止咳清咽緩釋顆粒提取工藝研究

王娜 劉曉龍

止咳清咽緩釋顆粒提取工藝研究

王娜 劉曉龍

目的優(yōu)選止咳清咽緩釋顆粒最佳提取工藝。方法以木犀草素的提取率為評價指標,以提取時間﹑液料比﹑乙醇濃度為考察因素, 采用響應面法優(yōu)選提取工藝。結果最佳提取工藝條件為提取時間為1.1 h, 液料比為8, 乙醇濃度為89%。結論所優(yōu)選工藝合理﹑可行, 可用于止咳清咽緩釋顆粒的提取。

止咳清咽緩釋顆粒；響應面法；提取工藝；木犀草素

止咳清咽緩釋顆粒系是本院國醫(yī)堂在《醫(yī)學心語》中 “止咳散”的基礎上［1-5］, 根據中醫(yī)辨證施治原則, 加入羌活﹑獨活﹑柴胡﹑前胡﹑茯苓﹑枳殼﹑川芎﹑黨參等, 用于治療外感風寒癥, 具有散寒祛風除濕﹑益氣解表﹑止咳之功效。為了提高產品質量, 穩(wěn)定制備工藝, 需要對提取工藝進行合理優(yōu)化［6］, 根據方中藥味所含有效成分及其藥性, 實驗以桔梗中木犀草素的提取率為指標, 采用響應面法優(yōu)選止咳清咽緩釋顆粒的提取工藝, 為后續(xù)的劑型開發(fā)和工業(yè)化生產提供實驗依據?，F報告如下。

1 材料與方法

1.1 試藥 止咳清咽緩釋顆粒的處方藥材(其中桔梗中木犀草素含量為240 μg/g)﹑木犀草素對照品。

1.2 儀器 色譜純試劑Waters液相色譜儀﹑超聲波提取器﹑萬分之一電子天平。

1.2 試驗方法

1.2.1 木犀草素標準曲線 課題研究中, 木犀草素對照品為5.6 mg/ml, 標準線性方程為A=7884.1C-5140.3, R=0.9996,線性范圍為11.20～67.20 μg/ml。

1.2.2 色譜條件 色譜柱：AlltimaC18(4.6 mm×250 mm, 5 μm)；流動相：乙腈-0.5%磷酸(35：65)；柱溫340 nm；流速1.0 ml/min；檢測波長340 nm。

1.2.3 提取方法 以處方量的藥材提取, 選擇提取時間﹑液料比﹑乙醇濃度作為考察因素, 按照表2安排試驗。以生產中的設備為基礎, 提取2次。考察因素的參數范圍見表1。

表1 考察因素的參數范圍

1.2.4 供試品制備 取提取液20 ml置容量瓶中, 加入甲醇,精密定容至50 ml。高速離心(4000 r/min)30 min, 取上清液5 ml, 甲醇定容至10 ml, 作為供試品, 冷藏﹑備用。

1.2.5 提取率 將1.2.4項中供試品中木犀草素的含量, 與藥材中木犀草素的總含量比較, 進而計算木犀草素的提取率。

C：供試品中木犀草素濃度；V：提取液的體積；M：藥材中木犀草素的含量。

2 結果與分析

2.1 響應面優(yōu)化結果與分析 采用響應面D-optimal設計方

法, 根據3個因素的參數范圍進行試驗設計, 設計方案及結果。見表2, 圖1。

表2 止咳清咽緩釋顆粒提取率

圖1 止咳清咽緩釋顆粒提取率3D圖

利用Design-Expert8軟件對數據進行多元回歸, 得到響應回歸方程為：

式中, 方程系數可知影響因素為X2＞X1＞X3, 且均為正相關, 其中X1和X2與X3均存在較強的交互作用, 呈正相關性,而且交互作用的影響度要大于單個因素。R2表明模型對提取率的實際值與預測值有很好的擬合度, 可以對提取工藝參數進行較好的分析和預測。利用軟件分析所得最優(yōu)工藝參數為：提取時間為1.1 h, 液料比為8, 乙醇濃度為89%。

2.2 最優(yōu)工藝驗證 依據求解所得工藝參數, 進行3次平行試驗驗證, 計算RSD值。見表3。

表3 3次平行試驗提取率(%)

結果表明, 響應面分析法優(yōu)化得到的工藝參數可信度高,具有較強重現性。

3 小結

響應面法在提取工藝中, 能較好的預測試驗結果, 較正交試驗優(yōu)點更加突出, 試驗次數少﹑周期短, 能在整個區(qū)域上查找明確工藝參數, 求得高精度的表達式等［7-12］。通過試驗所得工藝參數較之前正交試驗, 有效成分提取率提高, 在工藝條件上更加精確, 具有很強的實用價值。

［1］徐乃玉, 顧振綸.止嗽散藥理作用研究. 中國野生植物資源, 2003, 22(2):35-36.

［2］黃保南, 武曉軍.止嗽散應用體會.甘肅中醫(yī), 1998, 11(4):28-29.

［3］曲敬來, 高雪.止嗽散加減治療甲型季節(jié)性流感病毒性支氣管炎(亞急性期)的臨床研究86例.中國中醫(yī)藥現代遠程教育, 2010, 8(17):191-192.

［4］浦江晨, 沈麗華.不同劑型止嗽散治療急性支氣管炎療效分析.中國中醫(yī)急癥, 2010(19):915-916.

［5］黃少芳.麻杏止嗽散治療感冒后久咳臨床觀察.山西中醫(yī), 2010, 26(9):10-11.

［6］張新廣, 王冬梅, 黃虔.調脂安合劑提取工藝的研究.中成藥, 2008, 31(4):594-597.

［7］徐和祥.止嗽散加減聯(lián)合消食口服液治療兒童咳嗽變異性哮喘43例臨床觀察.時珍國醫(yī)國藥, 2013, 24(5):1185-1186.

［8］孫長霞, 蘇印泉, 張柏林, 等. 響應面分析法優(yōu)化松蘿多糖提取工藝的研究.食品工業(yè)科技, 2014(5):196-201.

［9］黃萌萌, 喬娟娟, 邱亞玲, 等. 響應面法優(yōu)化玄參提取工藝研究. 藥學與臨床研究, 2014, 22(1):34-38.

［10］盧婉怡.響應面法優(yōu)化纖維素酶輔助提取青蒿素的工藝研究.中國當代醫(yī)藥, 2014, 21(1):4-5.

［11］金華, 馬馳驍, 王建軍, 等. 響應面法優(yōu)化迎春花多糖提取工藝的研究.分析科學學報, 2013(6):827-830.

［12］余子川, 李小龍, 余捷婧, 等. 響應面法優(yōu)選廣玉蘭種籽油的超聲提取工藝.中國藥房, 2013(47):4457-4460.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.22.216

2015-07-20］

河南省中醫(yī)管理局立項課題(項目編號：2013ZY02084)

450000 鄭州大學附屬鄭州中心醫(yī)院