血清EB病毒抗體水平與鼻咽癌患者預(yù)后的關(guān)系*

令狐穎，苗 燕，謝 楓，胡德峰

(貴州省人民醫(yī)院體檢中心，貴陽(yáng) 550002)

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·論 著·

血清EB病毒抗體水平與鼻咽癌患者預(yù)后的關(guān)系*

令狐穎，苗 燕，謝 楓，胡德峰△

(貴州省人民醫(yī)院體檢中心，貴陽(yáng) 550002)

目的 分析治療前EB病毒Zta-IgA與VCA-IgA抗體濃度與鼻咽癌預(yù)后的關(guān)系。方法 選取2009年2月至2011年2月收治的130例EB病毒Zta-IgA與VCA-IgA抗體陽(yáng)性患者。根據(jù)抗體濃度分為低濃度組(1∶5～1∶20)、中濃度組(1∶40～1∶80)和高濃度組(>1∶160)。隨訪36個(gè)月，計(jì)算并比較各組患者生存情況。結(jié)果 不同抗體濃度組，臨床分期和分化程度之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Zta-IgA抗體低、中、高滴度組的放療近期總有效率分別為90.32%、68.57%、51.56%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=20.199，P=0.003)。VCA-IgA抗體低、中、高滴度組的放療近期總有效率分別為90.91%、71.88%、49.23%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=26.370，P=0.000)。Zta-IgA抗體高滴度組、中滴度組、低滴度組平均生存時(shí)間分別為(23.78±1.10)、(27.39±2.45)、(31.11±2.10)個(gè)月，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.122，P=0.047)。VCA-IgA抗體高滴度組、中滴度組、低滴度組平均生存時(shí)間分別為(23.62±1.48)、(26.96±2.55)、(31.54±1.96)個(gè)月，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.857，P=0.032)。結(jié)論 EB病毒Zta-IgA及VCA-IgA抗體水平與鼻咽癌患者放療的近期療效以及遠(yuǎn)期生存情況相關(guān)，是鼻咽癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

鼻咽癌； EB病毒； 抗體； 預(yù)后

鼻咽癌(NPC)是我國(guó)西南地區(qū)常見(jiàn)頭頸部腫瘤之一，貴州地區(qū)也是NPC的高發(fā)地區(qū)[1-2]。研究發(fā)現(xiàn)，Epstein-Barr(EB)病毒與NPC的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。作者的前期研究發(fā)現(xiàn)貴州省大部分地區(qū)、縣的苗族布依族及漢族人群中Zta-IgA與VCA-IgA抗體水平與NPC的發(fā)病密切相關(guān)[3-4]。這些抗體常用于早期篩查NPC中。后有研究將其用于判斷患者臨床預(yù)后中，關(guān)于其對(duì)臨床預(yù)后的指導(dǎo)意義，很多研究也存在分歧。本研究旨在分析NPC患者EB病毒相關(guān)抗體陽(yáng)性者，其抗體水平與患者預(yù)后及生存時(shí)間之間的關(guān)系，以便為此類抗體的臨床應(yīng)用打下理論基礎(chǔ)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2009年2月至2011年2月在本院耳鼻喉科住院的130例初次檢出并接受治療的NPC患者納入本研究中。其中男92例，女38例，平均年齡(46.4±11.4)歲。所有患者均經(jīng)過(guò)病理活檢證實(shí)為NPC。病理類型均為鱗狀細(xì)胞癌。患者接受治療前完成心電圖、胸線片、鼻咽部及頸部的CT、MRI檢查以及血常規(guī)和肝腎功能檢測(cè)。根據(jù)2008版NPC臨床分期，其中Ⅰ期7例，Ⅱ30例，Ⅲ70例，Ⅳa期23例。入選標(biāo)準(zhǔn)：所有患者Zta-IgA、EBNA1-IgA與VCA-IgA抗體滴度均大于1∶5，為陽(yáng)性；所有患者簽署知情同意書(shū)；所有患者均接受根治性放療治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：伴有嚴(yán)重心肝腎功能障礙；復(fù)發(fā)性腫瘤；全身已大面積轉(zhuǎn)移者。

