慢性丙型肝炎患者血清腫瘤壞死因子-α水平與病變程度、病毒學(xué)指標、抗病毒治療應(yīng)答效果之間的相關(guān)性研究

楊季萍 肖玉鵬 羅志粦 曾奮 許黎娟

慢性丙型肝炎患者血清腫瘤壞死因子-α水平與病變程度、病毒學(xué)指標、抗病毒治療
應(yīng)答效果之間的相關(guān)性研究

楊季萍 肖玉鵬 羅志粦 曾奮 許黎娟

目的 探討慢性丙型肝炎患者血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平與病變程度、病毒學(xué)指標、抗病毒治療應(yīng)答效果之間的相關(guān)性。方法 選擇50例慢性丙型肝炎患者作為觀察組(分為輕度組18例、中重度組22例、肝硬化組6例和肝癌組4例)和50例健康對照者(對照組), 分別于干擾素治療前后進行TNF-α、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)水平和丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)定量的測定, 并進行統(tǒng)計分析。結(jié)果 觀察組各組ALT、TNF-α水平比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；觀察組各組HCV-RNA對數(shù)值比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。觀察組各組TNF-α、ALT水平均顯著高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；觀察組各組HCV-RNA水平與輕度組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；HCV-RNA含量對數(shù)值與ALT水平和TNF-α含量無顯著相關(guān)性, 但ALT水平與TNF-α含量呈正相關(guān)(r=0.342, P<0.05)。結(jié)論 不同程度慢性丙型肝炎患者TNF-α和ALT水平存在差異, ALT水平與TNF-α含量呈正相關(guān), TNF-α水平可用于評價干擾素治療對機體免疫狀態(tài)的影響。

慢性丙型肝炎；腫瘤壞死因子-α；干擾素；丙型肝炎病毒核糖核酸；谷丙轉(zhuǎn)氨酶

丙型肝炎是由HCV引起的能夠嚴重危害人類健康的疾病, 大部分患者在疾病進展的最終發(fā)展為肝癌和肝硬化。在丙型肝炎慢性化和肝損傷的機制、診斷和預(yù)后的判斷中, 細胞因子的測定具有很重要的參考價值［1］。TNF-α是一種由單核巨噬細胞合成并釋放的活性作用較為廣泛的細胞因子, 可誘導(dǎo)各類細胞進行增殖分化, 并且在肝臟纖維化啟動和炎性反應(yīng)中具有很重要的作用, 同時TNF-α還能夠誘導(dǎo)淋巴細胞產(chǎn)生白細胞介素-2(IL-2)、IL-6、IL-12和干擾素-α(IFN-α)等, 導(dǎo)致肝臟內(nèi)出現(xiàn)大量細胞因子, 進而形成細胞因子網(wǎng)絡(luò)活化, 促使肝臟內(nèi)發(fā)生炎性反應(yīng), 導(dǎo)致肝細胞損傷, 參與肝臟炎性變化和肝癌的發(fā)生發(fā)展［2］。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選擇2011年12月~2014年12月本院確診住院的慢性丙型肝炎患者50例作為研究對象(觀察組), 其中男27例, 女23例, 年齡24~71歲, 平均年齡(49.8±13.6)歲,入選標準符合2000年9月中華醫(yī)學(xué)會傳染病和寄生蟲病學(xué)分會肝病分會西安會議對HCV感染者診斷的標準, 按照其臨床診斷分為：輕度組18例, 中重度組22例, 肝硬化組6例,肝癌組4例。排除嚴重腎功能異?；颊摺⒁倚透窝谆颊?、自身免疫性肝炎患者、酒精性肝炎患者、孕婦及哺乳期婦女等。另選擇本院體檢中心同期健康體檢者50例作為對照組, 其中男29例, 女21例, 年齡28~69歲, 平均年齡(48.3±16.8)歲。各組性別、年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

1. 2 方法

1. 2. 1 實驗方法 TNF-α的測定采用西門子IMMULITE1000化學(xué)發(fā)光法檢測, 試劑盒購自西門子公司。血清ALT水平的測定采用東芝TBA-2000FR全自動生化分析儀進行測定, 試劑盒為北京利德曼公司生產(chǎn)。HCV IgG血清抗體的測定采用ELISA法, 試劑盒由珠海麗珠試劑股份有限公司提供。病毒載量的測定在ABI-7300熒光定量PCR檢測儀上進行?；颊哂谇宄坎杉崭轨o脈血, 室溫下靜置30 min, 3000 r/min離心10 min后分離血清備用。

1. 2. 2 治療方法 觀察組患者入院后均行基礎(chǔ)護肝治療,然后應(yīng)用基因重組α-2b干擾素(安福隆, 天津華利達生物公司, 國藥準字S10970077)進行抗病毒治療, 300萬單位肌內(nèi)注射, 1次/d, 治療14 d后改為隔日1次, 連續(xù)治療6個月,采集治療前及治療6個月后血液樣本, 統(tǒng)一進行檢測。

