南海分室科單殖吸蟲—中國新記錄亞科

楊長平鄒小梅張劍英丁雪娟

(1. 華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院, 廣東省水產(chǎn)健康安全養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 廣州 510631; 2. 中國科學(xué)院南海海洋研究所,熱帶海洋生物資源與生態(tài)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 廣州 510301)

南海分室科單殖吸蟲—中國新記錄亞科

楊長平1, 2鄒小梅1張劍英1丁雪娟1

(1. 華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院, 廣東省水產(chǎn)健康安全養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 廣州 510631; 2. 中國科學(xué)院南海海洋研究所,熱帶海洋生物資源與生態(tài)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 廣州 510301)

研究記述寄生于海南清瀾綠短臂魚 Aprion virescens鰓上的一種分室科單殖吸蟲, 短臂魚蚌盤蟲Pseudonitzschia uku Yamaguti, 1965。所獲標(biāo)本的形態(tài)、量度與Yamaguti(1965)的原始描述基本一致; 但南海標(biāo)本的后吸器上具中央錨鉤和邊緣小鉤等幾丁質(zhì)結(jié)構(gòu), 而 Yamaguti的描述中無此類結(jié)構(gòu); 原始描述中陰莖表面被向后彎曲的小刺, 而南海標(biāo)本陰莖表面無刺。故此對(duì)蚌盤亞科、蚌盤蟲屬的特征進(jìn)行了補(bǔ)充修訂。該亞科、屬及種均為中國新記錄。標(biāo)本保存于華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院魚類寄生蟲學(xué)研究室。

單殖吸蟲; 短臂魚蚌盤蟲; 中國新記錄; 綠短臂魚; 南海

分室科(Capsalidae)單殖吸蟲隸屬于扁形動(dòng)物門(Platyhelminthes)、單殖吸蟲綱(Monogenea)、多鉤亞綱(Polyonchoinea)、分室目(Capsalidea)[1]。全球已報(bào)道的分室科單殖吸蟲共計(jì)9亞科47屬200余種[2—6],我國報(bào)道5亞科13屬21種[7—16]。2012年3月在海南清瀾港的綠短臂魚Aprion virescens鰓上采獲1種單殖吸蟲, 經(jīng)鑒定為分室科、蚌盤亞科 Pseudonitzschiinae Yamaguti, 1965、蚌盤蟲屬Pseudonitzschia Yamaguti, 1965的短臂魚蚌盤蟲Pseudonitzschia uku Yamaguti, 1965。該亞科、屬、種在我國均未見報(bào)道[16]。

1 材料與方法

將宿主魚帶回實(shí)驗(yàn)室, 先用肉眼觀察其體表、鼻腔、鰓蓋、口腔等部位, 后將鰓取下置于培養(yǎng)皿中, 在解剖鏡下進(jìn)行檢查。采獲的單殖吸蟲標(biāo)本部分用布氏膠直接封片以觀察幾丁質(zhì)結(jié)構(gòu); 部分用95%的酒精保存以進(jìn)行DNA序列研究; 其余用3%的戊二醛固定, 經(jīng)鉀礬胭脂蟲紅染色, 梯度酒精脫水, 松油醇透明后用中性樹膠封片。附圖借助OLYMPUS LB 描繪器進(jìn)行手繪, 掃描后用Photoshop CS修改。在光學(xué)顯微鏡(Olympus BX51)和激光掃描共聚焦顯微鏡(Zeiss, LSM710)下對(duì)標(biāo)本進(jìn)行觀察測量, 量度單位以 μm 計(jì)(量度取平均數(shù),括號(hào)中數(shù)字為量度變化范圍)。文中術(shù)語主要依據(jù)Yamaguti[17]。標(biāo)本保存于華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院魚類寄生蟲學(xué)研究室。

模板DNA的制備、28S rDNA部分序列的PCR擴(kuò)增及PCR產(chǎn)物的純化等參見丁雪娟和廖翔華[18]。PCR擴(kuò)增引物參照Mollaret等[19]: 正向C1 (5′-ACC CGCTGAATTTAAGCAT-3′)和反向 D2 (5′-TGGTC CGTGTTTCAAGAC-3′)。反應(yīng)體系為50 μL: 10×PCR buffer 5.0 μL, 2 mmol/L dNTP 5.0 μL, 25 mmol/L MgCl24.0 μL, 10 μmol/L引物各 2.0 μL, Taq酶(5 U/μL) 0.5 μL, DNA模板液3.0 μL, 滅菌雙蒸水28.5 μL。擴(kuò)增反應(yīng)步驟: 94℃預(yù)解鏈 5min; 然后94 ℃ 1min, 56 ℃ 1min, 72℃1min作30 個(gè)循環(huán); 最后 72℃延伸 5min。PCR產(chǎn)物經(jīng)電泳分離、回收、純化后送生工生物工程股份公司進(jìn)行序列測定。