1.2 抗體水平檢測(cè) 清晨空腹抽取每例患者外周靜脈血5 mL放入抗凝管中，分離上述標(biāo)本的血清于-20 ℃凍存待檢。注意應(yīng)囑咐患者采血前忌食油膩食物，空腹8 h以上并如實(shí)填寫(xiě)個(gè)人信息。采用ELISA法聯(lián)合檢測(cè)研究對(duì)象血漿EB病毒的Zta-IgA、EBNA1-IgA、VCA-IgA抗體滴度。

1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn) 比較相對(duì)吸光度值與校正相對(duì)吸光度值有否差異及可能影響因素血清抗體水平用相對(duì)吸光度值(rOD)表示，即樣本吸光度值(A)除以2份質(zhì)控血清的平均吸光度值。臨界值(cut off)=質(zhì)控血清的平均吸光度(A)值×20%。當(dāng)檢測(cè)樣本的吸光度值(A)≥臨界值時(shí)定為陽(yáng)性，當(dāng)檢測(cè)樣本的吸光度值(A)<臨界值時(shí)則為陰性。為了消除不同批次檢測(cè)試劑對(duì)樣本相對(duì)吸光度值和臨界值的影響，將相對(duì)吸光度值按以下公式進(jìn)行校準(zhǔn)：校正相對(duì)吸光度(ArA)=相對(duì)吸光度值(rOD)/該批次試劑檢測(cè)得到的臨界值。根據(jù)抗體滴度分為：低滴度組(1∶5～1∶20)、中滴度組(1∶40～1∶80)和高滴度組(>1∶160)。各組間年齡、性別、臨床分期等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.4 治療方法 所有患者接受放射性根治治療。采用電子線外照射。面頸聯(lián)合野及下頸前野給予36 Gy劑量。耳前野給予65 Gy劑量照射，如果顱底有所侵犯，給予顱底8 Gy劑量照射。如果乳突處頸及口咽部淋巴結(jié)腫大，可給予58 Gy劑量照射。頸部淋巴結(jié)預(yù)防劑量為50 Gy。

1.5 隨訪 對(duì)所有患者出院后進(jìn)行隨訪36個(gè)月，無(wú)失訪病例。隨訪期間患者在門(mén)診及病房行胸線片、腹部B超、鼻咽部MRI、CT等檢查。記錄患者的生存期，并進(jìn)行分析。

1.6 療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 近期客觀臨床療效則按照世界衛(wèi)生組織實(shí)體瘤療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)：完全緩解(CR)：全部可測(cè)量病灶完全消失持續(xù)4周；部分緩解(PR)：病灶的最大直徑與最大垂直橫徑乘積總和減少大于50%，持續(xù)至少4周；穩(wěn)定(SD)：病灶最大直徑與最大垂直橫徑乘積總和減少小于50%或增大小于25%，持續(xù)至少4周且無(wú)新病灶出現(xiàn)；進(jìn)展(PD)：病灶的最大直徑與最大垂直橫徑乘積總和增大大于25%，或出現(xiàn)新的病灶。將CR+PR定義為有效，而SD+PD定義為無(wú)效。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 所有數(shù)據(jù)采用SPSS17.0軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，多組采用方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；生存分析采用Kaplan-Meier法進(jìn)行，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 不同滴度組一般資料比較 Zta-IgA和VCA-IgA抗體滴度組的一般資料顯示，3個(gè)滴度組患者的年齡、性別、吸煙、飲酒差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。而臨床分期和分化程度之間的差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。臨床分期越高，其抗體水平越高，分化程度越低，其抗體水平越高。見(jiàn)表1、2。

表1 Zta-IgA抗體不同滴度組一般資料比較

表2 VCA-IgA抗體不同滴度組一般資料比較

2.2 不同抗體滴度組近期療效評(píng)價(jià) Zta-IgA抗體低、中、高滴度組的放療近期總有效率分別為90.32%、68.57%、51.56%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=20.199，P=0.003)。VCA-IgA抗體低、中、高滴度組的放療近期總有效率分別為90.91%、71.88%、49.23%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=26.370，P=0.000)。見(jiàn)表3、4。

