以殼聚糖為基質(zhì)的鹽酸利多卡因凝膠劑的研究*

呂 玥，李 晗，戴學(xué)文，房志仲

(1.天津市南開醫(yī)院，天津 300100； 2.天津醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，天津 300070)

?

藥物制劑

以殼聚糖為基質(zhì)的鹽酸利多卡因凝膠劑的研究*

呂 玥1，李 晗2，戴學(xué)文2，房志仲2

(1.天津市南開醫(yī)院，天津 300100； 2.天津醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，天津 300070)

目的：以殼聚糖為基質(zhì)制備鹽酸利多卡因凝膠劑，并建立鹽酸利多卡因的含量測定方法。方法：以殼聚糖為基質(zhì)制備凝膠劑，以HPLC法測定利多卡因的含量；色譜條件為Kromasil C18色譜柱(200 mm×4.6 mm，5 μm,)；流動相：甲醇-磷酸緩沖液(加磷酸調(diào)節(jié)pH=8.00)(75∶25)，流速為0.8 ml/min，檢測波長為254 nm，柱溫：室溫，進樣量20 μl。結(jié)果：鹽酸利多卡因在16.24～121.80 μg/ml范圍內(nèi)濃度與峰面積線性關(guān)系良好(r=0.999 9,n=7)，平均回收率為100.59%，RSD為0.35%。 結(jié)論：以殼聚糖為基質(zhì)制備的凝膠劑方法簡便，HPLC法測定凝膠劑中的利多卡因方法準確、可靠，可用于對利多卡因凝膠劑進行質(zhì)量控制、含量控制。

殼聚糖，利多卡因，凝膠劑，高效液相色譜法

國外對凝膠劑的研究較早，《英國藥典》1993年版收載了外用凝膠劑?！睹绹幍洹酚?995 年版和《中國藥典》2000年版首次收載凝膠劑[1]。國內(nèi)外凝膠劑用的輔料主要有卡波姆、殼聚糖、海藻酸鈣、羧甲基纖維素鈉等。殼聚糖來源廣泛，具有良好的組織相容性、生物可降解作用等,同時具有膠原質(zhì)和植物纖維的功能，無抗原和致敏性，無不良反應(yīng)，其成膜性、黏滯性良好。目前，殼聚糖在醫(yī)學(xué)、藥學(xué)等領(lǐng)域得到了深入的研究和臨床應(yīng)用[1]。

鹽酸利多卡因注射劑用于表面浸潤麻醉時患者有疼痛感，而膠漿劑僅適于黏膜用局部麻醉，且臨床對無創(chuàng)傷性表面麻醉制劑需求較大。凝膠劑的給藥途徑除經(jīng)皮給藥外、還可以經(jīng)口腔、眼部、鼻腔、陰道和直腸黏膜給藥，不同的給藥途徑均能收到滿意的臨床效果。鹽酸利多卡因凝膠劑在使用中患者無痛苦和損傷，給藥方便，作用持久，增加了患者的順應(yīng)性，可替代局部浸潤麻醉給藥，且較為經(jīng)濟。本文以殼聚糖為基質(zhì)，制備鹽酸利多卡因凝膠劑，并建立質(zhì)量控制方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 美國高效液相色譜儀(Spectra-physics)，輸液泵(SP8810 precision isocratic, BIO-RAD)，檢測器(Spectra SYSTEM UV2000,Thermo separation products)，Anastar 色譜工作站，Kromasil C18色譜柱(200 mm×4.6 mm，5 μm)；ALC-210.4電子分析天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)；KQ-100B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；pHS-25(數(shù)顯)pH計(上海精密科學(xué)儀器有限公司)，80-2B臺式離心機(上海安亭科學(xué)儀器廠制造)。

1.2 試藥 利多卡因?qū)φ掌?中國藥品生物制品檢定所，批號110715-201016)。鹽酸利多卡因樣品(湖北遠成藥業(yè)有限公司提供)，殼聚糖(南通興成生物制品廠提供)，甲醇(天津市風船化學(xué)試劑有限公司，色譜純)，鹽酸利多卡因凝膠劑(本院自制，批號20140505、20140510、20140512)，其他試劑均為市售分析純；重蒸水(天津醫(yī)科大學(xué)自制)。

