精美動物器官鑄型標本制作的實踐

杜曉霞郭建強祁根兄許 楠解紅梅蓋晉宏徐海斌張興娟

（1.山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學院寵物科技系,山東濰坊 261061；2.山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學院動物醫(yī)學系,山東濰坊 261061）

精美動物器官鑄型標本制作的實踐

杜曉霞1郭建強2祁根兄1許 楠1解紅梅1蓋晉宏1徐海斌1張興娟1

（1.山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學院寵物科技系,山東濰坊 261061；2.山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學院動物醫(yī)學系,山東濰坊 261061）

動物器官內(nèi)管道鑄型是一項實踐性很強的技術，在制作過程中，需要不斷摸索和嘗試才能獲得豐富的經(jīng)驗，并且需要不斷的總結(jié)和完善技術要領。筆者在從事管道鑄型標本制作過程中，積極探索，獲得如下經(jīng)驗:（1）采取最新鮮的器官作為材料是鑄型成功的前提；（2）選用適宜濃度的鑄型劑是顯示各種管道特點的關鍵；（3）針對器官內(nèi)部管道的不同特點適度掌握首次灌注量和補充灌注量是必要的手段；（4）用心體會手工控制壓力是鑄型成敗的重要因素；（5）用丙酮與丁酮混合作為溶劑有明顯的優(yōu)點。此外，精心的清理和修整可以收到錦上添花的效果。此外，制作并研究各種動物器官內(nèi)管道鑄型，尤其是血管鑄型，還能為臨床醫(yī)學以及動物醫(yī)學中進行人和動物（犬、貓等寵物）器官移植提供有價值的參考依據(jù)。

鑄型標本 制作 方法改進

精美的鑄型標本不僅可以全面真實地模擬正常器官內(nèi)部的管腔結(jié)構(gòu)形態(tài)和立體構(gòu)型，用來作為動物解剖學、動物外科手術學等學科的形象化教具，而且是一種令人賞心悅目的藝術品。理想化的標本應當具備色澤鮮亮、枝條清晰逼真等特點。但是制作一件完美精致的鑄型標本絕非易事，從動物器官的取材、插管、灌注、硬化、腐蝕、沖洗、干燥、修剪直至封裝，每一個環(huán)節(jié)都至關重要。筆者從2003年起至今，已經(jīng)制作了大量的大體解剖鑄型標本和微血管鑄型標本。曾經(jīng)參與了牦牛肺臟內(nèi)部管道鑄型標本的制作，親自制作了不同年齡段牦牛肺微血管鑄型的標本，以及黃牛心、肺；山羊心、肺、脾、肝、腎、乳腺、子宮；犬心、肺、肝、腎等器官內(nèi)的管道鑄型標本，獲得了寶貴的實踐經(jīng)驗。制出了一些令人滿意的標本，其中，1日齡牦牛肺微血管鑄型的一系列標本圖片在“1日齡牦牛肺泡毛細血管的掃描電鏡觀察”（杜曉霞等，2008）和“The subpleural pulmonary microvasculature in newborn yak（Bos grunniens）”（Du等，2009）兩篇文章中發(fā)表。在此將一些心得體會歸納如下，以饗讀者。

1 關鍵技術介紹

1.1 采取最新鮮的器官作為材料是鑄型成功的前提

例如，采集新鮮的黃牛心臟，其心臟壁及各血管壁均有良好的彈性與柔韌性，故不論是尋找冠狀動脈口還是灌注過程中的結(jié)扎等操作都比較容易，制作出的鑄型，效果很好（圖1）。但是，已經(jīng)固定過的不新鮮的黃牛心臟，彈性與韌性較差，給插管、結(jié)扎等操作帶來很大的困難，而且脂肪被固定后很難剝除，在剝除脂肪的過程中也會傷及細小血管，致使出現(xiàn)漏液現(xiàn)象嚴重影響鑄型標本的質(zhì)量。

