神經(jīng)肽Y對(duì)小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞活化狀態(tài)和生成IL-1β的影響

李琦軍邢兆國(guó)常軍英吳永波張淑麗王顏志穆衛(wèi)盧李炎賈東召

·論 著·

神經(jīng)肽Y對(duì)小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞活化狀態(tài)和生成IL-1β的影響

李琦軍*邢兆國(guó)*常軍英*吳永波△張淑麗※王顏志*穆衛(wèi)盧*李炎*賈東召*

目的探討神經(jīng)肽Y(NPY)對(duì)原代小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞生物活性及生成IL-1β的影響。方法 培養(yǎng)的原代大鼠皮層小膠質(zhì)細(xì)胞，將細(xì)胞分為Control組、LPS組、NPY+LPS組、NPY組和BIBP3226+NPY+LPS組，每組3個(gè)樣本，培養(yǎng)各組細(xì)胞6h。經(jīng)免疫細(xì)胞化學(xué)熒光染色后，顯微鏡下觀察小膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化。Eli?sa方法檢測(cè)培養(yǎng)液中IL-1β蛋白含量，RT-PCR方法檢測(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞中IL-1βmRNA表達(dá)水平。結(jié)果 孵育各組小膠質(zhì)細(xì)胞 6h后，LPS組培養(yǎng)液中IL-1β蛋白的含量及細(xì)胞中IL-1βmRNA表達(dá)水平分別為（961.00± 83.50）pg/mL和5.59±0.87，顯著高于Control組的96.33±24.58 pg/mL和1.05±0.12（P＜0.05），小膠質(zhì)細(xì)胞處于活化狀態(tài)；LPS+NPY組IL-1β蛋白含量和mRNA表達(dá)水平分別為(411.33±55.00)pg/mL和1.93±0.45，與LPS組相比顯著降低（P＜0.05），小膠質(zhì)細(xì)胞活化水平降低；IBP3226+NPY+LPS組IL-1β蛋白含量和mRNA表達(dá)水平分別為(886.00±97.53)pg/mL和4.51±0.71，與LPS+NPY組相比顯著增高（P＜0.05）；LPS組和IBP3226+NPY+LPS組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。NPY組與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 NPY通過(guò)作用于NPY Y1受體降低小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的生物活性，抑制其生成IL-1β。

神經(jīng)肽-Y小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞 白介素-1β

小膠質(zhì)細(xì)胞是一種廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的巨噬細(xì)胞。正常狀態(tài)下，小膠質(zhì)細(xì)胞處于靜息狀態(tài)，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中起著免疫監(jiān)視作用。當(dāng)內(nèi)環(huán)境發(fā)生變化時(shí)會(huì)迅速被激活，激活后的小膠質(zhì)細(xì)胞能夠釋放白細(xì)胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）和腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）等細(xì)胞因子以及活性氧、活性氮、脂類等大量生物活性物質(zhì)[1，2]，這些活性物質(zhì)的過(guò)分釋放并積聚于中樞神經(jīng)系統(tǒng)會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)元損傷[3-5]。神經(jīng)肽Y(NPY)是一種多肽類物質(zhì)，廣泛分布于中樞及周圍神經(jīng)系統(tǒng)，由36個(gè)氨基酸組成，與癲癇，學(xué)習(xí)和記憶都有著密切關(guān)系，NPY可以通過(guò)NPY Y2、Y5受體起到保護(hù)神經(jīng)元作用。最近Ferreira R等研究[6]表明，NPY可以抑制脂多糖（LPS）所致的小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞N9細(xì)胞株的激活，減少IL-1β、NO的生成。本實(shí)驗(yàn)將進(jìn)一步研究NPY對(duì)體外培養(yǎng)的原代大鼠皮層小膠質(zhì)細(xì)胞的生物活性、小膠質(zhì)細(xì)胞來(lái)源的IL-1β生成的影響。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象24h內(nèi)新生SD大鼠30只(清潔級(jí)，河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供[動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK(冀)2013-1-03]。主要試劑：小鼠單克隆抗體IBA-1、脂多糖(美國(guó)Sigma公司)，F(xiàn)ITC標(biāo)記的山羊抗小鼠IgG(美國(guó)Proteintech公司)，胎牛血清、DMEMF12培養(yǎng)液(美國(guó)Gibco公司)，BIBP3226（美國(guó)Tocris Bioscience公司），神經(jīng)肽Y (NPY)(美國(guó)ENZO公司)，ELISA試劑盒（中國(guó)Bio-Swamp公司），GoldViewⅠ型核酸染料（美國(guó)Ameresco公司），Trizol(美國(guó) Invitrogen公司)，RT-PCR逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、RNA酶抑制劑（RNasin）、PCR擴(kuò)增試劑盒、隨機(jī)引物(Random primers)（美國(guó)Promega公司）。

