網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)在多發(fā)性骨髓瘤臨床診斷中的應(yīng)用價(jià)值

劉曉良

網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)在多發(fā)性骨髓瘤臨床診斷中的應(yīng)用價(jià)值

劉曉良

目的探討網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)在多發(fā)性骨髓瘤臨床診斷中的應(yīng)用價(jià)值。方法選擇80例多發(fā)性骨髓瘤患者作為觀察組，同期選擇80例健康志愿供髓者作為對(duì)照組。2組都進(jìn)行血常規(guī)、骨髓象、細(xì)胞因子、網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)檢測(cè)。結(jié)果觀察組的中性粒細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)與血小板計(jì)數(shù)明顯低于對(duì)照組(P＜0．05)。相對(duì)于對(duì)照組，觀察組的骨髓象細(xì)胞大小明顯不均勻;核分葉過(guò)多、形態(tài)異常;染色質(zhì)粗糙，網(wǎng)狀排列;巨核細(xì)胞出現(xiàn)淋巴樣小巨核、單圓核小巨核、多圓核小巨核。與對(duì)照組相比，觀察組的血清TNF-α和IL-4值明顯較高(P＜0．05)。觀察組的RET、RET%、IRF、MFR、HFR值都明顯高于對(duì)照組(P＜0．05)，而LFR值明顯低于對(duì)照組(P＜0．05)。結(jié)論網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)在多發(fā)性骨髓瘤臨床診斷中的應(yīng)用可以較早預(yù)知骨髓造血功能的變化情況，結(jié)合其他方法進(jìn)行判定對(duì)制定治療方案和臨床指導(dǎo)用藥具有一定的參考作用。

網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù);多發(fā)性骨髓瘤;骨髓象;細(xì)胞因子;血常規(guī)

(The Practical Journal of Cancer，2015，30:1129～1131)

多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是發(fā)生在漿細(xì)胞的惡性克隆性疾病，其能分泌單克隆免疫球蛋白，并且主要表現(xiàn)為大量克隆性漿細(xì)胞的增生和積聚［1-2］。多發(fā)性骨髓瘤的發(fā)病機(jī)制至今尚不清楚，目前研究認(rèn)為機(jī)體免疫調(diào)節(jié)功能紊亂為其主要發(fā)病機(jī)制，T細(xì)胞功能失衡及其分泌的腫瘤壞死因子-α和干擾素介導(dǎo)的通過(guò)Fas途徑的正常骨髓細(xì)胞過(guò)度凋亡占主要地位［3-4］。傳統(tǒng)上通常采用中性粒細(xì)胞、血小板兩者來(lái)共同監(jiān)測(cè)骨髓相關(guān)疾病，但是由于受者骨髓造血功能重度受抑，當(dāng)患者血小板顯著減少或存在出血的危險(xiǎn)時(shí)，需要輸注血小板來(lái)加以防治，常常不能準(zhǔn)確反應(yīng)疾病狀況［5］。網(wǎng)織紅細(xì)胞是晚幼紅細(xì)胞脫核后到完全成熟之間的過(guò)渡細(xì)胞，是可以反映骨髓造血功能的一個(gè)重要指標(biāo)［6］。以往檢測(cè)網(wǎng)織紅細(xì)胞所用的顯微鏡目測(cè)法進(jìn)行網(wǎng)織紅細(xì)胞分群，但精確性較差［7］。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，網(wǎng)織紅細(xì)胞的檢測(cè)有了更大的發(fā)展。中熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率(MFR)、網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率(RET%)、網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值(RGT)、未成熟網(wǎng)

織紅細(xì)胞比率(IRF)、低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率(LFR)、高熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率(HFB)6項(xiàng)參數(shù)是近年使用全自動(dòng)血液分析儀后常規(guī)的檢測(cè)項(xiàng)目，其對(duì)臨床疾病的診斷、治療和療效觀察有重要作用［8-9］。本文為此具體探討了網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)在多發(fā)性骨髓瘤臨床診斷中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1．1 研究對(duì)象

