銀鯧魚脂肪酸的氣相色譜-質(zhì)譜分析

刁全平，郭 華，呂琳琳，李鐵純，侯冬巖

(鞍山師范學(xué)院 化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院,遼寧 鞍山 114007)

銀鯧魚脂肪酸的氣相色譜-質(zhì)譜分析

刁全平，郭 華，呂琳琳，李鐵純，侯冬巖*

(鞍山師范學(xué)院 化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院,遼寧 鞍山 114007)

為了解銀鯧魚中脂肪酸的組成，采用Bligh-Dyer提取法對樣品中脂肪油進(jìn)行提取，甲酯化后利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行分析測定.結(jié)果發(fā)現(xiàn)從銀鯧魚中鑒定出21種脂肪酸，飽和脂肪酸9種，相對百分含量占總檢出量的36.92%,不飽和脂肪酸12種，相對百分含量占總檢出量的63.08%，其中EPA和DHA的相對百分含量分別為3.45%和13.18%.

銀鯧魚；脂肪酸；氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用

銀鯧魚(Pampusargenteus)屬于鱸形目，鯧科，別名鏡魚、鮀魚，體短而高，極側(cè)扁，略呈菱形，頭較小，吻圓，口小，牙細(xì)，以甲殼類等動物為食，是我國沿海重要的經(jīng)濟(jì)魚類之一，廣泛分布于黃海、渤海、東海和南海各海區(qū)[1]，其肉質(zhì)細(xì)嫩、味道鮮美，含有豐富的蛋白質(zhì)、微量元素等營養(yǎng)物質(zhì)[2]，具有很高的營養(yǎng)價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，深受人們的喜愛，在中國海洋漁業(yè)中占重要地位.

目前關(guān)于銀鯧魚養(yǎng)殖、加工等方面的研究較多，而有效化學(xué)活性成分的研究較少.本文采用Bligh-Dyer提取法提取銀鯧魚肉的脂肪油，然后進(jìn)行甲酯化處理，再利用GC-MS對其進(jìn)行分析測定[3]，分離鑒定其中的脂肪酸成分，并測定其含量，尋求其成分與功效之間的關(guān)系，為銀鯧魚的進(jìn)一步深度開發(fā)提供一定的支持.

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

銀鯧魚購自鞍山市水產(chǎn)品市場，三氯甲烷、甲醇、氫氧化鉀、正己烷、無水硫酸鈉等化學(xué)試劑均為分析純，水為自制二次蒸餾水.

1.2 儀器與設(shè)備

HP6890/5973型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國惠普公司)；N-1000D-W微型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(日本東京理化器械株式會社)；85-1型恒溫磁力攪拌器(常州國華電器有限公司)；80-2B臺式離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)；KQ-250B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司).

1.3 方法

1.3.1 脂肪油的提取 取銀鯧魚一條，用剪刀將皮剝離，取背部肌肉，用四分法稱取樣品14.00 g，置于250 mL錐形瓶中，加入140 mL甲醇，70 mL三氯甲烷和42 mL蒸餾水，膠塞蓋緊，室溫下電磁攪拌20 h后，加入70 mL三氯甲烷和70 mL蒸餾水，搖勻后過濾，分液取下層有機(jī)相，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收溶劑，得脂肪油2.48 g.

1.3.2 脂肪油的甲酯化 用12 mL正己烷將魚油溶解，加入3 mL濃度為0.5 mol/L的氫氧化鉀-甲醇溶液在70 ℃水浴中回流20 min，冷卻后加入15 mL蒸餾水，超聲振蕩5 min，然后以3 000 r/min離心10 min，取上層正己烷溶液用無水硫酸鈉干燥后，待GC/MS分析備用.1.3.3 脂肪酸的分析鑒定 色譜條件：色譜柱為HP-5彈性石英毛細(xì)管柱(25 m×0.20 mm×0.33 μm)；進(jìn)樣口溫度300 ℃；程序升溫：100 ℃→200 ℃,升溫速率為10 ℃/min，200 ℃→280 ℃升溫速率為5 ℃/min，280 ℃保持5 min；分流比100∶1，溶劑延遲3 min．

質(zhì)譜條件：全掃描，四級桿質(zhì)量分析器，掃描范圍為20～500 m/z；離子源為電子轟擊源，離子源溫度為230 ℃；電離電壓為70 eV；電子倍增器電壓為1 988 V；發(fā)射電流為34.6 μA；接口溫度為230 ℃．

定性分析:取經(jīng)1.3.2項(xiàng)處理過的樣品0.4 μL，用GC/MS進(jìn)行分析鑒定．通過G1701BA化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，檢索NIST98譜圖庫，確定樣品中各個(gè)化學(xué)成分．

定量分析:通過G1701 BA化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，按峰面積歸一化法進(jìn)行定量分析，分別求得各化學(xué)成分的相對百分含量

X=Ai/∑Ai×100%.

