89例兒童交叉配血不合原因分析

89例兒童交叉配血不合原因分析

孫文杰，李萌，馮麗，楊海波*

(南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京兒童醫(yī)院， 江蘇 南京210008)

輸血是一項(xiàng)復(fù)雜的、特殊的、高風(fēng)險(xiǎn)的治療方法，尤其在兒童臨床輸血中更加復(fù)雜。臨床中兒童用血遇到受血者與供血者交叉配血不合的原因有很多，其中由不規(guī)則抗體抗M抗體、自身IgG抗體和自身冷抗體等導(dǎo)致的交叉配血不合是常見原因[1]。作者回顧性分析南京兒童醫(yī)院2011年3月至2014年7月血液科、腦外科、腎內(nèi)科、泌外科、心胸外科、ICU等89例交叉配血不合現(xiàn)象進(jìn)行研究討論，并分析了其原因。

1材料與方法

1.1檢測對象

受血者為南京市兒童醫(yī)院2011年3月至2014年7月臨床各科室89名申請輸血患兒，年齡0-14歲，其中女41例，男48例，多數(shù)為反復(fù)輸血、自身免疫性疾病、新生兒溶血、血液病等患兒。供血者血樣均來自江蘇省南京市血液中心無償獻(xiàn)血者。

1.2主要試劑

血型鑒定中抗A抗B標(biāo)清、A型和B型反定細(xì)胞、抗D(IgM、IgG/IgM)及譜細(xì)胞均為上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司產(chǎn)品。改良凝聚胺試劑為中山市生科試劑儀器有限公司產(chǎn)品，抗球蛋白卡和微柱凝膠卡為達(dá)亞美試劑公司產(chǎn)品。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1血型鑒定：微柱凝膠卡和試管法。

1.3.2抗體篩查和coombs實(shí)驗(yàn)：抗球蛋白法，根據(jù)抗體篩查陽性的對照譜確定不規(guī)則抗體的特異性。

1.3.3交叉配血實(shí)驗(yàn)：鹽水法、聚凝胺法采用標(biāo)準(zhǔn)試管，抗球蛋白法采用微柱凝膠卡法。

2結(jié)果

89例疑難交叉配血的標(biāo)本中血型正、反定型不符3例，其中ABO亞型1例，該亞型含有不規(guī)則抗A1抗體，另外2例A型Rh陽性患兒檢出抗A抗體。檢出直接和間接抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)均呈陽性者17例，直接抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)陰性而間接抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)陽性的患者69例。見表1。

表1　交叉配血不合情況

對89例疑難配血標(biāo)本進(jìn)行抗體篩查和鑒定，Rh血型系統(tǒng)檢出抗D抗體2例，抗c抗體2例，抗E抗體8例，抗c E抗體2例，c E+自身抗體15例(此15例中有1例患兒因頭孢唑肟鈉引起藥物性溶血導(dǎo)致交叉配血不合，該患兒血清中檢出抗cE抗體和自身抗體)。自身IgG抗體14例，自身冷抗體18例。MNS系統(tǒng)中檢出抗M抗體25例。ABO血型系統(tǒng)A型Rh陽性患兒檢出抗A抗體2例，抗A1 抗體1例。根據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，89例兒童交叉配血不合的原因主要由MNS血型系統(tǒng)中M抗體和Rh血型系統(tǒng)c E+自身抗體、自身IgG抗體以及自身冷抗體等引起。同種抗體特異性檢出結(jié)果如表2所示。

表2　同種抗體特異性檢出結(jié)果

3討論

輸血是臨床挽救患者生命是不可替代的治療手段，輸血前進(jìn)行準(zhǔn)確的血型定型、不規(guī)則抗體篩查及交叉配血是保證臨床輸血安全和有效的重要措施。當(dāng)交叉配血不合時(shí)，應(yīng)當(dāng)了解患者病史、用藥史、輸血史及其他因素，以便找出其配血不合的原因。當(dāng)主側(cè)交叉配合試驗(yàn)陽性，抗體篩選試驗(yàn)陰性時(shí)若患者和供血者血型定型皆正確，可能是患者血清中存在與供血者紅細(xì)胞抗原發(fā)生反應(yīng)的抗體，或者供血者紅細(xì)胞直接抗球蛋白試驗(yàn)為陽性，應(yīng)該重復(fù)患者血清抗體篩選試驗(yàn)，選擇其他供者血液重復(fù)交叉配血試驗(yàn)。當(dāng)主側(cè)交叉配合試驗(yàn)陽性，抗體篩選試驗(yàn)也陽性時(shí)考慮患者血清中的同種抗體與供血者紅細(xì)胞上的抗原發(fā)生反應(yīng)，應(yīng)該對患者血清進(jìn)行抗體鑒定，選擇抗原陰性的供者血液重復(fù)交叉配血試驗(yàn)。若主側(cè)交叉配合試驗(yàn)陽性，抗體篩選試驗(yàn)陽性、自身對照試驗(yàn)也陽性時(shí)，首先考慮患者血清中可能同時(shí)存在自身抗體和同種抗體，應(yīng)對患者紅細(xì)胞進(jìn)行自身吸收試驗(yàn)去除血清自身抗體，再進(jìn)行抗體鑒定試驗(yàn)。其次，若為患者血清異常(如白/球比值比例異常，或含血容量擴(kuò)張劑，或被污染等)，應(yīng)獲取新標(biāo)本或者用鹽水稀釋等[2]。本實(shí)驗(yàn)中檢出c E+自身抗體的15例患兒中有1例是因頭孢唑肟鈉引起藥物性溶血導(dǎo)致的交叉配血不合，所以在遇到交叉配血不合時(shí)與臨床溝通并了解患兒用藥史也是十分重要的。在新生兒中，新生兒溶血病也是引起交叉配血不合的原因。