選擇2010年1月至2014年5月經(jīng)病理確診為多發(fā)性骨髓瘤患者80例作為觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn):診斷均符合《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》，且骨髓單個(gè)核細(xì)胞Coombs試驗(yàn)陰性;全部患者病情為Ⅲ期;均未接受過(guò)治療;年齡20～80歲。80例中男性45例，女性35例;臨床分型:IgG型50例，IgA型20例，IgD型10例;臨床Durie-Samonf分期:ⅢA 45例，Ⅲ35例;年齡21～79歲，平均年齡(67．44±5．33)歲;臨床表現(xiàn):面色蒼白、頭暈乏力者45例，發(fā)熱33例，皮膚出血點(diǎn)及紫斑者34例，牙齦出血、鼻衄者16例。同期選擇80例健康志愿供髓者作為對(duì)照組，男性46例，女性34例;年齡21～79歲，平均年齡(67．65±5．11)歲。2組的性別、年齡對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0．05)。2組都簽署了知情同意書(shū)，自身都無(wú)合并心、肝、腎等嚴(yán)重疾病。

1．2 血常規(guī)分析

2組都選擇全自動(dòng)血液分析儀進(jìn)行血常規(guī)分析，采取靜脈EDTA-K2抗凝血2 ml，低溫離心分離血清后，應(yīng)用XE-2100全自動(dòng)血液分析儀，2 h內(nèi)檢測(cè)完成;檢測(cè)指標(biāo)包括中性粒細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)和血小板計(jì)數(shù)。

1．3 骨髓象檢測(cè)

取同樣的血液樣本進(jìn)行血涂片，然后進(jìn)行瑞氏染色，光學(xué)顯微鏡下先在低倍鏡下觀察有核細(xì)胞增生程度，選擇涂片均勻染色良好滿意的視野進(jìn)行有核細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察。

1．4 細(xì)胞因子測(cè)定

取同樣的血清樣本，測(cè)定血清TNF-α、IL-4水平;嚴(yán)格根據(jù)試劑盒操作說(shuō)明進(jìn)行。

1．5 網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)測(cè)定

取同樣的血液樣本，應(yīng)用XE-2100全自動(dòng)血液分析儀進(jìn)行檢測(cè)，網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)包括網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)數(shù)(RET)、網(wǎng)織紅細(xì)胞比率(RET%)、高熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率(HFR)、中熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率(MFR)、低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率(LFR)、未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞指數(shù)(IRF)等，嚴(yán)格按照說(shuō)明進(jìn)行操作。

1．6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

選擇SPSS 18．0軟件進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較，P＜0．05表明差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2．1 血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果對(duì)比

經(jīng)過(guò)檢測(cè)，觀察組的中性粒細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)與血小板計(jì)數(shù)明顯低于對(duì)照組(P＜0．05)。見(jiàn)表1。

表1 2組血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果對(duì)比(±s)

表1 2組血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果對(duì)比(±s)

組別中性粒細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)(×109/L)血小板(×109/L) 0．33±0．112．21±0．67對(duì)照組3．23±0．3423．48±5．44 t觀察組27．61525．983 P ＜0．05＜0．05

2．2 骨髓象形態(tài)對(duì)比

經(jīng)過(guò)檢測(cè)，相對(duì)于對(duì)照組，觀察組的骨髓象細(xì)胞大小明顯不均勻;核分葉過(guò)多、形態(tài)異常;染色質(zhì)粗糙，網(wǎng)狀排列;巨核細(xì)胞出現(xiàn)淋巴樣小巨核、單圓核小巨核、多圓核小巨核。

2．3 細(xì)胞因子測(cè)定結(jié)果對(duì)比

經(jīng)過(guò)測(cè)定，與對(duì)照組相比，觀察組的血清TNF-α和IL-4值明顯較高(P＜0．05)。見(jiàn)表2。

表2 2組細(xì)胞因子測(cè)定結(jié)果對(duì)比(μg/ml，±s)

表2 2組細(xì)胞因子測(cè)定結(jié)果對(duì)比(μg/ml，±s)

