促紅細胞生成素對血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的系膜細胞增殖及Ⅰ/Ⅳ型膠原和纖維連接蛋白表達的影響研究

季 芬，徐玉音，范亞平，王 鋒，楊 斌

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·論著·

促紅細胞生成素對血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的系膜細胞增殖及Ⅰ/Ⅳ型膠原和纖維連接蛋白表達的影響研究

季 芬，徐玉音，范亞平，王 鋒，楊 斌

目的 探討促紅細胞生成素(EPO)對血管緊張素Ⅱ(Ang Ⅱ)誘導(dǎo)的系膜細胞增殖及Ⅰ型膠原(ColⅠ)、Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)和纖維連接蛋白(FN)表達的影響。方法 將體外培養(yǎng)大鼠腎小球系膜細胞分為4組：對照組，AngⅡ組(0.1、1.0、10.0 μmol/L)，EPO組(1、10、100 U/L)，AngⅡ+EPO組(EPO 1、10、100 U/L預(yù)處理1 h后加AngⅡ 1.0 μmol/L)。各組處理0、24、48 h時，CCK-8法檢測系膜細胞增殖情況，免疫印跡法檢測系膜細胞ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白表達水平，ELISA法檢測系膜細胞培養(yǎng)上清液中ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白水平。結(jié)果 單獨給予AngⅡ或EPO均可刺激系膜細胞增殖，AngⅡ組亞組和EPO組亞組24、48 h時系膜細胞增殖水平均高于對照組，且48 h時高于24 h時，24 h時高于0 h時，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；單獨給予AngⅡ或EPO均可促進系膜細胞合成及分泌ColⅠ、Col Ⅳ和FN，除EPO 1 U/L亞組Col Ⅰ蛋白表達水平與對照組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)外，AngⅡ組亞組和EPO組其他亞組ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白表達水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與AngⅡ1.0 μmol/L+EPO 1 U/L亞組比較，AngⅡ1.0 μmol/L+EPO 10 U/L亞組和AngⅡ1.0 μmol/L+EPO 100 U/L亞組在24、48 h時系膜細胞增殖水平及ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白表達水平均下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，但與對照組及同濃度單純EPO亞組比較，AngⅡ1.0 μmol/L+EPO組各亞組24、48 h時系膜細胞增殖水平及ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白表達水平均增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 Ang Ⅱ能刺激系膜細胞增殖，促進系膜細胞合成及分泌ColⅠ、Col Ⅳ和FN，EPO亦有一定程度類似作用，但兩者同時存在時，EPO可拮抗AngⅡ誘導(dǎo)的系膜細胞增殖及ColⅠ、Col Ⅳ和FN的合成及分泌，提示EPO除可糾正腎性貧血外，可能對AngⅡ誘導(dǎo)的腎小球硬化具有抑制作用而保護腎功能。

促紅細胞生成素；血管緊張素Ⅱ；腎小球系膜細胞；膠原Ⅰ型 ；膠原Ⅳ型；纖連蛋白類

季芬，徐玉音，范亞平，等.促紅細胞生成素對血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的系膜細胞增殖及Ⅰ/Ⅳ型膠原和纖維連接蛋白表達的影響研究[J].中國全科醫(yī)學(xué)，2015，18(26)：3177-3181.[www.chinagp.net]

Ji F,Xu YY,Fan YP,et al.Effects of erythropoietin on ang Ⅱ-induced mesangial cell proliferation and the expression levels of col Ⅰ,Col Ⅳ and FN[J].Chinese General Practice，2015，18(26)：3177-3181.

