BioSystems A25全自動(dòng)特定蛋白分析儀測(cè)定血漿CRP的性能評(píng)價(jià)

曹 波，陳紅兵，郁 飛，楊志誠(chéng)，高 嶺

(南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科，南京 210008)

?

·論 著·

BioSystems A25全自動(dòng)特定蛋白分析儀測(cè)定血漿CRP的性能評(píng)價(jià)

曹 波，陳紅兵△，郁 飛，楊志誠(chéng)，高 嶺

(南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科，南京 210008)

目的 對(duì)新引進(jìn)的BioSystems A25全自動(dòng)特定蛋白分析儀開(kāi)展C反應(yīng)蛋白(CRP)項(xiàng)目進(jìn)行性能驗(yàn)證。方法 參考美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)系列文件和相關(guān)文獻(xiàn)，結(jié)合工作實(shí)際對(duì)血漿CRP項(xiàng)目的精密度、正確度、線性及參考區(qū)間進(jìn)行評(píng)價(jià)，并與本實(shí)驗(yàn)室原有的快速CRP測(cè)試儀(QuikRead go)結(jié)果進(jìn)行比對(duì)。結(jié)果 批內(nèi)變異系數(shù)(CV)為2.78%，兩個(gè)水平的批間CV分別為2.83%和2.11%，均小于廠家聲明的CV≤7.00%；正確度驗(yàn)證，相對(duì)偏差8.83%，小于廠家聲明(≤10.00%)；在線性評(píng)價(jià)中(1.0～120 mg/L)，回歸方程為Y=1.051 1X-2.730 0，r2=0.991 9，r=0.996；20例健康參考個(gè)體CRP檢測(cè)結(jié)果均在廠家提供的參考區(qū)間(0.1～10 mg/L)內(nèi)；本法與快速CRP測(cè)試儀(QuikRead go)結(jié)果進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)，按α=0.05水準(zhǔn)，2臺(tái)儀器檢測(cè)結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 用BioSystems A25全自動(dòng)特定蛋白分析儀測(cè)定血漿CRP項(xiàng)目各項(xiàng)性能驗(yàn)證指標(biāo)均合格，可用于臨床標(biāo)本檢測(cè)。

性能評(píng)價(jià)； C反應(yīng)蛋白； BioSystems A25全自動(dòng)特定蛋白分析儀； QuikRead go檢測(cè)儀

西班牙BioSystems(博士泰)公司的A25全自動(dòng)特種蛋白分析儀具有快速批量檢測(cè)C反應(yīng)蛋白(CRP)的特點(diǎn)，為引進(jìn)該儀器，本實(shí)驗(yàn)室依據(jù)美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)(CLSI)相關(guān)文件以及相關(guān)文獻(xiàn)，并結(jié)合實(shí)際工作，對(duì)其精密度、正確度、檢測(cè)線性范圍以及參考范圍作性能評(píng)價(jià)，現(xiàn)報(bào)道如下[1-3]。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 本院就診患者或體檢健康人員的EDTA抗凝的新鮮血漿，無(wú)溶血、黃疸和脂血，于4 ℃條件下保存。

1.2 儀器與試劑 試驗(yàn)儀器為西班牙BioSystems(博士泰)公司A25型全自動(dòng)特種蛋白分析儀及配套CRP檢測(cè)試劑、2個(gè)質(zhì)控品(批號(hào)分別為046XA、044XA)和校準(zhǔn)品(溯源：CRM470，批號(hào)：212014001，靶值：62.2 mg/L，非目前儀器使用校準(zhǔn)品)。比較儀器為芬蘭Orion Diagnostica Oy公司的QuikRead go(快速CRP測(cè)試儀)，試劑與質(zhì)控品均為其公司配套產(chǎn)品。

1.3 方法

1.3.2 正確度評(píng)價(jià) 使用A25全自動(dòng)特種蛋白分析儀連續(xù)檢測(cè)定值校準(zhǔn)品5 d，每批進(jìn)行2次重復(fù)。利用10次測(cè)量值計(jì)算均值、標(biāo)準(zhǔn)差和標(biāo)準(zhǔn)誤及相對(duì)偏差的絕對(duì)值。與廠家聲明比較，若質(zhì)控品的測(cè)定均值與其標(biāo)示值比較，相對(duì)偏差小于或等于10.00%，則認(rèn)為試驗(yàn)數(shù)據(jù)可以證實(shí)真實(shí)度，否則不能夠證實(shí)。

