SOX9與NM 23基因在前列腺癌中的表達(dá)

任彩虹

SOX9與NM 23基因在前列腺癌中的表達(dá)

任彩虹

目的 探討SOX9、NM 23基因在前列腺癌中的表達(dá)。方法 選取16例前列腺癌患者與24例前列腺良性增生患者，取其病理組織采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)定其mRNA表達(dá)量。結(jié)果 前列腺癌組患者NM 23、SOX 9 mRNA表達(dá)量與前列腺增生組患者比較明顯更高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 通過(guò)對(duì)NM 23、SOX9 mRNA表達(dá)量進(jìn)行測(cè)定可為前列腺癌臨床診斷提供可靠依據(jù)。

前列腺癌；NM 23基因；SOX 9基因；表達(dá)

前列腺癌是一種老年男性非常多見(jiàn)的惡性腫瘤疾病，根據(jù)美國(guó)調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，前列腺癌在惡性腫瘤發(fā)病率中排首位，死亡率則排第二位［1］。伴隨著中國(guó)經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，醫(yī)療水平的提升，人們的壽命普遍延長(zhǎng)，但因飲食結(jié)構(gòu)和生活習(xí)慣等變化，使得我國(guó)的前列腺癌患者的發(fā)病率也呈現(xiàn)為逐年遞增的趨勢(shì)，并發(fā)展成為了我國(guó)男性泌尿系統(tǒng)常見(jiàn)腫瘤疾病。目前，在前列腺癌的臨床診斷中，主要采用血清PSA、直腸指診、經(jīng)直腸前列腺超聲等手段，但這些方法的誤診率和漏診率相對(duì)較高。隨著基因檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)步，不少學(xué)者紛紛指出通過(guò)對(duì)SOX9與NM23基因進(jìn)行測(cè)定，可有效掌握前列腺癌的病變進(jìn)程，為臨床診斷提供客觀的依據(jù)?，F(xiàn)結(jié)合我院前列腺癌患者SOX9與NM23基因表達(dá)，對(duì)其用于前列腺癌診斷價(jià)值進(jìn)行探討。有關(guān)情況報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集我院2014年1月～2015年6月泌尿外科接診的24例前列腺良性增生患者與16例前列腺癌患者，所有病理組織均來(lái)自經(jīng)尿道前列腺電切術(shù)或者前列腺根治術(shù)等。所有樣本均在獲得后置于存有液氮的瓶?jī)?nèi)速凍保存。其中PCa患者平均年齡（71.5±1.54）歲；BPH患者平均年齡（63.6±2.54）歲。并根據(jù)石蠟切片診斷結(jié)果Gleason分級(jí)。

1.2 SOX9與NM23基因mRNA定量檢測(cè)

1.2.1 儀器與試劑 （1）儀器：運(yùn)用熒光定量PCR儀（ABI 7500）與配套分析軟件。（2）試劑：10×PCR Buffer、熱啟動(dòng)Taq酶、Rox Dye Reference等。

1.2.2 測(cè)定方法 （1）提取RNA：向速凍瓶中加入Trizol液，并放置于勻漿機(jī)行勻漿處理獲得RNA；（2）采用Takara Taq HS試劑；（3）通過(guò)熒光定量PCR儀與熒光定量PCR分析軟件；（4）對(duì)mRNA進(jìn)行提取；（5）經(jīng)NCBI的gene bank，對(duì)NM23以及SOX9基因的相關(guān)資料進(jìn)行檢索，獲取NM23以及SOX9基因的相關(guān)uniSTS 和Normal mRNA序列。通過(guò)Vextor NT6.0軟件對(duì)NM23以及SOX9基因的相關(guān)uniSTS擴(kuò)增片段中Normal mRNA位置進(jìn)行定位，長(zhǎng)度選取為100～300 bp。再通過(guò)NCBI中的e-PCR軟件與Blast軟件對(duì)該片段的特異性進(jìn)行分析，排除重復(fù)引物與特異性較差的引物。按照KLK11基因與TMPPSS2基因中的相關(guān)uniSTS和mRNA序列，按照反轉(zhuǎn)錄標(biāo)記與雜交的要求及ePCR結(jié)果，對(duì)特異性較佳的序列進(jìn)行篩選，同時(shí)完成NM23以及SOX9基因的uniSTS引物序列與探針序列的制作；（6）采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)RNA樣本進(jìn)行測(cè)定；（7）完成標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作；（8）采用相對(duì)定量法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS軟件處理數(shù)據(jù)，分別對(duì)良性前列腺增生癥和前列腺癌患者的NM23以及SOX9 mRNA表達(dá)量進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。P ＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