促紅細胞生成素(EPO)是哺乳動物調(diào)節(jié)紅細胞生成的主要因子，出生后主要產(chǎn)生于腎臟，基本生理功能是刺激骨髓紅細胞生成和釋放；重組EPO是慢性腎衰竭貧血治療的重大進展，目前已在臨床廣泛應(yīng)用。近來研究顯示，EPO可通過減輕足細胞損傷及改善腎小球內(nèi)皮細胞功能而減輕或延緩腎小球硬化[1-2]。系膜細胞是腎小球固有細胞，其增殖及Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)、Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)、纖維連接蛋白(FN)等系膜細胞外基質(zhì)(ECM)成分的過度合成和積聚在腎小球硬化過程中具有重要的病理作用，但鮮有EPO與腎小球系膜細胞及腎小球硬化相關(guān)的研究報道。本研究擬采用體外培養(yǎng)腎小球系膜細胞分別予不同濃度血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)或EPO單用及共同刺激，觀察腎小球系膜細胞增殖、ECM有關(guān)成分合成與分泌的改變，探討EPO對AngⅡ刺激所致腎小球系膜細胞增殖與ECM聚積的影響。

1 材料與方法

1.1 材料 大鼠腎小球系膜細胞株HBZY-1由中國典型培養(yǎng)物保藏中心提供，DMEM培養(yǎng)基購自美國Gibco BRL公司，胎牛血清購自美國Invitrogen公司，胰蛋白酶購自美國Sigma公司，AngⅡ購自美國Enzo公司，EPO購自山東阿華生物藥業(yè)有限公司，兔抗鼠ColⅠ抗體購自美國Santa Cruz公司，兔抗鼠Col Ⅳ抗體、兔抗鼠FN抗體購自美國Immunoway公司，兔抗鼠β-actin抗體、辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗兔IgG二抗購自上海碧云天生物技術(shù)研究所，大鼠ColⅠ、Col Ⅳ及FN ELISA檢測試劑盒購自美國R&D公司。

1.2 細胞培養(yǎng)與分組干預(yù) DMEM培養(yǎng)液(含10%胎牛血清)培養(yǎng)大鼠系膜細胞；待80%融合予無血清培養(yǎng)24 h使細胞同步化后分為4組：對照組，AngⅡ組(0.1、1.0、10.0 μmol/L)，EPO組(1、10、100 U/L)，AngⅡ+EPO組(EPO 1、10、100 U/L預(yù)處理1 h后加AngⅡ 1.0 μmol/L)。

1.3 CCK-8法檢測大鼠系膜細胞增殖 系膜細胞以每孔5×104的密度接種于96孔板，貼壁生長至80%融合后分組予干預(yù)處理48 h，于0、24、48 h時加CCK-8 10 μl /孔，37 ℃避光孵育2 h，采用酶標(biāo)儀于450 nm波長測定各孔吸光度(A)值。

1.4 免疫印跡法檢測系膜細胞合成ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白的水平 系膜細胞培養(yǎng)至80%融合按上述分組予干預(yù)處理48 h，4 ℃ 0.01 mmol/L PBS洗滌3次，棄上清液；加細胞裂解液冰上孵育30 min，離心后取上清液測定蛋白濃度，取等量蛋白SDS-PAGE電泳并轉(zhuǎn)移至PVDF膜，5% BSA封閉2 h，TBST洗滌3次，分別加入兔抗鼠ColⅠ、Col Ⅳ、FN抗體(1∶1 000)4 ℃孵育過夜。TBST洗滌3次，用辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗兔IgG(1∶1 000)室溫孵育2 h，TBST洗滌3次，BIO-RAD顯影儀顯影，用Image J圖像分析軟件掃描并測定灰度值，以目的蛋白灰度值與β-actin灰度值的比值與對照組灰度比值的百分比表示。

1.5 ELISA法檢測細胞培養(yǎng)上清液中ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白水平 取對數(shù)生長期系膜細胞以每孔1×105的密度接種于6孔板，分組予干預(yù)處理48 h，提取上清液，按照ELISA試劑盒說明書測定ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白水平，采用酶標(biāo)儀于450 nm波長測定各孔吸光度(A)值。

2 結(jié)果

2.1 AngⅡ或EPO對大鼠系膜細胞增殖的影響 單獨給予AngⅡ或EPO均可刺激系膜細胞增殖，AngⅡ組和EPO組各亞組24、48 h時系膜細胞增殖水平均高于對照組，且48 h時高于24 h時，24 h時高于0 h時，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

