壯筋續(xù)骨湯對(duì)骨折大鼠血清內(nèi)源性生長(zhǎng)因子水平的影響及意義

周 縝，藍(lán) 青，李洪波，寧 馳

壯筋續(xù)骨湯對(duì)骨折大鼠血清內(nèi)源性生長(zhǎng)因子水平的影響及意義

周 縝1，藍(lán) 青1，李洪波2，寧 馳1

目的：研究壯筋續(xù)骨湯對(duì)股骨骨折后大鼠血清中骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMP7）、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1（IGF-1）、堿性成纖維細(xì)胞因子（bFGF）和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGFβ1）水平的影響，探討其促進(jìn)骨折愈合的機(jī)制。方法：成年健康雄性Wistar大鼠72只，隨機(jī)數(shù)字表法分為假手術(shù)組、對(duì)照組、治療組各24只。用低速牙科鉆在股骨中段切斷股骨制備骨折模型，應(yīng)用壯筋續(xù)骨湯水煎液干預(yù)治療7 d、14 d、21 d、28 d后取材觀察，X線攝片觀察骨折局部愈合情況，蘇木精-伊紅染色觀察骨痂組織病理變化，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清BMP-7、IGF-1、bFGF和TGFβ1水平。結(jié)果：骨折7 d骨折斷端被纖維性組織填充；14 d纖維性骨痂開(kāi)始形成，成骨細(xì)胞增多；至21 d有鈣鹽沉著，破骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞活躍；至28 d骨性骨痂形成，大量骨小梁形成。治療組大鼠骨折后7～21 d骨痂結(jié)構(gòu)變化與對(duì)照組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較無(wú)明顯差異，但至28 d治療組骨痂結(jié)構(gòu)優(yōu)于對(duì)照組，其皮質(zhì)骨及髓腔可辨，成像更加清晰。血清BMP-7、IGF-1、bFGF和TGFβ1水平在骨折后7 d、14 d、21 d、28 d對(duì)照組和治療組明顯高于假手術(shù)組(t=20.46～21.07，P＜0.05)，在第28 d,治療組明顯高于對(duì)照組(t=12.92，P＜0.05)和假手術(shù)組(t=8.63，P＜0.05)。結(jié)論：壯筋續(xù)骨湯可能通過(guò)抑制內(nèi)源性BMP7、IGF-1、bFGF和TGFβ1降解，增強(qiáng)其活性，發(fā)揮促進(jìn)骨折愈合的作用。

壯筋續(xù)骨湯；大鼠；骨折；內(nèi)源性生長(zhǎng)因子

骨折創(chuàng)傷后，機(jī)體細(xì)胞生物因子發(fā)生應(yīng)激性改變，骨折端壞死骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞以及被吸收的骨基質(zhì)均向周?chē)尫艃?nèi)源性生長(zhǎng)因子,其中骨形態(tài)發(fā)生蛋白(bone morphogenetic protein-7，BMP-7）和胰島素樣生長(zhǎng)因子-1（insulin-like growth factor-1，IGF-1）、堿性成纖維細(xì)胞因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（transforming growth factor，TGFβ1）的作用尤為突出。有研究表明，大鼠股骨骨折后應(yīng)用壯筋續(xù)骨湯干預(yù)治療，具有促進(jìn)骨折愈合的作用[1-2]，但觀察時(shí)間只有2周，未能全面反映骨折愈合的過(guò)程[3]。本實(shí)驗(yàn)試圖觀察壯筋續(xù)骨湯對(duì)大鼠股骨骨折后血清BMP-7、IGF-1、bFGF和TGFβ 1水平影響，探討其促進(jìn)骨折愈合的作用機(jī)制。

1 材料和方法

1.1 動(dòng)物模型 成年健康雄性Wistar大鼠72只，體質(zhì)量230～250 g，清潔級(jí)，青島市藥物檢驗(yàn)所動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)SCXK（魯）20120010。適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d，應(yīng)用隨機(jī)數(shù)字表法分為假手術(shù)組、對(duì)照組、治療組各24只。10%水合氯醛腹腔注射麻醉動(dòng)物（300 mg/kg），俯臥位固定，常規(guī)消毒右下肢股骨段，取股外側(cè)切口，經(jīng)股前、外側(cè)肌間隔分離暴露股骨，在股骨中段（大轉(zhuǎn)子下1 cm）用低速牙科鉆（JBX-NE22，NSK Co.Ltd.Japan）切斷股骨，行克氏針（直徑1 mm，上海醫(yī)用縫合針廠）髓腔逆行固定股骨（假手術(shù)組動(dòng)物不切斷股骨），逐層縫合切口，常規(guī)消毒，拍攝骨折股骨X線片。手術(shù)后將大鼠放置籠中，每籠1只，單獨(dú)飼養(yǎng)，成活率100%。