1.3.3 線性范圍驗(yàn)證 參照CLSI的EP6-A方案選擇高值混合血漿樣本(H)、低值混合血漿樣本(L)，水平覆蓋分析測(cè)量范圍上、下限(分別為120、1.0 mg/L)[3]。將H、L樣本按照1L、0.8L+0.2H、0.6L+0.4H、0.4L+0.6H、0.2L+0.8H、1H各自配制混合，形成6個(gè)系列評(píng)價(jià)樣本。在保證A25型全自動(dòng)特種蛋白分析儀校準(zhǔn)和質(zhì)控狀態(tài)良好情況下，每個(gè)樣本重復(fù)測(cè)定4次，求其平均值作為測(cè)量結(jié)果，并以測(cè)量結(jié)果作為Y值，計(jì)算水平為X值，作X-Y坐標(biāo)圖，并進(jìn)行回歸分析處理，求出相關(guān)系數(shù)r，與廠家聲明(r≥0.99)比較來(lái)驗(yàn)證。

1.3.4 參考區(qū)間驗(yàn)證 參照CLSI C28-A2文件中提供的方法，選擇20例能夠合理代表實(shí)驗(yàn)室選擇的健康體檢人員的標(biāo)本，在保證儀器校準(zhǔn)和質(zhì)控狀態(tài)良好情況下用BioSystems A25全自動(dòng)特種蛋白分析儀隨機(jī)測(cè)量[4]。結(jié)果不超過(guò)2例(或10%)的觀察值在原始報(bào)告的參考區(qū)間外，則可以接受；3例以上超出界限，重新選擇20例參考個(gè)體，結(jié)果不超過(guò)2例(或10%)的觀察值在原始報(bào)告參考區(qū)間外，則也可以接受。再次有3例及以上超過(guò)參考限，重新檢查操作系統(tǒng)，如果操作沒(méi)有問(wèn)題，則認(rèn)為該參考區(qū)間不適合于當(dāng)?shù)厝巳?，需要重新建立參考區(qū)間。

1.3.5 儀器比對(duì) 選用20例患者標(biāo)本，其水平覆蓋方法的可報(bào)告范圍，每天用試驗(yàn)儀器A25型全自動(dòng)特種蛋白分析儀和比較儀器快速CRP測(cè)試儀(QuikRead go，溯源：ERM-DA472)在4 h內(nèi)各檢測(cè)5例樣本，連續(xù)檢測(cè)4 d。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 將20對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)計(jì)算，按α=0.05水準(zhǔn)，P<0.05為兩儀器測(cè)定結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 精密度驗(yàn)證情況 見(jiàn)表1。批內(nèi)精密度CV值為2.78%，批間精密度CV值分別為2.83%、2.11%，均小于廠家聲明的CV≤7.00%，故通過(guò)驗(yàn)證。

表1 精密度驗(yàn)證結(jié)果

2.3 線性評(píng)價(jià)情況 將預(yù)期值和實(shí)測(cè)值進(jìn)行比較,得到回歸方程：Y=1.051 1X-2.730 0，r2=0.991 9，r=0.996，大于廠家聲明(r≥0.99)，故線性符合要求，見(jiàn)圖1。

圖1 BioSystems A25全自動(dòng)特種蛋白分析儀測(cè)定

2.4 參考區(qū)間驗(yàn)證 廠家提供的CRP參考區(qū)間分別為0.1～10 mg/L。通過(guò)檢測(cè)20例實(shí)驗(yàn)室選擇的健康參考個(gè)體得出20例標(biāo)本CRP檢測(cè)結(jié)果均在參考區(qū)間內(nèi)，故可以使用廠家提供的參考范圍。

2.5 儀器比對(duì) 用快速CRP測(cè)試儀(QuikRead go)與A25全自動(dòng)特種蛋白分析儀分別檢測(cè)20例患者血漿CRP，進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)，t=-1.232，P>0.05，按α=0.05水準(zhǔn)，2臺(tái)儀器檢測(cè)結(jié)果一致。

