健脾消食方對(duì)脾虛大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)的影響

張進(jìn)，李巖

（1.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院消化內(nèi)科，沈陽(yáng) 110004；2.遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院消化內(nèi)科，遼寧 錦州 121000）

·論著·

健脾消食方對(duì)脾虛大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)的影響

張進(jìn)1，2，李巖1

（1.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院消化內(nèi)科，沈陽(yáng) 110004；2.遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院消化內(nèi)科，遼寧 錦州 121000）

目的觀察和探討健脾消食方對(duì)脾虛證大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)作用。方法雄性SD大鼠40只隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、模型中藥組、模型西藥組。通過(guò)勞倦過(guò)度加飲食失節(jié)法建立脾虛模型，建模成功后，各組予相應(yīng)藥物灌胃1周；期間觀察記錄大鼠癥狀、體質(zhì)量，給藥后測(cè)量胃排空率與小腸推進(jìn)比，酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)SP、SS含量。結(jié)果健脾消食方改善大鼠脾虛癥狀，模型中藥組與模型組比較體質(zhì)量增加、胃排空率增高、小腸推進(jìn)比降低、SP水平明顯增高、SS水平降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論健脾消食方改善脾虛大鼠一般狀態(tài)，提高脾虛大鼠胃排空，恢復(fù)小腸亢進(jìn)運(yùn)動(dòng)，其可能通過(guò)升高血清SP含量，降低血清SS含量進(jìn)而調(diào)節(jié)胃腸運(yùn)動(dòng)。

健脾消食方；脾虛證；胃腸運(yùn)動(dòng)；生長(zhǎng)抑素；P物質(zhì)

功能性消化不良是一種常見(jiàn)的消化系統(tǒng)疾病，以消化不良為主訴的患者約占普通內(nèi)科門診的10%，占消化內(nèi)科門診的50%［1］.其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，目前研究表明，本病與運(yùn)動(dòng)功能障礙、內(nèi)臟高敏感性、胃酸分泌、幽門螺桿菌感染、精神心理因素等諸多因素相關(guān)［2］。研究表明，運(yùn)動(dòng)功能障礙是功能性消化不良（functional dyspesia，F(xiàn)D）的主要發(fā)病基礎(chǔ)，約40%的FD患者存在胃排空延緩［3］，并且以固體胃排空延遲為主［4］。

FD在中醫(yī)學(xué)里屬于“痞滿”、“胃脘痛”、“積滯”范疇，肝胃不和型、脾胃虛弱型構(gòu)成了FD的主要證型［5］，根據(jù)FD的臨床表現(xiàn)及病機(jī)，在中醫(yī)辨證論治中尤其注重健脾補(bǔ)虛［6］。我們根據(jù)多年臨床經(jīng)驗(yàn)及既往藥理研究自擬健脾消食方，此方由健脾、消食、行氣的中藥組成。

本實(shí)驗(yàn)根據(jù)中醫(yī)病因病機(jī)理論，采用勞倦過(guò)度加飲食失節(jié)法建立大鼠脾虛證FD模型［7，8］，探討和證實(shí)健脾消食方對(duì)脾虛證大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康雄性SPF級(jí)SD大鼠40只，10～12周齡，體質(zhì)量180～220 g，由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供［許可證號(hào)：SCXK（遼）2003-0013］。

1.2 藥物與試劑

健脾消食方（太子參10 g、茯苓20 g、炒白術(shù)15g、炒雞內(nèi)金10 g、厚樸10 g、炒枳實(shí)10 g、砂仁10 g、炙甘草10 g），按照中藥常規(guī)煎法，最后濃縮成生藥濃度為0.8 g/mL的煎劑，4℃冷藏保存；枸櫞酸莫沙必利（5 mg/片，住友制藥有限公司，批號(hào)：2814C）：研細(xì)以蒸餾水稀釋成0.125 g/L的溶液；羧甲基纖維素（宜興市通達(dá)化學(xué)有限公司，批號(hào)：1107013）；硫噴妥鈉（上海新亞藥業(yè)有限公司，批號(hào)：020102）：臨用前，用滅菌注射用水溶解成2.5%溶液后應(yīng)用；Rat SS ELISA試劑盒（R&D Systems Inc.，USA）；Rat SP ELISA試劑盒（R&D Systems Inc.，USA）。營(yíng)養(yǎng)性半固體糊的制備［9］：羧甲基纖維素5 g、奶粉8 g、糖4 g、淀粉4 g、碳素墨水2 mL，蒸餾水150 mL，攪拌均勻。

1.3 儀器設(shè)備

電子天平（0.01 g）：TE612-L，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；低速離心機(jī)：SC-3612，安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司；吸收光酶標(biāo)儀：EL×808，Biotek，USA。