2 結(jié)果與討論

2.1 銀鯧魚脂肪酸甲酯總離子流譜圖

按照步驟1.3.3進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，得銀鯧魚脂肪酸甲酯總離子流譜圖如圖1所示，并將樣品中的脂肪酸種類及其相對百分含量列于表1.

對表1進(jìn)行分析，從銀鯧魚中鑒定出21種脂肪酸，飽和脂肪酸9種，相對百分含量占總檢出量的36.92%，不飽和脂肪酸12種，相對百分含量占總檢出量的63.08%.

9-十六碳烯酸(棕櫚油酸)和9-十八碳烯酸(油酸)能降低膽固醇和低密度脂蛋白，具有治療老年人心腦血管疾病等功能[4～5]，銀鯧魚中含量分別為5.69%和26.90%.5,8,11,14,17-二十碳五烯酸(EPA)和4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸(DHA)被稱為“腦黃金”，能夠?qū)π哪X血管疾病起到預(yù)防作用[6]，銀鯧魚中含量分別為3.45%和13.18%，其中，DHA的相對百分含量是海參中DHA的相對百分含量的5倍[7].

2.2 討論

本文采用Bligh-Dyer法在室溫下對銀鯧魚中脂肪油進(jìn)行提取，盡量避免脂肪酸在提取過程中的損失和多不飽和脂肪酸的變性，提高其脂肪酸分析的準(zhǔn)確度.銀鯧魚中的脂肪酸組成豐富，不飽和脂肪酸含量高，對于預(yù)防心血管病等疾病具有很高的藥用價(jià)值，本文的研究為銀鯧魚資源的進(jìn)一步開發(fā)提供一定的依據(jù).

表1 銀鯧魚脂肪油中脂肪酸(以酯表示)的組成及相對含量

[1] 許玉甫，周軍，張國勝，等.河北沿海銀鯧漁業(yè)資源現(xiàn)狀分析[J].河北漁業(yè)，2009，15(6)：4-6，15.

[2] 徐善良，王丹麗，徐繼林，等.東海銀鯧(Pampusargenteus)、灰鯧(P.cinereus)和中國鯧(P.sinensis)肌肉主要營養(yǎng)成分分析與評價(jià)[J].海洋與湖沼，2012，43(4)：775-782.

[3] 刁全平，侯冬巖，回瑞華，等.青石斑魚脂肪酸的分析及其營養(yǎng)價(jià)值評價(jià)[J].營養(yǎng)學(xué)報(bào)，2012，34(4)：411-413.

[4] 王維群．營養(yǎng)學(xué)[M]．北京：高等教育出版社，2005：76-258．

[5] 徐華順，羅玉萍，李思光.產(chǎn)棕櫚油酸酵母發(fā)酵條件的研究[J].中國油脂，1999，24(6)：53-55.

[6] 陳麗花，肖作兵，周培根.中國對蝦的脂肪酸分析及其營養(yǎng)價(jià)值評價(jià)[J].上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào),2010,19(1)：125-129.

[7] 刁全平，侯冬巖，回瑞華，等.海參脂肪酸的氣相色譜-質(zhì)譜分析[J].鞍山師范學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，10(4)：33-35.

DIAO Quanping,GUO Hua,Lü Linlin,LI Tiechun,HOU Dongyan*

(SchoolofChemistryandLifeScience,AnshanNormalUniversity,AnshanLiaoning114007,China)

(責(zé)任編輯：陳 欣)

Study on fatty acid inPampusargenteus

Composition and contents of fatty acid inPampusargenteuswas analyzed.The fatty oil was extracted by Bligh-Dyer method and esterified by sodium hydroxide-methanol,and the fatty acids methanol esters were separated and identified by gas chromatography-mass spectrometry.The results showed that 9 kinds of saturated fatty acids (36.92 %) and 12 kinds of unsaturated fatty acids (63.08%) were identified inPampusargenteus,and the contents of EPA and DHA were 3.45% and 13.18% respectively. Key wordsPampusargenteus；fatty acid；Gas Chromatography-Mass Spectrometry

2015-10-03

刁全平(1980-)，男，山東濰坊人，鞍山師范學(xué)院化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院副教授，主要從事天然產(chǎn)物有效成分分析.

O656.31

A

1008-2441(2015)06-0051-03