與AngⅡ1.0 μmol/L亞組比較，AngⅡ1.0 μmol/L+EPO 10 U/L亞組和AngⅡ1.0 μmol/L+EPO 100 U/L亞組在24、48 h時系膜細胞增殖水平均下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；與同濃度EPO亞組比較，AngⅡ+EPO組各亞組24、48 h時系膜細胞增殖水平增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表1)。

Table 1 Comparison of mesangial cell proliferation level among all groups at different times

組別0h24h48h對照組0.55±0.030.88±0.041.55±0.07AngⅡ組 AngⅡ0.1μmol/L亞組0.55±0.041.16±0.05ae1.92±0.09aef AngⅡ1.0μmol/L亞組0.57±0.05b1.35±0.06abe2.53±0.13abef AngⅡ10.0μmol/L亞組0.61±0.05b1.52±0.08abe2.76±0.14abefEPO組 EPO1U/L亞組0.59±0.030.91±0.05a1.60±0.08af EPO10U/L亞組0.56±0.03b1.02±0.05abe1.78±0.08abef EPO100U/L亞組0.57±0.04b1.14±0.05abe1.98±0.10abefAngⅡ+EPO組 AngⅡ1.0μmol/L+EPO1U/L亞組0.58±0.05d1.46±0.06ade2.56±0.13adef AngⅡ1.0μmol/L+EPO10U/L亞組0.59±0.04bcd1.37±0.06abcde2.27±0.11abcdef AngⅡ1.0μmol/L+EPO100U/L亞組0.56±0.03bcd1.29±0.05abcde2.14±0.11abcdefF值F交互=51.60,F組間=171.22,F時間=7265.77P值P交互<0.001,P組間<0.001,P時間<0.001

注：AngⅡ=血管緊張素Ⅱ，EPO=促紅細胞生成素；與同時間點對照組比較，aP<0.05；與同時間點、同組前一濃度亞組比較，bP<0.05；與同時間點單用AngⅡ1.0 μmol/L亞組比較，cP<0.05；與同時間點、同濃度單用EPO亞組比較，dP<0.05；與同亞組0 h比較，eP<0.05；與同亞組24 h比較，fP<0.05

2.2 免疫印跡法檢測大鼠系膜細胞ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白表達 單獨給予AngⅡ或EPO均可刺激系膜細胞合成ColⅠ、Col Ⅳ和FN，除EPO 1 U/L亞組Col Ⅰ 蛋白表達水平與對照組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)外，AngⅡ組亞組和EPO組其他亞組ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白表達水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表2)。

與AngⅡ1.0 μmol/L+EPO 1 U/L亞組比較，AngⅡ 1.0 μmol/L+EPO 10 U/L亞組和AngⅡ 1.0 μmol/L+EPO 100 U/L亞組ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白表達水平均下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與同濃度單用EPO亞組比較，AngⅡ+EPO組各亞組ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白表達水平均增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表2、圖1)。

2.3 ELISA法檢測細胞培養(yǎng)上清液中ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白水平 單獨給予AngⅡ或EPO均可刺激系膜細胞分泌ColⅠ、Col Ⅳ及FN，除EPO 1 U/L亞組FN表達水平與對照組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)外，AngⅡ組亞組和EPO組其他各亞組ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白表達水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表3)。

與AngⅡ1.0 μmol/L+EPO 1 U/L亞組比較，AngⅡ 1.0 μmol/L+EPO 10 U/L亞組和AngⅡ 1.0 μmol/L+EPO 100 U/L亞組ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白表達水平均下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與同濃度單用EPO亞組比較，AngⅡ+EPO組各亞組系膜細胞合成ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白水平均增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表3)。

Table 2 Comparison of the expression levels of ColⅠ,Col Ⅳ and FN in mesangial cells among all groups

