連城白鴨組織中黑色素含量的測定研究

辛清武 黃勤樓 鄭嫩珠李 麗 繆中緯 朱志明 張丹青

（福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,福建福州 350013）

連城白鴨組織中黑色素含量的測定研究

辛清武 黃勤樓 鄭嫩珠*李 麗 繆中緯 朱志明 張丹青

（福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,福建福州 350013）

本研究選用連城白鴨為研究對象，采用分光光度計法提取連城白鴨各組織的黑色素，明確連城白鴨各組織的黑色素含量。結(jié)果表明:（1）連城白鴨嘴皮的黑色素含量最高為0.1694，其極顯著（P＜0.01）高于其他各組織；肺臟的黑色素含量為0.0778，其除極顯著（P＜0.01）低于嘴皮外，均極顯著（P＜0.01）高于其他各組織。（2）皮膚的黑色素含量最低為0.0264，胸肌的黑色素含量為0.0301，其略低于腿?。?.0326）。（3）連城白鴨各組織的黑色素含量為:嘴皮＞肺臟＞腳皮＞肝臟＞脾臟＞腎臟＞心臟＞肌胃＞卵巢＞氣管＞輸卵管＞腿?。臼改c＞胸?。酒つw。

連城白鴨 組織 分光光度計法 黑色素含量

連城白鴨又名白鷺鴨是中國珍貴稀有的水禽資源，被列入國家畜禽品種資源重點保護名錄。連城白鴨以“白羽、烏嘴、黑腳”等性狀而著稱，因其具有清熱解毒、滋陰降火、開胃健脾等功效，被譽為“全國唯一的藥用鴨”[1]。動物黑色素具有重要的生物學(xué)功能，在商業(yè)運作中有著重要的經(jīng)濟價值，已經(jīng)成為近年來生物學(xué)領(lǐng)域新興的研究熱點[2-5]，越來越受重視。同時，由于烏骨雞皮膚和肌肉及組織中含有大量的黑色素，使得對黑色素有了更加深入的研究[6]。藥物本草中曾記載[7]，烏骨雞作為藥用雞，其入藥效果與皮膚、肌肉等組織中的黑色素相關(guān)。因此，本實驗選用連城白鴨為研究對象，采用分光光度計法提取連城白鴨各組織的黑色素，明確連城白鴨各組織的黑色素含量，為連城白鴨相關(guān)藥用價值方面的研究提供一定的參考。

1 材料與方法

本試驗于2014年3月～2014年12月在福建省畜禽分子遺傳育種實驗室和漳州昌龍農(nóng)牧發(fā)展有限公司進行。

1.1 試驗動物和組織采集

從漳州昌龍農(nóng)牧發(fā)展有限公司鴨場中挑選統(tǒng)一飼養(yǎng)、均勻度一致的160日齡（♀）連城白鴨6只，頸靜脈放血后，取其皮膚、胸肌、腿肌、肝臟、腎臟、肌胃、心臟、脾臟、肺、氣管、卵巢、輸卵管、嘴皮、腳皮、腸等組織，立即投入液氮中，-80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 黑色素含量的測定

連城白鴨各組織黑色素含量的測定參照Ozeki等和黎觀紅等[8-9]介紹的分光光度計法并稍作調(diào)整。具體方法：將采集的各組織取出，用冰冷的生理鹽水漂洗去除血液，用濾紙拭干稱重，然后準確稱取 10 mg 組織樣品加入到 1 mL 的soluene-350：water=9：1（V/ V）溶液中，100℃水浴加熱45min～1h，待組織完全溶解后，立即置于Nanodrop 2000分光光度計中測定 500 nm條件下的吸光度值（A500），利用A500吸光值表示各組織樣品中的黑色素含量。每個樣本重復(fù)測定6次。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

將所獲得的試驗數(shù)據(jù)利用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計分析。連城白鴨各組織黑色素含量之間的顯著性檢驗采用單因素方差分析（ANOVA）和LSD法多重比較。

由圖1可知，黑色素在連城白鴨各組織的含量存在明顯不同，其中嘴皮黑色素含量最高，極顯著高于其他組織（P＜0.01）；肺臟黑色素含量次之，除極顯著低于嘴皮外，均極顯著高于其他組織（P＜0.01）；皮膚黑色素含量最低。各組織黑色素含量總體表現(xiàn)為：嘴皮＞肺臟＞腳皮＞肝臟＞脾臟＞腎臟＞心臟＞肌胃＞卵巢＞氣管＞

2 結(jié)果

輸卵管＞腿?。臼改c＞胸肌＞皮膚。

3 討論

胡泗才等[10]、陳國宏等[11]和耿拓宇[12]等對泰和烏骨雞中黑色素在各部位的分布及相關(guān)研究中表明烏骨雞各組織的黑色素的沉積差異極顯著，其胸肌的黑度明顯淺于腿肌，且黑度隨周齡增加而變淺。本研究中連城白鴨各組織的黑色素含量也存在著明顯不同，特別是嘴皮和肺臟均極顯著高于其他各組織；胸肌的黑色素含量低于腿肌，但差異不顯著。

Muroya[13]研究表明烏骨雞各組織中黑色素的沉積差異顯著，依次為：骨膜＞性腺（卵巢或睪丸）=氣管≥心臟、肝臟、腺胃、盲腸、肌肉（大胸肌和鳥喙骨）和皮膚。而本研究中連城白鴨的黑色素含量總體表現(xiàn)為：嘴皮＞肺臟＞腳皮＞肝臟＞脾臟＞腎臟＞心臟＞肌胃＞卵巢＞氣管＞輸卵管＞腿肌＞十二指腸＞胸?。酒つw。連城白鴨各組織的黑色素含量分布情況與烏骨雞各組織的黑色素含量分布不同可能是由品種、取樣方法及黑色素的提取方法不同而造成的。本研究明確了連城白鴨各組織的黑色素含量，為連城白鴨相關(guān)藥用價值方面的研究提供一定的參考。

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[13] Muroya S，Tanabe R，Nakajima I，Chikuni K. Molecular characteristics and site specific distribution of the pigment of the silky fowl[J].Vet Med Sci，2000，62（4）：391-395.

福建省農(nóng)科院創(chuàng)新團隊項目（CXTD-2-1314）、福建省農(nóng)科院青年基金（2014QB-27）和福建省農(nóng)科院所青年基金（MYQJ2014-2）資助

辛清武（1985-），男，漢，山東濰坊，碩士，助理研究員。

鄭嫩珠（1972-），女，漢，福建寧德，在讀博士，副研究員。