血清干擾素-γ、白介素-4、白介素-6及白介素-10在腎癌患者治療中的表達(dá)及意義

魏雪菲, 徐　佩, 陳載融, 郭萬(wàn)華

(南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬南京鼓樓醫(yī)院 核醫(yī)學(xué)科, 江蘇 南京, 210029)

血清干擾素-γ、白介素-4、白介素-6及白介素-10在腎癌患者治療中的表達(dá)及意義

魏雪菲, 徐佩, 陳載融, 郭萬(wàn)華

(南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬南京鼓樓醫(yī)院 核醫(yī)學(xué)科, 江蘇 南京, 210029)

摘要:目的探討射頻消融術(shù)(RFA)以及根治性手術(shù)治療腎細(xì)胞癌患者手術(shù)前后血清干擾素-γ(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)及白介素-10(IL-10)的表達(dá)及臨床意義。方法應(yīng)用ELISA法對(duì)120例腎癌患者治療前與術(shù)后1周、1月及3月血清中的IFN-γ、IL-4、IL-6及IL-10含量進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果RFA組及根治組術(shù)后1周血清IFN-γ、IL-6、IL-10均升高(P<0.05); RFA組術(shù)后1、3月僅IFN-γ升高(P<0.05), 根治組術(shù)后1月僅IL-10升高(P<0.05); 2組IL-4水平手術(shù)前后均無(wú)顯著差異(P>0.05)。結(jié)論檢測(cè)腎癌患者治療前后細(xì)胞因子水平對(duì)于監(jiān)測(cè)疾病發(fā)展、評(píng)價(jià)手術(shù)效果、判斷預(yù)后有一定的作用。

關(guān)鍵詞:干擾素-γ; 白介素-4; 白介素-6; 白介素-10; 腎細(xì)胞癌

腎細(xì)胞癌(RCC)是泌尿系統(tǒng)中常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，約有25%的RCC患者首診時(shí)已為晚期[1], 其對(duì)化療和放療均不敏感，目前手術(shù)是公認(rèn)的治療原發(fā)性腎癌唯一有效的方法[2]。近來(lái)還有人[3]提出射頻消融結(jié)合腎血管栓塞術(shù)治療瘤體較大的腎癌是一種安全、可行的方法。各種細(xì)胞因子的分泌異常及異常炎癥細(xì)胞的出現(xiàn)在RCC的發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用[4], 如干擾素-α(IFN-α)[5]、干擾素-γ(IFN-γ)[6]、白介素-2(IL-2)[7]、白介素-4(IL-4)[8]、白介素-6(IL-6)[9]、白介素-9(IL-9)[10]、白介素-10(IL-10)[11]等。本文通過(guò)檢測(cè)RCC患者血清中IFN-γ、IL-4、IL-6及IL-10水平在治療前及治療后1周，1、3個(gè)月的變化，探討細(xì)胞因子在RCC疾病發(fā)生中的作用，現(xiàn)報(bào)告如下。

1資料與方法

1.1　一般資料

選取本院2012年1月—2014年6月住院患者120例，男78例，女42例，年齡26～69歲，平均年齡(2.5±13.4)歲，病理診斷為腎細(xì)胞癌患者。所有病例都未合并或已排除其他疾病如腎結(jié)核、腎結(jié)石、腎感染性疾病、腎良性腫瘤、腎盂腫瘤、腎間葉腫瘤、后腹腔其他腫瘤等；所有患者術(shù)前均未行放療、化療、免疫治療或靶向治療。正常對(duì)照組30例，為本院健康體檢人群。

1.2　方法

人IFN-γ、IL-4、IL-6及IL-10 ELISA試劑盒均購(gòu)于江蘇凱基生物科技發(fā)展有限公司，酶標(biāo)儀為BIO-RAD公司的Benchmark酶標(biāo)儀。

RFA治療組(60例):根據(jù)腫瘤的直徑、位置以及鄰近血管與臟器的關(guān)系，分為超聲引導(dǎo)下經(jīng)皮射頻消融術(shù)、腹腔鏡輔助下射頻消融術(shù)以及開(kāi)放射頻消融術(shù)。根治術(shù)組(60例)均采用腹腔鏡腎腫瘤根治性切除術(shù)。

