU F，RIGOSG，HENRY M，et al.Grow th performance，feed utilization and non-specific immune response of gilthead sea bream(Sparus aurata L.)fed graded levels of a bioprocessed soybean meal［J］.Aquaculture，2012，364－365:74－81.

［15］ 陸陽，楊雨虹，王裕玉，等.不同比例膨化豆粕替代魚粉對虹鱒生長、體成分及血液學(xué)指標(biāo)的影響［J］.動物營養(yǎng)學(xué)報，2010，22(1):221－227.

［16］ 高榮兵，莊平，章龍珍，等.豆粕替代魚粉對點籃子魚生長性能的影響［J］.水產(chǎn)學(xué)報，2010，34(10):1534－1540.

［17］ 張帆，張文兵，麥康森，等.飼料中豆粕替代魚粉對大黃魚生長、消化酶活性和消化道組織學(xué)的影響［J］.中國海洋大學(xué)學(xué)報，2012，42(增刊):75－82.

［18］ BISWASA，BISWASB K，ITO J，etal.Soybeanmeal can partially replace enzyme-treated fish meal in the diet of juvenile pacific bluefin tuna Thunnus orientalis［J］.Fisheries Science，2011，77(4):615－621.

［19］ 楊代勤，嚴(yán)安生，陳芳.幾種氨基酸及香味物質(zhì)對黃鱔誘食活性的初步研究［J］.水生生物學(xué)報，2002，26(2):205－208.

［20］ 艾慶輝，謝小軍.南方鲇的營養(yǎng)學(xué)研究:飼料中大豆蛋白水平對生長的影響［J］.水生生物學(xué)報，2002，26(1):57－65.

［21］ 苗雪霞，陳紅歌，李秀蘭，等.植酸酶對肉雞生長及磷利用率的影響［J］.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，1999，33(1):68－71.

［22］ CHENG Z J，HARDY RW，USRY JL.Effects of lysine supplementation in plant protein-based diets on the performance of rainbow trout(Oncorhynchus mykiss)and apparent digestibility coefficients of nutrients［J］.Aquaculture，2003，215(1/2/3/4):255－265.

［23］ EL-SAIDY D M S D，GABER M M A.Com plete replacement of fish meal by soy bean meal w ith dietary L-lysine supplementation for Nile tilapia Oreochromis niloticus(L.)fingerlings［J］.Journal of the World Aquaculture Social，2002，33(3):297－306.

［24］ 馬曉.肉骨粉替代魚粉對黃鱔(Monopterus albus)生長性能及營養(yǎng)成分的影響［D］.碩士學(xué)位論文.長沙:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2011:45－50.

［25］ 吳莉芳，安麗影，秦貴信，等.不同大豆蛋白源對埃及胡子鲇生長、飼料利用及體成分的影響［J］.水生生物學(xué)報，2009，33(6)，1214－1218.

［26］ 王桂芹，周洪旗，陳建明，等.翹嘴紅鲌對飼料蛋白的營養(yǎng)需求及豆粕對魚粉的適宜替代量［J］.中國水產(chǎn)科學(xué)，2006，13(2):277－285.

［27］ DAY O J，PLASCENCIA GONZáLEZ H G.Soybean protein concentrate as a protein source for turbot Scophthalmusmaximus L.［J］.Aquaculture Nutrition，2000，6(4):221－228.

［28］ DAVIES S J，MORRISPC.Influence ofmultiple am ino acid supplementation on the performance of rainbow trout，Oncorhynchusmykiss(W albaum)，fed soya based diets［J］.Aquaculture Research，1997，28(1):65－74.

［29］ REFSTIE S，STOREBAKKEN T，BAEVERFJORD G，etal.Long-term protein and lipid grow th of Atlantic salmon(Salmo salar)fed diets w ith partial replacement of fish meal by soy protein products atmedium or high lipid level［J］.Aquaculture，2001，193(1/2):91－106.

［30］ 賈艷菊，楊振才.膨化飼料動植物蛋白比對中華鱉稚鱉生長特性的影響［J］.水生生物學(xué)報，2007，31(4):570－575.

［31］ ELANGOVAN A，SHIM K F.The influence of replacing fish meal partially in the diet w ith soybean meal on grow th and body com position of juvenile tin foil barb(Barbodes altus)［J］.Aquaculture，2000，189(1/2):133－144.

［32］ LEENHOUWERS J I， ADJEI-BOATENG D，VERRETH JA J，et al.Digesta viscosity，nutrient digestibility and organ weights in A frican catfish(Clarias gariepinus)fed diets supplemented w ith different levels of a soluble non-starch polysaccharide［J］.Aquaculture Nutrition，2006，12(2):111－116.

［33］ 李正忠.花粉、靈芝與珍珠中必需氨基酸的定量測定與分析比較［J］.氨基酸雜志，1988(4):41－43.

［34］ LIN S M，LUO L.Effects of different levels of soybean meal inclusion in replacement for fish meal on grow th，digestive enzymes and transam inase activities in practical diets for juvenile tilapia，Oreochromis niloticus× O.aureus［J］.Animal Feed Science and Technology，2011，168(1/2):80－87.

［35］ 張璐，艾慶輝，麥康森，等.植酸酶和非淀粉多糖酶對鱸魚生長和消化酶活性的影響［J］.水生生物學(xué)報，2009，33(1):82－88.

［36］ YU D H，GONG SY，YUAN Y C，etal.Effects of replacing fish meal w ith soybean meal on grow th，body composition and digestive enzyme activities of juvenile Chinese sucker，Myxocyprinus asiaticus［J］.Aquaculture Nutrition，2013，19(1):84－90.

［37］ DENSTADLIV，SKREDE A，KROGDAHL A，et al.Feed intake，grow th，feed conversion，digestibility，enzyme activities and intestinal structure in Atlantic salmon(Salmo salar L.)fed graded levels of phytic acid［J］.Aquaculture，2006，256(1/2/3/4):365 －376.

［38］ 沈同，王鏡巖.生物化學(xué)［M］.2版.北京:高等教育出版社，1996:193－201.

［39］ KAUSHIK S J，CRAVEDI J P，LALLES J P，et al.Partial or total replacement of fish meal by soybean protein on grow th，protein utilization，potential estrogenic or antigenic effects，cholesterolem ia and flesh quality in rainbow trout(Oncorhynchusmykiss)［J］.Aquaculture，1995，133(3/4):257－274.

［40］ SETCHELL K D R，CASSIDY A.Dietary isoflavones:biological effects and relevance to human health［J］.The Journal of Nutrition，1999，129(3):758S－767S.

［41］ DENG JM，MAIK S，AIQ H，et al.Effects of replacing fishmealw ith soy protein concentrate on feed intake and grow th of juvenile Japanese ？ ounder，Paralichthys olivaceus［J］.Aquaculture，2006，258(1/2/3/4):503－513.

［42］ 劉襄河，葉繼丹，王子甲，等.飼料中豆粕替代魚粉比例對牙鲆生長性能及生化指標(biāo)的影響［J］.水產(chǎn)學(xué)報，2010，34(3):450－458.