1.2 小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)參照Nakajima等[7]所述方法。24h內(nèi)新生大鼠無(wú)菌環(huán)境下開(kāi)顱取腦，剝除腦膜及血管，取部分大腦皮質(zhì)，剪碎用0.125%胰蛋白酶37℃消化15 min，反復(fù)吹打成懸液，1000 r/min離心5 min后過(guò)濾，棄上清，在沉淀物中加入膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液（膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液為含10%胎牛血清，1U/mL青霉素、100μg/mL鏈霉素的DMEM/F12培養(yǎng)基制成細(xì)胞懸液），接種于250mL培養(yǎng)瓶中，37℃，5%CO2培養(yǎng)。第2天全量換液一次，以后每3d更換1/2體積培養(yǎng)液。培養(yǎng)至第14天，細(xì)胞充分分層生長(zhǎng)后，置于37℃恒溫?fù)u床中180r/min振搖2h，收集細(xì)胞懸液，1000r/min離心5min，去上清，用DMEM/F12全培養(yǎng)基吹打成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞調(diào)至約1×105/mL，種植到預(yù)先鋪好多聚賴氨酸的六孔板內(nèi)，每孔3mL。在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)靜置30min后完全換液一次，去除少突膠質(zhì)細(xì)胞，加入DMEM/F12完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)3～5d。

1.3 形態(tài)學(xué)觀察分離純化好的小膠質(zhì)細(xì)胞分別以1×104個(gè)/皿接種于3個(gè)預(yù)先放置經(jīng)多聚賴氨酸處理過(guò)的蓋玻片的3.5cm培養(yǎng)皿，24h后，分別更換為無(wú)血清膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液、含脂多糖（LPS）(終濃度為100ng/mL)的無(wú)血清膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液、含NPY(終濃度為1μmol/L)及LPS(終濃度為100ng/ mL)的無(wú)血清膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)6h，取出蓋玻片，以IBA-1為一抗，行免疫細(xì)胞化學(xué)染色，熒光顯微鏡下觀察原代大鼠皮質(zhì)小膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。

1.4 小膠質(zhì)細(xì)胞分組及處理方法將分離純化好的小膠質(zhì)細(xì)胞以2×104個(gè)/孔接種于預(yù)鋪多聚賴氨酸的24孔培養(yǎng)板用于IL-1β蛋白檢測(cè)，以5×105個(gè)/孔接種于6孔培養(yǎng)板用于IL-1βmRNA的檢

測(cè)。培養(yǎng)3d后換新鮮無(wú)血清膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)12h使細(xì)胞同步化，然后將細(xì)胞分為Control組、LPS組、NPY+LPS組、NPY組和BIBP3226+NPY+ LPS組，每組3個(gè)樣本。Control組細(xì)胞以無(wú)血清膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液孵育6h，LPS組細(xì)胞以含終濃度為100ng/mL LPS的無(wú)血清膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液孵育6h，NPY+LPS組細(xì)胞是先以含NPY(終濃度為1μmol/ L)的無(wú)血清膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液孵育0.5h，然后加入LPS（終濃度為100ng/mL）繼續(xù)孵育6h。NPY組細(xì)胞以含NPY(終濃度為1μmol/L)無(wú)血清膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液孵育6h。IBP3226+NPY+LPS組細(xì)胞先用含NPY Y1受體阻斷劑BIBP3226(終濃度為1 μmol/L)的無(wú)血清膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液孵育0.5h，再加入終濃度為1μmol/L的NPY孵育0.5h，最后加入終濃度100ng/mL的LPS繼續(xù)孵育6h。

1.5 小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液中IL-1β蛋白含量的檢測(cè)取上述各組小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液，離心后采用ELI?SA法檢測(cè)培養(yǎng)液中IL-1β蛋白含量。