1.4 脾虛證模型的建立

勞倦過(guò)度加飲食失節(jié)法：隔日將大鼠置于盛有溫水（22℃）的塑料桶中游泳至力竭1次（大鼠水中旋轉(zhuǎn)、運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)性明顯下降，水淹沒(méi)鼻尖，身體下沉，至再次浮出水面超過(guò)10 s，連續(xù)3次［10，11］）以達(dá)到勞倦過(guò)度；單日禁食不禁水，喂飼甘藍(lán)15 g/只，雙日自由進(jìn)食水，精煉豬油灌胃1次，以達(dá)到飲食不節(jié)，共25 d。按照脾虛模型宏觀診斷標(biāo)準(zhǔn)［12］，大鼠出現(xiàn)：精神倦怠，嗜臥，懶動(dòng)，拱背，扎堆，瞇眼；毛色干枯欠光澤，耳尾色白；抓取時(shí)掙扎無(wú)力；軟便或便塘；受激排便率增高；體質(zhì)量增長(zhǎng)減慢，食量減少為造模成功。

1.5 分組及給藥

40只大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d后隨機(jī)分為4組，即正常對(duì)照組、模型組、模型中藥組，模型西藥組，每組10只。除正常對(duì)照組外，其余3組建立脾虛證動(dòng)物模型，造模過(guò)程中大鼠因溺水死亡5只（模型組、模型西藥組各死亡2只，模型中藥組死亡1只）。造模成功后給藥，給藥依據(jù)人和鼠給藥劑量換算公式［13］進(jìn)行計(jì)算，模型中藥組給予健脾消食方12.5 mL/（kg·d），模型西藥組給予莫沙必利 12.5 mL/（kg·d），模型組及正常對(duì)照組給予灌服等量蒸餾水，1次/d灌胃，持續(xù)7 d。

1.6 一般情況觀察

包括毛發(fā)光澤度、活動(dòng)、反應(yīng)、大便情況、進(jìn)食量，造模前、造模后及給藥后的體質(zhì)量。

1.7 胃排空率和小腸推進(jìn)比的檢測(cè)

末次給藥后禁食不禁水24 h，給予半固體糊2 mL灌胃，灌胃前稱定營(yíng)養(yǎng)性半固體糊質(zhì)量，1 h后硫噴妥鈉（40 mg/kg）麻醉，迅速打開(kāi)腹腔，結(jié)扎賁門和幽門，剪取胃及全小腸；自賁門及幽門結(jié)扎處取胃，用吸水紙吸干胃外壁，稱質(zhì)量后沿胃大彎剪開(kāi)，用生理鹽水充分沖洗胃內(nèi)容物，再吸干水分后稱質(zhì)量，胃排空率=1-［（胃全重-胃凈重）/灌胃量］× 100%；量取小腸內(nèi)從幽門括約肌至腸內(nèi)容物色素最前端及至盲腸的距離，兩者之比，即為小腸推進(jìn)比。

1.8 血清P物質(zhì)（SP）、生長(zhǎng)抑素（SS）的檢測(cè)

末次給藥后禁食不禁水24 h，半固體糊灌胃后1 h，硫噴妥鈉麻醉，腹主動(dòng)脈采血4 mL，分離血清，-80℃保存，ELISA法檢測(cè)按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 大鼠一般狀態(tài)比較

模型組大鼠出現(xiàn)體型瘦小，毛發(fā)干枯，倦怠，疲乏懶動(dòng)，蜷縮，扎堆，抓取時(shí)掙扎無(wú)力，瞇眼，拱背等表現(xiàn)，糞便較正常組比較，初期進(jìn)食甘藍(lán)后排便干小，色深，后期時(shí)軟時(shí)稀，偶有便塘，進(jìn)食量降低，體質(zhì)量明顯低于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。給藥后，模型中藥組及模型西藥組大鼠精神狀態(tài)較模型組好轉(zhuǎn)，較活躍，毛發(fā)轉(zhuǎn)好，進(jìn)食量增加，體質(zhì)量均高于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 胃排空率

模型組胃排空率低于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；模型中藥組與模型西藥組胃排空率均高于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；模型中藥組與模型西藥組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），兩組胃排空率低于正常對(duì)照組，模型西藥組與正常對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），見(jiàn)表1。

2.3 小腸推進(jìn)比

模型組小腸推進(jìn)比高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），模型中藥組小腸推進(jìn)比低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），但與正常對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；模型西藥組小腸推進(jìn)比明顯高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），而與模型組比較無(wú)明顯差異，見(jiàn)表1。

表1 各組大鼠平均體質(zhì)量、胃排空率、小腸推進(jìn)比、SP水平、SS水平的比較（）Tab.1 Comparison of the mean body weight，GER，IPR，concentration of serum SP and concentration of serum SS between different groups（）

表1 各組大鼠平均體質(zhì)量、胃排空率、小腸推進(jìn)比、SP水平、SS水平的比較（）Tab.1 Comparison of the mean body weight，GER，IPR，concentration of serum SP and concentration of serum SS between different groups（）

compared to model group：1）P＜0.05，2）P＜0.01；compared to normal control group：3）P＜0.05，4）P＜0.01.