1.2 選用適宜濃度的鑄型劑是顯示各種管道特點的關鍵

我們制作過的器官標本大小相差懸殊，體積最大的是黃牛的肺臟，最小的是犬的腎臟。具體經(jīng)驗：掌握鑄型劑濃度時，應當遵循“管徑越大鑄型劑濃度要求越高，管徑越小濃度要求越低”的原則。例如，黃牛肺臟的肺動脈和支氣管樹，二者主干及分支的管徑都比較粗，選用30%ABS丙酮和丁酮1：1的灌注液進行灌注，結(jié)果標本主干飽滿，并且很好地顯示了肺動脈和支氣管樹的分支（圖2）。例如，犬的腎臟，灌注腎動脈選用10%ABS丙酮和丁酮1：1的灌注液，而腎靜脈和輸尿管則選用20%的灌注液效果比較好。對羊、犬肝臟和肺臟等器官內(nèi)多個管道同時鑄型時，更要注意控制濃度。例如，肝臟的肝動脈、肝靜脈、門靜脈和肝管同時鑄型時，因肝動脈細小，宜選用10%ABS丙酮和丁酮1：1的灌注液，肝靜脈、門靜脈和肝管比較粗，均宜選用30%ABS丙酮和丁酮1：1的灌注液。鑄型肺臟的肺動脈、肺靜脈和支氣管樹時，三種管道均宜選用30%ABS丙酮和丁酮1：1的灌注液（圖3）。此外，無論器官的大小、管道的粗細均應當注意，首次，灌注濃度與補充灌注濃度盡量要有濃度梯度。一般原則是“首次灌注濃度低，補充灌注濃度高”；同時，也要注意補充灌注的時間間隔，原則是“管道越粗，時間間隔越長”。例如，黃牛肺動脈和支氣管樹的鑄型，首次灌注濃度采用30%ABS丙酮和丁酮1：1的灌注液，但如果繼續(xù)增加濃度，液體太黏稠，可能難以進入管道，因此，用原濃度補充灌注8～9次，且每24 h補充灌注一次，效果比較好；對犬腎腎動脈而言，首次灌注濃度用10%ABS丙酮和丁酮1：1的灌注液，補充灌注可用10%～15%的灌注液，因管道非常細小，如果濃度太高灌注液無法進入管道，故間隔12 h，補充灌注一次即可。

1.3 針對器官內(nèi)部管道的不同特點適度掌握首次灌注量和補充灌注量是必要的手段

比如羊的腎臟，即便選用適宜的灌注液濃度，如果首次灌注液的用量過多也會造成鑄型標本密度過高（圖4）。因此，首次用量宜控制在5～10 ml，而且補充灌注時灌注液的用量也不宜過多，2～3 ml即可。一般遵循“灌注量適當即可，切忌過多”的原則。還比如同時鑄型肝臟的門靜脈、肝動脈和肝管時，更要控制灌注門靜脈的液體用量，如果用量太大，不僅影響門靜脈及其分支的顯示，甚至由于對其他管道的壓迫，將會影響其他管道的主干及其分支的顯示（圖5）。

1.4 用心體會手工控制壓力是鑄型成敗的重要因素

壓力大小是直接影響灌注效果的原因之一。筆者制作鑄型標本時未采用任何壓力裝置，灌注時利用10 ml和20 ml塑料注射器手動加壓，效果比較理想。因為手動加壓可以根據(jù)灌注情況隨時調(diào)整壓力。一般原則是“壓力寧小勿大”。尤其是管道分支繁多的器官，比如心、肝、脾、肺和腎等更應控制好壓力。如果壓力過大，就容易導致管道破裂，出現(xiàn)漏液。但有時也需要增大壓力，比如用固定過的黃牛心臟灌注冠狀動脈或心靜脈時，壓力不能過小，否則灌注液不易進入，尤其是靜脈阻力更大。因此，壓力的控制要根據(jù)器官內(nèi)管道的粗細，適當進行調(diào)整。

1.5 用丙酮與丁酮混合作為溶劑有明顯的優(yōu)點

過去人們往往采用丙酮或者丁酮作為溶劑，常常顯示出不同的缺點。我們研究的結(jié)果是，將丙酮與丁酮混合作為溶劑，二者可以取長補短。丙酮揮發(fā)太快，不易進入細小管道，而丁酮容易進入細小管道，揮發(fā)比較慢，丁酮可以補丙酮之不足；丙酮能溶于水，而丁酮不溶于水，但丙酮和丁酮又有良好的互溶性，可以避免管道內(nèi)存留水分而發(fā)生阻塞，尤其對細小的管道更是如此。比如羊、犬腎的腎動脈，羊、犬肝的肝動脈等。