1.2 治療方法 壯筋續(xù)骨湯配方：當(dāng)歸12 g，川芎12 g，熟地10 g，三七10 g，黃芪12 g，杜仲12 g，川續(xù)斷12 g，骨碎補(bǔ)12 g，紅花10 g，白芍10 g。由日照中醫(yī)院中藥制劑室嚴(yán)格依據(jù)《醫(yī)療機(jī)構(gòu)中藥煎藥室管理規(guī)范》[國(guó)中醫(yī)藥發(fā)（2009）3號(hào)]要求制備：室溫20～25℃,相對(duì)濕度≤85%條件下，用符合國(guó)家衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的常溫自來(lái)水浸泡藥材約20～30 min,煎制時(shí)先武火后文火，保持微沸狀態(tài)10～15 min,使有效藥物成分充分溶解。每副中藥要煎煮兩次，藥材充分煎透，達(dá)到無(wú)糊狀塊、無(wú)白心、無(wú)硬心，最終藥液250 mL，含生藥125 g，濃度0.5 g/m，用符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)藥品包裝材料分裝藥液，室溫冷卻，-20℃儲(chǔ)存。給予治療組大鼠每日1.25 g/kg（2.5 mL/kg）定量口服喂養(yǎng)，1次/d，連續(xù)28 d。對(duì)照組和假手術(shù)組同步給予等量的生理鹽水。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo) 分別于治療7、14、21、28 d后，每組各取6只動(dòng)物觀察。

1.3.1 X線攝片 10%水合氯醛腹腔注射（300 mg/kg）麻醉大鼠，X線攝片（GE Revolution RE/d型，USA）觀察骨痂結(jié)構(gòu)和骨質(zhì)密度改變，判斷骨折愈合情況。

1.3.2 大體觀察 10%水合氯醛腹腔注射（300 mg/kg）麻醉大鼠，完整取出股骨，剔除多余軟組織，生理鹽水洗滌，照相記錄骨折愈合情況。

1.3.3 組織病理 將股骨置4%多聚甲醛中固定24 h，蒸餾水浸泡4 h，置于20%乙二胺四乙酸（EDTA）溶液脫鈣15 d。截取骨折處上、下各0.5 cm之間的組織（包括血腫、骨痂組織），常規(guī)乙醇脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，應(yīng)用切片機(jī)（Leica2015,上海）沿縱軸切片，厚5μm，貼于載玻片。蘇木精-伊紅染色，光學(xué)顯微鏡下觀察骨痂的組織結(jié)構(gòu)。

1.3.4 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) 麻醉大鼠，經(jīng)腹主動(dòng)脈取血（4 mL），普通離心機(jī)4000 r/min離心10 min，分離血清（2 mL）。采用雙抗夾心ELISA試劑盒（Blue Green公司）測(cè)定大鼠血清BMP-7、IGF-1、bFGF、TGFβ1水平。按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，向特異性抗體包被酶標(biāo)板中每孔加血清標(biāo)本100μL，37℃孵育2 h，雙蒸水洗滌5 min×3次，加顯色劑顯色2 min，雙蒸水洗滌5 min×3次，洗板機(jī)拍干，用酶標(biāo)儀（Bio-Rad 550型，美國(guó)）在450 nm測(cè)定每孔的吸光度值，根據(jù)樣品的吸光度值在制備標(biāo)準(zhǔn)曲線坐標(biāo)上找出對(duì)應(yīng)的BMP-7（pg/mL）、IGF-1（ng/L）、bFGF（ng/L）和TGFβ1（ng/L）濃度。