2 方法與結(jié)果

2.1 鹽酸利多卡因凝膠劑的制備

2.1.1 處方 0.625 g鹽酸利多卡因(利多卡因0.5 g)，殼聚糖4 g，冰醋酸0.5 ml，丙二醇20 ml，氮酮1.5 ml，薄荷腦0.1 g，加蒸餾水至100 g。

2.1.2 制備 ①將冰醋酸加蒸餾水配成2%的醋酸水溶液，加入殼聚糖使其溶脹；②將鹽酸利多卡因溶于少量蒸餾水；③將薄荷腦、氮酮溶于丙二醇中，④將②和③分別加入①中，加蒸餾水至100 g，攪拌均勻，即得凝膠劑。

2.2 含量測定

2.2.1 色譜條件 TIANHE Kromasil C18色譜柱(200 mm×4.6 mm，5 μm)；流動相：甲醇-磷酸鹽緩沖液(25∶75，pH 8.0)；檢測波長為254 nm；流速：0.8 ml/min；柱溫：室溫，進樣量20 μl[1]。

2.2.2 溶液的配制

2．2．2．1 對照品溶液的配制 精密稱取鹽酸利多卡因?qū)φ掌?0 mg，置于50 ml量瓶中，加甲醇溶解并至刻度，搖勻。

2.2.2.2 樣品溶液的配制 精密稱取凝膠劑4 g，置50 ml燒杯中，加適量的流動相超聲使其溶解后，定量轉(zhuǎn)移至25 ml量瓶中，定容，搖勻；再取樣品溶液置于離心管，置入離心機中，離心10 min，轉(zhuǎn)速2 000 r/min；取上清液0.2 ml置于10 ml量瓶，定容至刻度。搖勻即得。

2.2.2.3 陰性對照溶液的配制 依處方制備不含鹽酸利多卡因的空白凝膠劑，依“2.2.2”項下樣品溶液的配制方法操做，得陰性對照溶液，備用。

2.2.3 專屬性試驗 分別取對照品溶液、樣品溶液和陰性對照溶液各取20 μl，按照“2.2.1”項下色譜條件進樣分析，結(jié)果顯示陰性對照液在利多卡因相同保留時間處無干擾，見圖1。

2.2.4 線性范圍 分別量取鹽酸利多卡因?qū)φ掌啡芤?.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2和1.5 ml于10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。按“2.2.1”項下色譜條件，進樣20 μl。以鹽酸利多卡因濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，結(jié)果回歸方程為Y=2 189.2X+5 336.4(r=0.999 9，n=7)，鹽酸利多卡因在16.24～121.80 μg/ml范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.2.5 精密度的測定 按“2.2.1”項下色譜條件，取對照品溶液進樣20 μl，以峰面積計算相對標準偏差，結(jié)果RSD為 0.85%(n=6)，說明日內(nèi)精密度良好。按“2.2.1”項下色譜條件于第1、2、3、4、5和6 d分別進行精密度測定，以峰面積計算相對標準偏差，RSD為0.79%(n=6)，說明日間精密度良好。

1.鹽酸利多卡因

2.2.6 重現(xiàn)性實驗 取同一鹽酸利多卡因樣品溶液，按“2.2.1”項下色譜條件，連續(xù)進樣6次，進樣量20 μl，以峰面積計算相對標準偏差RSD為0.60% (n=6)，說明該法重現(xiàn)性良好。

2.2.7 穩(wěn)定性的測定 按“2.2.1”項下色譜條件，取同一對照品溶液，分別在制備后0、3、6、9、12和24 h，進樣20 μl，記錄峰面積，以峰面積計算相對標準偏差RSD為0.81%，說明該溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.8 回收率的測定 精密稱取凝膠劑4 g置50 ml燒杯中，共9份，分別精密稱定0.8、1.0和1.2 g 鹽酸利多卡因于燒杯中，依“2.2.2.2”項下方法操作，配成80%、100%和120%的加樣溶液。按“2.2.1”項下色譜條件，進樣量20 μl，計算回收率，結(jié)果平均回收率為100.59%，RSD為0.35%，見表1。

