尿液趨化因子IP-10、MIG水平對(duì)術(shù)后早期移植腎急性排斥反應(yīng)的研究分析

葛亞輝 曲青山 鄭珊

尿液趨化因子IP-10、MIG水平對(duì)術(shù)后早期移植腎急性排斥反應(yīng)的研究分析

葛亞輝 曲青山 鄭珊

目的 探討腎移植術(shù)后尿液趨化因子干擾素γ誘導(dǎo)蛋白10(IP-10)、干擾素γ誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子(MIG)水平對(duì)術(shù)后早期移植腎的急性排斥反應(yīng)。方法 40例實(shí)施同種異體腎移植術(shù)的患者, 根據(jù)其移植術(shù)后的臨床表現(xiàn)與實(shí)驗(yàn)室檢查及華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院器官移植研究院病理研究中心的腎穿刺組織病理學(xué)檢查結(jié)果, 分為急性排斥組20例和非急性排斥組20例, 另外選取20例進(jìn)行健康體檢的人員作為健康組。所有的尿液標(biāo)本均采用液態(tài)芯片-流式熒光技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)三組的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果 急性排斥組與非急性排斥組、健康組相比, 尿液中的趨化因子IP-10、MIG的含量均明顯升高(P＜0.05)。結(jié)論 腎移植術(shù)后尿液中的趨化因子IP-10、MIG的升高與腎移植術(shù)后急性排斥反應(yīng)存在密切關(guān)聯(lián), 有望成為診斷急性排斥反應(yīng)較特異、敏感的指標(biāo), 對(duì)早期診斷和早期治療具有重要意義。

移植腎；趨化因子；干擾素γ誘導(dǎo)蛋白10；干擾素γ誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子；尿液；急性排斥反應(yīng)

器官移植已成為治療器官功能衰竭患者的重要手段［1］。然而針對(duì)并非自身臟器器官的受者, 術(shù)后必然存在著各種并發(fā)癥與各種未知危險(xiǎn)因素, 而腎移植術(shù)后首當(dāng)其沖的便是術(shù)后急性排斥反應(yīng)(acute rejection, AR), 而針對(duì)術(shù)后急性排斥反應(yīng)的早期診斷與治療是保證移植腎存活的關(guān)鍵措施。但怎樣才能早期診斷腎移植術(shù)后急性排斥反應(yīng), 一直是臨床移植醫(yī)師研究探討的問(wèn)題。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本移植中心2012年1月～2014年1月實(shí)施同種異體腎移植術(shù)的40例患者, 根據(jù)其移植術(shù)后的臨床表現(xiàn)與實(shí)驗(yàn)室檢查及華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院器官移植研究院病理研究中心的腎穿刺組織病理學(xué)檢查結(jié)果, 分為急性排斥組20例［年齡18～64歲：用藥均以FK506為基礎(chǔ)的三聯(lián)用藥。術(shù)后如發(fā)生腎功能延期恢復(fù)(DGF)或者急性肺部感染的, 均按照病癥要求進(jìn)行用藥調(diào)整和對(duì)癥治療］和非急性排斥組20例(年齡18～64歲；用藥均以FK506為基礎(chǔ)的三聯(lián)用藥。術(shù)后如發(fā)生DGF或者急性肺部感染的, 均按照病癥要求進(jìn)行用藥調(diào)整和對(duì)癥治療), 另外從體檢科選取20例(年齡18～64歲；全部為例行健康體檢的人員, 均無(wú)明顯的急/慢性疾病)作為健康組進(jìn)行監(jiān)測(cè)。三組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 研究方法 ①對(duì)根據(jù)移植術(shù)后的臨床表現(xiàn)與實(shí)驗(yàn)室檢查及腎穿刺組織病理學(xué)檢查結(jié)果確診的急性排斥組(1、2、3、5、7、9、11、13、15 d)進(jìn)行為期2周的連續(xù)檢測(cè), 采用液態(tài)芯片-流式熒光技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。②對(duì)20例非急性排斥組的移植受者［0(術(shù)后有尿當(dāng)天)、3、7、14、30 d］進(jìn)行連續(xù)檢測(cè), 采用液態(tài)芯片-流式熒光技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。③對(duì)20例健康組的尿液標(biāo)本采用液態(tài)芯片-流式熒光技術(shù)進(jìn)行1次檢測(cè)。④收集研究對(duì)象的尿液, 并在2 h內(nèi)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)或采取-20℃低溫保存。⑤本次臨床研究主要采用Luminex(型號(hào)200)多功能流式點(diǎn)陣儀, 其檢測(cè)原理是通過(guò)磁珠捕獲目標(biāo)標(biāo)志物, 并與標(biāo)記抗體和熒光試劑結(jié)合形成四聯(lián)復(fù)合物, 將該復(fù)合物通過(guò)單一管道, 用兩束激光對(duì)復(fù)合物中的熒光物進(jìn)行激發(fā), 收集激發(fā)光的數(shù)目和強(qiáng)度, 即可對(duì)目標(biāo)標(biāo)志物定性和定量。⑥本項(xiàng)研究不限制包括抗胸腺細(xì)胞球蛋白(ATG)誘導(dǎo)治療等其他輔助方案。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù) ± 標(biāo)準(zhǔn)差( x-±s)表示, 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

