營養(yǎng)棗片對小鼠抗疲勞和耐缺氧作用的研究

趙 旭，張 茹，吳昊軒，楊慶翠

(1. 哈爾濱商業(yè)大學(xué) 食品工程學(xué)院，哈爾濱 150076；2. 哈爾濱商業(yè)大學(xué) 藥學(xué)院，哈爾濱 150076)

營養(yǎng)棗片對小鼠抗疲勞和耐缺氧作用的研究

趙 旭1，張 茹2，吳昊軒2，楊慶翠2

(1. 哈爾濱商業(yè)大學(xué) 食品工程學(xué)院，哈爾濱 150076；2. 哈爾濱商業(yè)大學(xué) 藥學(xué)院，哈爾濱 150076)

研究以大棗、黨參、山藥、阿膠為主要原料制作益氣養(yǎng)血營養(yǎng)棗片對小鼠的耐缺氧和抗疲勞作用.通過常壓耐缺氧實(shí)驗(yàn)，觀察益氣養(yǎng)血營養(yǎng)棗片對小鼠的耐缺氧作用.采用負(fù)重游泳法記錄負(fù)重游泳時(shí)存活時(shí)間,觀察藥物對小鼠抗疲勞作用.結(jié)果表明，在耐缺氧方面，益氣養(yǎng)血營養(yǎng)棗片可以延長小鼠在常壓條件下的存活時(shí)間(P<0.05);在抗疲勞方面，益氣養(yǎng)血營養(yǎng)棗片能延長小鼠在負(fù)重情況下的存活時(shí)間(P<0.05).益氣養(yǎng)血營養(yǎng)棗片能增強(qiáng)小鼠耐缺氧和抗疲勞能力.

棗片；耐缺氧；抗疲勞

大棗系鼠李科棗屬植物，含有大量的多糖和纖維素，還含有豐富的B族維生素，維生素E，維生素C等營養(yǎng)元素[1].由于大棗富含豐富的營養(yǎng)，使其在促進(jìn)新陳代謝、增強(qiáng)心肌功能、防止血管硬化和高血壓、降低血脂、膽固醇等方面有良好的功效[2].目前，氣血不足成為現(xiàn)代人普遍存在的一種亞健康狀態(tài)，本研究根據(jù)中醫(yī)理論指導(dǎo)原則，選擇具有益氣補(bǔ)血功效的大棗、山藥、黨參、阿膠，通過實(shí)驗(yàn)獲得較為合理的加工工藝，制成適合多數(shù)人群食用的一種風(fēng)味獨(dú)特、改善健康的營養(yǎng)棗片.按照益氣養(yǎng)血功能性棗片組方配比，以小鼠為研究對象來進(jìn)行功能性評價(jià).以耐缺氧實(shí)驗(yàn)、抗疲勞游泳實(shí)驗(yàn)初步驗(yàn)證營養(yǎng)棗片的功能性.

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

選擇飽滿、無蟲蛀、優(yōu)質(zhì)大棗；黨參、山藥、東阿阿膠，購自寶豐藥店；白砂糖，市售；檸檬酸，市售，食品級，符合GB1978-86檸檬酸衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn).

GYB60-65均質(zhì)機(jī)：上海申鹿均質(zhì)機(jī)有限公司；AKR900多功能食品加工機(jī)：中山市東風(fēng)鎮(zhèn)安蜜爾電器廠；DHG-9203A型電熱恒溫鼓風(fēng)箱：上海精密實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司； Aquarius40B高壓滅菌機(jī)：上海知恒科學(xué)儀器有限公司.PYX190S-A微生物培養(yǎng)箱：科利儀器有限公司；SW-CJ-1D無菌操作臺(tái)：北京華威興業(yè)有限公司.

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

小鼠，雌性，清潔級昆明種，18～22 g，長春市億斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限責(zé)任公司，許可證號(hào)SCXK(吉)-2011-0004.

1.3 實(shí)驗(yàn)棗片

1.3.1實(shí)驗(yàn)棗片的制備原理與方法

選取大棗、黨參、山藥、阿膠等優(yōu)質(zhì)原料，設(shè)計(jì)棗片制作工藝，并進(jìn)行單因素分析，分別考察了料液比對產(chǎn)品感官的影響、烘干條件對棗片的影響等因素，并通過正交設(shè)計(jì)考察了益氣養(yǎng)血營養(yǎng)棗片最佳配方，以感官評價(jià)為指標(biāo)，最終得出益氣養(yǎng)血營養(yǎng)棗片的最優(yōu)工藝為：大棗粉與生藥量0.08 g/mL的黨參液以1∶7的比例混合，加入山藥粉3%，阿膠0.5%，白砂糖8%，檸檬酸0.4%，在60～70 ℃下熱風(fēng)烘干8～9 h[3].