表1 回收率試驗結(jié)果(n=9)

2.4.9 樣品含量測定 取供試品3批，分別按“2.2.2.2”項下方法配制供試品溶液，精密吸取供試品溶液20 μl，按“2.2.1”項下色譜條件分析，根據(jù)供試品和對照品的峰面積，按照外標法計算樣品的含量，結(jié)果3批樣品的含量分別為標示量的99.15%、104.09%和105.93%。

3 討論

3.1 殼聚糖用量 殼聚糖本身為一種多糖類纖維素，在醋酸溶液中溶解，殼聚糖溶液呈較好的凝膠劑，殼聚糖用量從1%～6%，凝膠劑的黃色逐漸加深，而且凝膠劑的黏性也會隨之增加。當殼聚糖用量在4%時，與氮酮、丙二醇能充分混合，制備過程簡單、易行[3，4]。

3.2 系統(tǒng)適應(yīng)性 在試驗中用甲醇代替乙腈，用甲醇-磷酸緩沖液(50∶50)為流動相，結(jié)果發(fā)現(xiàn)利多卡因的峰型不對稱，當調(diào)整甲醇與磷酸緩沖液的比例為25∶75時, 利多卡因的峰型對稱，保留時間在11 min左右，塔板數(shù)大于2 500，分離度大于1.5，符合分析要求[3，5]。

3.3 鹽酸利多卡因加入方式 分別考查了直接將鹽酸利多卡因粉末加入制備好的凝膠基質(zhì)中和先配成鹽酸利多卡因溶液再加到凝膠基質(zhì)中，經(jīng)試驗發(fā)現(xiàn)，先將鹽酸利多卡因配成溶液，再加到凝膠基質(zhì)中，鹽酸利多卡因溶液與凝膠基質(zhì)能均勻混合，而且凝膠劑黏性更好。

1 中國藥典[S]. 二部.2010:709-701,2371

2 王署東，劉文雅.凝膠劑的研究進展及應(yīng)用概況[J].中國藥業(yè)，2010，19(21)：1-3

3 孫慶申，車小瓊，趙凱.殼聚糖基質(zhì)與蛋白質(zhì)藥物的釋放[J].高分子通報，2008，21(6):46-48

4 董煜.高效液相色譜法測定鹽酸利多卡因膠漿的含量[J].中國藥業(yè)，2010，10(2)：36-38

5 吳洪應(yīng)，龔純.HPLC法同時測定林可霉素利多卡因凝膠中林可霉素和鹽酸利多卡因的含量[J].中國藥品標準，2005，6(2)：26-28

Research on lidocaine hydrochloride gels with chitosan as the matrix

Lv Yue1，Li Han2，Dai Xuewen2，F(xiàn)ang Zhizhong2

(Tianjin Nankai Hospital,Tianjin 300100；2.College of Pharmacy, Tianjin Medical University，Tianjin 300070)

Objectives：Preparation of chitosan as the matrix of lidocaine hydrochloride gels,to establish content determination and methodology of the method.Methods：Design the prescription, according to the prescription preparation gels. To establish HPLC method for determining the content of lidocaine，the chromatographic conditions is Kromasil C18chromatographic column(200 mm×4.6 mm, 5 μm)； mobile phase: methanol - phosphate buffer(75∶25); add phosphoric acid to adjust pH 8.0, flow rate of 0.8 ml/min，λmax=254 nm；column temperature: room temperat ure, injection amount 20 μl .Results：The calibration curves of lidocaine were linear in the ran ges of 16.24～121.8 μg/ml (r=0.999 9,n=7).The recoveries were 100.59%，and RSD were 0.35%(n=3).Conclusions：The methods of HPLC is specific, effective, sensitive and accurate. It can be used to lidocaine hydrochloride gel agent for quality control,content control.

chitosan，lidocaine,hydrochloride gels，HPLC

2014-11-13

TQ460.6 R927.2

A

1006-5687(2015)02-0029-03