3 討 論

CRP是急性時(shí)相反應(yīng)蛋白之一，大部分是由人體的肝臟所合成的，其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，在血中半衰期大約為19 h，其水平主要依賴于肝臟的生成量[4-5]。一般情況下，健康人群體內(nèi)CRP水平均比較低，在1～10 mg/L，當(dāng)人體在理化因素刺激、感染、腫瘤或是受到急性創(chuàng)傷之后的7 h，血水平就會(huì)急劇上升，每天合成量可以達(dá)到1 g[6]。

隨著CRP測(cè)定在臨床的廣泛應(yīng)用，尤其CRP與白細(xì)胞計(jì)數(shù)聯(lián)合檢驗(yàn)的方法對(duì)于兒科醫(yī)師制訂治療方案具有重要的參考作用，有利于實(shí)現(xiàn)個(gè)性化治療的需求，同時(shí)，還可以避免使用不必要的抗菌藥物，保證患兒的健康恢復(fù)[7]。本實(shí)驗(yàn)室原有快速CRP測(cè)試儀(QuikRead go)已不能適應(yīng)臨床標(biāo)本量的日益增加，故引進(jìn)BioSystems A25全自動(dòng)特種蛋白分析儀來(lái)批量檢測(cè)CRP。而通常1個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)應(yīng)用到臨床之前，實(shí)驗(yàn)室必須對(duì)其進(jìn)行性能驗(yàn)證，最主要的性能指標(biāo)包括精密度、正確度、檢測(cè)線性范圍以及參考范圍是否符合當(dāng)?shù)厝巳篬8-9]。

而隨著檢驗(yàn)技術(shù)的不斷發(fā)展、項(xiàng)目的不斷增加、儀器及試劑品種繁多，檢驗(yàn)質(zhì)量的控制變得越來(lái)越重要。為確保臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確與可靠，《美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)法案修正案》和美國(guó)病理家學(xué)會(huì)要求參加認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)室，在開(kāi)展某1項(xiàng)新的檢測(cè)項(xiàng)目、更換檢測(cè)系統(tǒng)或儀器、改變檢測(cè)試劑盒廠商時(shí)，實(shí)驗(yàn)室需對(duì)其相關(guān)方法學(xué)分析性能予以驗(yàn)證，對(duì)廠商提供的評(píng)價(jià)資料中的主要性能予以確認(rèn)[10]。

本研究參照CLSI文件結(jié)合實(shí)際工作，經(jīng)過(guò)檢測(cè)、計(jì)算，BioSystems A25全自動(dòng)特種蛋白分析儀測(cè)定血漿CRP，其批內(nèi)、批間精密度均達(dá)到廠家聲明性能；正確度方面，是使用參考物質(zhì)正確度驗(yàn)證方案，在5 d內(nèi)每批進(jìn)行2次重復(fù)，然后計(jì)算均值以及相對(duì)偏差，相對(duì)偏差在廠家聲明范圍內(nèi)；線性回歸r=0.996，故認(rèn)為BioSystems A25全自動(dòng)特種蛋白分析儀測(cè)定CRP在給定的范圍內(nèi)呈線性；參考范圍的驗(yàn)證結(jié)果顯示，檢測(cè)20例能夠合理代表健康總體的樣本，沒(méi)有2例超過(guò)廠家給定的參考范圍，故認(rèn)為可以使用廠家的參考范圍；與本實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的儀器快速CRP測(cè)試儀(QuikRead go CRP)進(jìn)行的配對(duì)t檢驗(yàn)比對(duì)，顯示兩者結(jié)果一致，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

BioSystemsA25全自動(dòng)特種蛋白分析儀速度可達(dá)200測(cè)試/小時(shí)，一次進(jìn)樣72份，能很好地適應(yīng)批量標(biāo)本的測(cè)定，如能實(shí)現(xiàn)不間斷連續(xù)上樣，比色盤(pán)自動(dòng)循環(huán)，則能更好地發(fā)揮其速度優(yōu)勢(shì)。綜上所述，此儀器采用乳膠比濁法檢測(cè)CRP的主要分析性能驗(yàn)證結(jié)果符合質(zhì)量目標(biāo)要求，可用于臨床標(biāo)本檢測(cè)。同時(shí)，對(duì)每一檢測(cè)系統(tǒng)的性能進(jìn)行有效地評(píng)估和監(jiān)測(cè)，有助于提高實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

[1]Kindmark CO.The concentration of C-reactive protein in sera from healthy individuals[J].Scabd J Clin Lab Invest,1972,29(5):407-411.

