朝陽(yáng)地區(qū)海產(chǎn)品副溶血性弧菌污染情況檢測(cè)

冀 威

(遼寧省朝陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 122000)

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朝陽(yáng)地區(qū)海產(chǎn)品副溶血性弧菌污染情況檢測(cè)

冀 威

(遼寧省朝陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 122000)

為了解朝陽(yáng)市鮮凍水產(chǎn)品副溶血性弧菌污染狀況，為預(yù)防副溶血性弧菌食物中毒提供科學(xué)依據(jù)。結(jié)果從3類140份鮮凍水產(chǎn)品中檢出75株副溶血性弧菌，檢出率為53.6%。在朝陽(yáng)市售水產(chǎn)品中存在副溶血性弧菌污染，建議加大對(duì)水產(chǎn)品的監(jiān)督檢查，提示在細(xì)菌性食物中毒的調(diào)查中，如食用了水產(chǎn)品，應(yīng)考慮副溶血性弧菌污染。

水產(chǎn)品；副溶血性弧菌；檢測(cè)

1 生物學(xué)特性

副溶血性弧菌(VP)屬弧菌科，是一種嗜鹽革蘭陰性致病菌，常存在于近海岸的海水、海底沉積物、魚蝦貝殼類海產(chǎn)品中。海產(chǎn)品副溶血性弧菌帶菌率的種系差異主要取決于寄主的生活習(xí)性和攝食方式。溫度也是VP繁殖的重要影響因子，直接影響海產(chǎn)品中VP的生長(zhǎng)繁殖。

2 副溶血性弧菌的危害

副溶血性弧菌于1950年從日本一次暴發(fā)性食物中毒中分離發(fā)現(xiàn)。該菌為海產(chǎn)品中常見(jiàn)菌，主要引起食物中毒和急性腹瀉，尤以日本、東南亞、美國(guó)及我國(guó)臺(tái)北地區(qū)多見(jiàn)，也是我國(guó)大陸沿海地區(qū)食物中毒中最常見(jiàn)的致病菌。

3 材料與方法

3.1 樣品采集

樣品來(lái)源本次調(diào)查于2009年進(jìn)行。用隨機(jī)抽樣的方法采集朝陽(yáng)市各市場(chǎng)和大型超市零售的新鮮魚蝦貝，共采樣3次，采樣時(shí)間分別為8月、9月、10月，每次分別隨機(jī)采取海水魚、蝦、貝類。樣品采集后1～2h內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。所采集的海水魚包括鯧魚、小黃魚、梅魚、白菇魚、黃菇魚、帶魚6種魚，各取樣10份。海水蝦包括南美白對(duì)蝦、日本對(duì)蝦、斑節(jié)對(duì)蝦、紅蝦和刀額新對(duì)蝦5種蝦，各取樣10份。貝類包括扇貝、蠣子、蜆子3種貝，各取樣10份。3類共140份鮮凍水產(chǎn)品。

3.2 試劑

試劑有3%的氯化鈉堿性蛋白胨水、TCBS瓊脂、3.5%氯化鈉三糖鐵瓊脂(TSI)、3.5%氯化鈉胰酪胨大豆瓊脂(TSA)、嗜鹽性胰酪胨肉湯，均由北京路橋有限責(zé)任公司提供。弧菌顯色培養(yǎng)基由法國(guó)科瑪嘉公司生產(chǎn)生化試劑由法國(guó)梅里埃公司生產(chǎn)。

3.3 主要儀器

主要儀器有均質(zhì)器及無(wú)菌均質(zhì)袋、電熱恒溫培養(yǎng)箱。

3.4 方法

3.4.1 增菌

魚類以無(wú)菌操作秤取表面組織、腸、鰓、貝殼類先在符合生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)的流水下洗刷外殼并甩干，無(wú)菌操作打開(kāi)外殼，取全部?jī)?nèi)容物，均無(wú)菌剪碎。