1.6 小膠質(zhì)細(xì)胞中IL-1βmRNA表達(dá)水平的檢測(cè)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)上述各組小膠質(zhì)細(xì)胞中的IL-1βmRNA表達(dá)水平。小膠質(zhì)細(xì)胞加入Trizol（1mL/孔），吹打后移至去核酶的離心管中，靜置5min。每管加入0.2mL氯仿，震蕩15s，靜置5min。12000r/min離心15min，把上層無(wú)色液體移到新的離心管中。加入等體積的異丙醇，顛倒混勻。4℃12000r/min離心10min，管底可見(jiàn)羽毛狀白色沉淀物，完全棄去上清。加入1mL 75%乙醇（DEPC水配置），洗滌沉淀。4℃7500r/min離心5min，棄上清。靜置晾干3～5min，加入20～30 μL DEPC水充分溶解RNA。1%瓊脂糖凝膠電泳證實(shí)RNA完整性較好，無(wú)污染。紫外分光光度計(jì)檢測(cè)RNA濃度。引物由上海生工生物公司合成。IL-1β上游引物5’-CTCCATGAGC TTTGTA?CAAGG-3’，IL-1β下游引物5’-TGCTGATGTAC?CAGTTGGG-3’，擴(kuò)展長(zhǎng)度為245bp。GAPDH上游引物 5’-TGAACGGGAAGCTCACTGG-3’，GAPDH下游引物5’-GCTTCACCACCTTCTTGAT?GTC-3’，擴(kuò)增長(zhǎng)度為120bp。實(shí)時(shí)PCR反應(yīng)中反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系總RNA 8μL，隨機(jī)引物1μL，2×ES Reaction Mix 10μL，RT/RI Enzyme Mix 1μL，總體積20μL。擴(kuò)增體系為：2×UltraSYBR Mixture（with ROX）10μL，上游引物（10μmol/L）1μL，下游引物（10μmol/L）1μL，cDNA 8μL，總 體 積 20μL。RT-PCR反應(yīng)程序參數(shù)：預(yù)變性95℃10min；變性95℃ 15s，退火58℃ 20s，延伸72℃ 27s，40個(gè)循環(huán)。用ABI 7300 Real-Time PCR System（(Applied Biosystems,Foster City,CA,USA)檢測(cè)并計(jì)算目的基因表達(dá)量與內(nèi)參GAPDH比較的相對(duì)值（RQ值），用于統(tǒng)計(jì)分析。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法利用SPSS10.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)符合正態(tài)性和方差齊性的要求，采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)的方差分析，進(jìn)一步的兩兩比較采用LSD法，數(shù)據(jù)以±s表示，檢測(cè)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 大鼠大腦皮質(zhì)小膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化無(wú)血清培養(yǎng)液孵育的小膠質(zhì)細(xì)胞呈細(xì)胞呈分枝狀外觀，胞體較小，有細(xì)長(zhǎng)的突起（箭頭），細(xì)胞表達(dá)IBA-1（圖1）。含LPS的無(wú)血清培養(yǎng)液孵育的小膠質(zhì)細(xì)胞處于活化狀態(tài)，胞體變?yōu)閳A形和阿米巴狀，突起回縮，IBA-1染色加深（箭頭,圖2）。提前加入NPY再加入LPS的無(wú)血清培養(yǎng)液孵育的小膠質(zhì)細(xì)胞大部分為非活化狀態(tài)，成多角形，有長(zhǎng)的突起（箭頭），IBA-1染色陽(yáng)性，但比LPS組熒光強(qiáng)度明顯弱（圖3）。

2.2 培養(yǎng)液中IL-1β蛋白含量的變化孵育各組小膠質(zhì)細(xì)胞6h后，LPS組和IBP3226+NPY+LPS組中IL-1β的含量顯著高于Control組（F=127.991, P＜0.05）；LPS組和IBP3226+NPY+LPS組之間無(wú)顯著性差異。LPS+NPY組與LPS組相比，培養(yǎng)液中IL-1β含量顯著降低（P＜0.05），IBP3226+NPY+ LPS組與LPS+NPY組相比，培養(yǎng)液中IL-1β的含量顯著增高（P＜0.05），NPY組與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表1。

2.3 小膠質(zhì)細(xì)胞中IL-1βmRNA水平的變化孵育各組小膠質(zhì)細(xì)胞6h后，LPS組和BIBP3226+ NPY+LPS組小膠質(zhì)細(xì)胞的IL-1βmRNA表達(dá)水平顯著高于Control組（F=42.4712，P＜0.05）；LPS組和IBP3226+NPY+LPS組之間無(wú)顯著性差異。與

LPS組相比，LPS+NPY組小膠質(zhì)細(xì)胞中的IL-1βmRNA表達(dá)水平明顯降低（P＜0.05）。與LPS+NPY組相比，IBP3226+NPY+LPS組小膠質(zhì)細(xì)胞中的IL-1βmRNA表達(dá)水平顯著增高（P＜0.05），NPY組與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表1。

