復(fù)方苯佐卡因膜劑的制備及處方優(yōu)化

陶明濤，李人宇（連云港師范高等?？茖W(xué)?；瘜W(xué)化工系，江蘇連云港 222000）

口腔潰瘍是一種常見病和多發(fā)病，發(fā)作時影響說話及吞咽、進(jìn)食，患者非常痛苦。全身用藥對其療效不明顯，迄今為止尚缺乏理想的治療藥物，臨床治療主要使用局部制劑治療[1-2]。苯佐卡因（BZ）具有止痛、止癢作用，可口腔局部給藥用于潰瘍治療[3]。醋酸地塞米松（DA）為臨床應(yīng)用最廣泛的糖皮質(zhì)激素類藥物，具有抗炎、抗過敏作用；能降低毛細(xì)血管壁和細(xì)胞膜的通透性，減少炎性滲出，并能抑制組胺和其他有毒物質(zhì)的形成與釋放；可促進(jìn)潰瘍面收縮，加速潰瘍面愈合[4]。口腔潰瘍可局部運用糖皮質(zhì)激素治療。復(fù)方苯佐卡因膜劑是以DA、BZ為主藥制成的復(fù)合藥膜，其可附著在濕潤的口腔黏膜上，保護(hù)創(chuàng)面；且藥膜作為載藥體系可在口腔中持續(xù)釋放藥物，使藥效持久[5]?，F(xiàn)將其制備方法及處方優(yōu)化介紹如下。

1 材料

1.1 儀器

1260型高效液相色譜儀（美國安捷倫公司）；RV10型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（德國艾卡公司）；TE214S型電子天平（德國賽多利斯公司）；DZG6021型真空干燥箱（上海森信實驗儀器有限公司）；RCZ8型藥物溶出儀（上海黃海藥檢儀器有限公司）；PHS-3C型酸度計（上海精密科學(xué)儀器有限公司）。

1.2 藥品與試劑

BZ原料藥（大連美侖生物技術(shù)有限公司，批號：20120418，藥用級，純度：99%）；DA原料藥（藥用級，天津天藥藥業(yè)有限公司，批號：NDAC121204，純度：99%）；聚乙烯醇1788（PVA）（山西三維集團(tuán)股份有限公司，批號：20120503，藥用輔料）；羧甲基纖維素鈉（CMC-Na，分析純，天津福晨化學(xué)試劑廠，批號：20100903）；其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 膜劑的處方篩選

以PVA、CMC-Na為成膜材料，制備BZ復(fù)方膜劑。甘油為增塑劑，聚山梨酯80為增溶劑。PVA及CMC-Na加水過夜溶脹后，于水浴上加熱至95 ℃使溶解，轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀的燒瓶中；DA、BZ溶于無水乙醇中，依次加入甘油、聚山梨酯80、藥物的乙醇溶液，95 ℃水浴加熱，60 r/min旋轉(zhuǎn)至揮出乙醇，混合均勻；繼續(xù)95 ℃水浴加熱，15 r/min旋轉(zhuǎn)3 h，抽真空脫氣。趁熱將膜料傾倒在預(yù)熱玻璃板上，顛板使膜料均勻鋪平，移至45 ℃的真空干燥箱中干燥1 h，冷卻后脫膜，制得藥膜，其總質(zhì)量為8.873 g。再將藥膜切割成1.5 cm×2 cm的膜片，密封。抽取20片稱質(zhì)量，計算平均膜片質(zhì)量為0.131 g（RSD＝0.21%），質(zhì)量差異符合標(biāo)準(zhǔn)[5-6]。每片膜片含DA、BZ分別為4.366、21.704 mg。

2.2 含量測定方法的建立

2.2.1 色譜條件 色譜柱：Agilent Eclipse Plus C18（50 mm×24.6 mm，5 μm）；流動相：甲醇-磷酸溶液（pH 3.0，63∶37）[7-8]，流速：1 ml/min；檢測波長：240 nm；柱溫：40 ℃；進(jìn)樣量：10 μl。

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密稱取干燥至恒質(zhì)量的DA原料藥87.2 mg、BZ原料藥86.1 mg，分別用流動相溶解并定容至1 000 ml，制成質(zhì)量濃度依次為87.2、86.1 μg/ml的對照品貯備液。精密量取DA對照品貯備液1、2、3、4、5 ml，分別置于25 ml量瓶中，用流動相定容至刻度，作為DA系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。精密量取BZ對照品貯備液5、10、15、20、25 ml，分別置于25 ml量瓶中，用流動相定容至刻度，作為BZ系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。進(jìn)樣測定，記錄峰面積，以峰面積（y）為縱坐標(biāo)、質(zhì)量濃度（x）為橫坐標(biāo)，進(jìn)行回歸分析。DA、BZ的回歸方程依次為y＝25.980 3x+4.240 7（r＝0.999 9），y＝14.780 5x－1.826 0（r＝1.000 0）。結(jié)果表明，DA、BZ質(zhì)量濃度的線性范圍依次為3.49～17.44 μg/ml、17.22～86.1 μg/ml。