組別ColⅠ/β-actinColⅣ/β-actinFN/β-actin對照組0.04±0.000.08±0.000.20±0.01AngⅡ組 AngⅡ0.1μmol/L亞組0.05±0.00a0.12±0.01a0.25±0.01a AngⅡ1.0μmol/L亞組0.08±0.00ab0.23±0.01ab0.38±0.02ab AngⅡ10.0μmol/L亞組0.09±0.00ab0.27±0.01ab0.43±0.02abEPO組 EPO1U/L亞組0.04±0.000.11±0.01a0.21±0.01 EPO10U/L亞組0.05±0.00ab0.12±0.01ab0.23±0.01ab EPO100U/L亞組0.05±0.00a0.14±0.01ab0.26±0.01abAngⅡ+EPO組 AngⅡ1.0μmol/L+EPO1U/L亞組0.08±0.00ad0.23±0.01ad0.37±0.02ad AngⅡ1.0μmol/L+EPO10U/L亞組0.07±0.00abcd0.18±0.01abcd0.32±0.02abcd AngⅡ1.0μmol/L+EPO100U/L亞組0.06±0.00abcd0.16±0.01abcd0.29±0.01abcdF值106.67138.63125.26P值<0.001<0.001<0.001

注：與對照組比較，aP<0.05；與同組前一濃度亞組比較，bP<0.05；與單用AngⅡ1.0 μmol/L亞組比較，cP<0.05；與同濃度單用EPO亞組比較，dP<0.05

3 討論

EPO是調(diào)節(jié)哺乳動物紅細胞生成的一種30.4 kD酸性糖蛋白激素，成人主要由腎臟腎小管周圍的間質(zhì)細胞產(chǎn)生，通過與EPO受體(EPOR)結(jié)合發(fā)揮生理作用，臨床已廣泛應(yīng)用于治療慢性腎臟病所致貧血。近年發(fā)現(xiàn)EPO具有促進紅細胞生成以外的組織臟器保護作用，對心血管、腎臟、腦和神經(jīng)系統(tǒng)損傷等均有明顯的保護作用，在許多非造血組織中證實存在EPOR，EPO與其結(jié)合相互作用可誘導(dǎo)一系列的細胞保護效應(yīng)，包括促有絲分裂、抗氧化應(yīng)激、抑制凋亡以及通過動員骨髓內(nèi)皮祖細胞促進血管修復(fù)等[3]。已有研究表明多種腎臟實質(zhì)細胞包括腎小球系膜細胞、腎小管和集合管上皮細胞等亦有EPOR表達[4-6]，可能是EPO腎臟保護作用的生理基礎(chǔ)。有研究發(fā)現(xiàn)EPO可減輕缺血再灌注、5/6腎切除、環(huán)孢素腎毒性等動物模型中的腎小管損傷和腎間質(zhì)纖維化，顯示EPO具有腎臟保護作用[7-8]。

注：1=對照組，2=EPO 1 U/L亞組，3=EPO 10 U/L亞組，4=EPO 100 U/L亞組，5= AngⅡ 0.1 μmol/L亞組，6= AngⅡ1.0 μmol/L亞組，7=AngⅡ10.0 μmol/L亞組，8=AngⅡ1.0 μmol/L+EPO 1 U/L亞組，9=AngⅡ1.0 μmol/L+ EPO 10 U/L亞組，10=AngⅡ1.0 μmol/L+ EPO 100 U/L亞組

圖1 各組大鼠系膜細胞ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白表達水平

Figure 1 Expression levels of ColⅠ,Col Ⅳ and FN in mesangial cells of all groups

Table 3 Comparison of expression levels of ColⅠ,Col Ⅳ and FN in cell culture supernatant of all groups

組別ColⅠColⅣFN對照組9.07±0.3712.34±0.5928.04±1.23AngⅡ組 AngⅡ0.1μmol/L亞組12.53±0.50a15.96±0.73a35.59±1.65a AngⅡ1.0μmol/L亞組16.68±0.86ab21.78±1.26ab63.71±3.09ab AngⅡ10.0μmol/L亞組17.67±0.93ab23.49±1.20ab73.64±3.93abEPO組 EPO1U/L亞組10.09±0.31a13.64±0.67a30.49±1.68 EPO10U/L亞組11.39±0.36ab14.56±0.73ab32.10±1.64ab EPO100U/L亞組12.95±0.43ab16.02±0.89ab40.16±2.45abAngⅡ+EPO組 AngⅡ1.0μmol/L+EPO1U/L亞組16.31±0.75ae21.98±1.33ad64.44±3.71ad AngⅡ1.0μmol/L+EPO10U/L亞組14.87±0.66abcd20.38±1.33abcd59.38±2.90abcd AngⅡ1.0μmol/L+EPO100U/L亞組13.96±0.46abcd18.57±0.94abcd49.36±2.88abcdF值137.1590.62231.90P值<0.001<0.001<0.001