2 結(jié)果

2.1 X線觀察 假手術(shù)組大鼠股骨骨皮質(zhì)完整、連續(xù)（圖1A），模型組（對(duì)照組、治療組）大鼠骨折當(dāng)天骨折線清晰，骨皮質(zhì)連續(xù)性中斷（圖1F）。對(duì)照組大鼠骨折7 d（圖1B）骨折斷端被纖維性組織填充，但骨折線仍然明顯，至14 d（圖1C）纖維性骨痂開(kāi)始形成，至21 d（圖1D）有鈣鹽沉著，至28 d（圖1E）骨性骨痂形成，骨小梁排列不規(guī)則。治療組大鼠骨折后7～21 d（圖1G、H、I），骨痂結(jié)構(gòu)變化與對(duì)照組相應(yīng)時(shí)間比較無(wú)明顯差異，但至28 d治療組骨痂結(jié)構(gòu)（圖1J）優(yōu)于對(duì)照組（圖1E），其皮質(zhì)骨及髓腔可辨，成像更加清晰。

圖1 大鼠骨折愈合的X線觀察

2.2 大體觀察 假手術(shù)組大鼠骨皮質(zhì)完整（圖2A），模型組大鼠骨折線清晰（圖2F）。對(duì)照組骨折7 d（圖2B）骨折斷端被纖維性肉芽組織包圍（針扎易透），14 d（圖2C）纖維性骨痂形成、變硬（針扎有阻力），21 d（圖2D）纖維性骨痂和軟骨骨痂增多、中心硬度增大（針扎阻力增大），28 d（圖2E）纖維性骨痂逐漸被軟骨和骨性骨痂代替，硬度增大（針扎不透）。治療組大鼠術(shù)后7～21 d（圖2G、H、I）骨痂結(jié)構(gòu)與對(duì)照組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較無(wú)明顯差異，但至28 d治療組骨痂（圖2J）硬度較對(duì)照組（圖2E）明顯增大（針扎不進(jìn)）。

2.3 組織病理 假手術(shù)組大鼠骨質(zhì)結(jié)構(gòu)正常（圖3A），模型組大鼠在骨折當(dāng)天骨折端斷為血腫組織所填充（圖3F）。對(duì)照組骨折后7 d（圖3B）形成肉芽組織，14 d（圖3C）骨折端纖維性組織、成骨細(xì)胞增多，形成大量纖維性骨痂，21 d（圖3D）破骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞活躍，骨小梁形成，28 d（圖3E）骨小梁清晰可見(jiàn)。治療組骨痂結(jié)構(gòu)在7～21 d（圖3G、H、I）與對(duì)照組相應(yīng)時(shí)間比較無(wú)顯著性差異，但至28 d（圖3J）骨痂結(jié)構(gòu)顯著優(yōu)于骨折組（圖3E）。

2.4 酶聯(lián)免疫檢測(cè) 假手術(shù)組血清BMP-7水平在術(shù)后7～28 d未見(jiàn)顯著性變化（t=0.54～1.03，P＞0.05）；對(duì)照組和治療組在術(shù)后7～28 d各時(shí)間點(diǎn)均顯著高于假手術(shù)組（t=20.46～21.07，P＜0.05）；治療組術(shù)后7～21 d與對(duì)照組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較無(wú)顯著性差異（t=0.64～0.93，P＞0.05）；療組術(shù)后28 d顯著高于對(duì)照組（t=12.92，P＜0.05）和假手術(shù)組（t=8.63，P＜0.05）。見(jiàn)表l。

圖2 大鼠骨折標(biāo)本的大體線觀察

圖3 大鼠骨折處骨痂的病理學(xué)觀察，HE染色×200

表1 各組大鼠各時(shí)間點(diǎn)血清BMP-7水平（±SD，pg/mL）

表1 各組大鼠各時(shí)間點(diǎn)血清BMP-7水平（±SD，pg/mL）

注：與假手術(shù)組比較,aP＜0.05;與對(duì)照組比較,bP＜0.05;與21 d比較,cP＜0.05

組別假手術(shù)組對(duì)照組治療組n6 6 6 7 d 428.24±11.15 538.85±12.17a 530.69±14.36a 14 d 430.94±11.26 540.42±12.22a 534.70±13.55a 21 d 433.14±10.65 543.14±13.28a 536.42±13.32a 28 d 432.83±10.53 450.69±11.65a、c 493.27±10.59a、b、c

