乳腺癌中CDC6蛋白表達(dá)意義

齊攀 曹興玥 金艷 張冰 謝振斌

乳腺癌中CDC6蛋白表達(dá)意義

齊攀 曹興玥 金艷 張冰 謝振斌

目的探討乳腺癌組織中細(xì)胞分裂周期蛋白6(CDC6)蛋白表達(dá), 分析CDC6蛋白表達(dá)與雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、人類表皮生長因子受體-2(HER-2)、p53蛋白表達(dá)的關(guān)系和意義。方法采用免疫組化方法檢測73例乳腺癌石蠟標(biāo)本中CDC6蛋白的表達(dá), 分析其與ER、PR、HER-2、p53的關(guān)系。結(jié)果CDC6主要表達(dá)于細(xì)胞漿及細(xì)胞核中, 陽性表達(dá)率：乳腺癌中65.8%, 正常乳腺組織中40.0%, 表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。CDC6蛋白表達(dá)與HER-2表達(dá)呈正相關(guān)。結(jié)論CDC6蛋白表達(dá)與乳腺癌關(guān)系密切, 檢測其表達(dá)對進(jìn)一步了解乳腺癌的生物學(xué)行為及判斷預(yù)后有一定價值。

乳腺癌; 細(xì)胞分裂周期蛋白6；雌激素受體；孕激素受體；人類表皮生長因子受體-2

乳腺癌是婦女常見的惡性腫瘤之一, 發(fā)病率呈逐年上升趨勢, 研究發(fā)現(xiàn)它已成為危害婦女健康的頭號殺手。全世界每年約有120萬乳腺癌患者。乳腺是性激素依賴器官, 其生長、發(fā)育和細(xì)胞的增殖均受雌激素和孕激素的影響[1]。細(xì)胞分裂周期蛋白6(cell division cycle6, CDC6)位于人類染色體17q21.3, 它的表達(dá)受到轉(zhuǎn)錄因子E2F家族的控制, 是人類DNA復(fù)制起始物中必不可少的[2]。在G1期如果細(xì)胞中CDC6水平下調(diào), 則細(xì)胞不能進(jìn)入S期, 后來發(fā)現(xiàn), 如果CDC6受到干擾, 表達(dá)下調(diào), 則會阻滯細(xì)胞增殖及促進(jìn)凋亡。

本文通過免疫組化方法來研究CDC6蛋白在乳腺癌中的表達(dá), 探討其與已知病理指標(biāo)的相關(guān)性, 從而發(fā)現(xiàn)CDC6蛋白在乳腺癌中的意義, 為乳腺癌患者早診早治及未來的個體化精準(zhǔn)治療尋找適合的靶的。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院既往73例乳腺癌石蠟組織塊,25例正常乳腺組織標(biāo)本(來自瘤旁正常乳腺組織)。其中,73例乳腺癌患者中位年齡56歲,65例為浸潤性非特殊型癌,6例為浸潤性特殊型癌,2例為導(dǎo)管內(nèi)癌。25例乳腺組織正常者中位年齡45歲, 所取標(biāo)本距病灶最小距離2.5 cm, 中位距離3.5 cm, 經(jīng)病理證實(shí)均為正常乳腺組織(無腫瘤浸潤)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果判斷方法 采用組織切片免疫組化方法： CDC6(11640-1-AP)兔抗人多克隆抗體為美國PTG.LAB公司生產(chǎn)。免疫組化染色按S-P試劑盒操作說明進(jìn)行。染色過程中設(shè)陽性和陰性對照。每例乳腺癌標(biāo)本均已有HE染色切片(病理既往存放), 并進(jìn)行組織學(xué)分級(SBR分級標(biāo)準(zhǔn))。CDC6以胞核和胞漿出現(xiàn)清晰的棕黃色顆粒為陽性, 采用半定量積分法判斷結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)分析。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CDC6在乳腺正常組織及乳腺癌中的表達(dá)情況 CDC6在乳腺癌組織中的陽性表達(dá)為48例, 陰性為25例, 陽性率65.8%；正常組織中陽性表達(dá)為10例, 陰性為15例, 陽性率為40.0%, 兩者陽性率相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

2.2 CDC6表達(dá)與乳腺癌臨床指標(biāo)的關(guān)系 HER-2陽性及陰性患者CDC6表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05), CDC6蛋白與HER-2呈正相關(guān)(r=0.737, P＜0.05)；p53陽性表達(dá)患者中CDC6陽性率為71.4%(30/42), 陽性及陰性患者CDC6表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

表1 CDC6表達(dá)與乳腺癌各臨床指標(biāo)的關(guān)系(n)