2 形態(tài)學(xué)描述

短臂魚蚌盤蟲 Pseudonitzschia uku Yamaguti, 1965, 中國新記錄(圖1、2)

圖1 短臂魚蚌盤蟲Fig. 1 Pseudonitzschia uku Yamaguti, 1965

宿主: 綠短臂魚Aprion virescens (Valenciennes, 1830)

寄生部位: 鰓

標(biāo)本采集時(shí)間及地點(diǎn): 2012年3月23日, 海南清瀾港 (19°61′ N, 110°72′ E)

形態(tài)描述: 蟲體長卵形, 背腹扁平, 體長 2033 (1075—2125) μm, 最大體寬592 (500—713) μm (圖1A、2A)。后吸器肌質(zhì)、盤狀, 無柄, 常折疊呈蚌形,大小為482 (440—520) μm×464 (400—510) μm; 其邊緣具加厚的肌質(zhì)環(huán)、兩側(cè)中位處內(nèi)凹呈缺刻狀,外周被薄的邊緣瓣膜, 膜寬53 (50—60) μm (圖1C、2B); 中央錨鉤1對(duì), 倒“Y”形, 基部分叉, 頂端漸細(xì),斜向列于后吸器兩側(cè)缺刻與中央之連線處, 長 12.9 (12.8—13.3) μm (圖 2C); 邊緣小鉤 14個(gè), 胚鉤型, 長11.5 (10—12.5) μm (圖1E、2D)。前吸器1對(duì), 碟狀, 大小為300 (270—320) μm×206 (200—210) μm。眼點(diǎn)1對(duì), 位于咽前。咽肌質(zhì), 中部無縊縮, 大小為105 (90—120) μm×149 (110— 150) μm。咽后緊接腸叉, 腸支具側(cè)分支, 末端不匯合。

睪丸球形, 28 (27—30)個(gè), 大小為85 (70—130) μm× 87 (80—100) μm, 位于卵巢之后、主腸支之內(nèi)。輸精管自睪丸區(qū)向前伸出, 繞過卵黃囊左側(cè)于卵巢之前形成一回旋結(jié)構(gòu), 后彎曲前行并繞過子宮背部進(jìn)入雄性交接囊, 于交接囊內(nèi)旋轉(zhuǎn)后最終形成射精管。雄性交接囊肌質(zhì), 近圓柱形, 前端彎曲, 大小為236 (200—260) μm×92 (80—100) μm, 縱列于咽之后, 交接囊基部具 1膨大的肌質(zhì)球。射精管于陰莖基部與前列腺管結(jié)合。陰莖短圓錐形, 向前延伸至生殖腔。陰莖基部具 1棒狀的生殖盤, 大小為 105 (90—120) μm×49 (40—60) μm。前列腺囊橢球形, 位于雄性交接囊下方, 大小為 65 (55—80) μm×69 (60—75) μm, 基部具前列腺細(xì)胞; 前列腺管自前列腺伸出, 向前延伸進(jìn)入雄性生殖囊并穿過基部的肌質(zhì)球, 最后與射精管匯合。公共生殖管圓柱形, 開口于左前吸器下方之體側(cè)邊緣, 常被左前吸器覆蓋(圖1B)。

卵巢近球形, 中位, 約位于蟲體前1/3處, 大小為133 (120—150) μm×115 (110—130) μm。卵黃囊長橢圓形, 緊鄰于卵巢左上方, 大小為 120 (100—130) μm×62 (50—70) μm。卵黃腺濾泡狀, 伴腸支分布。輸卵管自卵巢伸出, 與卵黃囊輸出管相接后向前延伸至卵模。卵模與梅氏腺細(xì)胞發(fā)育較好, 位于雄性交接囊與輸精管之間。子宮紡錘形, 于陰莖遠(yuǎn)端水平開口于公共生殖管。陰道遠(yuǎn)端膨大, 基部與卵黃囊相接, 受精囊未見 。陰道開口于蟲體背面、左前吸器下方之咽基部水平(圖 1B)。卵四面體型,大小為130 μm×140 μm, 具1根較長的極絲(圖1D)。

