不同提取方法對(duì)人參皂苷收率的影響

信小娟，陳旸，叢建華

(大興安嶺地區(qū)農(nóng)業(yè)林業(yè)科學(xué)研究院，黑龍江加格達(dá)奇165000)

不同提取方法對(duì)人參皂苷收率的影響

信小娟，陳旸，叢建華

(大興安嶺地區(qū)農(nóng)業(yè)林業(yè)科學(xué)研究院，黑龍江加格達(dá)奇165000)

通過(guò)對(duì)索氏提取法、超聲波提取法、微波提取法3種不同方法提取人參皂苷，比較人參皂苷的收率。采用相同的提取試劑-甲醇，利用索氏提取法、超聲波提取法、微波提取法提取人參皂苷；紫外可見(jiàn)-分光光度法測(cè)定人參皂苷含量，比較人參皂苷的收率。結(jié)果表明，3種提取方法，人參皂苷的收率分別為8.34%、9.36%、8.76%。超聲提取法更適合應(yīng)用于工廠化生產(chǎn)。

人參；索氏提取法；超聲波提取法；微波提取法；人參皂苷

人參為五加科人參屬植物(PanaxginsengC. A. Meyer)的干燥根和根莖，具有安神益智、大補(bǔ)元?dú)狻⑸蝠B(yǎng)血、補(bǔ)脾益肺的功效，人參中的主要活性成分為人參皂苷[1-2]。人參皂苷(ginsenosides)具有抗腫瘤、抗心律失常、延緩衰老及增強(qiáng)免疫力等作用[3-6]。目前，對(duì)于中草藥中活性成分的提取主要采用索氏提取法、微波提取法和超聲提取法進(jìn)行。本研究對(duì)上述3種方法提取人參皂苷的收率進(jìn)行比較，對(duì)工廠化提取人參皂苷具有一定的指導(dǎo)意義。

1 材料與方法

1.1 材料

5年生干燥人參根，由大興安嶺地區(qū)農(nóng)業(yè)林業(yè)科學(xué)研究院提供；人參皂苷對(duì)照品Re(批號(hào)：110754-201324)購(gòu)買于中國(guó)食品藥品檢定研究院。

索氏提取器(鄭州興華玻璃儀器設(shè)備直銷店)；P70D20TLD4-型微波爐(廣東格蘭仕集團(tuán))；KQ250B-型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；755-型分光光度計(jì)(上海圣科儀器設(shè)備有限公司)；AUY220-型電子分析天平(日本島津公司)；電子恒溫水浴鍋(長(zhǎng)春通州科技儀器廠)。

1.2 方法

1.2.1 人參皂苷的提取

將人參進(jìn)行粉碎處理后過(guò)40目篩，精密稱取9份，每份1g，中性濾紙包好作為供試品；分別進(jìn)行如下操作：(1)取3份供試品，分別置于索氏提取器中，加入80mL三氯甲烷，加熱回流提取8h；揮干三氯甲烷后加入60mL甲醇，加熱回流提取6h；棄掉濾紙包，揮干甲醇，加入20mL蒸餾水溶解后轉(zhuǎn)移至分液漏斗中；分別加入等體積的乙酸乙酯和水飽和正丁醇溶液進(jìn)行除雜處理；揮干水飽和正丁醇溶液后加入10mL甲醇復(fù)溶，待測(cè)。(2)取3份供試品，分別置于50mL三角瓶中，加入20mL甲醇進(jìn)行超聲處理10min；棄掉濾紙包，揮干甲醇，加入20mL蒸餾水溶解后轉(zhuǎn)移至分液漏斗中；分別加入等體積的乙酸乙酯和水飽和正丁醇溶液進(jìn)行除雜處理；揮干水飽和正丁醇溶液后加入10mL甲醇復(fù)溶，待測(cè)。(3)取3份供試品，分別置于50mL燒杯中，加入20mL甲醇，低火微波5次，每次2min；棄掉濾紙包，揮干甲醇，加入20mL蒸餾水溶解后轉(zhuǎn)移至分液漏斗中；分別加入等體積的乙酸乙酯和水飽和正丁醇溶液進(jìn)行除雜處理；揮干水飽和正丁醇溶液后加入10mL甲醇復(fù)溶，待測(cè)。