3 討論

和人類有關(guān)的更多的CDC6致瘤作用相繼被發(fā)現(xiàn), 最早的在非小細(xì)胞肺癌中, 作者發(fā)現(xiàn)hCDC6和hCdt1蛋白和p53蛋白在腫瘤的生長中有協(xié)同效應(yīng)。把腫瘤生長的不同階段通常稱為增生, 不典型增生, 惡性腫瘤, 這樣就為發(fā)現(xiàn)CDC6蛋白在腫瘤的增長中是如何起作用的提供條件, 基因的擴(kuò)增導(dǎo)致了腫瘤的發(fā)生, 過表達(dá)hCDC6的細(xì)胞DNA發(fā)生損傷, 基因重新復(fù)制, 阻滯了細(xì)胞的衰老和凋亡[3]。CDC6過表達(dá)導(dǎo)致老鼠上皮細(xì)胞過度增生至癌變, 相同情況在人類上皮細(xì)胞中也會發(fā)生。作者發(fā)現(xiàn)老鼠及人類上皮細(xì)胞過度增生至癌變與腫瘤抑制基因EMT有關(guān), 而CDC6蛋白過表達(dá), 誘發(fā)EMT基因的沉默及EMT蛋白的減少[4]。這可能就是CDC6與癌癥有關(guān)的機(jī)制。CDC6蛋白在宮頸癌中高表達(dá), 促進(jìn)了宮頸癌的發(fā)生發(fā)展, 其可作為宮頸癌檢測的標(biāo)志物[5]。CDC6蛋白在甲狀腺癌中也是增高的, 靶向CDC6增殖, 舌癌就有可能根治[6]。本研究中, 乳腺癌組織中CDC6蛋白表達(dá)較正常乳腺組織中多, 這驗(yàn)證了CDC6過表達(dá)促進(jìn)癌癥發(fā)展的機(jī)制。

HER-2即人類表皮生長因子受體-2,20世紀(jì)80年代, HER-2就已被發(fā)現(xiàn), 該基因位于17號染色體q21上, 編碼p185跨膜蛋白, 其對上皮細(xì)胞的生長、分化、存活具有調(diào)控作用, 在正常體上皮細(xì)胞均有表達(dá), 但無擴(kuò)增。異常擴(kuò)增的HER-2可以促進(jìn)存活, 抑制凋亡, 促進(jìn)腫瘤新生血管的生成, 增強(qiáng)瘤細(xì)胞的侵襲力。HER-2蛋白已成為判斷腫瘤惡性程度的重要標(biāo)志物。CDC6基因及HER-2基因同位于17q21, 有協(xié)同作用, 本研究發(fā)現(xiàn)CDC6與HER-2有正相關(guān)性, HER-2蛋白表達(dá)增強(qiáng), CDC6蛋白表達(dá)增強(qiáng)。這再次證實(shí)CDC6預(yù)示不良預(yù)后, 其可以成為監(jiān)測乳腺癌病情、評價療效的重要分子生物學(xué)指標(biāo)。通過抑制CDC6的表達(dá)可以選擇性抑制腫瘤細(xì)胞的增殖, CDC6有可能成為一種有前景的治療乳腺癌的突破點(diǎn)。這些意義是與本次實(shí)驗(yàn)?zāi)康南嘁恢碌摹?/p>

[1]S?nger N, Ruckh?berle E, Bianchini G, et al. OPG and PgR show similar cohort specific effects as prognostic factors in ER positive breast cancer. Mol Oncol,2014,8(7):1196-1207.

[2]Borlado LR, Méndez J. CDC6: from DNA replication to cell cycle checkpoints and oncogenesis. Carcinogenesis,2008,29(2):237-243.

[3]Liontos M, Koutsami M, Sideridou M, et al. Deregulated overexpression of hCdt1 and hCdc6 promotes malignant behavior. Cancer Res,2007,67(22):10899-10909.

[4]Hanahan D, Weinberg RA. Hallmarks of cancer: the next generation. Cell,2011,144(5):646-674.

[5]陳麗萍, 劉潤花, 趙富璽. 宮頸癌組織中MCM4、CDC6的表達(dá)及其與HPV16/18感染的相關(guān)性. 中國腫瘤生物治療雜志,2008,15(4):374-378.

[6]梁守建, 雷志敏. Cdc6和Ki-67蛋白與口腔鱗癌的相關(guān)性研究.醫(yī)學(xué)綜述,2013,19(5):958-960.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.15.023

2015-05-04]

453002 新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院頭頸乳腺科(齊攀)；新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院組胚教研室(曹興玥 金艷)；新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院兒科(張冰)；新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院 (謝振斌)