火把花根片治療2型糖尿病腎病的療效及對血清HGF、尿TGF-β1水平的影響

王麗娟，范麗萍，殷美琦，羅 玫，余江毅

(1.江蘇省中醫(yī)院，江蘇 南京 210029；2.南京中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，江蘇 南京 210029；3.江蘇省蘇州市中醫(yī)院，江蘇 蘇州 215000)

火把花根片治療2型糖尿病腎病的療效及對血清HGF、尿TGF-β1水平的影響

王麗娟1，范麗萍2，殷美琦3，羅 玫1，余江毅1

(1.江蘇省中醫(yī)院，江蘇 南京 210029；2.南京中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，江蘇 南京 210029；3.江蘇省蘇州市中醫(yī)院，江蘇 蘇州 215000)

目的觀察火把花根片治療糖尿病腎病(DN)的療效及對患者血清肝細(xì)胞生長因子(HGF)、尿TGF-β1水平的影響。方法將臨床期DN患者隨機(jī)分為2組，對照組30例給予厄貝沙坦膠囊每次150mg早晨空腹口服，治療組30例在對照組的基礎(chǔ)上加服火把花根片，每次4片，每日早中晚飯后30min口服。觀察2組治療前后臨床癥狀，尿微量白蛋白(mALB)、肝酐(Cr)、尿微量白蛋白/肌酐值(ACR)、24h尿蛋白定量(UTP)、TGF-β1及血清HGF變化情況。結(jié)果治療后治療組臨床癥狀均顯著改善(P<0.05)，對照組僅夜尿增多、口干癥狀明顯改善(P均<0.05)，治療組倦怠乏力、水腫、腰酸痛、尿頻、口干癥狀改善情況均明顯優(yōu)于對照組(P均<0.05)；2組治療后中醫(yī)證候積分均顯著改善(P均<0.01)，且治療組改善情況優(yōu)于對照組(P均<0.01)；2組治療后尿ACR、UTP 、TGF-β1均下降(P均<0.05)，血清HGF水平均升高(P均<0.05)，且治療組改善幅度明顯優(yōu)于對照組(P均<0.05)。Pearson相關(guān)分析顯示血清HGF 和尿TGF-β1呈負(fù)相關(guān)(r=-0.264，P<0.05)。結(jié)論火把花根片聯(lián)合厄貝沙坦膠囊可顯著改善DN患者臨床癥狀，降低尿ACR、UTP及TGF-β1水平，提高血清HGF水平，可能延緩DN進(jìn)展。

糖尿病腎??；火把花根片；血清HGF；尿TGF-β1

糖尿病腎病(diabetic Nephropathy,DN)是糖尿病常見的嚴(yán)重微血管并發(fā)癥之一，是一種進(jìn)展性腎臟疾病。糖尿病患者一旦出現(xiàn)腎功能損害，其發(fā)展速度將遠(yuǎn)快于其他腎小球疾病，最終將導(dǎo)致腎衰竭。據(jù)相關(guān)統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，DN進(jìn)展至終末期腎病(end-stage renal disease,ESRD)的速度約是其他腎臟病的14倍[1]。隨著糖尿病在全球范圍的爆發(fā)流行，DN的早期防治刻不容緩。本研究通過觀察中成藥火把花根片對2型DN患者血清肝細(xì)胞生長因子(HGF)及尿TGF-β1水平的影響，評價(jià)火把花根片干預(yù)DN的臨床療效，并探索可能的作用機(jī)制。