2.2.3 精密度與回收率試驗 精密量取DA、BZ對照品貯備液各5 ml，混合，稀釋制成含DA 8.72 μg/ml、BZ 43.1 μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)液。室溫下放置，同日內(nèi)測定5次，結(jié)果日內(nèi)RSD依次為0.83%、0.49%（n＝5）；每日測定1次，連續(xù)測定5 d，結(jié)果日間RSD依次為1.06%、0.97%（n＝5），表明精密度良好。稱取DA原料藥0.044 2 g、BZ原料藥0.218 2 g、PVA 0.15 g、CMC-Na 0.15 g、甘油0.15 g、聚山梨酯80 0.15 ml，甲醇超聲充分溶解，濾過后取濾液。分別稱取高、中、低質(zhì)量的DA、BZ原料藥[9]，加入至以上濾液并超聲溶解，甲醇定容至250 ml，精密量取2.5 ml，稀釋定容至100 ml，測定藥物含量并計算DA、BZ的回收率，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收率試驗結(jié)果（n＝6）Tab 1 Results of recovery test（n＝6）

2.3 體外累積釋放度測定

將制得的藥膜放入藥物溶出儀中，轉(zhuǎn)籃法測定累積釋放度，溶出介質(zhì)為pH7.4的生理鹽水1 000 ml。于0.25、0.5、1、2、3、4 h分別取樣1 ml，并同時加入1 ml新鮮溶出介質(zhì)。吸取液用0.45 μm的微孔濾膜濾過，按“2.2.1”項下方法測定DA、BZ含量。以樣品理論含量為100%，計算藥膜中DA、BZ的累積釋放度。

2.4 正交設(shè)計優(yōu)化處方

根據(jù)預(yù)試驗結(jié)果，以PVA（A）、CMC-Na（B）、甘油（C）、聚山梨酯80（D）用量為因素，DA、BZ累積釋放度的平均值為指標(biāo)，其中以0.25 h累積釋放度評價藥膜的突釋效應(yīng)、2 h累積釋放度評價藥膜的釋藥性能，按照L9（34）正交表進(jìn)行試驗設(shè)計優(yōu)化處方。因素與水平見表2，正交試驗結(jié)果見表3，方差分析結(jié)果見表4。

表2 因素與水平Tab 2 Factors and levels

由表3和表4結(jié)果表明，對突釋效應(yīng)（成型性）影響順序為A＞D＞B＞C，因素對釋藥性能影響順序為A＞C＞B＞D，最優(yōu)組合分別為A1B3C1D3（0.25 h）、A2B2C2D1（2 h）。綜合考慮成型性與釋放[10-11]，確定最優(yōu)處方為A2B2C2D2。

表3 正交試驗結(jié)果Tab 3 Result of orthogonal test

表4 方差分析結(jié)果（0.25 h/2 h）Tab 4 Results of variance analysis（0.25 h/2 h）

2.5 驗證試驗

2.5.1 含量測定 根據(jù)最優(yōu)處方確定藥膜處方：DA 0.3 g，BZ 1.5 g，PVA 1.2 g，CMC-Na 1.2 g，甘油1.6 g，聚山梨酯80 1.5 ml，加蒸餾水至60 ml，按“2.1”項下方法制成藥膜（厚度2 mm）200 cm2。取6片膜片，按“2.2”項下方法測定樣品中主藥的含量，結(jié)果顯示，每片藥膜含DA 4.375 mg（RSD＝0.55%，n＝6）、BZ 21.607 mg（RSD＝0.71%，n＝6）。

2.5.2 累積釋放度 取最優(yōu)處方制備的藥膜6批次，按“2.3”項下方法測定體外累積釋放度。復(fù)方苯佐卡因膜劑中BZ、DA的累積釋放曲線見圖1。

圖1 復(fù)方苯佐卡因膜劑中BZ、DA的累積釋放曲線Fig 1 Cumulative release curves of BZ and DA in Compound benzocaine film

由圖1結(jié)果顯示，DA、BZ從藥膜中緩慢釋放，0.25、2 h的平均累積釋放度分別為69.25%（RSD＝1.43%）、32.7%（RSD＝2.01%），2 h時基本接近累積釋放最大值。雖然有一定比例的藥物不能從藥膜中完全釋放，但是該藥膜的釋放行為能滿足臨床用藥的需要。

3 討論

膜劑能簡單有效地將藥物固定在病灶部分，釋藥行為良好。隨制藥設(shè)備的發(fā)展，特別是生產(chǎn)自動化程度的提高，膜劑的應(yīng)用將得到推廣。筆者制備了治療嚴(yán)重口腔潰瘍的復(fù)方苯佐卡因藥膜，局部口含給藥，給藥2 h內(nèi)，藥物從藥膜中逐步釋放，從而發(fā)揮局部止痛與抗炎作用。藥膜在體外釋放試驗中，能基本保持完整，為口腔潰瘍的臨床治療提供了新的選擇。該復(fù)方藥膜制備方法簡單，質(zhì)量可控，有很好的臨床價值。

該復(fù)方藥膜給藥后15 min內(nèi)存在一定的突釋效應(yīng)，有利于給藥后的迅速起效；但藥膜中兩種主藥都存在釋放不完全的情況，其有待進(jìn)行更深入的后續(xù)研究予以解決。

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