通過(guò)對(duì)前列腺癌患者與前列腺增生患者NM23、SOX9基因進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果顯示，前列腺癌組NM23 mRNA表達(dá)量為（4.38±0.75），SOX9 mRNA表達(dá)量為（9.18±0.99）；前列腺增生組NM23 mRNA表達(dá)量為（3.01±0.76），SOX9 mRNA表達(dá)量為（4.06±0.82）。前列腺癌組患者NM23、SOX9 mRNA表達(dá)量均高于前列腺增生組患者，對(duì)比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t1=11.294，t2=34.795，P＜0.05）。

3 討論

近幾年來(lái)，在前列腺癌臨床診斷中，主要采用血清PSA進(jìn)行篩查、診斷與預(yù)后判斷，但因前列腺炎、前列腺增生等均可致使血清PSA水平因此上升，致使其診斷灰區(qū)，導(dǎo)致前列腺增生與前列腺癌經(jīng)常出現(xiàn)誤診、漏診等現(xiàn)象。為此，選取一種有效的分子標(biāo)記物來(lái)對(duì)前列腺癌的診斷進(jìn)行指導(dǎo)具有非常重要的作用。SOX9 是SOX家族基因中非常重要的一名成員。有研究該基因與多種惡性腫瘤的病變和發(fā)展均有直接聯(lián)系［2］。有研究者通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，SOX9不僅在正常前列腺的發(fā)育中有重要作用［3-4］，同時(shí)在腫瘤的侵襲力和腫瘤生長(zhǎng)中也發(fā)揮了重要作用［5］。NM23基因的表達(dá)與失活可引起組織器官出現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移和畸形分化。根據(jù)本研究結(jié)果來(lái)看，通過(guò)對(duì)前列腺癌與前列腺增生患者NM23、SOX9基因表達(dá)進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，前列腺癌組的NM23、SOX9 nRNA均高于前

列腺增生組（P＜0.05）。

綜上所述，在對(duì)前列腺癌診斷中，以NM23、SOX9基因?yàn)榉肿訕?biāo)記物，可充分掌握組織中其表達(dá)量，并根據(jù)表達(dá)量的不同來(lái)作為病情診斷、預(yù)后的判斷指標(biāo)。參考文獻(xiàn)

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Expression of SOX9 and NM23 Gene in Prostate Cancer

REN Caihong, Pathology Department, the First Hospital Affiliated to Fujian Medical University, Fuzhou 350005, China

ObjectiveTo investigate the expression of SOX9 and NM 23 gene in prostate cancer.Methods16 patients w ith prostate cancer and 24 patients w ith benign prostatic hyperplasia, take the pathological tissue, the expression of mRNA was measured by real-time fluorescence quantitative PCR.ResultsThe expression of SOX9 and mRNA NM 23 in prostate cancer group was significantly higher compared w ith that in patients w ith benign prostatic hyperplasia（P＜0.05）.ConclusionThe expression of SOX9 and mRNA NM 23 can be measured, and it can provide reliable basis for clinical diagnosis of prostate cancer.

Prostate cancer, NM 23 gene, SOX9 gene, Expression

R 737.25

B

1674-9308（2015）28-0042-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2015.28.030

350005 福建省福州市福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科