IL-18、IL-12檢測在老年支氣管哮喘診斷中的應(yīng)用研究

花 蕾

江西省九江開發(fā)區(qū)人民醫(yī)院，江西九江332000

IL-18、IL-12檢測在老年支氣管哮喘診斷中的應(yīng)用研究

花 蕾

江西省九江開發(fā)區(qū)人民醫(yī)院，江西九江332000

目的探討外周血白細胞介素18（IL-18）、IL-12檢測在老年支氣管哮喘診斷中的應(yīng)用。方法選擇我院呼吸科2012年1月～2015年1月收治的老年支氣管哮喘患者60例為病例組，同時選取同期體檢正常者60例為對照組，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測患者IL-18、IL-12水平，并比較兩組的差異。結(jié)果病例組IL-18為（187.26±37.51）ng/mL，高于對照組的（131.56±45.25）ng/mL，IL-12為（41.23±12.68）ng/mL，低于對照組的（75.89± 12.23）ng/mL，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；病例組中急性發(fā)作期IL-18高于緩解期，IL-12低于緩解期，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。IL-18與IL-12呈負相關(guān)關(guān)系（r=-1.231，P＜0.05）。結(jié)論老年支氣管哮喘患者外周血IL-18水平明顯高于正常群體，且急性發(fā)作期高于緩解期，IL-18與IL-12呈負相關(guān)關(guān)系。

白細胞介素-18；白細胞介素-12；老年；支氣管哮喘

支氣管哮喘是臨床常見的疾病，主要是以嗜酸性粒細胞、肥大細胞反應(yīng)為主的氣道慢性炎癥，由于老年群體呼吸系統(tǒng)生理機能和免疫功能呈退行性變[1]，并且合并癥較多，更容易發(fā)生哮喘，并且由于并發(fā)心血管系統(tǒng)疾病、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病更難診斷。隨著社會老齡化和生活環(huán)境改變[2]，老年哮喘的發(fā)病率呈現(xiàn)明顯上升趨勢，嚴重威脅老年群體的生活質(zhì)量。白細胞介素（IL）是細胞產(chǎn)生的一類細胞因子，種類較多，其中IL-12主要由激活的炎性細胞產(chǎn)生，IL-18具有調(diào)節(jié)細胞增生、分化及細胞外基質(zhì)生成的作用[3]。本文主要探討我院收治的60例老年支氣管哮喘患者的IL-12、IL-18檢測情況，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院呼吸科2012年1月～2015年1月收治的老年支氣管哮喘患者60例為病例組，其中男32例，女28例，年齡60～80歲，平均（74.4±5.8）歲，病程5～30年，平均（17.34±2.37）年，其中哮喘急性發(fā)作期患者37例，緩解期患者23例。納入標準：①患者均符合《中華醫(yī)學(xué)會呼吸病分會哮喘診斷標準》。②無嚴重并發(fā)癥或者合并癥等。③符合倫理道德，簽署知情同意書等。排除標準：①患有肝、腎、心、肺等重要器官功能衰竭性疾病或者嚴重感染性疾病。②患者近期服用過免疫治療、類固醇激素藥物等或組胺類和氨茶堿類藥物等。③不依從、不配合、容易產(chǎn)生失訪的以及拒絕參加試驗者。選取我院同期體檢正常者60例作為對照組，男35例，女25例，年齡60～85歲，平均（76.12± 2.31）歲，兩組的年齡、性別等基線資料間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 血樣采集采集老年支氣管患者早晨空腹血（急性發(fā)作期和緩解期）和對照組外周靜脈血5 mL，轉(zhuǎn)移到經(jīng)過EDTA浸潤過的抗凝管中，3000 rpm，離心15min，收集血清-80℃保存待用。

1.2.2 白介素的檢測支氣管哮喘患者外周血白介素檢測采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢查，主要檢測患者IL-18和IL-12，ELISA試劑盒均購自上海通蔚實業(yè)有限公司，具體操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.3 觀察指標

比較兩組IL-18、IL-12的表達水平以及支氣管哮喘急性發(fā)作期和緩解期差異。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行，計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，檢驗符合正態(tài)分布方差齊性行組間的t檢驗，IL-18與IL-12的關(guān)系采用Pearson相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組IL-18、IL-12水平比較

病例組IL-18為（187.26±37.51）ng/mL，高于對照組的（131.56±45.25）ng/mL，IL-12為（41.23±12.68）ng/mL，低于對照組的（75.89±12.23）ng/mL，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；病例組中急性發(fā)作期IL-18高于緩解期，IL-12低于緩解期，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者IL-18，IL-12水平比較（x±s，ng/m L）