1 臨床資料

1.1一般資料 選取2012年3月—2013年6月江蘇省中醫(yī)院內(nèi)分泌科門診及病房就診的臨床期DN患者60例，均符合DN診斷標(biāo)準(zhǔn)：①明確的糖尿病病史；②持續(xù)性或間歇性蛋白尿，伴或不伴腎功能損害；③除外其他原因引起的腎臟損害；④并發(fā)特異性視網(wǎng)膜病變，有利于確立DN診斷。尿白蛋白排泄率(UAER)持續(xù)>200μg/min或尿蛋白定量>0.5g/24h。中醫(yī)辨證為氣陰兩虛、濕瘀阻絡(luò)證：倦怠乏力，下肢水腫，腰酸痛，尿頻，夜尿增多，口干，舌質(zhì)紫，苔薄。患者空腹血糖(FBG)≤8.0mmol/L，餐后2h血糖(2hPG)≤10.0mmol/L，血壓≤140/90mmHg(1mmHg=0.133kPa)，血肌酐(SCr)≤176μmol/L，年齡30～70歲。本研究經(jīng)江蘇省中醫(yī)院倫理委員會審查并批準(zhǔn)，所有受試者均簽署知情同意書。將患者完全隨機(jī)分為治療組及對照組，每組30例，2組患者年齡、性別構(gòu)成比、糖尿病病程、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、糖代謝指標(biāo)[FBG、2hPG、糖化血紅蛋白(HbA1c)]、脂代謝指標(biāo)(TG、TC、LDL-C、HDL-C)、血壓(SBP、DBP)、血SCr等比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見表1。

表1 2組一般資料比較

組別n2hPG/(mmol/L)HbA1c/%TC/(mmol/L)TG/(mmol/L)LDL-C/(mmol/L)HDL-C/(mmol/L)SCr/(μmol/L)治療組308．57±1．147．58±0．625．48±1．522．78±0．903．47±1．101．14±0．31101．04±35．52對照組308．49±0．917．39±0．495．40±1．282．67±1．043．37±1．051．20±0．3493．16±33．20

1.2治療方法 2組降糖、降壓、調(diào)脂等基礎(chǔ)治療保持不變，并指導(dǎo)患者飲食及運(yùn)動。對照組給予厄貝沙坦膠囊(賽諾菲安萬特公司，150mg/粒)，每次150mg，早晨空腹口服。治療組在對照組的基礎(chǔ)上加服火把花根片(昆明山海棠片，重慶市中藥研究院制藥廠，0.18g/片)，每次4片，早中晚飯后30min口服。2組均連續(xù)服藥3個(gè)月。

1.3觀察指標(biāo) ①采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)法測定血清HGF、尿TGF-β1，試劑盒購自美國Ebioscience公司，測定按說明書嚴(yán)格規(guī)范操作。②采用Olympus AU2700全自動生化分析儀測定血糖(FBG、2hPG)、血脂(TG、TC、LDL-C、HDL-C)、血SCr、尿微量白蛋白/肌酐值(ACR)、UTP；高效液相色譜法檢測HbA1c。③治療前后按照中醫(yī)癥狀體征量化分級標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行量化評分。a.倦怠乏力：無為0分，不耐勞力為1分，可堅(jiān)持輕體力勞動為2分，勉強(qiáng)支持日?；顒訛?分；b.水腫：無為0分，晨起顏面水腫為1分，下肢持續(xù)水腫為2分，四肢持續(xù)水腫為3分；c.腰酸痛：無為0分，勞累后腰痛為1分，持續(xù)性腰困痛為2分，持續(xù)性腰背困痛為3分；d.尿頻：無為0分，有為1分；e.夜尿增多：無為0分，有為1分；f.口干：無為0分，有為1分；g.舌質(zhì)紫：無為0分，有為1分。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SAS 8.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用2檢驗(yàn)或Wilcoxon秩和檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.12組治療前后中醫(yī)臨床癥狀積分比較 2組治療前各項(xiàng)癥狀積分及總積分比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)；治療后治療組倦怠乏力、水腫、腰酸痛、尿頻、夜尿增多、口干、舌質(zhì)紫均顯著改善(P均<0.05)，對照組僅夜尿增多、口干癥狀明顯改善(P均<0.05)；且治療組治療后倦怠乏力、水腫、腰酸痛、尿頻、口干癥狀改善情況均明顯優(yōu)于對照組(P均<0.05)，2組夜尿增多、舌質(zhì)紫癥狀改善情況比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見表2。2組治療后中醫(yī)證候積分均較治療前顯著改善(P均<0.01)，且治療組改善程度優(yōu)于對照組(P<0.01)。見表3。