圖1 黃牛心臟左冠狀動脈鑄型圖，A（紅色）:左冠狀動脈；圖2 黃牛肺動脈和支氣管樹的鑄型，A（藍色）:肺動脈，B（白色）:支氣管；圖3 山羊肺動脈、肺靜脈和支氣管樹聯(lián)合鑄型圖，A（藍色）:肺動脈，B（白色）支氣管，V（紅色）肺靜脈；圖4 山羊腎血管鑄型，A（紅色）:腎動脈，V（紅色）:腎靜脈（注:鑄型過密，動靜脈主干均充盈紅色）；圖5 山羊肝動脈、門靜脈和肝管聯(lián)合鑄型，A（紅色）:肝動脈，V（黃色）:門靜脈，D（綠色）:肝管（注:門靜脈分支太過密集）

2 鑄型過程中的其他注意事項

2.1 精心的清理和修整可以收到錦上添花的效果

對制作出的鑄型標本在腐蝕和沖洗后，要充分去除殘留在鑄型表面的腐敗組織和細小的雜物，比如脂肪、線頭等。甚至要采用一邊沖洗一邊用針尖、小鑷子等器具細心去除雜物的工作。鑄型標本上局部過度密集時也可稍作修剪，疏密打枝。常見對犬肺、羊肺鑄型時，灌注肺動脈、肺靜脈、支氣管樹時常難以保證兩側(cè)肺內(nèi)的管道同時充盈到相同的程度，常常出現(xiàn)一側(cè)比較密而另一側(cè)比較稀的情況，因此需要稍作修剪。尤其在顯示管道的宏觀或亞宏觀效果時，更要對照鑄型前原材料的照片，對鑄型好的標本進行修剪和疏密打枝的工作。當多個管道在同一標本上（如肺、肝、腎）同時顯現(xiàn)時，更應當通過修整次要枝條，以便保證各種管道既能同時顯示，又能表現(xiàn)出相互之間的關系，使其自然而美觀的顯現(xiàn)。

2.2 鑄型過程中其他環(huán)節(jié)應當重視的問題

在制作鑄型過程中，從取材、插管、灌注、硬化、腐蝕、沖洗、干燥、修剪，到最后的封裝。每一個程序都應當小心謹慎，否則很可能前功盡棄。以下兩點尤其應當引起重視。

2.2.1 腐蝕

腐蝕時可以選擇酸腐蝕法、堿腐蝕法或者自然腐蝕法。筆者制作的標本大多選用50%鹽酸作為腐蝕液。僅在牛肺上先利用自然腐蝕，再用50%硫酸腐蝕相結(jié)合的方法。腐蝕的要點是一定要腐蝕徹底，原則是“腐蝕時間寧長勿短”。

2.2.2 沖洗

不論應用強酸、強堿或是自然腐蝕法，都必須用流水充分沖洗，沖洗完后宜用自來水或蒸餾水浸泡數(shù)天。每天都要換水，以便中和殘余的酸或堿，如果長時間不換水，將會因霉變而導致標本的色澤發(fā)生變化。沖洗時的原則是必須徹底干凈，“水流壓力寧小勿大”，否則使得標本表面細小的血管被沖斷或者改變原有的構(gòu)型。

[1] 杜曉霞，俞紅賢，劉英，等.1日齡牦牛肺泡毛細血管的掃描電鏡觀察[J].畜牧獸醫(yī)學報，2008，39（3）：355-359.

[2] Du X X，Yu H X，Liu Y，et al. The subpleural pulmonary microvasculature in newborn yak（Bos grunniens）[J].Veterinary Research Communications，2009，33（4）：355-365.

杜曉霞（1980-），女，甘肅慶城人，講師，博士，研究方向:動物解剖學、組織胚胎學、動物生理學.

山東省高等學校科技計劃項目（J11LC63）