姜半夏配方顆粒多糖含量測定

張建琨 王穎 劉岐 吳靜芬266011山東省青島市市立醫(yī)院

姜半夏配方顆粒多糖含量測定

張建琨 王穎 劉岐 吳靜芬
266011山東省青島市市立醫(yī)院

目的：提取并測定姜半夏配方顆粒多糖含量。方法：用硫酸-蒽酮比色法測定姜半夏配方顆粒中多糖含量。結(jié)果：姜半夏配方顆粒多糖的含量0.2532％（n=3）。結(jié)論：該實驗方法簡單、快速、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于姜半夏配方顆粒多糖的測定。

姜半夏；配方顆粒；多糖

資料與方法

姜半夏配方顆粒與姜半夏藥材一樣，具降逆止嘔、燥濕化痰、消痞散結(jié)的功效[1]，在臨床上應(yīng)用十分普遍。日本學(xué)者報道半夏中含酸性多糖，姜半夏多糖生物活性廣泛，本實驗以D-無水葡萄糖為對照品，建立了姜半夏配方顆粒的多糖含量測定方法，為大規(guī)模的工業(yè)生產(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)。

儀器與藥品：在本研究中，我們使用到的主要儀器和設(shè)備有WFZ800-D2型可見-紫外分光光度計和電子天平。使用的主要藥品有D-無水葡萄糖、純化水、姜半夏配方顆粒等。

姜半夏多糖的含量測定：①對照品溶液的制備：首先，使用高精密度的電子天平秤取D-無水葡萄糖10.0mg，然后將其放置于50mL容量瓶中，加入適當(dāng)?shù)募兓量潭?，不斷稀釋，最后緩慢搖勻。②樣品供試液的制備：首先，使用高精密度的電子天平秤取本品粉末1g，然后將其放置于有瓶塞的錐形瓶中，精密加水100mL用水浴提取1 h，放冷，靜置，精密量取10mL，定容于100mL容量瓶中，搖勻，即得。重復(fù)上述操作，制得供試品平行組。③標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：精密量取對照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL，量取完畢后將其分別放置于10mL容量瓶中，使用適當(dāng)?shù)募兓♂屩量潭?，然后緩慢搖勻。然后，在這些容量瓶中分別吸取1.0mL放置在1個有瓶塞的試管中，吸取完畢后，分別加入蒽酮試劑0.5mL和濃硫酸3.0mL，加入以后馬上緩慢搖勻，在室溫下冷卻，直至恢復(fù)至室溫，在進(jìn)行上訴操作的同時用1.0mL純化水加蒽酮試劑0.5mL和濃硫酸3.0mL作空白對照，所有試管準(zhǔn)備完畢后，使用WFZ800-D2型可見-紫外分光光度計在（624±1）nm波長處測定吸收度。④穩(wěn)定性試驗：首先，使用精密度較高的吸管吸取供試液1mL，在室溫每隔1 h測定其吸光度，連續(xù)測定5次。⑤精密度試驗：取供試液5份，分別按含量測定項下方法操作。⑥加樣回收試驗：首先，使用精密度較高的吸管吸取供試液1.0mL放置在容量瓶中，然后向容量瓶中滴對照品溶液2.0mL，加入完畢后再加純化水，直至稀釋到10mL，定容完畢后，使用精密吸管在該容量瓶中再次吸取溶液1.0mL，依法加蒽酮試劑0.5mL，濃硫酸3.0mL進(jìn)行測定5次。⑦樣品的含量測定：使用精密度較高的吸管吸取供試液1.0mL放置在有瓶塞的試管中，分別加入蒽酮0.5mL，濃硫酸3.0mL，加入后馬上緩慢搖勻，在室溫下冷卻，直至恢復(fù)至室溫。此外，使用1.0mL純化水加蒽酮試劑0.5mL和濃硫酸3.0mL作空白對照。試劑準(zhǔn)備完畢后，使用WFZ800-D2型可見-紫外分光光度計于（624±1）nm波長處測定吸收度。

結(jié)果

姜半夏配方顆粒多糖含量測定：以吸收度A為橫坐標(biāo)，葡萄糖濃度為縱坐標(biāo)，求得回歸方程C=0.028485A-0.00287，（r=0.998548）（n=5）。說明D-無水葡萄糖在0.0022～0.0133mg/mL范圍內(nèi)與吸光度呈良好的線性關(guān)系。樣品中多糖的含量按以下公式計算：（0.028485A-0.00287）/W×450。其中A為吸光度，W為樣品量（g），測定結(jié)果，見表1。

結(jié)果測定，在本研究中，我們把樣品液在5 h內(nèi)連續(xù)測定5次，其測定結(jié)果是穩(wěn)定的，RSD=1.56％（n=5），精密度實驗結(jié)果，其RSD=2.63％（n=5），表明實驗用的測定儀器精確；其加樣回收率99.54％，RSD=1.69％（n=5），說明其是切實可行的，能夠有效地被應(yīng)用于臨床。

表1 姜半夏配方顆粒多糖含量測定結(jié)果（n=3）

討論

硫酸-蒽酮比色法測定姜半夏配方顆粒中多糖含量，研究結(jié)果表明，該方法具有較高的穩(wěn)定性，測定結(jié)果精確度高，并且操作方法簡單易行，因此可作為姜半夏配方顆粒的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

有研究表明，半夏多糖有抗腫瘤的作用，對于腫瘤的放化療輔助治療有良好的開發(fā)前景[2]。把姜半夏制備成配方顆粒，可在最大程度上保留原藥材的有效成分和功能，且具有體積小，易于攜帶保存，質(zhì)量穩(wěn)定可控的優(yōu)點[3]，并便于臨床使用。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社,2005：78.

[2] 趙永娟,王蕾,侯琳,等.半夏多糖抗腫瘤作用研究[J].中國藥理學(xué)通報,2006,22（3）：368-71.

[3] 諸明娜.免煎中藥配方顆粒與傳統(tǒng)中藥飲片的比較[J].湖北中醫(yī)雜志,2004,26（11）：55.

Determ ination of polysaccharide content in Jiang Ban Xia formula granules

Zhang Jiankun,Wang Ying,Liu Qi,Wu Jingfen
The MunicipalHospitalofQingdao City,Shandong Province 266011

Objective：To extractand determinate the determination of polysaccharide content in Jiang Ban Xia formula granules.Methods：Anthrone sulfuric acid colorimetricmethod was used to determine the determination of polysaccharide content in Jiang Ban Xia formula granules.Results：The determination of polysaccharide content in Jiang Ban Xia formula granulewas0.2532％（n= 3）.Conclusion：The experimental method was simple,fast and accurate,and repeatability was good.It can be used for the determination ofpolysaccharide content in Jiang Ban Xia formula granules.

Jiang Ban Xia；Formula granules；Polysaccharide

10.3969/j.issn.1007-614x.2015.28.3