白介素-1與β2防御素對胎膜早破合并羊膜腔感染預測的意義

楊麗娜，王　凡，于海燕，金海鴻，逯慶玲

(黑龍江省醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱150036)

白介素-1與β2防御素對胎膜早破合并羊膜腔感染預測的意義

楊麗娜，王凡，于海燕，金海鴻，逯慶玲

(黑龍江省醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱150036)

(ChinJLabDiagn,2015,19:0412)

胎膜早破(Premature Rupture of Membrane,PROM)指臨產前胎膜發(fā)生破裂，其發(fā)生率國外5%-15%，國內2.7%-17%，并呈逐年上升趨勢，常致早產、圍生兒死亡、宮內及產后感染率升高，是威脅母兒健康的一個常見產科并發(fā)癥。胎膜早破后是否及時發(fā)現(xiàn)羊膜腔感染，適時終止妊娠對于孕婦及新生兒的預后有重要的意義，本研究探討白介素-1(IL-1)與β2防御素(HBD-2)對胎膜早破合并羊膜腔感染預測的意義，為臨床預測PROM后的宮內感染提供新的理論依據和檢測手段。

1材料與方法

1.1研究對象選擇2012年6月-2013年6月在黑龍江省醫(yī)院產科病房因胎膜早破住院分娩孕婦42例，其中足月胎膜早破22例，未足月胎膜早破20例，同時選擇與胎膜早破組孕周相近的20例非胎膜早破孕婦作為對照組。兩組在年齡，孕周，孕產次比較，差異無統(tǒng)計學意義(見表1)。根據胎膜的病理診斷報告，將胎膜早破組分為絨毛膜羊膜炎(Histological chorioamnionitis,HCA)組18例和非HCA組24例。孕婦納入標準參照人民衛(wèi)生出版社出版的《婦產科學》第七版。HCA診斷標準為鏡下絨毛膜及羊膜被中性粒細胞浸潤且胎盤絨毛膜板晦暗或不透明[2]。

1.2標本采集(1)血清：患者在妊娠結束前抽取肘靜脈血5 ml，3 000轉/分，離心15分鐘，分離血清，置-20℃冰箱保存待檢。(2)胎膜：患者妊娠結束后取破裂口周邊胎膜組織2 cm×2 cm送檢黑龍江省醫(yī)院病理科以確定有無組織學絨毛膜羊膜炎。

1.3實驗方法采用固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測各研究組對象血清β2防御素、白介素-1。

2結果

2.1實驗組與對照組各項基本資料的比較

各組在年齡、孕產次、孕周比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)(見表1)。

表1　孕產婦基本資料比較

2.2實驗組與對照組胎膜感染情況的比較

HCA組IL-1水平、HBD-2水平與非HCA組比較，差異顯著，P<0.01；HCA組IL-1水平、HBD水平與對照組比較，差異顯著，P<0.01；非HCA組的IL-1水平、HBD-2水平與對照組比較，無顯著性差異，P>0.05，見表2。從均數(shù)直觀圖觀察到，隨著胎膜早破的出現(xiàn)、感染的發(fā)生，IL-1水平、HBD-2水平有升高的趨勢，見圖1、2。

表2　孕婦血清中IL-1、HBD-2水平的比較

與HCA組比較，*：P<0.05；**：P<0.01

2.3IL-1與HBD-2預測HCA 的ROC曲線

繪制IL-1和HBD-2水平的ROC曲線，以敏感性為Y軸，1-特異性為X軸，結果提示以這2個參數(shù)預測HCA均有統(tǒng)計學意義(PIL-1=0.01，PHBD-2=0.03)；所計算的曲線下面積分別為75%和71%；95%可信區(qū)間分別為(0.60，0.90)和(0.53,0.88)；當IL-1以80.22 pg/ml為分界點時，診斷HCA的敏感性為0.78，特異性為0.75；當HBD-2以474.79 ng/L為分界點時，診斷HCA的敏感性為0.67，特異性為0.79(見圖3)。