1. 3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差( x-±s)表示, 采用t檢驗；計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗；多級比較采用方差分析；相關(guān)性分析采用直線相關(guān)性分析, 相關(guān)系數(shù)用r表示。P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 各組ALT、TNF-α和HCV-RNA水平比較 觀察組各組ALT水平比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(F=0.981, P<0.01)；觀察組各組TNF-α水平比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(F=14.69, P<0.01)；觀察組各組HCV-RNA對數(shù)值比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。觀察組各組TNF-α水平均顯著高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=6.596, 9.857, 6.673, 8.358；P<0.01)；觀察組各組ALT水平均顯著高于對照組, 差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=12.031, 6.610, 3.971, 6.857, P<0.01)；觀察組各組HCVRNA水平與輕度組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。將HCV-RNA含量對數(shù)值與患者ALT水平、TNF-α含量進行相關(guān)性分析, 結(jié)果顯示HCV-RNA含量對數(shù)值與ALT水平和TNF-α含量無顯著相關(guān)性, 但ALT水平與TNF-α含量呈正相關(guān)(r=0.342, P<0.05)。見表1。

2. 2 慢性丙型肝炎患者治療前后血清TNF-α水平比較 各組TNF-α水平與治療前比較均顯著降低, 差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表1 各組ALT、TNF-α和HCV-RNA水平比較（±s)

表1 各組ALT、TNF-α和HCV-RNA水平比較（±s)

注：與對照組比較, a P<0.01；觀察組各組ALT、TNF-α比較, P<0.01；與輕度組比較, b P<0.05

組別 例數(shù) ALT(U/L) TNF-α(pg/ml) HCV-RNA(copies/ml) lgHCV-RNA輕度組 18 51.68±10.66a 32.62±21.64a 2.11+07E±2.88+07E 7.01±0.63中重度組 22 105.64±60.61a 35.26±15.61a 3.45+06E±4.99+06Eb 6.04±0.71肝硬化組 6 100.32±88.94a 37.61±2.61a 2.69+06E±2.00+06Eb 6.23±0.64肝癌組 4 125.36±66.51a 34.33±18.31a 2.21+06E±2.62+06Eb 5.77±1.04對照組 50 18.62±5.35 2.31±1.31

表2 慢性丙型肝炎患者治療前后血清TNF-α水平比較（±s, pg/m l)

表2 慢性丙型肝炎患者治療前后血清TNF-α水平比較（±s, pg/m l)

注：與治療前比較, a P<0.05

組別 例數(shù) 治療前 治療后觀察組 50 35.49±2.99 24.71±2.85a完全應(yīng)答組 18 30.31±3.88 21.66±1.35a部分應(yīng)答組 16 35.69±2.81 24.99±2.21a無應(yīng)答組 16 42.37±4.98 28.01±1.66a對照組 50 2.31±1.31 -

3 討論

近年來, 諸多研究表明HCV-RNA含量、ALT水平與肝損傷有顯著相關(guān)性, HCV復(fù)制活躍時引起肝損傷和ALT水平升高, HCV-RNA定量與ALT水平呈正相關(guān)［3］。本研究中, HCV-RNA含量與ALT水平無顯著相關(guān)性, 這提示HCVRNA含量與疾病的程度可能無顯著相關(guān), HCV-RNA含量可能與肝組織炎性程度和病程的進展無水平相關(guān), 病毒復(fù)制導(dǎo)致的免疫損傷和直接損傷有很大的個體差異。這可能與HCV感染機體時免疫狀態(tài)和肝組織的損傷有關(guān), 免疫力較高者造成的病理損傷較重, 免疫力低下者造成的病理損傷較輕,因此免疫功能發(fā)生紊亂才是肝損傷的重要因素［4］。

機體感染HCV后, 免疫系統(tǒng)激活, 導(dǎo)致單核細胞合成并釋放TNF-α, 同時HCV病毒產(chǎn)生的內(nèi)毒素-免疫復(fù)合物也能夠促使機體產(chǎn)生大量TNF-α, 而單核細胞具有的自分泌調(diào)節(jié)機制在TNF-α大量分泌的情況下進行有效調(diào)節(jié)誘導(dǎo)更多的TNF-α釋放。TNF-α又能夠激活T、B淋巴細胞、NK細胞和單核細胞參與病毒感染而改變肝細胞膜成分免疫應(yīng)答, 造成肝細胞壞死和肝功能改變。本研究發(fā)現(xiàn)TNF-α水平與ALT水平呈正相關(guān), 這可能是因為TNF-α2238啟動子A等位基因與ALT水平高度相關(guān)［5］。

本研究中, 治療前后慢性丙型肝炎患者TNF-α水平均有顯著降低, 再一次從臨床角度證實了TNF-α在肝臟損傷中起到的重要炎性介質(zhì)作用。

［1］ Gramenzi A, And reone P, Loggi E, et al. Cytokine profile of peripheral blood mononuclear cells from patients with different outcomes of hepatitis C virus infection. J Viral Hepat, 2005, 12(5):525.

［2］ Murata K, Yamamoto N, Kawakita T, et al. Up- regulation of IL- 18 by interferon alpha- 2b/ribavirin combination therapy induces an anti- viral effect in patients with chronic hepatitis C. Hepatogastroenterology, 2005, 52(62):547.

［3］ Par G, Berki T, Palinkas L, et al. Immunology of HCV infection: the causes of impaired cellular immune response and the effect of antiviral treatment. Orv Hetil, 2006, 147(13):591- 600.

［4］ Mao XR, Yuan H. Genetic association of tumor necrosis facor-alpha polymorphisms with hepatitis C virus infection. Nical Focus, 2007, 22(6):389-392.

［5］ Leone N, Rizzetto M. Natural history of hepatitis C virus infection: from chronic hepatitis to cirrhosis, to hepatocellular carcinoma. Minerva Gastroenterol Dietol, 2005, 51(1):31-46.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.31.018

351100 福建省莆田市第一醫(yī)院

2015-04-29］