假手術(shù)組血清IGF-1水平在術(shù)后7～28 d未見(jiàn)顯著性變化（t=0.54～1.03，P＞0.05）；對(duì)照組和治療組在術(shù)后7～28 d各時(shí)間點(diǎn)均顯著高于假手術(shù)組（t=20.46～21.07，P＜0.05）；治療組術(shù)后7～21 d與對(duì)照組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較無(wú)顯著性差異（t=0.64～0.93，P＞0.05）；治療組術(shù)后28 d顯著高于對(duì)照組（t=12.92，P＜0.05）和假手術(shù)組（t=8.63，P＜0.05）。見(jiàn)表2。

假手術(shù)組血清bFGF水平在術(shù)后7～28 d未見(jiàn)顯著性變化（t=0.54～1.03，P＞0.05）；對(duì)照組和治療組在術(shù)后7～28 d各時(shí)間點(diǎn)均顯著高于對(duì)照組（t=20.46～21.07，P＜0.05）；治療組術(shù)后7～21 d與對(duì)照組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較無(wú)顯著性差異（t=0.64～0.93，P＞0.05）；治療組術(shù)后28 d顯著高于對(duì)照組（t=12.92，P＜0.05）和假手術(shù)組（t=8.63，P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表2 各組大鼠各時(shí)間點(diǎn)血清IGF-1水平（±SD，pg/mL）

表2 各組大鼠各時(shí)間點(diǎn)血清IGF-1水平（±SD，pg/mL）

注：與假手術(shù)組比較,aP＜0.05;與對(duì)照組比較,bP＜0.05;與21 d比較,cP＜0.05

組別假手術(shù)組對(duì)照組治療組n 6 6 6 7 d 17.35±0.71 21.08±1.07a 20.35±0.95a 14 d 17.43±0.65 21.22±1.13a 20.39±0.97a 21 d 17.62±0.70 20.47±0.96a 21.25±0.92a 28 d 17.71±0.65 18.02±0.83a、c 20.25±0.85a、b、c

表3 各組大鼠各時(shí)間點(diǎn)血清bFGF含量（±SD，ng/L）

表3 各組大鼠各時(shí)間點(diǎn)血清bFGF含量（±SD，ng/L）

注：與假手術(shù)組比較,aP＜0.05;與對(duì)照組比較,bP＜0.05;與21 d比較,cP＜0.05

組別假手術(shù)組對(duì)照組治療組n6 6 6 7 d 18.36±0.74 22.54±0.82a 22.63±0.77a 14 d 18.23±0.89 22.61±0.86a 22.76±0.75a 21 d 17.89±0.87 23.24±0.94a 23.22±0.88a 28 d 18.07±0.73 18.16±0.56a、c 21.23±0.64a、b、c

假手術(shù)組血清TGFβ1水平在術(shù)后7～28 d未見(jiàn)顯著性變化（t=0.54～1.03，P＞0.05）；對(duì)照組和治療組在術(shù)后7～28 d各時(shí)間點(diǎn)均顯著高于對(duì)照組（t=20.46～21.07，P＜0.05）；治療組術(shù)后7～21 d與對(duì)照組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較無(wú)顯著性差異（t=0.64～0.93，P＞0.05）；療組術(shù)后28 d顯著高于對(duì)照組（t=12.92，P＜0.05）和假手術(shù)組（t=8.63，P＜0.05）。見(jiàn)表4。

表4 各組大鼠各時(shí)間點(diǎn)血清TGFβ1含量（±SD，ng/L）

表4 各組大鼠各時(shí)間點(diǎn)血清TGFβ1含量（±SD，ng/L）

注：與假手術(shù)組比較,aP＜0.05;與對(duì)照組比較,bP＜0.05;與21 d比較,cP＜0.05

組別假手術(shù)組對(duì)照組治療組n6 6 6 7 d 122.01±8.14 162.55±10.19a 154.52±13.93a 14 d 124.96±7.54 161.08±12.26a 157.69±10.86a 21 d 123.61±8.42 163.09±11.21a 160.04±12.44a 28 d 124.66±7.01 127.28±7.43a、c 149.29±8.15a、b、c