Concentration Concentration Before model After model After drug GER（%） IPR（%） of serum of serum establishment（g） establishment（g） administration（g） SP（ng/L） SS（pg/mL）Normal control group 10 215.10±6.37 385.70±17.70 415.70±17.16 74.05±11.09 54.02±7.85 82.32±12.70 46.58±11.07 Model group 8 216.25±6.96 258.50±6.684） 273.50±12.074） 49.15±10.114） 66.81±6.834） 71.56±5.873） 63.84±10.404）Model TCM group 9 216.89±6.00 257.33±19.674） 291.89±24.751），3） 60.41±12.311） 59.11±6.421） 81.67±7.711） 50.76±10.031）Model western medicine group 8 214.50±8.25 255.50±7.674） 284.87±8.594） 69.07±8.082） 70.20±8.644） 82.85±8.351） 51.72±6.951）Body weight Groups n

2.4 P物質(zhì)

模型組SP水平明顯低于正常對(duì)照組（P＜0.05），模型中藥組及模型西藥組SP水平明顯高于模型組（P＜0.05），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。模型中藥組、模型西藥組、正常對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

2.5 生長(zhǎng)抑素

模型組SS水平顯著高于正常對(duì)照組（P＜0.01），模型中藥組及模型西藥組SS水平明顯低于模型組（P＜0.05），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；模型中藥組與模型西藥組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；模型中藥組及模型西藥組SS水平與正常對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

3 討論

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，功能性消化不良的發(fā)生與情志郁結(jié)、外邪內(nèi)積、脾胃虛弱有關(guān)，脾虛是發(fā)病的基礎(chǔ)，肝郁是致病的條件，胃氣不降是引發(fā)癥狀的原因［14］?！蹲C治準(zhǔn)繩》云“脾主四肢，若勞力辛苦，傷其四肢，則根本竭矣。或因飲食不調(diào)，或因勞力過(guò)度，或飲食不調(diào)之后加之勞力，或勞力過(guò)度之后繼以不調(diào)，故皆謂之內(nèi)傷元?dú)獠蛔阒C”。根據(jù)以上中醫(yī)理論，我們采用勞倦過(guò)度加飲食失節(jié)法建立脾虛證動(dòng)物模型，有研究表明，勞倦過(guò)度加飲食失節(jié)法與利血平、耗氣破氣等其他造模方法相比，對(duì)胃黏膜的損傷更輕［15］，與功能性胃腸病更相符。我們采用的公認(rèn)疲勞標(biāo)準(zhǔn)，其力竭的程度更深，避免了疲勞的快速恢復(fù)［11］同時(shí)又可避免中度運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度對(duì)于胃腸運(yùn)動(dòng)功能的促進(jìn)作用［16］。

健脾消食方參照出自《太平惠民和劑局方》的四君子湯作為健脾之基礎(chǔ)，加炒雞內(nèi)金、砂仁、厚樸、炒枳實(shí)而成。方中太子參為君藥，甘溫益氣，健脾養(yǎng)胃；臣以苦溫之白術(shù)，健脾燥濕加強(qiáng)益氣助運(yùn)之力，炒雞內(nèi)金消食導(dǎo)滯；佐以甘淡茯苓，健脾滲濕，砂仁、厚樸、炒枳實(shí)行氣導(dǎo)滯；使以炙甘草益氣和中，調(diào)和諸藥，諸藥合用，共奏益氣健脾，消食導(dǎo)滯之功。既往藥理研究表明：四君子湯對(duì)大鼠胃運(yùn)動(dòng)具有雙向調(diào)節(jié)作用［17］，白術(shù)煎劑能明顯促進(jìn)小鼠胃排空及小腸推進(jìn)功能［18］，厚樸可以改善L-Arg和阿托品所致的胃腸動(dòng)力障礙［19，20］，枳實(shí)提取物能夠增強(qiáng)家兔離體腸管的自主運(yùn)動(dòng)，其水煎劑可使犬小腸平滑肌張力和運(yùn)動(dòng)功能增強(qiáng)［21］。砂仁及其水提取液有較好的促胃腸動(dòng)力作用［22，23］，各種雞內(nèi)金炮制品都能不同程度地減少小腸推進(jìn)率［24］，本方符合中醫(yī)傳統(tǒng)理論，并且具備藥理學(xué)基礎(chǔ)。