圖1 IL-18與IL-12間散點圖

2.2 IL-18與IL-12相關(guān)性分析

IL-18與IL-12經(jīng)過相關(guān)性分析示呈負相關(guān)關(guān)系（r=-1.231，P＜0.05），見圖1。 3討論

支氣管哮喘是由多種細胞和細胞組分參與的氣道慢性炎癥性疾病，這種慢性炎癥與氣道高反應(yīng)性相關(guān)，通常出現(xiàn)廣泛而多變的可逆性氣流受限，導(dǎo)致反復(fù)發(fā)作的喘息、氣促、胸悶和（或）咳嗽等癥狀[4]，多在夜間和（或）清晨發(fā)作、加劇，多數(shù)患者可自行緩解或經(jīng)治療緩解。臨床上發(fā)生支氣管哮喘原因主要包括遺傳因素、接觸變應(yīng)原、還有一些誘發(fā)因素，如空氣污染、吸煙、呼吸道病毒感染、妊娠以及劇烈運動、氣候轉(zhuǎn)變；多種非特異性刺激如[5]吸入冷空氣、蒸餾水霧滴等都可誘發(fā)哮喘發(fā)作。此外，精神因素亦可誘發(fā)哮喘等，臨床表現(xiàn)發(fā)作性伴有哮鳴音的呼氣性呼吸困難或發(fā)作性咳嗽、胸悶，嚴重者被迫采取坐位或呈端坐呼吸，干咳或咳大量白色泡沫痰，甚至出現(xiàn)發(fā)紺等，有時咳嗽可為唯一的癥狀（咳嗽變異型哮喘）。有的青少年患者則以運動時出現(xiàn)胸悶、咳嗽及呼吸困難為惟一的臨床表現(xiàn)（運動性哮喘）[6]。哮喘癥狀可在數(shù)分鐘內(nèi)發(fā)作，歷經(jīng)數(shù)小時至數(shù)天，應(yīng)用支氣管舒張劑或自行緩解。某些患者在緩解數(shù)小時后可再次發(fā)作，夜間及凌晨發(fā)作和加重常是哮喘的特征之一。老年支氣管患者隨著年齡增加，自身體質(zhì)和生理機能均發(fā)生降低，是易感人群和高發(fā)人群。老年哮喘常見癥狀有咳嗽、咳痰和呼吸急促、呼氣延長、發(fā)作性喘息、胸悶及胸部緊縮，尤其是夜間陣發(fā)性呼吸困難[7]。

白細胞介素[8，9]是免疫系統(tǒng)細胞增殖、分化的功能性細胞因子，現(xiàn)有IL-1～IL38，功能復(fù)雜，成網(wǎng)絡(luò)，復(fù)雜重疊；在免疫細胞的成熟、活化、增殖和免疫調(diào)節(jié)等一系列過程中均發(fā)揮重要作用，此外它們還參與機體的多種生理及病理反應(yīng)。IL-18屬于IL-1配體家族，結(jié)構(gòu)與IL-1蛋白家族相似。人IL-18cDNA編碼193個氨基酸，半胱氨酸天冬酶在N端將其水解為成熟的IL-18，發(fā)揮其生物學(xué)活性。其位于染色體11q22.2～22.3，由6個外顯子和5個內(nèi)含子組成，cDNA全長約1.1kb，主要是一種作用強大的前炎癥細胞因子，最具特征的功能是調(diào)節(jié)細胞增生、分化及細胞外基質(zhì)生成，故IL-18在糖尿病腎?。―N）的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用[9-10]。它是一個前炎癥因子，可調(diào)節(jié)多種細胞發(fā)育及細胞因子分泌。研究表明[11]它是獨特的依賴細胞因子周圍環(huán)境而刺激Thl和Th2細胞反應(yīng)的細胞因子，能促進外周單個核細胞產(chǎn)生IFN-γ、IL-2和粒細胞巨噬細胞集落刺激因子等細胞因子，增強NK細胞核Thl細胞的細胞毒作用，促進T細胞的增殖，并在Thl細胞分化和免疫反應(yīng)中有促進和調(diào)節(jié)作用，在免疫調(diào)節(jié)、抗感染、抗腫瘤及慢性炎癥性疾病發(fā)病過程中起著重要作用。IL-12是[12]由B細胞和巨噬細胞產(chǎn)生，其分子是一種異型二聚體，由40 kD和35 kD（p35）的2個亞基通過二硫鍵相連接，功能主要為IL-12作用于T細胞和NK細胞，曾被命名[13]為細胞毒性淋巴細胞成熟因子（CLMF）和NK細胞刺激因子（NKsf）。IL-12可刺激活化型T細胞增殖[14]，促進TH0細胞向TH1細胞分化，誘導(dǎo)ctl和NK細胞的細胞毒活性并促進其分泌IFN-γ、TNF-α、GM-CSF等細胞因子，促進NK細胞和IL-2rα、TNF受體及CD56分子的表達，增強對腫瘤細胞的adcc效應(yīng)[15]。

本文通過收治我院60例老年支氣管哮喘患者和60例正常體檢者，分析IL-18、IL-12在老年支氣管哮喘中的診斷作用，結(jié)果顯示病例組IL-18為（187.26± 37.51）ng/mL，高于對照組的（131.56±45.25）ng/mL，IL-12為（41.23±12.68）ng/mL，低于對照組的（75.89± 12.23）ng/mL，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），病例組中急性發(fā)作期IL-18高于緩解期，IL-12低于緩解期，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

綜上所述，老年支氣管哮喘患者外周血IL-18水平明顯高于正常群體，并且急性發(fā)作期高于緩解期，IL-18與IL-12呈負相關(guān)，臨床上可以根據(jù)檢測患者外周血IL-18、IL-12水平表達判斷疾病類型以及疾病發(fā)展情況。

[1]吳澤生，林云碧，段艷萍，等.白細胞介素18在慢性結(jié)腸血吸蟲病腸黏膜中的表達及意義[J].臨床薈萃，2014，29（2）：162-164.

