同期放化療對晚期鼻咽癌患者血漿EB病毒DNA水平的影響

矯德馨　龔智強(qiáng)　賈鑑慧

作者單位：110042 遼寧省腫瘤醫(yī)院放療科

同期放化療對晚期鼻咽癌患者血漿EB病毒DNA水平的影響

矯德馨龔智強(qiáng)賈鑑慧

作者單位：110042 遼寧省腫瘤醫(yī)院放療科

【摘要】目的探討同期放化療對晚期鼻咽癌患者血漿EB病毒DNA水平的影響。方法選取98例晚期鼻咽癌患者作為研究對象，采用放療聯(lián)合紫杉醇化療進(jìn)行治療，并對98例患者血漿EBV-DNA 水平采用熒光定量PCR 技術(shù)進(jìn)行測定，并與其影像學(xué)檢查及病理結(jié)果進(jìn)行比較分析。結(jié)果放化療后鼻咽癌患者52例緩解，21例穩(wěn)定，25例進(jìn)展。三組鼻咽癌患者血漿 EB-DNA 水平測定陽性率緩解組為0、穩(wěn)定組為4.76%，進(jìn)展組最高為88.00%，緩解組與穩(wěn)定組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，進(jìn)展組分別與緩解組、穩(wěn)定組比較，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；3組敏感性分別為0、4.76%、88.00%，特異性分別為100.00%、95.24%、12.00%，陰性預(yù)測值分別為69.33%、26.67%、4.00%，陽性預(yù)測值分別為0、4.35%、95.65%；緩解組特異性和陰性預(yù)測值最高，與進(jìn)展組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；進(jìn)展組敏感性和陽性預(yù)測值最高，與緩解組和穩(wěn)定組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論晚期鼻咽癌患者同期放化療后血漿EB病毒DNA水平，可作為監(jiān)測和反映鼻咽癌患者放化療后轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的重要指標(biāo)。

【關(guān)鍵詞】放化療；晚期鼻咽癌；血漿；EB病毒；DNA水平

Effects of Concurrent Chemoradiotherapy for EB Virus DNA Levels in Plasma of

Patients with Advanced Nasopharyngeal Carcinoma

JIAODexin，GONGZhiqiang，JIAXinhui.LiaoningTumorHospital，Shenyang，110042

【Abstract】ObjectiveTo investigate the effect of concurrent chemoradiotherapy for EB virus DNA levels in plasma of patients with advanced nasopharyngeal carcinoma.Methods98 patients with advanced nasopharyngeal carcinoma received radiation therapy combined with paclitaxel chemotherapy，and plasma EBV-DNA level of 98 patients were measured by quantitative PCR and was compared with imaging and pathology results.ResultsAfter chemoradiotherapy，there were 52 cases of remission，21 cases of stable and 25 cases of progress.Positive rate of plasma EB-DNA level in remission group was 0，stable group was 4.76%，progressive group was 88.00%，the difference was not statistically significant between remission group and stable group(P>0.05)，progress group were compared with remission group and stable group，the difference was statistically significant(P<0.05)；sensitivity of the 3 groups were 0，4.76%，88.00%，specificity were 100.00%，95.24%，12.00%，and negative predictive values were 69.33%，26.67%，4.00%，positive predictive value were 0，4.35%，95.65%；remission group had the highest specificity and negative predictive value，compared with the progress group，the difference was statistically significant(P<0.05)；the progress group had the highest sensitivity and positive predictive value，compared with remission group and stable group，the difference was statistically significant(P<0.05).ConclusionEB virus DNA levels in plasma of patients with advanced nasopharyngeal carcinoma after concurrent chemoradiotherapy can be used as an important indicator in surveillance and reflect of metastasis and recurrence.

【Key words】Chemotherapy；Advanced nasopharyngeal carcinoma；Plasma；EB virus；DNA level

(ThePracticalJournalofCancer,2015,30:0362～0364)

鼻咽癌作為惡性腫瘤，我國南方地區(qū)為高發(fā)區(qū)，放化聯(lián)合是其目前首選治療方法，但遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和局部區(qū)域復(fù)發(fā)是致使治療失敗的重要原因[1]。目前，較多研究證明血漿EB病毒DNA水平與鼻咽癌關(guān)系較為密切，且其定量檢測伴隨熒光定量 PCR 技術(shù)的成熟，也成為可能[2]。因此，本研究對98例晚期鼻咽癌患者血漿EB病毒DNA水平的變化影響進(jìn)行研究，探討血漿EBV-DNA 水平與晚期鼻咽癌患者放化療后出現(xiàn)轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)等預(yù)后的關(guān)系?，F(xiàn)總結(jié)報告如下。