所有病例均于術(shù)前1 d和治療后1周, 1、3個(gè)月清晨空腹抽取靜脈血3 mL, 靜脈血標(biāo)本采集后應(yīng)立即離心,將獲得的血清置-70 ℃冰箱保存待檢。采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)所有標(biāo)本的IFN-γ、IL-4、IL-6及IL-10含量，檢測(cè)步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

1.3　統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，結(jié)果均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

各組標(biāo)本血清IFN-γ、IL-4、IL-6及IL-10檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。RCC患者除血清IL-4外, IFN-γ、IL-6及IL-10測(cè)定結(jié)果與對(duì)照組比較有顯著差異。RFA組術(shù)后血清IFN-γ水平均高于術(shù)前(P<0.05), 術(shù)后1周的IL-6、IL-10水平較術(shù)前均升高(P<0.05), 術(shù)后1、3個(gè)月較術(shù)前均下降(P<0.05); 根治組術(shù)后1周IFN-γ水平較術(shù)前升高(P<0.05), 術(shù)后1、3個(gè)月與術(shù)前比較無(wú)顯著差異(P>0.05)，術(shù)后1周IL-6水平較術(shù)前升高(P<0.05), 術(shù)后1個(gè)月與術(shù)前比較無(wú)顯著差異(P>0.05), 術(shù)后3個(gè)月較術(shù)前明顯下降(P<0.05), 術(shù)后1周及1月的IL-10水平較術(shù)前升高(P<0.05),術(shù)后3個(gè)月與術(shù)前比較無(wú)顯著差異(P>0.05); 2組IL-4水平手術(shù)前后均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表1　RCC患者治療前后與對(duì)照組血清IFN-γ、IL-4、IL-6及IL-10檢測(cè)情況比較　pg/mL

與對(duì)照組比較, *P<0.05; 與同組治療前比較, #P<0.05。

3討論

免疫因素在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮了重要作用[12], 機(jī)體的荷瘤狀態(tài)會(huì)引發(fā)免疫應(yīng)答，機(jī)體發(fā)揮抗腫瘤免疫反應(yīng)以細(xì)胞免疫為主，主要效應(yīng)細(xì)胞是CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞。CD4+T細(xì)胞中的Th1型細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞中的Tc1型細(xì)胞可釋放IL-2、IFN-γ等MHCⅠ類分子來(lái)刺激NK細(xì)胞和CTL細(xì)胞活化，激活單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和NK細(xì)胞介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞殺傷途徑，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡；而CD4+T細(xì)胞中的Th2型細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞中的Tc2型細(xì)胞可分泌IL-4、IL-6、IL-10等MHCⅡ分子來(lái)抑制MHCⅠ類分子的表達(dá)，降低抗原遞呈能力，影響CTL對(duì)腫瘤抗原的識(shí)別，使腫瘤細(xì)胞逃避特異性CTL的殺傷作用[13]。IL-10在介導(dǎo)免疫耐受方面具有重要作用。Th1、Th2型細(xì)胞因子水平及比例變化在機(jī)體免疫調(diào)節(jié)中具有重要意義, Th2向Th1漂移可促進(jìn)抗腫瘤效應(yīng)，若Th1/Th2比例向Th2偏移則會(huì)造成免疫抑制狀態(tài)，干擾抗腫瘤免疫反應(yīng)，有可能發(fā)生腫瘤細(xì)胞的免疫逃避[14]。