3 討論

骨折是骨的完整性和連續(xù)性中斷。依據(jù)組織、細(xì)胞學(xué)的變化，將骨折愈合分為血腫機(jī)化期、原始骨痂形成期、骨痂改造塑型期三個(gè)階段。在血腫機(jī)化期，丹參、川芎、紅花等活血化瘀藥物可以改善骨折斷端局部血液循環(huán)，為骨痂形成提供物質(zhì)保障。在骨痂形成期，續(xù)斷、骨碎補(bǔ)等含有豐富膠原、鈣鹽和微量元素，參與蛋白合成酶代謝等，有利于骨質(zhì)修復(fù)[4]。黃佩軍[1]應(yīng)用壯筋續(xù)骨湯聯(lián)合鎖定加壓鋼板內(nèi)固定治療脛骨平臺(tái)骨折有效率達(dá)90%；張學(xué)恒等[5]應(yīng)用單側(cè)多功能外固定支架配合壯筋續(xù)骨湯治療肱骨骨折骨不連，骨折愈合率高達(dá)97.4%。

骨折愈合是一個(gè)復(fù)雜的骨再生、修復(fù)過(guò)程，有多種細(xì)胞因子參與。隨著基因、生物技術(shù)的不斷提高，對(duì)骨生長(zhǎng)因子促進(jìn)骨折愈合機(jī)制的認(rèn)識(shí)也不斷深入[6]。Urist等[7]首先發(fā)現(xiàn)了BMP，并由此提出了“誘導(dǎo)成骨”理論。BMP-7具有強(qiáng)烈的誘骨活性，其通過(guò)干預(yù)間充質(zhì)干細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子Runx2和Osterix的表達(dá)，誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化，并協(xié)同其他調(diào)節(jié)因子參與骨組織的形成[8]。IGF-1是調(diào)節(jié)骨細(xì)胞功能和代謝的重要因子，能減少骨膠原退化、增加骨質(zhì)沉積，促進(jìn)成骨細(xì)胞分化、成熟及補(bǔ)充[9]，并以劑量-時(shí)間依賴(lài)性方式影響其增生及功能代謝[10]。IGF-1與骨組織中的受體結(jié)合，發(fā)生受體自身磷酸化激活絡(luò)氨酸蛋白酶,促使胰島素受體底物磷酸化，從而調(diào)節(jié)軟骨細(xì)胞、骨細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖與代謝[11-13]。

bFGF通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、分化并改變細(xì)胞產(chǎn)物的合成而作用于成骨過(guò)程，不僅促進(jìn)骨細(xì)胞的生長(zhǎng)，而且促進(jìn)毛細(xì)血管的增生，改善血液供應(yīng)，促進(jìn)成骨細(xì)胞與支架材料的黏附[14]。在參與骨折修復(fù)過(guò)程中，TGF-β1與bFGF有正協(xié)同作用，TGF-β1是bFGF的調(diào)控因子[15]。聯(lián)合應(yīng)用能協(xié)同刺激成骨細(xì)胞增殖，加速軟骨內(nèi)骨化的進(jìn)程,比單獨(dú)應(yīng)用一種因子具有更明顯的成骨誘導(dǎo)作用[16-18]。內(nèi)源性bFGF在骨折愈合各階段有恒定的基因表達(dá)水平，一般是骨損傷初期表達(dá)強(qiáng)烈，到高峰后表達(dá)逐漸減弱：在骨折后l～3周內(nèi)持續(xù)存在于骨折位點(diǎn)，從第4 d至3周內(nèi)，bFGF表達(dá)強(qiáng)烈，隨時(shí)間的推移逐漸減弱[19]。bFGF早期表達(dá)能使骨端多種細(xì)胞分裂、增殖，使血腫機(jī)化形成肉芽組織，后期主要使間質(zhì)細(xì)胞或成纖維細(xì)胞保持增殖活躍狀態(tài)。

骨生長(zhǎng)因子生物活性大，生理作用強(qiáng)，能加速骨折愈合，但是外源性細(xì)胞因子半衰期短，清除率高，不能持續(xù)有效地促進(jìn)骨折愈合。中藥治療骨折，除了解痙止痛、活血化瘀、去腐生肌等常規(guī)作用外，也直接或間接影響骨生長(zhǎng)因子的分泌、降解和活性調(diào)節(jié)。實(shí)驗(yàn)研究顯示，中藥治療骨折可通過(guò)提高外骨痂、聯(lián)接骨痂、橋梁骨痂、礦化骨痂的體積密度，從而增加骨骼強(qiáng)度，使骨癡拉伸強(qiáng)度、彎曲強(qiáng)度、抗折力、載荷量等力學(xué)性能明顯增強(qiáng)。王力等[20]實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，用壯筋續(xù)骨湯體外培養(yǎng)骨細(xì)胞，S期細(xì)胞明顯增多，能促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖。說(shuō)明壯筋續(xù)骨湯能促進(jìn)成骨細(xì)胞DNA的合成，通過(guò)促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖來(lái)實(shí)現(xiàn)加快骨折愈合的作用。王祥杰等[21]動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，壯筋續(xù)骨湯在骨折初期即能顯著提高實(shí)驗(yàn)性大鼠血清BMP-7、NPY水平，促進(jìn)實(shí)驗(yàn)性大鼠骨折愈合。