蝦類：取樣部位為腹部?jī)?nèi)的肌肉。將蝦在流水下沖洗，摘去頭胸節(jié)，用滅菌剪子剪除腹節(jié)與頭胸節(jié)連接處的肌肉，然后擠出腹節(jié)內(nèi)的肌肉。秤取25g樣品，加入225mL的堿性蛋白胨水中，混勻，置37℃恒溫箱培養(yǎng)18h。

3.4.2 分離培養(yǎng)

用接種環(huán)取上述培養(yǎng)后的堿性蛋白胨水增菌液，劃線接種于TCBS選擇性瓊脂平板,置37℃培養(yǎng)24h 。

3.4.3 鑒定

每板挑取2～3個(gè)可疑菌落，分別劃線科瑪嘉顯色瓊脂平板上，置37℃培養(yǎng)24h。在科瑪嘉顯色瓊脂平板上，副溶血性弧菌為中等大小紫紅色圓形隆起，混濁不透明的菌落。將科瑪嘉顯色瓊脂平板上可疑菌落穿刺接種TSI，37℃培養(yǎng)24h，副溶血性弧菌在TSI上產(chǎn)生堿性斜面(紅色)、酸性底部(黃色)，不產(chǎn)氣，有動(dòng)力，不產(chǎn)H2S，瓊脂內(nèi)輕微混濁。同時(shí)進(jìn)行氧化酶試驗(yàn)，劃線TSA，置42℃培養(yǎng)24h，副溶血性弧菌生長(zhǎng)。副溶血性弧菌為氧化酶陽(yáng)性。將TSA培養(yǎng)物進(jìn)行耐鹽試驗(yàn)，結(jié)果符合在無(wú)鹽和10%鹽胨水中不生長(zhǎng)，7%鹽胨水中生長(zhǎng)特征。

涂片鏡檢：將可疑菌落涂片，進(jìn)行革蘭氏染色，鏡檢觀察形態(tài)。副溶血性弧菌為革蘭氏陰性，成棒狀、弧狀、卵圓狀等多形態(tài)，無(wú)芽孢，有鞭毛。

4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

本實(shí)驗(yàn)共采集3類140份樣品，檢出副溶血性弧菌75株， 檢出率為53.6%。魚類檢測(cè)份數(shù)各10份，鯧魚、小黃魚、梅魚、白菇魚、黃菇魚、帶魚檢測(cè)菌株數(shù)分別為5份、7份、6份、8份、7份、7份。平均檢出率66.7%，3類樣品中檢出率最高。貝類產(chǎn)品監(jiān)測(cè)份數(shù)各10份，扇貝、蠣子、蜆子檢測(cè)菌株數(shù)分別為3份、1份、1份，平均檢出率16.7%，相對(duì)較低。蝦類檢測(cè)份數(shù)各10份南美白對(duì)蝦、日本對(duì)蝦、斑節(jié)對(duì)蝦、紅蝦、刀額新對(duì)蝦檢測(cè)菌株數(shù)分別為5份、6份、7份、8份、4份，平均檢出率60%。

由此可見(jiàn)，受檢的海產(chǎn)品的副溶血性弧菌污染較嚴(yán)重。從不同種類看魚類、蝦類污染較貝類高，從不同標(biāo)本整體污染情況看，魚類、蝦類樣品比貝類高。說(shuō)明抽檢的海產(chǎn)品均存在不同程度的副溶血性弧菌污染，提示應(yīng)加強(qiáng)衛(wèi)生監(jiān)測(cè)，加強(qiáng)科學(xué)食用海產(chǎn)品的衛(wèi)生安全宣傳。

5 結(jié)論

副溶血性弧菌是海產(chǎn)品中常帶菌種，常存在于近海岸的海水、海底沉積物、魚蝦貝殼類海產(chǎn)品中。本地海產(chǎn)品副溶血性弧菌帶菌含量較高，以魚類污染最為嚴(yán)重。溫度是副溶血性弧菌繁殖的重要影響因子，直接影響海產(chǎn)品中副溶血性弧菌的生長(zhǎng)繁殖。