從89例疑難配血原因分析來看，MNS血型系統(tǒng)中抗M抗體是導(dǎo)致兒童臨床配血不合的主要原因之一。抗M 抗體是MNS 血型系統(tǒng)最常見的抗體，分為天然抗體和免疫性抗體，絕大多數(shù)的抗M抗體以IgM形式存在，少數(shù)為IgG和IgM同時(shí)存在，而且這些IgG類抗體能夠在鹽水介質(zhì)中凝集紅細(xì)胞[3]。IgM性質(zhì)的抗M抗體，在37℃情況下多不凝集，臨床意義不大，只有IgG性質(zhì)的抗M抗體在37℃具有活性，可引起新生兒溶血病與溶血性輸血反應(yīng)。由于酶可影響MNS血型系統(tǒng)抗原決定簇，因此，在輸血前交叉配血時(shí)，必須應(yīng)用抗人球蛋白法，只有在結(jié)果陰性的情況下才能予以輸注，以確保臨床輸血有效性與安全性[4]。對于有多次輸血史、自身免疫溶血性貧血患兒而言，其體內(nèi)容易產(chǎn)生ABO系以外不規(guī)則抗體。89例疑難配血標(biāo)本中有25例檢出抗M抗體，標(biāo)本主要來源于血液科、新生兒科、腎內(nèi)科、普外科、PICU、SICU等科室，且這些患兒大多數(shù)有反復(fù)多次輸血史。反復(fù)輸血可能是引起患兒產(chǎn)生抗M抗體的主要原因，由于本研究病例數(shù)較少且皆是兒童，國內(nèi)外關(guān)于抗M抗體的產(chǎn)生報(bào)道較少，所以其產(chǎn)生原因需進(jìn)一步研究證實(shí)。

其次，Rh血型系統(tǒng)同種免疫性抗體也是造成兒童臨床配血不合的主要原因之一，Rh血型系統(tǒng)的抗原至今已發(fā)現(xiàn)了幾十個(gè)，但牽涉到臨床輸血問題的5個(gè)主要抗原是C、c、D、E、e。Rh抗原有很強(qiáng)的免疫原性，其抗原強(qiáng)弱順序?yàn)镈>E>C>c>e[5]。

另外自身抗體和自身冷抗體的存在亦是引起交叉配血不合的原因。血液病、自身免疫性疾病和反復(fù)多次輸血患者體內(nèi)易產(chǎn)生自身抗體，自身抗體和自身冷抗體可對血型、不規(guī)則抗體篩查、交叉配血等輸血前的所有實(shí)驗(yàn)造成影響[6]。由于正常人血清中含有的冷凝集素效價(jià)很低，一般<4℃才有活性，20℃則不凝集，一般對交叉配血無影響，但某些患者血清中常含有高效價(jià)病理性的冷凝集素，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、自身免疫性溶血性貧血、支原體肺炎、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿、多發(fā)性骨髓瘤等，常給交叉配血帶來一定的困難[7]。此89例標(biāo)本中檢測出自身冷抗體者多為自身免疫性溶血性貧血、支原體肺炎患兒。所以冷凝集素對ABO血型定型及交叉配血困難的影響也不容忽視。

當(dāng)然，交叉配血不合原因中獻(xiàn)血者的原因也比較常見。因?yàn)榻】但I(xiàn)血者也會(huì)通過“天然”途徑、妊娠、輸血等免疫途徑產(chǎn)生同種抗體，如服藥、病毒感染、自身免疫性疾病等因素也會(huì)導(dǎo)致抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)陽性[8]。這就要求所有輸血科從業(yè)人員認(rèn)真篩查，快速準(zhǔn)確的做出判斷，若出現(xiàn)供血者抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)陽性時(shí)應(yīng)及時(shí)更換供血者血液。

總之，對于臨床疑難配血不合樣本，通過分析交叉配血不合的因素,采取合理恰當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)方法，確定引起交叉配血不合的抗體性質(zhì),是確保臨床輸血安全的重要手段。還應(yīng)盡量給予患兒ABO、Rh、MN血型同型輸注，可有效解決臨床配血不合問題，也可更加有效的減少遲發(fā)性輸血不良反應(yīng)的發(fā)生。

參考文獻(xiàn)：

[1]吳建民,陶華林.疑難交叉配血的探討及處理方法[J].醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)與臨床,2008,3(6):29.

[2]夏琳.臨床輸血診療技術(shù)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2008:62-99.

[3]李勇，馬學(xué)嚴(yán)．實(shí)用血液免疫學(xué)[M]．北京：北京科學(xué)出版社，2006：231-233．

[4]李志強(qiáng)．簡明臨床輸血理論與實(shí)踐[M]．上海：世界圖書出版社，2010：269-277．

[5]劉達(dá)莊．免疫血液學(xué)[M]．上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2002：65-66．

[6]魏亞明.基礎(chǔ)輸血學(xué)[M].北京人民衛(wèi)生出版社，2011：45.

[7]李曉碧．采血車上首次獻(xiàn)血者發(fā)生獻(xiàn)血不良反應(yīng)的研究[J]．中國實(shí)用醫(yī)藥，2008，3(29)：167．

[8]Novaretti MC，Sopeleti CR，Dorlhiac-Llacer PE，et al．Use of gel microcolumn assay for the detection of drug-induced positive direct antiglobulin tests[J]．J Clin Lab Anal，2005，19(5)：219．

(收稿日期：2014-12-11)

作者簡介：孫文杰,女，35歲，碩士，主管檢驗(yàn)師，從事臨床輸血檢驗(yàn)方向研究。

文章編號：1007-4287(2015)12-2127-03

*通訊作者