[2]王艷杰，李曉轅，靳英麗，等.呼出氣一氧化氮測定在評價老年人支氣管哮喘療效中的價值[J].中國老年學(xué)雜志，2013，2（33）：528-530.

[3]許溢新，徐為，李慧，等.轉(zhuǎn)染增殖細胞核抗原肽表位融合白細胞介素-18基因的樹突狀細胞對T細胞增殖的影響[J].中華實驗外科雜志，2011，28（5）：151-153.

[4]劉洪彥，鄭毅，史旭華，等.半胱氨酸蛋白酶-1及其下游因子白細胞介素-18和33在類風濕關(guān)節(jié)炎患者血清中的表達[J].中華風濕病學(xué)雜志，2013，17（2）：98-102.

[5]李俐，楊成君，陸艷娟，等.老年支氣管哮喘患者IL-18、IL-12水平的變化及臨床意義[J].中國老年學(xué)雜志，2011，4（31）：1290-1293.

[6]Chazan R.Combined therapy ICS/LABA-New therapeutical trends in patients with asthma and chronic obstructive pulmonary disease[J].Pol Merkur Lekarski，2010，8（166）：251-255.

[7]Choi BS，Kim KW，Lee YJ，et al.Exhaled nitric oxide is associated with allergic inflammation in children[J].JKorean Med Sci，2011，26（10）：1265-1269.

[8]葉先智，馀紅貞.哮喘患者經(jīng)糖皮質(zhì)激素治療前后血清介素水平變化及意義[J].中國生化藥物雜志，2014，4（34）：118-120.

[9]Secor ER Jr，Shah SJ，Guernsey LA，et al.Bromelain limits airway inflammation in an ovalbumin-induced murine model of established asthma[J].Altern Ther Health Med，2012，18（5）：9-17.

[10]劉莉，余可斐，穆敬平，等.地塞米松對哮喘大鼠氣道重建、肥大細胞及IL-10的影響[J].中華肺部疾病雜志（電子版），2012，5（1）：17-23.

[11]梁秋波，陸常青，劉建東，等.老年哮喘急性發(fā)作期IL－4、IL－18水平及臨床意義[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2015，36（7）：1015-1016.

[12]張敬銀.特異性免疫對兒童支氣管哮喘血清白細胞介素4、白細胞介素18和轉(zhuǎn)化生長因子β1水平的影響[J].中國醫(yī)師進修雜志，2014，37（30）：4-7.

[13]諸葛福媛，朱麒錢，斯徐偉，等.2型糖尿病患者早期腎損害外周血單個核細胞白細胞介素-18的表達[J].中華內(nèi)分泌外科雜志，2015，9（3）：189-192.

[14]徐衛(wèi)芹.支氣管哮喘患兒治療前后血清IL-2，IL-18和D-D水平檢測的臨床意義[J].醫(yī)藥前沿，2014，（16）：212-213.

[15]王劍，曾慶紅，華香，等.血清降鈣素原與C-反應(yīng)蛋白和白細胞介素-18診斷急性上呼吸道感染患兒的臨床研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014，24（15）：3887-3889.

Research on app lication of IL-18 and IL-12 detection in diagnosis of bronchial asthma in elderly

HUA Lei
The People's Hospital of Jiujiang Development Zone,Jiujiang 332000,China

ObjectiveTo investigate the application of peripheral blood interleukin-18 and IL-12 detection in the diagnosis of bronchial asthma in elderly.MethodsA total of 60 elderly patientswith bronchial asthmawhowere admitted and treated in the department of respiration in our hospital from January 2012 to January 2015 were selected as the disease group and 60 people who were of normal controls during the same period of time were assigned control group. Enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)was adopted to test the level of IL-18 and IL-12 in patients and the differences of the two groupswere compared.Resu ltsIL-18 level in case group was(187.26±37.51)ng/mL,higher than that of control group of(131.56±45.25)ng/mL;IL-12 level in case group was(41.23±12.68)ng/mL,lower than that of control group of(75.89±12.23)ng/mL.Differences showed statistical significance(P＜0.05).IL-18 level of acute episode was higher than of remission stage in case group while IL-12 was lower than remission stage.Differences showed statistical significance(P＜0.05).There was a negative relationship between IL-18 and IL-12(r=-1.231,P＜0.05).ConclusionElderly patients of bronchial asthma have significant higher peripheral blood IL-18 level than normal group of people with higher level of acute episode than that of remission stage.

Interleukin-18;Interleukin-12;Elderly;Bronchial asthma

R562.2+5

B

1673-9701（2015）36-0124-03

2015-09-11）