2.3 EB病毒Zta-IgA與VCA-IgA抗體不同水平組間總生存曲線分析 應(yīng)用Kaplan-Meier生存分析法分析Zta-IgA與VCA-IgA抗體不同滴度組與NPC患者預(yù)后的關(guān)系。Zta-IgA抗體高滴度組、中滴度組、低滴度組平均生存時(shí)間分別為(23.78±1.10)、(27.39±2.45)、(31.11±2.10)個(gè)月，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.122，P=0.047)。Zta-IgA抗體滴度越高，其患者生存預(yù)后越差，滴度越低，患者生存預(yù)后越好。VCA-IgA抗體高滴度組、中滴度組、低滴度組平均生存時(shí)間分別為(23.62±1.48)、(26.96±2.55)、(31.54±1.96)個(gè)月，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.857，P=0.032)。VCA-IgA抗體滴度越高，其患者生存預(yù)后越差，滴度越低，患者生存預(yù)后越好。

表3 Zta-IgA抗體不同滴度組近期臨床療效比較

注：χ2=20.199,P=0.003。

表4 VCA-IgA抗體不同滴度組近期臨床療效比較

注：χ2=26.370，P=0.000。

2.4 預(yù)后多因素COX模型分析 將130例NPC患者，采用COX模型，分析其年齡、性別、臨床分期、病理分化程度、吸煙、飲酒以及兩個(gè)抗體的水平與患者預(yù)后因素分析。結(jié)果顯示臨床分期、分化程度、Zta-IgA和VCA-IgA與患者的總生存時(shí)間有關(guān)(P<0.05)，為獨(dú)立的預(yù)后因素。見(jiàn)表5。

表5 130例NPC患者的預(yù)后多因素分析

3 討 論

EB病毒是一種嗜B細(xì)胞的人類皰疹病毒，某些受EB病毒感染的B細(xì)胞可發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化為惡性腫瘤細(xì)胞[5-6]。由于EB病毒在人群中感染率高，與NPC的關(guān)系密切，而NPC又是我國(guó)高發(fā)癌瘤之一，世界上80%左右的NPC發(fā)生在我國(guó)，尤以廣東、廣西、湖南、福建等發(fā)病率高，貴州也是高發(fā)區(qū)，其NPC病死率名列全國(guó)第9位，因此如何做好NPC的早期監(jiān)測(cè)、早期發(fā)現(xiàn)、早期確診，以便早期得到及時(shí)治療是防控的重點(diǎn)[7]。自從Old等上世紀(jì)60年代首次發(fā)現(xiàn)NPC患者體內(nèi)存在EB病毒抗體后，之后很多研究發(fā)現(xiàn)，此類患者體內(nèi)存在不同水平，不同類型的抗體。這提示NPC的患病與EB病毒感染存在密切關(guān)系。目前研究較多的EB病毒相關(guān)抗體為Zta-IgA與VCA-IgA抗體[8-9]。作者前期的研究結(jié)果表明，Zta-IgA與VCA-IgA抗體在貴州少數(shù)民族地區(qū)出現(xiàn)概率較高。為了研究Zta-IgA與VCA-IgA抗體在NPC患者中的預(yù)后預(yù)測(cè)意義，本研究選取本院Zta-IgA與VCA-IgA抗體陽(yáng)性的NPC患者130例，分析其預(yù)后之間的關(guān)系。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同Zta-IgA和VCA-IgA抗體滴度組間，其在臨床分期和分化程度上存在顯著差異，可見(jiàn)臨床分期越高，其抗體滴度越高，呈一定正相關(guān)，分化程度越低，其抗體滴度越高。這也充分說(shuō)明Zta-IgA和VCA-IgA抗體與NPC的臨床病理之間存在相關(guān)關(guān)系。作者對(duì)130例患者放療后的短期療效進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，Zta-IgA抗體低、中、高滴度組的總有效率分別為90.32%、68.57%、51.56%(χ2=20.199，P=0.003)。VCA-IgA抗體低、中、高滴度組的總有效率分別為90.91%、71.88%、49.23%(χ2=26.370，P=0.000)。提示這兩種抗體，其滴度越高，放療后短期療效越差。為了驗(yàn)證2個(gè)抗體在遠(yuǎn)期生存中的作用，作者采用了生存曲線分析，結(jié)果顯示Zta-IgA及VCA-IgA抗體滴度越高，其患者生存預(yù)后越差，總生存時(shí)間越短，滴度越低，患者生存預(yù)后越好，總生存時(shí)間越長(zhǎng)。