3 討論

自從Besedovsky提出了免疫-神經(jīng)-內(nèi)分泌調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)學(xué)說(shuō)以來(lái)，免疫在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的作用受到人們?cè)絹?lái)越多的關(guān)注。小膠質(zhì)細(xì)胞（MG）廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，在免疫功能調(diào)節(jié)方面起著重要作用。很多資料顯示小膠質(zhì)細(xì)胞激活和中樞神經(jīng)系統(tǒng)很多疾病有關(guān)，例如阿爾茨海默病、帕金森綜合癥、腦缺血等中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變[8-10]。MG活化后產(chǎn)生大量細(xì)胞因子等生物活性物質(zhì)，例如IL-1β、TNF-a、NO等，這些物質(zhì)的大量積聚會(huì)對(duì)神經(jīng)元產(chǎn)生毒害作用，這可能是MG活化后導(dǎo)致神經(jīng)元損傷的重要途徑之一。IL-1β是最常見(jiàn)的損傷性細(xì)胞因子，也是小膠質(zhì)細(xì)胞激活后釋放的前炎癥因子，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)多種生理和病理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。

圖1 無(wú)血清培養(yǎng)基孵育的小膠質(zhì)細(xì)胞，IBA-1染色后的小膠質(zhì)細(xì)胞，可見(jiàn)長(zhǎng)的突起(400×)，標(biāo)尺為25μm

圖2 含LPS的無(wú)血清培養(yǎng)基孵育的小膠質(zhì)細(xì)胞，IBA-1染色加深，胞體突起回縮，成圓形或者多角形(400×)，標(biāo)尺為25μm

圖3 含LPS和NPY的無(wú)血清培養(yǎng)基孵育的小膠質(zhì)細(xì)胞，IBA-1染色后大部分細(xì)胞有長(zhǎng)的細(xì)胞突起，熒光強(qiáng)度較LPS組明顯減弱(400×)，標(biāo)尺為25μm

表1 各組培養(yǎng)基中IL-1β蛋白含量(±s,n=3)

表1 各組培養(yǎng)基中IL-1β蛋白含量(±s,n=3)

1）與control組比較，P＜0.05；2）與LPS+NPY組比較，P＜0.05

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人體內(nèi)的神經(jīng)肽類物質(zhì)與炎癥反應(yīng)有著較密切的關(guān)系。當(dāng)體內(nèi)出現(xiàn)炎癥反應(yīng)時(shí)會(huì)釋放一些神經(jīng)肽類物質(zhì)，這些神經(jīng)肽類物質(zhì)可以下調(diào)機(jī)體的免疫應(yīng)答，誘導(dǎo)T細(xì)胞的產(chǎn)生，抑制抗原特異性Th1細(xì)胞分化，維持機(jī)體免疫耐受，減輕炎癥反應(yīng)[11-14]。NPY全名神經(jīng)肽酪氨酸，是一種廣泛存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)肽，與癲癇，學(xué)習(xí)、記憶、攝食和內(nèi)分泌都有著密切關(guān)系。NPY通過(guò)與不同的受體結(jié)合在體內(nèi)發(fā)揮不同的作用，NPY受體都屬于G蛋白的偶聯(lián)受體，在人體內(nèi)包括Y1、Y2、Y3、Y4、Y5 5種亞型。第二軍醫(yī)大學(xué)周江睿對(duì)原代培養(yǎng)的腹腔巨噬細(xì)胞和RAW264.7細(xì)胞的研究[15]顯示，NPY對(duì)炎癥因子的調(diào)節(jié)具有雙面性，一方面，NPY能夠抑制腹腔巨噬細(xì)胞釋放炎性因子IL-1β、TNF-α、IL-6和前列腺素B2，另一方面，NPY能夠促進(jìn)腹腔巨噬細(xì)胞晚期炎癥因子HMGB1的分泌。最近Ferreira R等[16-17]研究表明，小鼠小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞株N9細(xì)胞表達(dá)NPYY1受體，NPY可以抑制LPS所致N9細(xì)胞的激活，減少

