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    藥理學(xué)

    2015-02-28 01:39:26
    關(guān)鍵詞:復(fù)氧阻斷劑原代

    藥理學(xué)

    RISK信號(hào)通路在β2-腎上腺素受體激動(dòng)劑clenbuterol減輕心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷中的作用

    張秋芳,譚艷,汪選斌,等

    目的:研究β2-腎上腺素受體激動(dòng)劑clenbuterol對(duì)原代培養(yǎng)的心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷的作用及其是否與激活再灌注損傷挽救激酶(reperfusion injury salvage kinase,RISK)信號(hào)通路有關(guān)?方法:將原代培養(yǎng)的新生Wistar大鼠乳鼠心肌細(xì)胞分為8組,①正常培養(yǎng)組;②缺氧/復(fù)氧(A/R)組;③clenbuterol(1 μmol·L-1)+A/R;④ICI118,551(10 μmol·L-1)+clenbuterol(1 μmol·L-1)+A/R組;⑤美托洛爾metoprolol(10 μmol·L-1)+clenbuterol (1 μmol·L-1)+A/R組;⑥ metoprolol(10 μmol·L-1)+A/R組;⑦PD98059(20 μmol·L-1)+clenbuterol(1 μmol·L-1)+A/R組;⑧ LY294002(10 μmol·L-1)+clenbuterol(1 μmol·L-1)+A/R組?采用MTT法測(cè)定各組細(xì)胞存活率;比色法檢測(cè)心肌細(xì)胞培養(yǎng)液的乳酸脫氫酶(LDH)含量;Hoechst 33342熒光染色法檢測(cè)細(xì)胞凋亡率;分子探針DCFH-DA檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平;Western blot檢測(cè)心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧后ERK及p-ERK1/2蛋白的表達(dá)水平?結(jié)果:與A/R組比較,clenbuterol+A/R組明顯增高細(xì)胞存活率,降低LDH含量,降低細(xì)胞凋亡率,ROS產(chǎn)生減少,p-ERK1/2蛋白表達(dá)水平增高,而選擇性β2受體阻斷劑ICI118, 551可取消clenbuterol的上述作用,β1受體阻斷劑Metoprolol對(duì)clenbuterol的作用無(wú)影響,PI3K抑制劑LY294002和ERK1/2抑制劑PD98059可阻斷clenbuterol對(duì)心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷的保護(hù)作用?結(jié)論:clenbuterol能夠減輕心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷,加入選擇性β2受體阻斷劑ICI118,551,PI3K抑制劑LY294002和ERK抑制劑PD98059均使clenbuterol的保護(hù)作用取消,表明clenbuterol可通過(guò)激動(dòng)β2腎上腺素受體,激活RISK信號(hào)通路發(fā)揮抗心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷的作用?

    clenbuterol;缺氧/復(fù)氧;心肌細(xì)胞;磷酸化ERK;PI3K;reperfusion injury salvage kinase(RISK)

    來(lái)源出版物:中國(guó)藥理學(xué)通報(bào), 2015, 31(10): 1368-1374聯(lián)系郵箱:張秋芳,zqf1112000@163.com

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