本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，壯筋續(xù)骨湯在骨折術(shù)后第1～3周內(nèi)并沒(méi)有提高大鼠血清中BMP7、IGF-1、bFGF和TGF-β1水平，只是在21 d后，能使骨生長(zhǎng)因子繼續(xù)保持較高水平，說(shuō)明壯筋續(xù)骨湯并不能促進(jìn)內(nèi)源性骨生長(zhǎng)因子分泌，可能只是在骨折愈合后期起到減緩內(nèi)源性BMP7、IGF-1、bFGF和TGFβ1降解、延長(zhǎng)其半衰期、增強(qiáng)其活性，從而發(fā)揮促進(jìn)骨折愈合的作用。

[1]黃佩軍.壯筋續(xù)骨湯聯(lián)合鎖定加壓鋼板內(nèi)固定治療脛骨平臺(tái)骨折療效觀察[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥,2012,31(14)：20-21.

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The Effect of Zhuangjin Xugu Decoction on Serum Levels of Endogenous Growth Factor in Femur Frac? ture Rats

ZHOU Zhen,LAN Qing,LI Hong-bo,et al.Institute of Integrative Medicine,Qingdao University,Qingdao(266021),China

ObjectiveTo investigate the effects of Zhuang Jin Xu Gu Decoction(“ZJXG Decoction”)-which literally means a decoction for strengthening tendons and bones-on serum levels of bone morphogenetic pro?tein-7(BMP-7)and insulin-like growth factor-1(IGF-1),basic fibroblast growth factor(bFGF)and transform?ing growth factor β1(TGFβ1).MethodsSeventy-two male adult Wistar rats were randomly divided into sham-operated group,control group and treatment group,with 24 rats in each group.Femur fractures were gener?ated by cutting femur transversely at middle point.ZJXG Decoction was orally administered after sur?gery for 7～28 days,and fracture healing observed by X-ray,the pathological changes of the callus ob?served by collecting samples for hematoxylin-eosin staining.The serum levels of BMP-7 and IGF-1,bFGF and TGFβ1 were detected by enzyme-linked immunobsorbent assay(ELISA).ResultsSeven days after fracture,the fracture gap was fully filled by fibrous tissue;in 14 days,fibrous callus formatted,osteoblasts increased;in 21 days,calcium salt deposited,osteoclast formed and osteoblast activity increased;in 28 days,bony callus formed,a large amount of trabecular bone formatted.The callus of treatment group rats showed no significant dif?ference from that of the control group at the corresponding time points from 7 to 21 days after fracture,but in 28 days,the treatment group showed better callus than control group did,and the cortical bone and medullary cavi?ty could be identified with more clear image.ELISAResultsshowed that the serum levels of BMP-7,IGF-1,bF?GF and TGFβ1 in the control group and the treatment group from 7 day to 28 days were significantly higher than those in the sham-operated group(t=20.46～21.07,P＜0.05);in 28 days,the levels in the treatment group became significantly higher than those in the control group(t=12.92,P＜0.05)and sham-operated group(t=8.63,P＜0.05).ConclusionIt can be concluded that ZJXG Decoction could enhance the fracture healing by reducing the decomposition of BMP-7 and IGF-1,bFGF and TGFβ1 and enhancing their activities.

Zhuangjin Xugu decoction;rats;fracture;endogenous growth factors

Q95-33;R683

A

1007-6948(2015)05-0479-06

10.3969/j.issn.1007-6948.2015.05.012

1.青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院中西醫(yī)結(jié)合研究中心（青島 266021）

2.青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院松山醫(yī)院（青島 266021）

周縝，E-mail：lnlyfly@163.com

（收稿：2014-06-08 修回：2015-08-20）

（責(zé)任編輯 李秀蘭）