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    藏藥五味獐牙菜湯對膽囊炎模型家兔藥效學的影響

    2015-02-28 01:07:34王拴旺李永平王樹林
    西部中醫(yī)藥 2015年5期
    關鍵詞:菜湯利膽家兔

    王拴旺,李永平,王樹林

    1青海省武警總隊醫(yī)院,青海 西寧 810000;2青海大學醫(yī)學院

    膽囊炎是一種比較常見的腹部外科疾病,是由各種原因引起的淤滯膽汁被腸道細菌逆行感染后引起的膽囊組織炎性病變。據(jù)統(tǒng)計,我國目前約有一億多膽囊炎及其并發(fā)癥患者,約占總人口的8%~10%,膽囊炎已成為影響我國國民健康的第二大腹部外科疾?。?]。由于青藏高原人們的生活和飲食習慣等因素,導致其膽囊炎發(fā)病率高于全國平均水平。五味獐牙菜湯是藏醫(yī)經(jīng)典方劑中治療膽囊炎、黃疸型肝炎首選藥方之一,由印度獐牙菜、榜嘎、力嘎都、寬筋藤、小檗皮組成,收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準·藏藥》第1冊[2],歷代醫(yī)家用其治療膽囊炎、黃疸型肝炎,療效確切。本研究通過動物實驗研究探討該藥的藥效學及部分作用機制,旨在為五味獐牙菜湯的臨床應用提供依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 實驗動物 新西蘭家兔,雌雄各半,體質量(2.2±0.2)kg,由青海大學醫(yī)學院實驗中心提供。

    1.2 實驗藥物 1)五味獐牙菜湯按原方比例在實驗室自提,配制成濃度為3 g(生藥)/mL的溶液,4℃冰箱保存;2)消炎利膽片(廣東省博羅先鋒藥業(yè)集團有限公司生產(chǎn),批號:011104)。

    1.3 主要試劑 IL-1β酶標試劑盒 (進口分裝,上海森雄科技實業(yè)有限公司提供);PGE2酶標試劑盒(進口分裝,上海森雄科技實業(yè)有限公司);致病菌株選用埃希氏大腸桿菌(青海大學醫(yī)學院微生物教研室提供),以生理鹽水配制成濃度大約為2×109/mL菌液。

    1.4 主要儀器 全自動酶標儀(BIO-ROD公司)及洗板機;RE-52A真空旋轉蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠提供);電子分析天平(奧豪斯國際貿(mào)易上海有限公司提供);TDL 50B臺式離心機(上海安亭科學儀器廠提供)。

    1.5 實驗方法

    1.5.1 動物分組 動物購回適應性喂養(yǎng)2天后隨機分為空白對照組、模型對照組、五味獐牙菜湯低劑量組、五味獐牙菜湯中劑量組、五味獐牙菜湯高劑量組、消炎利膽片組(陽性對照組)6組,每組10只。

    1.5.2 造模方法 依據(jù)文獻[3-5]加以改進,家兔用3%戊巴比妥鈉溶液注射麻醉,仰位固定,備皮后按手術常規(guī)進行無菌消毒,腹部正中切口,將肝臟翻轉出腹腔,暴露膽囊。對空白對照組家兔抽出膽汁,不注射菌液,結扎針孔,逐層縫合肌層及皮膚,傷口表面消毒后,常規(guī)喂養(yǎng)。其余各組手術過程同空白對照組,但抽出膽汁后,向膽囊內(nèi)緩慢注入0.3mL菌液,結扎針孔,余同空白對照組。手術前后測量家兔肛溫和體質量,以后每天測量1次。

    1.5.3 給藥方法 于術后第2天開始各組動物灌胃給藥或給生理鹽水,每天1次,連續(xù)15天。

    1.6 膽汁收集方法[6]最后1次灌胃給藥后間隔30分鐘,用3%戊巴比妥鈉溶液進行耳緣靜脈注射麻醉,麻醉后背位固定于手術臺,開腹,分離出呈白色的韌性膽管,下穿2根絲線,將乳頭部扎緊,用眼科剪在膽管上向肝臟方向剪出“V”形切口,再在膽管中向肝臟方向插入外徑1mm的塑料管,用絲線扎緊,蓋上紗布。手術完畢后先穩(wěn)定20分鐘,再每隔30分鐘收集膽汁一次,分別收集30、60、90分鐘家兔的膽汁且與空白對照組比較。

    1.7 血清IL-1β、PGE2檢測 膽汁引流結束后,腹主動脈取血,分別做血清IL-Iβ、PGE2檢測。采用酶聯(lián)免疫吸附實驗方法(enzyme-l inked immunosorbent assay,ELISA),具體流程按試劑盒檢測程序進行。