劉孟忠等[10]報(bào)道，接受治療前NPC患者的VCA/IgA高濃度抗體組患者10年生存率低于低濃度抗體組。Liu等[11]研究發(fā)現(xiàn)治療前VCA/IgA滴度可作為NPC患者生存的預(yù)后因子，而VCA/IgG則未見(jiàn)明顯聯(lián)系。Twu等則指出，VCA/IgA并不能夠預(yù)測(cè)NPC患者的預(yù)后及生存情況。這可能由于其在選擇病例數(shù)量較少，存在選擇偏倚所致。

Zta-IgA及VCA-IgA之所以和NPC患者的預(yù)后相關(guān)，這是由于這兩種抗體能夠反應(yīng)患者體內(nèi)腫瘤負(fù)荷的情況，能夠較好地反映體內(nèi)腫瘤及周圍轉(zhuǎn)移灶的情況。因此能夠得到此兩抗體滴度和患者預(yù)后相關(guān)的結(jié)論。

總之，NPC患者治療前EB病毒Zta-IgA及VCA-IgA抗體水平的高低可以作為NPC預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，可以用來(lái)判斷NPC患者放療的近期療效以及遠(yuǎn)期生存情況。早期檢測(cè)EB病毒Zta-IgA及VCA-IgA抗體水平有助于臨床早期制定合理的放化療方案，為NPC的臨床治療提供有力的依據(jù)。

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Relationship between serum EB virus antibody level and prognosis in patients with nasopharyngeal carcinoma*

LINGHu-ying,MIAOYan,XIEFeng,HUDe-feng△

(PhysicalExaminationCenter,GuizhouProvincialPeople′sHospital,Guiyang,Guizhou550002,China)

Objective To analyze the relationship between EB virus Zta-IgA and VCA-IgA antibody concentrations with the prognosis of nasopharyngeal cancer(NPC).Methods 130 NPC patients with EB virus Zta-IgA and VCA-IgA antibody-positive from February 2009 to February 2011 were selected and divided into the low concentration group (1∶5-1∶20),middle concentration group (1∶40-1∶80) and high concentration group (>1∶160) according to the antibody concentration.The 36-month follow-up was performed.The survival rates were calculated and compared among 3 groups.Results There was statistically significant differences in clinical stages and degrees of differentiation among different groups(P<0.05).The short term effective rates in the low,middle and high Zta-IgA antibody concentration groups were 90.32%,68.57% and 51.56% respectively,the differences were statistically significant (χ2=20.199,P=0.003).The total short term effective rate of radiotherapy in the low,middle and high VCA-IgA antibody concentration groups were 90.91%,71.88%,49.23% respectively,the differences were statistically significant(χ2=26.370,P=0.000).The average survival time in the high,middle and low Zta-IgA antibody concentration groups were (23.78±1.10)，(27.39±2.45)，(31.11±2.10) months respectively,the differences were statistically significant(χ2=6.122,P=0.047).The average survival time in the high,middle and low VCA-IgA antibody concentration group were (23.62±1.48)，(26.96±2.55)，(31.54±1.96) months,the differences were statistically significant (χ2=6.857,P=0.032).Conclusion EB virus Zta-IgA and VCA-IgA antibody levels are related with the short-term efficacy and long-term survival of the NPC patients and the independent risk factors for the prognosis of the NPC patients.

nasopharyngeal carcinoma; EB virus; antibodies; prognosis

貴州省科技廳基金項(xiàng)目(黔科合SY字[2011]007號(hào))。

令狐穎，女，本科，主任技師，主要從事臨床檢驗(yàn)及健康管理工作?！?/p>

，E-mail:569168069@qq.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.17.004

A

1672-9455(2015)17-2490-04

2015-03-20

2015-03-25)