1材料與方法

1.1　一般資料

選取2012年11月-2013年10月收治的98例鼻咽癌患者為研究對象，所有患者初診時均經(jīng)病理學(xué)檢查確診為晚期鼻咽癌，病理類型為鱗狀細(xì)胞癌，且患者血常規(guī)、肝腎功能等基本正常，可耐受放化療。年齡58-74歲，平均年齡(63.2±14.9)歲，病程1～10年，平均病程(3.6±2.3)年，所有患者一般臨床資料無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，見表1。

表1　98例晚期鼻咽癌患者臨床資料情況

1.2　治療方法與指標(biāo)

采用放療聯(lián)合紫杉醇化療治療方式進(jìn)行治療，放療的同時進(jìn)行化療，靜脈滴注紫杉醇 60 mg/m2，1個周期為21 d，共4個周期，紫杉醇的靜脈滴注在開始放療的第1、22、43 d，進(jìn)行紫杉醇靜脈滴注前一天口服地塞米松，連續(xù)口服5 d，0.75～3 mg/d，防止過敏反應(yīng)發(fā)生或液體潴留導(dǎo)致病情加重。并對98例患者血漿EBV-DNA 水平應(yīng)用熒光定量PCR 技術(shù)進(jìn)行測定，并與其影像學(xué)檢查及病理結(jié)果進(jìn)行比較，分析血漿EBV-DNA 水平與晚期鼻咽癌患者放化療后出現(xiàn)轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)等預(yù)后的關(guān)系。

1.3　血漿 DNA提取及定量PCR 反應(yīng)方法

抽取患者5 ml外周血置于 EDTA 抗凝管中，以4 000 r/min 離心速度分離 10 min，取上層血漿并凍存于 -20 ℃。將凍存血漿置于4 ℃解凍，抽取每例標(biāo)本50 μL 血漿，用 QIAamp 血液按試劑盒說明書提取試劑盒(德國Qiagen 公司)抽提 DNA[3]。在自動熒光 PCR 儀(PE 7700)上進(jìn)行熒光定量PCR 反應(yīng)，用蒸餾水作為陰性對照[4]。

1.4　療效評價標(biāo)準(zhǔn)

近期治療效果根據(jù) 2003年WHO發(fā)布的實(shí)體瘤療效評價標(biāo)準(zhǔn)分為：完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、穩(wěn)定(SD)及進(jìn)展(PD)，治療有效率 =(CR +PR +SD)/ 總例數(shù) ×100%[5]。

1.5　統(tǒng)計學(xué)處理

2結(jié)果

2.1　放化療后鼻咽癌患者血漿 EB-DNA 水平測定陽性率情況比較

放化療后鼻咽癌患者52例緩解，21例穩(wěn)定，25例進(jìn)展。三組鼻咽癌患者血漿 EB-DNA 水平測定陽性率緩解組為0、穩(wěn)定組為4.76%，進(jìn)展組最高為88.00%，緩解組與穩(wěn)定組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，進(jìn)展組分別與緩解組、穩(wěn)定組比較，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2　放化療后鼻咽癌患者血漿 EB-DNA 水

2.2 　放化療后鼻咽癌患者血漿 EB-DNA 水平的測定結(jié)果

放化療后緩解組、穩(wěn)定組、進(jìn)展組3組鼻咽癌患者血漿EB-DNA 水平檢測為陽性23 例，陰性75例。3組敏感性分別為0、4.76%、88.00%，特異性分別為100.00%、95.24%、12.00%，陰性預(yù)測值分別為69.33%、26.67%、4.00%，陽性預(yù)測值分別為0、4.35%、95.65%；緩解組特異性和陰性預(yù)測值最高，與進(jìn)展組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；進(jìn)展組敏感性和陽性預(yù)測值最高，與緩解組和穩(wěn)定組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3　放化療后鼻咽癌患者血漿 EB-DNA 水平的測定結(jié)果/%

3討論

鼻咽癌發(fā)病與遺傳和環(huán)境因素密切相關(guān)，韋淦寶[6]綜合比較晚期鼻咽癌近期療效、遠(yuǎn)期療效及發(fā)生毒副反應(yīng)的情況，認(rèn)為治療中晚期鼻咽癌應(yīng)用放療聯(lián)合替加氟或紫杉醇較單純放療更具臨床應(yīng)用價值，其5年生存率幾乎為單純放療的3倍，達(dá)60%以上。

目前，對鼻咽癌篩查和診斷的主要手段是檢測 EB 病毒殼抗原 IgA 抗體(VCA-IgA)，但其假陽性率較高，因此在臨床診斷上有一定難度[7]。近年來關(guān)于EB 病毒感染與鼻咽癌二者之間關(guān)系密切有較多的研究報告證明。隨著熒光定量 PCR 技術(shù)的成熟，使鼻咽癌患者血漿 EB 病毒的 DNA 水平的定量檢測成為可能。熒光定量 PCR反應(yīng)一方面具備 PCR 的高靈敏性，一方面擴(kuò)增后無需進(jìn)行處理，很難被污染，是理想的研究鼻咽癌患者血漿 EB- DNA 水平的手段[8]。