1.2.2 人參皂苷標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密稱取人參皂苷-Re標(biāo)準(zhǔn)品適量，甲醇溶解后制備成2mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液；分別吸取人參皂苷-Re標(biāo)準(zhǔn)品溶液10、20、30、40、50μL置于具塞試管中，向試管中分別加入90、80、70、60、50μL的甲醇，另備一支具塞試管加入100μL甲醇作空白處理；分別向具塞試管中加入0.5mL的0.5%香草醛-乙醇溶液和5mL的74%硫酸，振蕩混勻；60℃恒溫水浴20min后冰水浴10min終止反應(yīng)；調(diào)節(jié)紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)至544nm處進(jìn)行比色測(cè)定；以人參皂苷-Re標(biāo)準(zhǔn)品的進(jìn)樣量(X，mg/mL)為橫坐標(biāo)，吸光度(Y，OD544)為縱坐標(biāo)，繪制出人參皂苷-Re的標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程：Y=0.1798X+0.0108(R2=0.9983)。

1.2.3 人參皂苷含量的測(cè)定

根據(jù)2010年版《中國(guó)藥典》(一部)關(guān)于人參皂苷含量測(cè)定的相關(guān)闡述，本研究采用紫外-可見(jiàn)分光光度法對(duì)人參皂苷含量進(jìn)行測(cè)定[7]。分別精密吸取各組供試品溶液0.1mL，置于具塞試管中，加入0.5mL的0.5%香草醛-乙醇溶液和5mL的74%硫酸，振蕩混勻；將試管置于60℃恒溫水浴鍋中加熱20min后置于冰水中冷卻10min；在波長(zhǎng)544nm處進(jìn)行比色測(cè)定。

2 結(jié)果與分析

采用索氏提取法、超聲波提取法、微波提取法，以相同提取試劑—甲醇提取人參皂苷，3種不同提取方法對(duì)人參皂苷收率的影響見(jiàn)表1所示。在相同除雜處理的條件下，3組人參皂苷收率分別為8.34%、8.76%、9.36%。結(jié)果表明同樣以甲醇作為提取試劑，相同的除雜處理，超聲提取法提取人參皂苷的收率更高。

表1 不同提取方法對(duì)人參皂苷得率的影響

3 討論

超聲提取法是利用超聲波在液體介質(zhì)中傳播時(shí)產(chǎn)生的“空化效應(yīng)”，不斷產(chǎn)生無(wú)數(shù)個(gè)內(nèi)部壓力達(dá)到上千個(gè)大氣壓的空氣穴，而空氣穴不斷爆破產(chǎn)生微觀上的強(qiáng)大沖擊波，不斷的轟擊人參粉末，使其含有的人參皂苷更容易溢出，從而加大了人參皂苷的得率。微波提取法同樣具有提取時(shí)間短、操作簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)，但是相對(duì)于超聲提取法而言，其人參皂苷得率略低，且操作過(guò)程中容易發(fā)生危險(xiǎn)，并不適合大規(guī)模生產(chǎn)。超聲提取法與微波提取法的提取時(shí)間較短、能源消耗少，而索氏提取法不但耗時(shí)、耗能而且還產(chǎn)生大量的廢液，從工廠生產(chǎn)的角度考量，超聲提取法更適合應(yīng)用于大規(guī)模的人參皂苷提取。

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[7]國(guó)家藥典委員會(huì)匯編. 中國(guó)藥典 [M]. 2010年版一部, 北京:化學(xué)工業(yè)出版社, 2010: 8.

Effects of Different Extraction Methods on the Yield of Ginsenosides

Xin Xiaojuan,Chen Yang,Cong Jianhua

(North Drug Development Research Laboratory, Agriculture & Forestry Science Research Institute of Daxing’an Mountain range, Daxing’an Mountain range, Heilongjiang Province,165000)

Objective Through three different extraction method on ginsenosides of soxhlet extraction, ultrasonic extraction, microwave extraction, compared ginsenosides yield. Method Selected the same extraction reagent-methanol, used soxhlet extraction method, ultrasonic extraction method, microwave extraction method extractcted ginsenosides, determination of ginsenosides by UV visible spectrophotometry, compared ginsenosides yield. Results Three kinds of extraction methods, ginsenosides yield was 8.34%, 9.36%, 8.76%. Conclusion Ultrasonic extraction method is more suitable for industrial production .

Ginseng; Soxhlet extraction method; Ultrasonic extraction method; Microwave extraction method; Ginsenosides

2014-09-18

R284.2

A

doi.:10.13268/j.cnki.fbsic.2015.01.013