以上描述根據(jù)1個(gè)布氏膠封片標(biāo)本和7個(gè)染色標(biāo)本。

3 討論

本種最先由 Yamaguti[17]在美國夏威夷海域的綠短臂魚鰓上發(fā)現(xiàn)并描述, 并以其后吸器前后折疊成蚌形、上無幾丁質(zhì)結(jié)構(gòu)等特征而建立蚌盤蟲屬與蚌盤亞科。該亞科至今僅報(bào)道1屬1種, 即蚌盤蟲屬短臂魚蚌盤蟲[5, 17]。蚌盤亞科、蚌盤蟲屬、短臂魚蚌盤蟲此前在我國未見報(bào)道, 均為中國新記錄。

圖2 短臂魚蚌盤蟲Fig. 2 Pseudonitzschia uku Yamaguti, 1965

本研究標(biāo)本與Yamaguti[17]的原始描述在形態(tài)和量度上基本一致, 但存在差異: 在Yamaguti的描述中, 后吸器上無幾丁質(zhì)結(jié)構(gòu)(Unarmed), 而本研究標(biāo)本后吸器上具幾丁質(zhì)的中央錨鉤和邊緣小鉤; 原始描述中陰莖表面被向后彎曲的小刺, 而本研究南海標(biāo)本的陰莖表面未見此結(jié)構(gòu)。我們對(duì)南海標(biāo)本的28S rRNA基因部分序列進(jìn)行了測定, 所獲序列與GenBank中的短臂魚蚌盤蟲序列(No. FJ972013.1)完全重疊, 印證了其為短臂魚蚌盤蟲。Whittington[5]曾推測該種的纖毛蚴具幾丁質(zhì)的中央錨鉤和邊緣小鉤, 成蟲后吸器幾丁質(zhì)結(jié)構(gòu)的缺失屬次生現(xiàn)象, 是發(fā)育過程中其中央錨鉤等發(fā)生脫落所致(Secondary losses)。我們認(rèn)為該蟲種后吸器中央錨鉤和邊緣小鉤結(jié)構(gòu)微小(12.8—13.3 μm和10—12.5 μm), 加之肌肉質(zhì)后吸器前后折疊易將其覆蓋, 故難以被觀察到。

根據(jù)南海標(biāo)本的觀察所得, 蚌盤亞科、蚌盤蟲屬的特征修訂如下:

蚌盤亞科特征(Amended subfamilial diagnosis):分室科(Capsalidae sensu Yamaguti, 1963)。后吸器肌質(zhì), 無柄, 圓盤狀, 常前后折疊呈蚌形, 具缺刻狀的肌質(zhì)外環(huán)和薄的邊緣瓣膜、1對(duì)中央錨鉤和14個(gè)邊緣小鉤; 無分隔、腔室或突起。前吸器1對(duì), 碟狀。眼點(diǎn) 1對(duì)。咽中部不縊縮。腸支具側(cè)分支, 后端不匯合。睪丸多個(gè), 分布于卵巢之后的主腸支之內(nèi)。雄性交接囊肌質(zhì), 位于咽之后, 包括射精管和前列腺管; 陰莖短, 基部較窄, 遠(yuǎn)端膨大, 具或不具細(xì)刺。公共生殖孔開口于蟲體腹面、左前吸器的下方。卵巢球形, 位于睪丸之前。卵模較發(fā)達(dá)。子宮開口于公共生殖管。陰道開口于蟲體左側(cè)背面之咽水平。卵黃腺伴腸支分布, 卵黃囊位于卵巢左上方。卵四面體型, 單極絲。寄生于海水硬骨魚類。

蚌盤蟲屬特征: 同亞科。

致謝:

華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 2009級(jí)研究生胡盼, 2010級(jí)研究生肖海溶、袁凱, 2011級(jí)研究生楊芳協(xié)助采集標(biāo)本, 謹(jǐn)致謝意。

[1] Boeger W A, Kritsky D C. Phylogenetic relationships of the Monogenoidea [M]. In: Littlewood D T J, Bray R A (Eds.), London: Interrelationships of the Platyhelminthes. 2001, 92—102