圖1IL-1水平變化趨勢 圖2HBD-2水平變化趨勢圖3IL-1與HBD-2診斷HCA 的ROC曲線

3討論

近年來，國內外的學者對胎膜早破發(fā)生的原因從機械力學，胎膜結構變化，感染，免疫等方面的研究取得長足的進步。其中感染一直是眾多研究者密切關注的相關因素之一。我們普遍觀察到發(fā)生胎膜早破的孕婦，在發(fā)病后相當一段時間內無明顯的臨床表現(xiàn)，處于亞臨床感染階段，等到出現(xiàn)感染征象，可能已經對孕產婦及胎兒的預后造成影響，因此，胎膜早破合并感染的早期發(fā)現(xiàn)十分重要。本研究探討IL-1與HBD-2在胎膜早破患者中對羊膜腔感染的預測，希望為臨床胎膜早破合并絨毛膜炎的診斷提供新的思路。

有人認為，感染引起的IL-1升高 是人類分娩的機理[3]，國外有研究[4]發(fā)現(xiàn)，孕晚期羊水中IL-1β水平升高，有發(fā)生胎膜早破和早產的風險。Puchner等[5]研究結果顯示羊水中 IL-1β 水平每增加一個單位，早產及胎膜早破的發(fā)生率增加7.2 倍。我們的研究表明，胎膜早破發(fā)生后IL-1較對照組有所升高，但與對照組無統(tǒng)計學意義，隨著絨毛膜感染的發(fā)生，IL-1水平進一步升高，與對照組及非HCA組均有統(tǒng)計學意義，可作為胎膜早破發(fā)生后，羊膜腔出現(xiàn)感染的診斷指標。

人防御素是一組多肽，具有抗微生物和細胞毒活性,是構成機體天然防衛(wèi)系統(tǒng)的重要組成部分,它能夠對多種細菌、真菌、某些有包膜的病毒起到殺傷作用。防御素分為α和β防御素兩大類。它們在人體呈現(xiàn)持續(xù)的非特異性表達，同時也可以被細胞因子等炎癥反應的產物誘導表達。HBD-2對革蘭氏陰性菌及革蘭氏陽性菌都有一定的滅活性。還有研究者報道HBD-2對大腸桿菌,銅綠假單胞菌及白色念珠菌有較強的殺滅活性[6]。HBD-2存在于妊娠婦女的生殖道中，是抵抗微生物入侵生物屏障的重要組成部分,胎膜早破發(fā)生后,微生物侵入羊膜腔，HBD-2參予進行抗微生物的天然免疫反應,故其水平升高；當微生物的入侵受到抑制,就不會發(fā)生宮內感染，相反，如果羊膜腔內的天然免疫屏障未能控制微生物的入侵,病原微生物的產物就會刺激了HBD-2的表達。Soto E等人發(fā)現(xiàn)，羊水中HBD-2水平在HCA患者中出現(xiàn)升高[7]，也有研究者發(fā)現(xiàn)HBD-3水平在宮內感染患者中有所升高[8]。我們的研究表明，胎膜早破后HBD-2較對照組有所升高，但與對照組無統(tǒng)計學意義，隨著絨毛膜感染的發(fā)生，HBD-2水平進一步升高，與對照組比較差異顯著，與非HCA組比較有統(tǒng)計學意義，因此，HBD-2水平可作為胎膜早破羊膜腔出現(xiàn)感染的診斷指標。

在分組比較中可以看到，IL-1和HBD-2隨著胎膜早破的發(fā)生和感染的發(fā)生都呈現(xiàn)出升高的趨勢，可作為疾病的動態(tài)觀察依據。我們考慮HBD-2通過自身特有的殺菌機制使菌體裂解，發(fā)揮生物活性并導致釋放菌體內諸如內毒素等物質時，而菌體內容物又可誘發(fā)IL-1的產生或生成上調,進而又使機體局部各種細胞因子增多。這又能使HBD-2基因表達上調,至此形成一個循環(huán)，HBD-2和IL-1互為因果,相互促進，共同升高。通過ROC曲線的繪制，我們看到當IL-1以80.22 pg/ml為分界點時，診斷HCA的敏感性為0.78，特異性為0.75；當HBD以474.79 ng/L為分界點時，診斷HCA的敏感性為0.67，特異性為0.79(見圖3)，提示可以此作為分界點進行HCA的預測。

參考文獻：

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[5]Puchner K,Iavazzo C,Gourgiotis D,et al.Mid-trimester amniotic fluid interleukins(IL-1β,IL-10 and IL-18) as possible predictors of preterm delivery[J].In Vivo,2011,25(1):141.

[6]Harder J,Bartels J,Christophers E,et al.A peptide antibiotic from human skin[J].Nature,1997,387:861.