影像學(xué)檢查往往對當(dāng)患者體內(nèi)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的較小瘤體并不敏感，而此時血漿 EB 病毒 DNA 則已較早呈現(xiàn)陽性[9]。呂志倩[10]對100例鼻咽癌患者研究發(fā)現(xiàn)，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血漿中EB-DNA 水平為0 copies/mL，而發(fā)生雙側(cè)和單側(cè)咽后部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者EB-DNA 水平分別為 1.1×105copies/mL和2.2×104copies/mL，EB 病毒 DNA 的水平在單、雙側(cè)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性組之間及單、雙側(cè)陽性組與陰性組與之間進(jìn)行比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。翁玉玲等[11]報告，血漿 EB 病毒 DNA 的敏感性與特異性均相對較高，有可能替代 VCA-IgA 成為鼻咽癌早期診斷與篩查的指標(biāo)。

本研究中，鼻咽癌患者血漿 EB-DNA 水平測定陽性率緩解組為0、穩(wěn)定組為4.76%，進(jìn)展組最高，為88.00%，緩解組與穩(wěn)定組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，進(jìn)展組分別與緩解組、穩(wěn)定組比較，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；緩解組特異性和陰性預(yù)測值最高，與進(jìn)展組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；進(jìn)展組敏感性和陽性預(yù)測值最高，與緩解組和穩(wěn)定組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。以上提示對鼻咽癌患者外周血漿 EB 病毒 DNA 水平進(jìn)行熒光定量 PCR 技術(shù)檢測，在鼻咽癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移等進(jìn)展患者中的篩查與早期檢測有重要臨床意義，這與胡慧農(nóng)[12]的研究結(jié)論一致。

綜上所述，晚期鼻咽癌患者同期放化療后血漿EB病毒DNA水平，可作為監(jiān)測和反映鼻咽癌患者放化療后轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的重要治療效果指標(biāo)。

參考文獻(xiàn)

[1]劉洪波，徐曉南，賴淑貞，等.多西他賽聯(lián)合順鉑治療鼻咽癌放療后遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的臨床觀察〔J〕.腫瘤基礎(chǔ)與臨床，2012，25(4)：296-298.

[2]龐丹梅，鄧燕明，衛(wèi)光宇，等.局部晚期鼻咽癌同步放化療單藥與聯(lián)合方案的療效對比〔J〕.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2010，26(1)：76-78.

[3]陳冬平，余意，齊斌，等.多西他賽加奈達(dá)鉑和順鉑加氟尿嘧啶方案誘導(dǎo)化療局部晚期鼻炎癌的前瞻性研究〔J〕.國際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報，2012，18(10)：17-19.

[4]李麗華.多西他賽同期放化療治療晚期鼻咽癌臨床觀察〔J〕.實(shí)用中西醫(yī)結(jié)合臨床，2010，10(6)：43，53.

[5]李中文，湯明，鄒彥.血漿EBV-DNA在中晚期鼻咽癌誘導(dǎo)化療前后水平變化〔J〕.遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2013，36(1)：41-43.

[6]韋淦寶.同期放化療治療Ⅲ期鼻咽癌的療效對比〔J〕.中國醫(yī)藥指南，2014，12(19)：163-164.

[7]李友瓊，陽文輝，黃慧嬪，等.EB病毒DNA載量檢測在門診診斷鼻咽癌患者中的應(yīng)用價值〔J〕.中國臨床新醫(yī)學(xué)，2013，6(5)：415-418.

[8]張洋，張寧，譚以昶，等.血漿EBV-DNA檢測在鼻咽癌患者放療后的臨床意義〔J〕.中國醫(yī)學(xué)工程，2013，21(12)：115-116.

[9]Leung SF，Tam JS，Chan A T，et al.Improved accuracy of detection of nasopharyngeal a by combined application of circulating epstein-barr virus DNA and anti-epstein-barr viral capsid antigen IgA antibody〔J〕.C lin Chen，2004，50(2)：339-345.

[10]呂志倩，胡學(xué)峰，黃國森，等.鼻咽癌患者EBV-DNA的表達(dá)及臨床意義〔J〕.中外醫(yī)療，2013，32(36)：183-184.

[11]翁玉玲.鼻咽癌咽后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與EBV-DNA血清學(xué)標(biāo)記物關(guān)系分析〔J〕.當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2013，19(16)：58-59.

[12]胡慧農(nóng)，黃民主，黃霜，等.同期放化療治療Ⅲ期鼻咽癌的療效對比〔J〕.中國醫(yī)藥指南，2014，12(19)：163-164.

(編輯：吳小紅)

(收稿日期2014-03-25修回日期 2014-04-18)

中圖分類號：R739.63

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1001-5930(2015)03-0362-03

DOI：10.3969/j.issn.1001-5930.2015.03.014

通訊作者：賈鑑慧