[2] Bullard S A, Payne R R, Braswell, J S. New genus with two new species of capsalid monogeneans from dasyatids in the Gulf of California [J]. Journal of Parasitology, 2004, 90(6): 1412—1427

[3] Kearn G C, Whittington I D. Neoentobdella gen. nov. for species of Entobdella Blainville in Lamarck, 1818 (Monogenea, Capsalidae, Entobdellinae) from stingray hosts, with descriptions of two new species [J]. Acta Parasitologica, 2005, 50(1): 32—48

[4] Kearn G C, Whittington I D, Evans-Gowing R. A revision of Entobdella Blainville in Lamarck, 1818, with special emphasis on the nominal (type) species “Entobdella hippoglossi (Muller, 1776) Blainville, 1818” (Monogenea: Capsalidae: Entobdellinae) from teleost flatfishes, with descriptions of three new species and a new genus [J]. Zootaxa, 2007, 1659(1): 1—54

[5] Whittington I D. The Capsalidae (Monogenea: Monopisthocotylea): a review of diversity, classification and phylogeny with a note about species of complexes [J]. Folia Parasitologica, 2004, 51(2—3): 109—122

[6] Sepúlveda F A, González M T, Oliva M E. Two new species of Encotyllabe (Monogenea: Capsalidae) based on morphometric and molecular evidence: parasites of two inshore fish species of northern Chile [J]. Journal of Parasitology, 2014, 100(3): 344—349

[7] Dyer W G, Poly W J. Trimusculotrema schwarzi n. sp. (Monogenea: Capasalidae) from the skin of the stingray Dasyatis zugei (Elasmobranchii: Dasyatidae) off Hong Kong, China [J]. Systematic Parasitology, 2002, 51(3): 217—225

[8] Li L W, Yan J, Wang H P. A new species of Encotyllabe from marine fishes in Minnan-Taiwan Bank, Fujian, China [J]. Journal of Zhejiang University (Science Edition), 2004, 31(2): 207—210 [李立偉, 嚴(yán)杰, 王煥萍. 閩南-臺(tái)灣淺灘野生真鯛寄生的分室科中柄蟲屬一新種(吸蟲綱: 單殖吸蟲目)．浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(理學(xué)版), 2004, 31(2): 207—210]

[9] Whittington I D, Kearn G C. Two new species of entobdelline skin parasites (Monogenea, Capsalidae) from the blotched fantail ray, Taeniura meyeni, in the Pacific Ocean, with comments on spermatophores and the male copulatory apparatus [J]. Acta Parasitologica, 2009, 54(1): 12—21

[10] Yang T B, Kritsky C D, Sun Y. Revision of Allobenedenia Yamaguti, 1963 (Monogenoidea: Capsalidae) with the description of A. zhangi n. sp. from Epinephelus fasciatus (Teleostei: Serranidae) in the South China Sea [J]. Systematic Parasitology, 2004, 59(3): 223—233

[11] Yang C P, Hu P, Ding X J. A new species of the genus Caballerocotrla (Monogenea, Capsalidae) of the South China Sea [J]. Acta Zootaxonomica Sinica, 2012, 37(2): 305—308 [楊長平, 胡盼, 丁雪娟. 南中國海墨杯蟲屬(單殖吸蟲, 分室科)一新種．動(dòng)物分類學(xué)報(bào). 2012, 37(2): 305—308]

[12] Yang C P, Hu P, Ding X J. Monogenea of Chinese marine fishes XXII. A new Chinese record genus and species Nasicola klawei (Stunkard, 1962) Yamaguti, 1968 (Capsalidae) [J]. Journal of South China Normal University (Nature Science Edition), 2012, 44(2): 120—122 [楊長平, 胡盼, 丁雪娟. 中國海洋魚類單殖吸蟲研究XXII.分室科一新記錄屬．華南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2012, 44(2): 120—122][13] Yang C P, Hu P, Ding X J et al. A new Chinese record

species of capsalid monogenea from Auxis Thazard of the South China Sea [J]. Acta Hydrobiologica Sinica, 2012, 36(6): 1205—1207 [楊長平, 胡盼, 丁雪娟, 等. 南海扁鰹寄生墨杯蟲屬單殖吸蟲—中國新記錄種．水生生物學(xué)報(bào), 2012, 36(6): 1205—1207]