急性排斥組尿液中的IP-10和MIG表達(dá)明顯高于對(duì)照組和非急性排斥組, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

3 討論

隨著我國(guó)腎移植技術(shù)的不斷發(fā)展與改進(jìn), 使腎移植手術(shù)的成功率大大增加, 使移植腎的存活率也顯著提高, 然而臟器本身并非人為可以控制, 存在著諸多未知風(fēng)險(xiǎn), 這其中首當(dāng)其沖影響移植腎失功的便是術(shù)后急性排斥反應(yīng)。移植腎急性排斥反應(yīng)是影響腎臟移植成功與否的關(guān)鍵, 是導(dǎo)致慢性排斥反應(yīng)和移植物功能損傷的危險(xiǎn)因素, 其發(fā)生與淋巴細(xì)胞的激活、趨化遷移以及移植物局部發(fā)揮效應(yīng)有關(guān)［2-4］。由于目前移植腎的急性排斥反應(yīng)最終仍需要通過(guò)腎穿刺活檢得以確認(rèn), 但穿刺容易引起出血, 誘發(fā)感染等一系列并發(fā)癥, 所以更多學(xué)者已在尋找可替代創(chuàng)傷性的特異性、敏感性指標(biāo)來(lái)為臨床診治提供價(jià)值。移植排斥發(fā)生的每一階段都有賴于趨化因子及其受體的相互作用［5］。研究證實(shí)趨化因子家族成員在腎移植術(shù)后急性排斥反應(yīng)中的發(fā)生發(fā)展中起到關(guān)鍵作用［6］。趨化因子根據(jù)氨基端半胱氨酸的排列方式不同, 分為C、CC、CXC和CX3C亞家族, 它們通過(guò)與7次跨膜的、G蛋白偶聯(lián)的趨化因子受體相結(jié)合而發(fā)揮生物效應(yīng)［7］, IP-10和MIG介導(dǎo)白細(xì)胞向移植物募集, IP-10是表達(dá)于Th1細(xì)胞的趨化因子受體的功能激動(dòng)劑, 在淋巴細(xì)胞的免疫活化、炎癥浸潤(rùn)、細(xì)胞遷移和發(fā)生效應(yīng)中發(fā)揮重要作用, 也被認(rèn)為是排斥反應(yīng)進(jìn)入特異性反應(yīng)階段的標(biāo)志, 尿中IP-10和MIG檢測(cè)對(duì)于腎移植急性排斥反應(yīng)的早期診斷具有重要意義。

本文研究急性排斥組尿液中的IP-10和MIG表達(dá)明顯高于對(duì)照組和非急性排斥組, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。提示IP-10和MIG在急性排斥反應(yīng)組織中的表達(dá)與腎移植的免疫狀態(tài)密切相關(guān), 這可以作為腎移植術(shù)后急性排斥反應(yīng)早期診斷及早期治療的一種有效指標(biāo)。即使腎移植術(shù)1周后如果血肌酐處于正常范圍, 若其尿液中IP-10和MIG指標(biāo)明顯升高, 也提示急性排斥反應(yīng)發(fā)生的可能性較大。當(dāng)急性排斥組的患者經(jīng)沖擊治療使腎功能降至正常范圍后, 尿液中的趨化因子IP-10和MIG也隨之降低, 更證實(shí)了尿液中趨化因子IP-10 和MIG的檢測(cè)對(duì)于AR早期的診斷具有重要作用。

綜上所述, 腎移植術(shù)后尿液中的趨化因子IP-10、MIG的升高與腎移植術(shù)后急性排斥反應(yīng)存在密切關(guān)聯(lián), 有望成為診斷急性排斥反應(yīng)較特異、敏感的指標(biāo), 對(duì)早期診斷和早期治療具有重要意義。

［1］ 黎磊石.中國(guó)腎移植手冊(cè).第2 版.香港:華夏科學(xué)出版社, 2009:67-383.

［2］ Geleff S, Draganovici D, Jaksch P, et al.The role of chemokine receptors in acute lung allograft rejection.Eur Respir J, 2010, 35(1): 167-175.

［3］ Gorgi Y, Sfar I, Jendoubi-Ayed S, et al.Allograft renal rejection and chemokine polymorphism.Saudi J Kidney Dis Transpl, 2011, 22(1): 18-23.

［4］ 郭君其, 黃一亮, 吳衛(wèi)真, 等.細(xì)胞間黏附分子1與移植腎急性排斥反應(yīng).中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù), 2009, 13(5):862-864.

［5］ 魏澗, 李泉源, 郭小軍, 等.IP-10和CXCR3在同種異體腎移植急性排斥反應(yīng)中的表達(dá)及意義.包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2010, 26(6):12-14.

［6］ Wells TN, Power CA, Shaw JP, et al.Chemokineblockers--therapeutics in the making? Trends Pharmacol Sci, 2006, 27(1):41-47.

［7］ Eteshola E.Isolation of scFv fragments specific for monokine induced by interferon-gamma (MIG) using phage display.J Immunol Methods, 2010, 358(1-2):104-110.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.19.025

2015-02-27］

河南省鄭州市科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目 鄭科技［2013］1號(hào)(項(xiàng)目編號(hào)：20130610)

450003 鄭州人民醫(yī)院腎臟移植科