1.3.2棗片溶劑微生物指標(biāo)的測定

將制備好的棗片溶劑置于 37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中保溫 7 d，對保溫實(shí)驗(yàn)后的棗片溶劑進(jìn)行菌落總數(shù)和大腸菌群的測定[3-4].細(xì)菌總數(shù)的檢驗(yàn)，采用平板菌落計(jì)數(shù)法；大腸菌群的檢驗(yàn)，采用多管發(fā)酵法；致病菌的檢驗(yàn)，根據(jù)GB/T4789.4-2010進(jìn)行檢驗(yàn).

1.4 實(shí)驗(yàn)劑量

所制棗片3 g/片，其中含有紅棗粉0.336 g，黨參液2.343 g，白糖0.214 g，檸檬酸0.015 g，山藥粉0.081 g，阿膠0.015 g.按體質(zhì)量 60 kg 計(jì)，推薦棗片攝入量為每日兩片.本實(shí)驗(yàn)的低劑量組設(shè)定為人體推薦攝入量的10倍劑量，中、高劑量組分別為人體推薦攝入量的15倍和20倍，即1.0、1.5、2.0 g/kg，轉(zhuǎn)換成小鼠劑量即：低劑量組0.02 g，中劑量組0.03 g，高劑量組0.04 g.對照實(shí)驗(yàn)組給予等劑量的蒸餾水.受試樣品經(jīng)口灌胃，每日 1 次，持續(xù)給予30 d.

1.5 常壓耐缺氧實(shí)驗(yàn)

取小鼠60只，按體質(zhì)量分層隨機(jī)分為4組，每組15只，即對照組、棗片低劑量組1.0 g/kg、棗片中劑量組1.5 g/kg、棗片高劑量組2.0 g/kg，分別灌胃給予蒸餾水、棗片溶液各劑量30 d，于末次灌胃1 h后，將各組小鼠分別放入裝有5 g鈉石灰的磨口瓶內(nèi)(每瓶1只小鼠，磨口瓶規(guī)格為250 mL)，用凡士林封住瓶口，蓋嚴(yán)，確保磨口瓶氣密性良好，立即計(jì)時(shí)，以呼吸停止跡象為實(shí)驗(yàn)指標(biāo)，觀察并準(zhǔn)確記錄小鼠因缺氧而死亡的時(shí)間[4-5].

1.6 負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)

取小鼠60只，分組給藥量和給予時(shí)間同常壓耐缺氧實(shí)驗(yàn)，末次給予受試樣品30 min后，置小鼠在水箱(尺寸約60 cm×60 cm×50 cm)中游泳.水深約為25～26 cm，水溫調(diào)整并穩(wěn)定于(25±1.0)℃，鼠尾根部負(fù)荷鼠自重10%的重物，進(jìn)行游泳實(shí)驗(yàn)，在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中使每只小鼠四肢不停運(yùn)動(dòng)，準(zhǔn)確記錄小鼠持續(xù)游泳的時(shí)間和力竭游泳時(shí)間，力竭判斷標(biāo)準(zhǔn)按照Dawson法[6]，用秒表準(zhǔn)確記錄小鼠入水至頭部全部入水持續(xù)8 s內(nèi)不能浮出水面為止.記錄游泳開始時(shí)間至力竭的時(shí)間作為小鼠游泳時(shí)間[4-5].

1.7 統(tǒng)計(jì)方法與結(jié)果判定

2 結(jié) 果

2.1 常壓耐缺氧實(shí)驗(yàn)結(jié)果

由表1可知，與對照組相比，營養(yǎng)棗片呈劑量依賴性地延長小鼠存活時(shí)間，提示營養(yǎng)棗片提高小鼠抗疲勞能力.

表1 棗片對小鼠生存時(shí)間的影響

組別鼠的數(shù)量/只生存時(shí)間/s對照組151703．80±46．59 棗片低劑量組152043．50±104．73??棗片中劑量組152081．10±94．10??棗片高劑量組152120．90±83．28??

與空白對照組比較，**P<0.01

2.2 負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果

由表2可知，與對照組相比，營養(yǎng)棗片呈劑量依賴性地延長小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，營養(yǎng)棗片有明顯的抗疲勞作用.

表2 棗片對小鼠游泳時(shí)間的影響

組別鼠的數(shù)量/只游泳時(shí)間/s對照組15643．20±28．42 棗片低劑量組151276．20±58．83??棗片中劑量組151325．85±62．76??棗片高劑量組151377．50±67．19??