    1.8 統(tǒng)計學方法 數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件處理,計量資料以(χ±s)表示,采用單因素方差分析,組間多重比較采用LSD-t檢驗,檢驗水準為α=0.05。

    2 結果

    2.1 五味獐牙菜湯對家兔膽汁流量的影響 與模型組比較,五味獐牙菜湯高、中、低3個劑量組和消炎利膽片組均有明顯利膽作用(P<0.01),見表1。

    表1 各組家兔膽汁流量變化情況(χ±s)mL

    2.2 五味獐牙菜湯對家兔血清IL-1β、PGE2的影響 與空白組相比,模型對照組IL-1β、PGE2顯著增高(P<0.001);各治療組 IL-1β、PGE2顯著低于模型對照組(P<0.01),見表2。

    表2 五味獐牙菜湯對家兔血清IL-1β、PGE2的影響

    3 討論

    中醫(yī)將膽囊炎歸為“膽脹”“脅痛”和“黃疸”等范疇,認為由肝膽失于疏泄,濕熱內(nèi)生而成,治療上遵循“痛則不通,通則不痛”的原則,強調(diào)疏通治法[7-9]。五味獐牙菜湯以疏肝利膽為主,配伍清熱利濕之品,以達清利肝膽濕熱之目的。該藥組方精練,用藥嚴謹,配伍科學,獨具特色。方中印度獐牙菜是藏藥蒂達的主要來源之一,被藏醫(yī)尊為蒂達之上品,在經(jīng)典藏醫(yī)藥著作《月王藥診》《四部醫(yī)典》和《晶珠本草》中均有詳細記載,是藏醫(yī)治療肝膽疾病的首選藥物之一,味苦,性涼,清肝利膽,退諸熱;榜嘎味苦,性涼,有小毒,清熱解毒利濕。主治肝炎、膽囊炎、肺炎、感冒發(fā)熱、咽喉炎、胃腸炎;力嘎都(狹葉紅景天)味澀,性溫,益氣活血,通脈平喘;寬筋藤味苦,性涼,清熱除濕,祛風通絡;小檗皮味苦,性寒,清熱燥濕、瀉火解毒,治疫癘、陳熱病、黃水病。5藥共奏清熱解毒、利濕退黃的作用,用于膽囊炎、黃疸型肝炎的治療。

    臨床上,膽囊炎病人均有不同程度的膽汁淤積現(xiàn)象。正常膽汁由于各種原因淤積于膽囊體部不得排泄,常會造成膽汁的主要成分發(fā)生改變,使膽固醇和膽紅素含量升高,而膽汁酸含量降低。膽固醇含量的升高和膽汁酸含量的降低又會使膽汁變得粘稠,以致凝集固化,甚至形成結石,進一步堵塞膽管,一方面使膽汁流通更加不暢,另一方面又會加重感染,造成其他并發(fā)癥的發(fā)生。本實驗結果表明,五味獐牙菜湯散各劑量組均可增加家兔的膽汁流量,提示五味獐牙菜湯在促進家兔膽汁分泌方面具有良好效果,具有較好的利膽作用。

    如何消除炎癥反應是治療膽囊炎的第一要務,炎癥反應貫穿了膽囊炎發(fā)病的始終,是最直接的致病原因。主要炎癥因子IL-1β、PGE2的含量可反映炎癥反應的輕重程度,因此,測定主要炎癥因子的含量可以直觀了解藥物是否具有消炎效果。研究結果表明五味獐牙菜湯治療膽囊炎的作用機制可能與其能夠降低炎癥組織中的主要炎癥因子的含量有關。

    [1]施維錦.膽道外科學[M].上海:上??茖W技術出版社,1997:69.

    [2] 中國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準藏藥:第一冊[M].北京:中華人民共和國衛(wèi)生部,1995:279.

    [3] 郭鷂.人類疾病的動物模型[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1982:302-305.

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    [5] 闞紅衛(wèi),魏安祥.膽囊炎病因及其動物模型研究進展[J].中國臨床藥理學與治療學,2008,13(8):957-960.

    [6] 陳奇.中藥藥理研究方法學[M].2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2006:452-455.

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    [8] 成旭.疏肝利膽湯治療慢性結石性膽囊炎30例臨床觀察[J].西部中醫(yī)藥,2013,26(6):66-68.

    [9] 徐慶山,牛術仙,杜忠海.調(diào)脾疏膽湯治療慢性膽囊炎52例臨床觀察[J].河北中醫(yī),2011,33(1):45.

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