[2]NCCLS.EP-15A user demonstration of performance for precision and accuracy:approved guideline[S].NCCLS,Wayne,PA:2001.

[3]NCCLS.E6-A2.Evaluation of the linearity of quantitative measurement procedures:a statistical approach:approved guideline[S].NCCLS,Wayne,PA:2003.

[4]程文琴.章復(fù)湘.張如.醫(yī)院傳染病信息管理系統(tǒng)的應(yīng)用研究[J]．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012,22(14):3107-3109．

[5]Pepys MB,Hirschfield GM.C-reactive protein:acritical update[J].J Clin Invest,2003,111(7):1805-1812.

[6]周俏梅.持續(xù)質(zhì)量改進(jìn)法在基層醫(yī)院傳染病監(jiān)測(cè)管理中的應(yīng)用[J]．浙江預(yù)防醫(yī)學(xué),2011,23(5):90-91．

[7]毛中美，龔敏，諸葛小寅.C-反應(yīng)蛋白與白細(xì)胞檢測(cè)在兒科感染性疾病中應(yīng)用的評(píng)價(jià)[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2014,24(7):1782-1786.

[8]張葵.定量檢測(cè)系統(tǒng)方法學(xué)性能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的基本方法[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2009,27(5)：321-323.

[9]魏昊，叢玉隆．醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理與認(rèn)可指南[M]．北京：中國(guó)計(jì)量出版社,2004:72-75.

[10]韓靜,胡梅,楊桂花,等.BNⅡ特種蛋白儀測(cè)定IgG、IgA和IgM性能評(píng)價(jià)[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2013,34(10):1292-1294.

Performance evaluation of BioSystems A25 automatic specific protein analyzer in measuring plasma CRP

CAOBo,CHENHong-bing△,YUFei,YANGZhi-cheng,GAOLing

(DepartmentofClinicalLaboratory,AffiliatedNanjingChildren′sHospitalofNanjingMedicalUniversity,Nanjing,Jiangsu210008,China)

Objective To verify the performance of newly introduced BioSystems A25 automatic specific protein analyzer in measuring C-reactive protein(CRP).Methods By referring to the U.S.Clinical and Laboratory Standards Institute(CLSI) series of documents and related literature,combined with actual work,the precision,accuracy,linearity and reference intervals of plasma CRP item were evaluated and compared with the results detected by the rapid CRP test meter(QuikRead go).Results The intra-assay coefficient of variation(CV) was 2.85%,the inter-assay coefficients of variation(CV) in two levels were 2.83% and 2.11% separately,both were less than the manufacturer declaration′s (CV≤ 7.00%);in the accuracy verification,relative deviation was 8.83%,which was less than the manufacturer declaration′s (≤10.00%);in the online evaluation(1.0-120 mg/L),the regression equation wasY=1.051 1X-2.730 0,r2=0.991 9,r=0.996;the CRP test results in 20 healthy reference individuals were within the reference interval provided by the manufacturer (0.1-10 mg/L);the results detected by this instrument and the results detected by the rapid CRP test instrument (QuikRead go) were performed the pairedttest,according to α=0.05 standards,there is no significantly difference in the detection results between the two instruments(P>0.05).Conclusion The various performance verification indexes of the BioSystems A25 automatic specific protein analyzer in testing plasma CRP are qualified and can be used in clinical sample detection.

performance evaluation; C-reactive protein; BioSystems A25 automatic specific protein analyzer; QuikRead go test meter

曹波，男，本科，主管技師，主要從事臨床檢驗(yàn)工作?！?/p>

，E-mail:chenghb1999@126.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.17.037

A

1672-9455(2015)17-2577-02

2015-03-20

2015-03-25)