本實(shí)驗(yàn)大鼠造模后出現(xiàn)脾虛證的宏觀癥狀，開(kāi)腹時(shí)觀察到模型大鼠胃腸脹氣，腸壁變薄等脾虛證表現(xiàn)。模型大鼠的胃排空減低及小腸運(yùn)動(dòng)亢進(jìn)，提示其存在消化、吸收功能障礙，健脾消食方可提高脾虛大鼠減低的胃排空率，作用雖弱于莫沙必利，但是能夠恢復(fù)脾虛大鼠亢進(jìn)的小腸運(yùn)動(dòng)，使其接近正常，具有胃腸運(yùn)動(dòng)的雙向調(diào)節(jié)作用。

SS是一種廣泛分布的抑制型胃腸激素，大部分分布在胃腸道［25］，可抑制許多細(xì)胞因子的釋放，對(duì)胃腸道具有廣泛的直接和間接調(diào)節(jié)作用［26］，抑制胃固體排空和胃張力性收縮［27，28］。FD患者外周血SS升高［29～31］，并且FD患者的癥狀與血漿SS含量明顯相關(guān)［32］。

本研究結(jié)果顯示，脾虛模型大鼠的胃腸運(yùn)動(dòng)失調(diào)可能與血清中SP水平下降、SS水平升高有關(guān)。健脾消食方提升脾虛大鼠血清中SP水平，降低SS水平，表明該方可能通過(guò)調(diào)節(jié)血清SP、SS含量影響胃腸運(yùn)動(dòng)。

本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了健脾消食方的胃腸調(diào)節(jié)作用和組方的合理性，為其對(duì)臨床脾虛證消化不良患者胃腸運(yùn)動(dòng)失調(diào)的治療提供了理論依據(jù)。功能性消化不良的運(yùn)動(dòng)功能改變不僅表現(xiàn)為全胃排空的異常，還包括胃容受性，胃內(nèi)食物的分布，胃十二指腸協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)，胃腸電活動(dòng)等多方面的異常，并且與消化不良的癥狀具有相關(guān)性。健脾消食方對(duì)于胃腸運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)作用仍值得進(jìn)一步研究探索。

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（編輯 裘孝琦）

EffectsofJianpixiaoshiDecoction on GastrointestinalMotility in Ratswith Spleen-deficiency

ZHANGJin1，2，LIYan1

（1.DepartmentofGastroenterolgy，Shengjing Hospital，China MedicalUniversity，Shenyang 110004，China；2.DepartmentofGastroenterolgy，The FirstAffiliated Hospital，Liaoning MedicalUniversity，Jinzhou 121000，China）

Objective To investigate the regulating effect of Jianpixiaoshi Decoction（JPXSD）on gastrointestinal motility in rats of functional dyspepsia（FD）with spleen deficiency syndrome.MethodsForty healthy male SDrats were randomly divided into fourgroups：normalcontrolgroup，model group，model traditional Chinese medicine（TCM）group and model western medicine group.Except for the normal control group，F(xiàn)D model ofspleen-deficiency type was established by swimming to exhaustion on alternate daysand alternating feeding ofcabbage and lard for25 days.Corresponding drugs were then administrated to those fourgroups：distilled water，JPXSD and Mosapride distilled watersolution once a day by gavage for7 days.Symptoms and body weights of these rats were observed and recorded during the experiment.After the last of drug administration，all groups were fasted for24 hours.Nutritious semisolid paste marked with ink was given orally to the rats，GERand IPR of1 hourwere detected underanesthesia by sodium thiopental and blood were collected at the same time.The concentration of serum SP and SS were measured by ELISA according to the instructions.ResultsJPXSD improved the symptoms of model rats.Model TCM group showed significantly increased body weight，higher GER，lower IPR，higher serum SP level and lower SS level when compared to model group（P＜0.05）.ConclusionJPXSD could improve the symptoms of rat with spleen-deficiency，raise its body weight，accelerate the decreased gastric emptying and bring back the hyperactive small intestinal movementto normal.The regulating role ofJPXSDmay be realized through the increase ofserum SP leveland decrease ofSS level.

Jianpixiaoshi decoction；spleen-deficiency syndrome；gastrointestinal motility；somatostatin；substance P

R572

A

0258-4646（2015）08-0690-04

遼寧省科技廳藥物源頭創(chuàng)新研究課題

張進(jìn)（1988-），男，醫(yī)師，碩士.

李巖，E-mail：liy@sj-hospital.org

2014-05-26

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