IL-1β、NO的生成，另一方面，NPY還能抑制N9細(xì)胞的吞噬作用和遷移能力，當(dāng)阻斷NPY Y1受體后，這種抑制作用消失。本實(shí)驗(yàn)采用LPS為MG的激活劑，在LPS處理MG 6h后，MG處于明顯的活化狀態(tài)，細(xì)胞體積增大，突觸回縮，由分支狀變?yōu)閳A形、梭形或者阿米巴狀，特征性標(biāo)志物IBA-1免疫染色加深，MG的免疫活性也隨之增強(qiáng)，MG培養(yǎng)液中IL-1β含量與MG細(xì)胞中IL-1βmRNA表達(dá)水平均明顯增高，與對(duì)照組有顯著差異。加入NPY后能夠明顯抑制LPS對(duì)MG的激活作用，使大部分MG處于非活化狀態(tài)，降低了MG培養(yǎng)液中IL-1β蛋白和MG細(xì)胞內(nèi)的IL-1βmRNA表達(dá)水平，使用BIBP3226阻斷NPY Y1受體后這種抑制作用完全消失，說(shuō)明NPY是通過(guò)Y1受體起到降低MG的免疫活性，減少M(fèi)G來(lái)源的IL-1β產(chǎn)生。NPY處理非活化的小膠質(zhì)細(xì)胞后，培養(yǎng)液中IL-1βa蛋白及MG細(xì)胞內(nèi)的IL-1βmRNA水平均未發(fā)生明顯變化，說(shuō)明NPY對(duì)靜止期的小膠質(zhì)細(xì)胞影響不大。

本研究表明，NPY對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的小膠質(zhì)細(xì)胞的免疫活性有調(diào)節(jié)作用，NPY能下調(diào)中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞的免疫活性，抑制IL-1β的產(chǎn)生，這種作用是通過(guò)其Y1受體實(shí)現(xiàn)的。本研究為NPY以小膠質(zhì)細(xì)胞為靶點(diǎn)治療與免疫有關(guān)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

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The effect of NPY on the activation of microglia and IL-1βproduction

.LI Qijun,XING Zhaoguo,CHANGJunying,WU Yongbo,ZHANG Shuli,WANG Yanzhi,MU Weilu,LI Yan,JIA Dongzhao.Department of Orthopaedic Trauma, the third Hospital of Shijiazhuang city,NO.15,South Sports street,Shijiazhuang 050011，China.Tel:0311-85990917.

ObjectiveTo explore the effect of NPY on activation of primary microglia and the production of in?terleukin-1β.MethodsRat primary cortical microglia was cultured and divided into control group,LPS group,NPY+ LPS group,NPY group and BIBP3226+NPY+LPS group.Microglia in control group were incubated with serum-free me?dium for 6 h;microglia in LPS group were incubated with serum-free medium plus LPS for 6 h;microglia in NPY+LPS group were incubated with serum-free medium plus NPY and LPS for 6 h;microglia cells in NPY group were incubat?ed in serum-free medium plus NPY for 6 h;microglia cells in BIBP3226+NPY+LPS group were incubated in se?rum-free medium including BIBP3226、NPY and LPS for 6 h.After 6 h,Primary cultured microglia were stained us?ing IBA-1 antibody and examined under the fluorescence microscope.The protein levels of IL-1βin the culture media and the mRNA expression levels of IL-1 βin the microglia of different groups were detected using the methods of Elisa and RT-PCR.ResultsAfter 6 h,the contents of IL-1 βin the culture media and the mRNA expression levels of IL-1 βin the cells of LPS group increased remarkably compared with control group(P＜0.05)and the microglia were activat?

Neuropeptide Y MicrogliaInterleukin-1β

R741

A

2014-06-19）

（責(zé)任編輯:甘章平）

10.3936/j.issn.1002-0152.2015.03.007

* 石家莊市第三醫(yī)院創(chuàng)傷一科(石家莊 050011)

△ 石家莊市公安局法醫(yī)損傷檢驗(yàn)鑒定室

※ 秦皇島市骨科醫(yī)院藥劑科

ed.Compared with LPS group,the contents of IL-1 βin the culture media.the mRNA expression levels of IL-1β and the activity of microglia in LPS+NPY group were significantly decreased.Compared with LPS+NPY group,the contents of IL-1 βin the culture media.the mRNA expression levels of IL-1β and the activity of microglia in BIBP3226+NPY+ LPS group were increased(P＜0.05).There were no significant differences in the contents of IL-1βin the culture media. the mRNA expression levels of IL-1β and the activity of microglia between BIBP3226+NPY+LPS group and LPS group or between NPY group and the control group.ConclusionNPY can inhibit the biological activity of microglia and IL-1βproduction through NPY Y1 receptorin the microglia.