腎癌患者免疫功能缺陷和紊亂, CD4+T細(xì)胞水平和CD4+/CD8+比值明顯降低CD8+T細(xì)胞水平升高[15]。本研究結(jié)果顯示，腎癌患者射頻消融術(shù)及根治性手術(shù)1周，各種細(xì)胞因子的表達(dá)較術(shù)前均有明顯上升，且2組患者細(xì)胞因子水平相當(dāng)，但在術(shù)后1個(gè)月及3個(gè)月后, 2組患者血清細(xì)胞因子水平出現(xiàn)顯著性差異。其可能原因?yàn)椋盒g(shù)后1周時(shí)由于手術(shù)過(guò)程中的創(chuàng)傷、出血、應(yīng)激等因素可導(dǎo)致機(jī)體不同程度的免疫功能紊亂以及術(shù)后炎性反應(yīng)導(dǎo)致了細(xì)胞因子的大量釋放，因此在1周時(shí)未表現(xiàn)出顯著性差異，當(dāng)術(shù)后1個(gè)月患者細(xì)胞因子水平的差異才逐漸表現(xiàn)出來(lái)，根治組患者基本恢復(fù)到術(shù)前水平, RFA組IFN-γ水平明顯升高, IL-6、IL-10水平降低。

臨床實(shí)驗(yàn)[16]表明, IFN-γ水平升高有助于機(jī)體抗腫瘤免疫功能的恢復(fù)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡效應(yīng); IL-4可誘導(dǎo)腫瘤免疫并可排斥已形成的惡性腫瘤; IL-6水平的降低有利于解除機(jī)體的免疫抑制狀態(tài)，增強(qiáng)免疫功能; IL-10水平的下降還能刺進(jìn)Th1細(xì)胞及其分泌的細(xì)胞因子的作用，提高其抗原遞呈能力，減少對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫耐受[17]。本研究中RFA治療后腎癌患者血清IFN-γ水平明顯升高, IL-6、IL-10水平降低，這種細(xì)胞因子的改變提示RFA治療可以上調(diào)患者體內(nèi)Th1型細(xì)胞因子的表達(dá)，同時(shí)抑制患者Th2型細(xì)胞因子的表達(dá)，促進(jìn)Th1/Th2比例向Th2逆轉(zhuǎn)，增強(qiáng)了腎癌患者的機(jī)體抗腫瘤免疫反應(yīng)，與國(guó)外報(bào)道一致[18]。由于本文中檢測(cè)的免疫指標(biāo)有限，隨訪時(shí)間較短，因此需要加大標(biāo)本量及檢測(cè)指標(biāo)進(jìn)一步研究其內(nèi)在關(guān)系，使之與臨床關(guān)系更加確定。

綜上所述，分析腎癌患者治療前后的免疫相關(guān)細(xì)胞因子水平可以探查腎癌患者機(jī)體的免疫狀態(tài)，為腎癌的綜合治療、療效觀察、手術(shù)方法評(píng)價(jià)及預(yù)后判斷等提供了新的思路。

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Expressions and significance of serum IFN-γ, IL-4, IL-6 and IL-10 in treatment of patients with renal cell carcinoma

WEI Xuefei, XU Pei, CHEN Zairong,GUO Wanhua

(DepartmentofNuclearMedicine,NanjingDrumTowerHospitalAffiliatedtoMedical

CollegeofNanjingUniversity,Nanjing,Jiangsu, 210008)

ABSTRACT:ObjectiveTo explore the expressions and clinical significance of serum IFN-γ, IL-4, IL-6 and IL-10 before and after operation in patients with renal cell carcinoma by treatment of radiofrequency ablation and radical operation. MethodsELISA was used to detect the levels of serum IFN-γ, IL-4, IL-6 and IL-10 before operation and one week, one month and three months after operation in 120 patients with renal cancer. ResultsLevels of IFN-γ、IL-6、IL-10 increased significantly one week after operation in both of RFA group and radical operation group (P<0.05). IFN-γ increased significantly one month and three month after operation in the RFA group (P<0.05), while IL-10 increased significantly one month after operation in the radical operation group (P<0.05). There was no significant difference of IL-4 level before and after operation in both groups (P>0.05). ConclusionDetection of cytokine levels before and after treatment in patients with renal cancer is beneficial for monitoring disease development, evaluating surgical effects and judging prognosis.

KEYWORDS:interferon-γ; interleukin-4; interleukin -6; interleukin-10; renal cell carcinoma

通信作者:郭萬(wàn)華, E-mail: wanhuaguo@163.com

基金項(xiàng)目:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81171363)

收稿日期:2014-08-20

中圖分類號(hào):R 692

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

文章編號(hào):1672-2353(2015)07-068-03DOI: 10.7619/jcmp.201507019