2.22組治療前后生化指標(biāo)比較 2組治療前尿ACR、UTP、TGF-β1及血清HGF水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)；治療后2組各指標(biāo)均較治療前明顯改善(P均<0.05)，且治療組尿ACR、UTP、TGF-β1下降幅度明顯優(yōu)于對照組(P均<0.05)，血清HGF上升幅度明顯優(yōu)于對照組(P均<0.01)。見表4。

2.3血清HGF與尿TGF-β1相關(guān)性分析 Pearson 相關(guān)分析顯示血清HGF和尿TGF-β1呈負(fù)相關(guān)(r=-0.264，P<0.05)。見圖1。

3 討 論

DN又稱糖尿病腎小球硬化癥，是一種以微血管病變?yōu)橹鞯哪I小球病變。隨著糖尿病發(fā)病率的逐年上升，DN的發(fā)病人數(shù)也在不斷增加。據(jù)美國腎臟資料系統(tǒng)(USRDS)的統(tǒng)計(jì)，超過43%的ESRD由糖尿病所致，且糖尿病所致ESRD比例在逐年上升，伴有ESRD的患者5年生存率小于20%。

表2 2組治療前后癥狀積分比較 例

表3 2組治療前后中醫(yī)證候總積分比較分)

注：①與治療前比較，P<0.01;②與對照組比較，P<0.01。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為DN的發(fā)病機(jī)制主要與長期持續(xù)高血糖導(dǎo)致的腎臟血流動力學(xué)改變、蛋白非酶糖基化、多元醇通路激活、脂代謝紊亂、氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子和生長因子等釋放、遺傳因素等有關(guān)[2]，但其確切發(fā)病機(jī)制仍未闡明。DN的最主要特征是腎小球硬化，表現(xiàn)為系膜區(qū)細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)蛋白積聚導(dǎo)致的彌漫性或結(jié)節(jié)性纖維化[3]。新的觀點(diǎn)認(rèn)為，炎癥參與了DN的發(fā)生和發(fā)展。炎癥因子包括腫瘤壞死因子α(TNF-α)及其他遞質(zhì)或許能刺激腎小球細(xì)胞增加ECM蛋白的產(chǎn)生或減少ECM蛋白的降解[4]。

表4 2組治療前后生化指標(biāo)比較

注：①與治療前比較，P<0.01；②與對照組比較，P<0.05；③與對照組比較,P<0.01。

圖1 HGF和TGF-β1的相關(guān)性

隨著對DN炎癥機(jī)制的逐步認(rèn)識，越來越多的藥物腎保護(hù)作用被確認(rèn)來源于其抗炎效應(yīng)?；鸢鸦ǜ抢ッ魃胶Ｌ牡母瞥傻闹谐伤?，其具有抗炎、抗免疫作用，臨床上主要用于慢性腎小球腎炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡等自身免疫性疾病的治療，其對DN的治療運(yùn)用較少。

本研究發(fā)現(xiàn)，治療后治療后口干、倦怠乏力、水腫、腰酸痛、尿頻、夜尿增多、舌質(zhì)紫癥狀均明顯改善，而對照組僅夜尿增多、口干癥狀改善；且治療組倦怠乏力、水腫、腰酸痛、尿頻、口干癥狀改善情況明顯優(yōu)于對照組。2組治療后中醫(yī)癥候總積分及尿ACR、UTP均明顯下降，且治療組下降更為顯著。說明在降糖、降壓、抑制腎素-血管緊張素系統(tǒng)活性基礎(chǔ)上，聯(lián)合運(yùn)用中藥火把花根片可明顯改善患者臨床癥狀，降低UAER。