注：與對照組比較，aP<0.05；與同組前一濃度組比較，bP<0.05；與單用AngⅡ1.0 μmol/L亞組比較，cP<0.05；與同濃度單用EPO亞組比較，dP<0.05

腎小球系膜細胞增殖、ECM合成和分泌增加與異常積聚是各種原發(fā)或繼發(fā)性腎臟疾病導(dǎo)致腎小球硬化的共同病理特征，也是造成腎功能進行性減退的重要病理基礎(chǔ)，AngⅡ在此病理過程中處于中心環(huán)節(jié)，可通過血流動力學(xué)因素作用于腎臟小血管加重高壓力、高灌注、高濾過以及血管切應(yīng)力作用，間接促進系膜細胞增殖和ECM積聚，亦可由非血流動力學(xué)因素直接誘導(dǎo)系膜細胞增殖或刺激轉(zhuǎn)化生長因子 β、結(jié)締組織生長因子、成纖維細胞生長因子及白介素6等因子產(chǎn)生，進而促進系膜細胞增殖以及ECM合成增加與降解減少[9]。本研究顯示，AngⅡ可促進大鼠腎小球系膜細胞增殖以及系膜細胞合成與分泌ColⅠ、Col Ⅳ和FN，隨AngⅡ水平增加，系膜細胞增殖及合成與分泌ColⅠ、Col Ⅳ和FN更加明顯，與文獻研究結(jié)果一致[10]，證實AngⅡ是腎小球硬化病理過程的重要因子。同時本研究亦顯示，單用EPO刺激也可在一定程度上誘導(dǎo)系膜細胞增殖及合成分泌ColⅠ、Col Ⅳ和FN；但進一步發(fā)現(xiàn)兩者同時使用時，EPO對AngⅡ刺激所致系膜細胞增殖、ECM成分ColⅠ、Col Ⅳ及FN的高表達具有明顯的拮抗作用，并呈劑量相關(guān)，表明臨床上慢性腎臟病患者應(yīng)用EPO除可糾正腎性貧血外，還可能對AngⅡ誘導(dǎo)的腎小球硬化病理過程發(fā)揮抑制作用而保護腎功能。本研究目前僅有體外實驗，相關(guān)機制和細胞信號途徑仍有待進一步深入研究明確。

作者聲明：文章為原創(chuàng)作品，數(shù)據(jù)準(zhǔn)確，內(nèi)容不涉及泄密，無一稿兩投，無抄襲，無內(nèi)容剽竊，無作者署名爭議，無與他人課題以及專利技術(shù)的爭執(zhí)，內(nèi)容真實，文責(zé)自負(fù)。

本文要點：

本研究結(jié)果顯示，AngⅡ可促進大鼠腎小球系膜細胞增殖以及系膜細胞合成與分泌ColⅠ、Col Ⅳ和FN，單用EPO也可在一定程度上誘導(dǎo)系膜細胞增殖及合成分泌ColⅠ、Col Ⅳ和FN，兩者同時使用時，EPO對AngⅡ刺激所致系膜細胞增殖及ColⅠ、ColⅣ、FN的高表達有明顯的拮抗作用，并與劑量相關(guān)。本研究結(jié)果對于腎小球硬化機制以及應(yīng)用EPO進行防治具有一定的理論指導(dǎo)價值和實踐意義，為進一步研究EPO除糾正貧血外的器官保護、延緩腎臟纖維化作用奠定了基礎(chǔ)。本研究選題較為新穎，國內(nèi)外相關(guān)研究很少；但研究方法較為簡易，進行了體外實驗，僅測定了系膜細胞增殖及蛋白表達，有待于進一步行動物實驗探索具體作用機制及信號途徑。

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(本文編輯：趙躍翠)

Effects of Erythropoietin on Ang Ⅱ-induced Mesangial Cell Proliferation and the Expression Levels of Col Ⅰ,Col Ⅳ and FN

JIFen,XUYu-yin,FANYa-ping,etal.