IL-4觀察組組別TNF-α 4．44±2．382．22±0．45對(duì)照組1．23±0．671．10±0．34 t 12．7736．493 P ＜0．05＜0．05

2．4 網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)值對(duì)比

經(jīng)過(guò)檢測(cè)與計(jì)算，觀察組的RET、RET%、IRF、MFR、HFR值都明顯高于對(duì)照組(P＜0．05)，而LFR值明顯低于對(duì)照組(P＜0．05)。見(jiàn)表3。

3 討論

多發(fā)性骨髓瘤是一種常見(jiàn)的惡性漿細(xì)胞疾病，由于各種因素的影響，大部分患者治療效果均不理想［10］。目前診斷多發(fā)性骨髓瘤主要依賴血常規(guī)、骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)、骨髓病理、細(xì)胞遺傳學(xué)和分子遺傳學(xué)等檢查方法，但仍有相當(dāng)多疑似病例不能確診，為此有必要尋找更為客觀而特異的診斷和鑒別診斷方法［11］。多發(fā)性骨髓瘤在常規(guī)生化分析中，多表現(xiàn)為中性粒細(xì)胞

絕對(duì)計(jì)數(shù)與血小板計(jì)數(shù)明顯降低，但是并非多發(fā)性骨髓瘤所特有，容易造成誤診。

在血象分析中，多發(fā)性骨髓瘤的病態(tài)改變以核形異常為主要表現(xiàn)，包括淋巴樣小巨核細(xì)胞、多核、小圓核、巨核細(xì)胞及大單圓核小巨核細(xì)胞等;并且多數(shù)涂片粒細(xì)胞胞質(zhì)顆粒稀少或缺如，可出現(xiàn)異帶雙核型幼稚粒細(xì)胞，偶見(jiàn)嗜堿粒細(xì)胞增多現(xiàn)象［12］。研究表明T淋巴細(xì)胞異常激活及功能亢進(jìn)在骨髓瘤發(fā)病中有重要作用，CD4+T淋巴細(xì)胞是體液免疫、細(xì)胞免疫及細(xì)胞因子調(diào)節(jié)的中心，骨髓瘤患者也存在外周血Th細(xì)胞亞群比例失衡［13］。

基礎(chǔ)免疫學(xué)研究表明，由于Th2型細(xì)胞因子IL-4可以使Th1細(xì)胞向Th2方向轉(zhuǎn)化。骨髓瘤的恢復(fù)期雖然Th2細(xì)胞有所下降，但I(xiàn)L4卻依然增高，且此時(shí)Th1型細(xì)胞因子已顯著降低［14］。同時(shí)當(dāng)前研究顯示骨髓瘤的發(fā)病由于Th1細(xì)胞增多、功能亢進(jìn)及Th2細(xì)胞代償不足，使整個(gè)免疫格局向Th1型偏移所致［15］。與對(duì)照組相比，本文觀察組的血清TNF-α和IL-4值明顯較高(P＜0．05)。因此，未知抗原誘發(fā)Th0細(xì)胞向Th1細(xì)胞偏移分化，而Th2細(xì)胞代償不足導(dǎo)致Th1/Th2細(xì)胞比例失衡，最終使下游效應(yīng)因子和效應(yīng)細(xì)胞TNF-α和IL-4顯著升高，造成骨髓造血功能衰竭。