本研究還發(fā)現(xiàn)，火把花根片聯(lián)合厄貝沙坦膠囊可明顯升高血清HGF水平及降低尿TGF-β1水平，Pearson相關(guān)分析顯示血清HGF和尿TGF-β1呈負(fù)相關(guān)。HGF是一種多效性因子，其可通過抑制TGF-β1等致纖維化生長因子來誘導(dǎo)基質(zhì)的降解，減輕腎小球硬化和間質(zhì)纖維化，改善腎功能，延緩DN進(jìn)展[5]。而在眾多促纖維化的因子中，TGF-β1被認(rèn)為是最重要的促纖維化因子之一，它在腎小球硬化和腎間質(zhì)纖維化中扮演著極為重要的角色[6]。本研究推測火把花根片可能通過升高HGF水平及下調(diào)TGF-β1的水平，從而促進(jìn)腎小球基底膜免疫復(fù)合物的沉積，誘導(dǎo)基質(zhì)的降解，減少間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤，防止腎小球硬化及小管間質(zhì)纖維化，從而減少蛋白尿的排泄，改善腎臟功能。這也從另一個(gè)角度證明了炎癥機(jī)制在糖尿病腎小球硬化癥中的重要作用[7]。

綜上所述，在厄貝沙坦膠囊治療基礎(chǔ)上聯(lián)合火把花根片防治臨床期DN療效較好，HGF和TGF-β1的相互平衡可能在腎臟纖維化中起決定性作用，目前尚無中醫(yī)藥調(diào)控HGF、TGF-β1干預(yù)DN炎癥反應(yīng)的研究，加強(qiáng)對炎癥機(jī)制及其治療方法的研究，尋求有效延緩、逆轉(zhuǎn)DN向ERSD發(fā)展的有效藥物可能為DN的防治開辟新的思路。

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Effect of colquhounia root tablet on type 2diabetic nephropathy and the levels of serum HGF and urine TGF-β1

WANG Lijuan1, FAN Liping2, YIN Meiqi3, LUO Mei1, YU Jiangyi1

(1.Jiangsu Province Hospital of TCM, Nanjing 210029, Jiangsu, China; 2.The First Clinical Medical College of Nanjing University of TCM, Nanjing 210029, Jiangsu, China; 3.Suzhou Hospital of TCM, Suzhou 215000, Jiangsu, China)

Objective It is to observe the curative effect of colquhounia root tablet on type 2diabetic nephropathy (DN) and the effect on the levels of serum HGF and urine in the patients.Methods The DN patients in clinical stage were randomly divided into 2groups, the control group with 30cases were given irbesartan capsule 150mg by oral administration on an empty stomach in the morning, and the treatment group was given colquhounia root tablet 4pills per time by oral use in 30min after the three meals.The changes of clinical symptoms, mALB, Cr, ACR, 24hUTP, TGF-β1and serum HGF before and after treatment in both group were observed.Results All the clinical symptoms were significantly improved in treatment group after treatment (P<0.05), but in the control group, only increased urination frequency, and dry moth were significantly improved (P<0.05).The improvements of symptoms such as lassitude, asthenia, edema, back ache, frequent urination and dry mouth in the treatment group were much better than that in the control group (P<0.05).The syndrome scores of TCM in both groups were significantly improved after treatment (P<0.01), and the improvements were more better in the treatment(P<0.01).The levels of urine ACR, UTP, TGF-β1were decreased, while the level of serum HGF increased after treatment in both groups, and the improvements were more obviously in treatment group (P<0.05).Pearson relative analysis showed that serum HGF was negative related with urine TGF-β1(r=-0.264,P<0.05).Conclusion Colquhounia root tablet combined with irbesartan capsule can significantly improve clinical symptoms of the patients with DN, decrease the levels of urine ACR, UTP, TGF-β1and increase the level of serum HGF, this may possible delay the development of DN.

diabetic nephropathy; colquhounia root tablet; serum HGF; urine TGF-β1

王麗娟，女，主治中醫(yī)師，主要從事糖尿病及其并發(fā)癥中西醫(yī)結(jié)合診治。

余江毅，E-mail：suxin218@sohu.com

江蘇省中醫(yī)藥管理局資助項(xiàng)目(LZ11021)

10.3969/j.issn.1008-8849.2015.19.002

R587.2

A

1008-8849(2015)19-2057-04

2015-01-30