[7]Soto E,Espinoza J,Nien JK,Kusanovic JP et al.Human beta-defensin-2:a natural antimicrobial peptide present in amniotic fluid participates in the host response to microbial invasion of the amniotic cavity[J].J Matern Fetal Med ,2007,20:15.

[8]Buhimschi IA,Jabr M,Buhimschi CS et al.The novel antimicrobial peptide beta3-defensin is produced by the amnion:a possible role of the fetal membranes in innate immunity of the amniotic cavity[J].Am J Obstet Gynecol ,2004,191:1678.

摘要：目的通過測定外周血白介素-1(IL-1)及β2防御素(HBD-2)水平，探討他們在胎膜早破中的作用，分析其與羊膜腔感染的相關性，為臨床的診斷與治療提供新的思路。方法42例胎膜早破患者分別測定外周血IL-1及HBD-2水平，與20例對照組進行比較，根據胎膜病理診斷結果，實驗組進一步分出組織學絨毛膜炎組(HCA)和非組織學絨毛膜炎組(非HCA組)，比較兩組間HBD-2及IL-1水平。結果42名胎膜早破患者中，病理證實胎膜早破無感染者(非HCA)24例，感染者(HCA)18例。HCA組IL-1水平與非HCA組比較，差異顯著，P<0.01；HCA組IL-1水平與對照組比較，差異顯著， P<0.01；非HCA組的IL-1水平與對照組比較，無顯著性差異，P>0.05。 HCA組HBD水平與非HCA組比較，差異顯著，P<0.05；HCA組HBD水平與對照組比較，差異顯著， P<0.01；非HCA組的HBD水平與對照組比較，無顯著性差異，P>0.05。從均數(shù)直觀圖觀察到，隨著胎膜早破的出現(xiàn)，感染的發(fā)生，IL-1、HBD水平均有升高的趨勢。通過ROC曲線觀察，當IL-1以80.22 pg/ml為分界點時，診斷HCA的敏感性為0.78，特異性為0.75；當HBD以474.79 ng/L為分界點時，診斷HCA的敏感性為0.67，特異性為0.79。結論胎膜早破患者外周血IL-1、HBD-2水平有預測和診斷HCA的可能，其升高在HCA患者中有統(tǒng)計學意義，為臨床HCA的診斷提供新的手段。

關鍵詞：β2防御素；白介素-1；絨毛膜羊膜炎；胎膜早破

The Value of Serum IL-1 and HBD-2 in Diagnosis of Infection in Premature Rupture of MembranesYANGLi-na,WANGFan,YUHai-yan,etal.(HeilongjiangProvincialHospital，Harbin150036,China)

Abstract:ObjectiveTo analysis the relationship between the infection and the serum level of IL-1 and HBD-2 in premature rupture of membranes.Methods42 women with PROM were enrolled in the study.20 samples without PROM pregnancies matching the same gestational ages were recruited as control group.According to the results of pathological diagnosis of membranes,pregnant women with PROM were divided into histological chorioamnionitis(HCA) and non-HCA.We analyze the level of IL-1 and HBD-2 between the different groups.ResultsIn 42 patients with PROM,24 cases were non-infected and 18 cases were infected.The level of IL-1 in HCA group are significantly higher than non-HCA group and control group(P<0.01).The level of HBD-2 in HCA group are significantly higher than non-HCA group(P<0.05) and control group(P<0.01).There is no statistically significant different between non-HCA and control group(P>0.05).We observe from the mean plot show that the level of IL-1 and HBD-2 has a tendency to rise with the emergence of PROM and infection.According to the ROC curve,when IL-1 take 80.22 pg/mL,the sensitivity and specificity of diagnosis infection in PROM are 0.78 and 0.75 respectively.when HBD-2 take 474.79 ng/L,the sensitivity and specificity of diagnosis infection in PROM are 0.67 and 0.79 respectively.ConclusionThe clinical value of serum IL-1 and HBD-2 may be a specific index diagnosis of infection PROM in the future.

Key words:HBD-2;IL-1;chorioamnionitis;premature rupture of membranes

收稿日期：(2013-11-27)

作者簡介：楊麗娜，碩士，副主任醫(yī)師，黑龍江省醫(yī)院婦產科醫(yī)生。

文獻標識碼：A

中圖分類號：R714.43+3

文章編號：1007-4287(2015)03-0412-03

基金項目：黑龍江省衛(wèi)生廳科研課題(2013372)