與空白對照組比較，**P<0.01

3 討 論

缺氧對受試動(dòng)物是一種劣性刺激，將會(huì)顯著影響受試動(dòng)物的氧化功能，同時(shí)會(huì)對各種代謝反應(yīng)造成影響，最終會(huì)導(dǎo)致機(jī)體的心、腦等主要器官缺氧供能不足而死亡[8].由此可推測出所研究的營養(yǎng)棗片具有一定降低機(jī)體氧耗的作用，可以適當(dāng)延長小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間.耐缺氧能力作為反映受試動(dòng)物應(yīng)激缺氧最客觀、最直接有效的指標(biāo).在宏觀角度上體現(xiàn)為受試動(dòng)物的耐缺氧時(shí)間,以反映受試動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)耐力.利用受試動(dòng)物耐缺氧時(shí)間的變化情況，來評價(jià)抗疲勞功能，觀察所研制的營養(yǎng)棗片是否可提高受試動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)耐力是抗疲勞功能有力的宏觀表現(xiàn).常壓耐缺氧是受試動(dòng)物抗應(yīng)激能力反應(yīng)的指標(biāo)，負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)則側(cè)重于小鼠體力及抗疲勞檢測[9].耿東升等相關(guān)研究報(bào)道表明[10]，抗疲勞和耐缺氧可能與中醫(yī)學(xué)認(rèn)為的益氣養(yǎng)血有關(guān).

本研究制備的營養(yǎng)棗片由大棗粉、黨參、山藥、阿膠等原料組成，風(fēng)味獨(dú)特，食用方便，有補(bǔ)中益氣、養(yǎng)血安神的功能.本營養(yǎng)棗片的主要成分為大棗，大棗營養(yǎng)豐富，是藥食兩用的佳品.《本草綱目》記載“大棗味甘無毒，補(bǔ)中益氣，益血壯神，潤心肺，補(bǔ)五臟，治虛損，延年益壽”等[11].黨參補(bǔ)氣兼能養(yǎng)血，是我國傳統(tǒng)的補(bǔ)益藥.現(xiàn)代藥理研究表明，黨參具有調(diào)節(jié)血糖，促進(jìn)造血機(jī)能，抗缺氧，耐疲勞，增強(qiáng)機(jī)體免疫力等多種作用，主治脾胃虛弱，中氣不足，肺氣虧虛，氣短口渴，血虛萎黃等癥[12-13].阿膠味甘、性平, 歸肺、肝、腎經(jīng).具有補(bǔ)血滋陰、潤燥、止血之功效，被歷代醫(yī)家尊稱為“補(bǔ)血圣藥”[14].山藥富含皂苷、黏液質(zhì)、氨基酸、糖蛋白、VC 等營養(yǎng)物質(zhì).山藥性甘、平、無毒，《神農(nóng)本草經(jīng)》謂之：主健中補(bǔ)虛，除寒熱邪氣，補(bǔ)中益氣力，長肌肉，久服耳目聰明；《本草綱目》認(rèn)為，山藥能益腎氣，健脾胃.近年來的研究表明，山藥具有誘導(dǎo)產(chǎn)生干擾素、增強(qiáng)人體免疫能力、抗衰老、抗腫瘤、降血糖和降血脂等方面的作用[15-16].

本研究表明，不同劑量的營養(yǎng)棗片可不同程度地提高小鼠的耐力，連續(xù)灌服可顯著提高小鼠常壓耐缺氧能力，可明顯提高小鼠負(fù)重游泳能力，且隨劑量增加，作用越強(qiáng).說明營養(yǎng)棗片有一定的益氣養(yǎng)血作用.為大棗深加工產(chǎn)品營養(yǎng)棗片用于養(yǎng)生保健提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)支撐，對加深大棗營養(yǎng)品的開發(fā)具有重要意義.

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Effects of anti-fatigue and hypoxia tolerance of nutritional jujube slices

ZHAO Xu1, ZHANG Ru2, WU Hao-xuan2, YANG Qing-cui2

(1. School of Food Engineering, Harbin University of Commerce, Harbin 150076, China;2. School of Pharmacy, Harbin University of Commerce, Harbin 150076, China)

The effects of YiqiYangxue nutrition jujube slices made of jujube, codonopsis, yam and donkey-hide gelatin on hypoxia tolerance and anti-fatigue of mice was studied. The effects of YiqiYangxue nutrition jujube slices on endurance in mice was observed through bearing hypoxia tolerance test at normal pressure and loading swimming test. The atmospheric hypoxia test showed that the mice in YiqiYangxue nutrition jujube slices group could prolong the hypoxia tolerance time at normal pressure (P<0.05). The anti-fatigue experiment showed that the mice in YiqiYangxue nutrition jujube slices group could prolong the swimming time (P<0.05). YiqiYangxue nutrition jujube slices can obviously improve the endurance in mice.

Jujube slices; hypoxia tolerance; anti-fatigue

2015-02-21.

黑龍江省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練項(xiàng)目(201310240021)

趙 旭(1992-)，男， 碩士，研究方向：食品工程.

張 茹(1980-)，女，博士，講師，研究方向：天然產(chǎn)物活性成分及作用機(jī)制.

R151

A

1672-0946(2015)03-0335-03