DepartmentofNephrology,AffiliatedHospitalofNantongUniversity,Nantong226001,China

Objective To investigate the effects of erythropoietin on Ang Ⅱ-induced mesangial cell proliferation and the expression levels of Col Ⅰ,Col Ⅳ and fibronectin (FN).Methods Rat mesangial cells were cultured in virto and were divided into 4 groups:control group,Ang Ⅱ group (0.1,1.0,10.0 mol/L),EPO group (1,10,100 U/L),and Ang Ⅱ+ EPO group(mesangial cells were pretreated with EPO 1，10，100 U/L for 1 h,then AngⅡ 1.0 μmol/L was added).After 0 h，24 h，48 h treatment,mesangial cell proliferation was assayed by CCK-8; the expression levels of Col Ⅰ,Col Ⅳ and FN protein were detected by ELISA; the expression levels of Col Ⅰ,Col Ⅳ and FN in cell culture supernatant were detected by ELISA.Results Either Ang Ⅱ or EPO alone could stimulate mesangial cell proliferation; AngⅡ group and EPO subgroups were higher than control group in cell proliferation levels at 24 h and 48 h,and the cell proliferation levels at 48 h were higher than 24 h,and those at 24 h were higher than 0 h (P<0.05).Either Ang Ⅱ or EPO alone could stimulate the synthesis of mesangial cells and the secretion of Col Ⅰ,Col Ⅳ and FN;apart from EPO 1 U/L subgroup which was not significantly different from control group in the expression of ColⅠ(P>0.05),AngⅡ group and other EPO subgroups were all higher(P<0.05) than control group in the expression levels of ColⅠ,Col Ⅳ and FN.Compared with AngⅡ1.0 μmol/L+EPO 1 U/L group,AngⅡ1.0 μmol/L+EPO 10 U/L group and AngⅡ1.0 μmol/L+EPO 100 U/L group were lower in 24 h and 48 h mesangial cell proliferation levels and the expression levels of ColⅠ,Col Ⅳ and FN (P<0.05),while compared with control group and EPO subgroups of the same concentrations,AngⅡ1.0 μmol/L+EPO(1，10，100 U/L) subgroups were higher in 24 h and 48 h mesangial cell proliferation levels and the expression levels of ColⅠ,Col Ⅳ and FN(P<0.05).Conclusion Ang Ⅱ can increase the mesangial cell proliferation and promote the synthesis and secretion of Col Ⅰ,Col Ⅳ and FN.EPO has the similar effects in some extent.But when the cells were treated by EPO and Ang Ⅱ together,EPO can inhibit the AngⅡ-induced mesangial cell proliferation and decrease the synthesis and secretion of Col Ⅰ,Col Ⅳ and FN induced by AngⅡ.The result indicated that EPO not only curbs renal anemia,but also protects renal function by inhibiting glomerulosclerosis induced by Ang Ⅱ.

Erythropoietin;Angiotensin Ⅱ;Glomerular mesangial cells；Collagen type Ⅰ;Collagen type Ⅳ;Fibronectins

國家自然科學(xué)基金資助項目(81170689)；南通市社會事業(yè)科技創(chuàng)新與示范計劃項目(HS2011029)

226001江蘇省南通市，南通大學(xué)附屬醫(yī)院腎內(nèi)科(季芬現(xiàn)工作單位為南通市第二人民醫(yī)院腎內(nèi)科)

范亞平，226001 江蘇省南通市，南通大學(xué)附屬醫(yī)院腎內(nèi)科；E-mail:fanyp19107@medmail.com.cn

R 322.61

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2015.26.013

2015-03-25；

2015-07-15)