網(wǎng)織紅細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有殘存的核糖核酸，經(jīng)過(guò)特殊染色可呈現(xiàn)出特殊的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。用特定的堿性熒光染料與網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)的RNA結(jié)合后，通過(guò)流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定網(wǎng)織紅細(xì)胞的熒光強(qiáng)度，熒光強(qiáng)度越強(qiáng)，說(shuō)明RNA含量越多，網(wǎng)織紅細(xì)胞也就越不成熟［16］。根據(jù)熒光強(qiáng)度的大小，可以將網(wǎng)織紅細(xì)胞分為高熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞(HFR)、中熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞(MFR)、低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞(LFR)等部分。網(wǎng)織紅細(xì)胞及其參數(shù)在判斷骨髓造血功能狀態(tài)、鐵代謝狀態(tài)等中日益成為重要的敏感指標(biāo)，全自動(dòng)網(wǎng)織紅細(xì)胞分析儀不僅改善了傳統(tǒng)項(xiàng)目網(wǎng)織紅細(xì)胞比例、絕對(duì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)精密度，而且還能檢測(cè)未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)，并在此基礎(chǔ)上得出未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)［17］。其中用RET%、RET觀察貧血的性質(zhì)是否為增生性;網(wǎng)織紅細(xì)胞分群的LFR、MFR、HFR可對(duì)骨髓造血狀況進(jìn)行分析和監(jiān)測(cè);IRF是了解骨髓反應(yīng)狀態(tài)的指標(biāo);MFR、HFR屬幼稚型網(wǎng)織紅細(xì)胞，其比例增高說(shuō)明骨髓造血功能旺盛，從而能更好地評(píng)價(jià)骨髓造血功能。本文觀察組的RET、RET%、IRF、MFR、HFR值都明顯高于對(duì)照組(P＜0．05)，而LFR值明顯低于對(duì)照組(P＜0．05)。表明網(wǎng)織紅細(xì)胞的這些參數(shù)指標(biāo)可用于多發(fā)性骨髓瘤的診斷及療效觀察、放化療后骨髓抑制及恢復(fù)的觀察等。

總之，網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)在多發(fā)性骨髓瘤臨床診斷中的應(yīng)用可以較早預(yù)知骨髓造血功能的變化情況，結(jié)合其他方法進(jìn)行判定對(duì)制定治療方案和臨床指導(dǎo)用藥具有一定的參考作用。

表3 2組網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)值對(duì)比(±s)

表3 2組網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)值對(duì)比(±s)

RET/%IRF/%LFR/%MFR/%HFR/%觀察組1．62±0．340．09±0．0312．87±5．3388．39±6．091組別RET/(g·L-1) 0．33±3．201．73±0．35對(duì)照組1．03±0．440．06±0．023．32±1．3396．63±5．443．18±1．220．44±0．12 t 5．9833．9848．0935．3316．9838．001 P ＜0．05＜0．05＜0．05＜0．05＜0．05＜0．05

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The Application Value of Reticulocyte Parameters in Clinical Diagnosis of Multiple Myeloma

LIU Xiaoliang．The Center Hospital of Shangluo，Shangluo，726000

ObjectiveTo investigate the application value of reticulocyte parameters in clinical diagnosis of multiple myeloma．Methods80 multiple myeloma patients was the observation group，and 80 healthy patients was the control group．Blood routine，bone marrow，cytokines，reticulocyte parameters of the 2 groups were detected．ResultsThe absolute neutrophil count and platelet count in the observation group were significantly lower than those of the control group(P＜0．05)．Compared with the control group，bone marrow cell size was uneven;nuclear sub leaves was excessive，morphological was abnormal;chromatin coarse mesh arrangement;megakaryocytes appear lymphoid small megakaryocytes，single nuclei small megakaryocytes，multiround nucleus small megakaryocytes in the observation group．Compared with the control group，the serum TNF-α and IL-4 level in the observation group were significantly higher(P＜0．05)．The RET，RET%，IRF，MFR，HFR value in the observation group were significantly higher than those of the control group(P＜0．05)，the LFR value in the observation group was significantly lower than that of the control group(P＜0．05)．ConclusionThe reticulocyte parameters in clinical diagnosis of multiple myeloma can predict early changes in bone marrow function，combined with other methods it has a certain reference for determining clinical treatment and medication guide．

Reticulocyte parameters;Multiple myeloma;Bone marrow;Cytokines;Blood routine

10．3969/j．issn．1001-5930．2015．08．007

R733．3

A

1001-5930(2015)08-1129-03

2014-12-04

2015-07-02)

(編輯:甘艷)

726000陜西省商洛市中心醫(yī)院