[14] Zhang J Y, Qiu Z Z, Ding X J et al. Parasitees and Parasitic Dieases of Fishes [M]. Beijing: Science Press. 1999, 735 [張劍英, 邱兆祉, 丁雪娟, 等. 魚類寄生蟲與寄生蟲?。本?科學(xué)出版社. 1999, 735]

[15] Zhang J Y, Yang T B, Liu L et al. Monogeneans of Chinese Marine Fishes [M]. Beijing: China Agriculture Press. 2001, 400 [張劍英, 楊廷寶, 劉琳, 等. 中國海洋魚類單殖吸蟲.北京: 中國農(nóng)業(yè)出版社. 2001, 400]

[16] Zhang J Y, Yang T B, Liu L, et al. A list of monogeneans from Chinese marine fishes [J]. Systematic Parasitology, 2003, 54(2): 111—130

[17] Yamaguti S. New monogenetic trematodes from Hawaiian fishes Ⅰ [J]. Pacific Science, 1965, 19(1): 55—95

[18] Ding X J, Liao X H. The taxonomic status of Dactylogyrus inversus (Monogenea: Dactylogyridae) inferred from DNA sequences [J]. Acta Zootaxonomica Sinica, 2004, 29(4): 628—632 [丁雪娟, 廖翔華. 鱸魚寄生逆轉(zhuǎn)指環(huán)蟲的分類地位．動(dòng)物分類學(xué)報(bào), 2004, 29(4): 628—632]

[19] Mollaret I, Jamieson B G M, Justine J-L. Phylogeny of the Monopisthocotylea and Polyopisthocotylea (Platyhelminthes) inferred from 28S rDNA sequences [J]. International Journal of Parasitology, 2000, 30(2): 171—185

A NEWLY RECORDED SUBFAMILY OF PSEUDONITZSCHIINAE (MONOGENEA: CAPSALIDAE) IN THE SOUTH CHINA SEA

YANG Chang-Ping1, 2, ZOU Xiao-Mei1, ZHANG Jian-Ying1and DING Xue-Juan1
(1. Guangdong Provincial Key Laboratory for Healthy and Safe Aquaculture, College of Life Science, South China Normal University, Guangzhou 510631, China; 2. Key Laboratory of Tropical Marine Bio-resources and Ecology, South China Sea Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510301, China)

A capsalid monogenean, Pseudonitzschia uku Yamaguti, 1965, that belongs to Pseudonitzschia, Pseudonitzschiinae, was discovered on the gills of Aprion virescens in Qinglan Bay of Hainan in China. The morphology and size of the specimens were consistent with the original description, except that there were anchors and marginal hooklets on their haptor, and that the recurved spines over the cirrus were missing. Therefore here we updated the description of the characteristics of the Pseudonitzschiinae subfamily and the Pseudonitzschia genus. The subfamily, genus and species were reported for the first time in China. The specimens were deposited in the Lab of Fish Parasitology of Collage of Life Sciences in the South China Normal University.Amended diagnosis of Pseudonitzschiinae: Capsalidae sensu Yamaguti, 1963. Body elliptical flattened. Haptor disc-shaped, sessile, usually folded antero-posteriorly, armed with one pair of anchors and 14 marginal hooklets; indented muscular margin and delicate marginal membrane present; without septa, loculi or papillae. Anterior attachment organ paired, sucker-shaped. One pair of eye spots. Pharynx without constriction. Intestinal limbs with lateral dendritic diverticula, not united posteriorly. Testes numerous, intercecal. Male copulatory pouch muscular, postpharyngeal, consisted of ejaculatory and prostatic ducts; cirrus short, swelled anterior, armed or unarmed. Common genital pore opening ventrally, posterior to the left anterior attachment organ. Ovary single, spherical, pretesticular; Ootype well developed; uterus opened into the common genital pore; vagina opened dorsally at the level of pharynx. Vitellaria co-extensive with intestinal branches; vitelline reservoir immediately sinistral to ovary. Egg tetrahedral, with single filament. Gill parasites of marine teleosts.

Monogenea; Pseudonitzschia uku; New record in China; Aprion virescens; South China Sea

Q959.15

A

1000-3207(2015)04-0789-05

10.7541/2015.103

2014-10-14;

2015-01-10

國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31093430; 31172051)資助

楊長平(1986—), 男, 江西高安人; 碩士研究生; 主要從事海水魚類單殖吸蟲研究。E-mail: yangbing3524@sina.com

丁雪娟, E-mail: dingxj@scnu.edu.cn