乙肝病毒基因分型與HBV DNA及臨床表現(xiàn)的關(guān)系

李衛(wèi)昆650041云南省昆明市第三人民醫(yī)院肝病三科

乙肝病毒基因分型與HBV DNA及臨床表現(xiàn)的關(guān)系

李衛(wèi)昆
650041云南省昆明市第三人民醫(yī)院肝病三科

目的：探討乙肝病毒基因分型(C型和B型)與HBV DNA載量及臨床表現(xiàn)的關(guān)系。方法：2011-2013年收治慢性乙型肝炎、肝硬化患者160例，經(jīng)檢測均為乙肝病毒(HBV)基因型；160例患者均進行基因分型，選測基因B型患者與基因C型患者對HBV DNA載量及臨床類型作比較。結(jié)果：160例患者中，基因B型64例(40%)，基因C型92例(57.5%)，其他類型4例(2.5%)；在HBV DNA載量方面及CHB和LC人數(shù)方面，C型均顯著高于B型，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；C型肝損害嚴重程度高于B型。結(jié)論：乙肝病毒基因C型患者HBV DNA載量高，病情活動相對劇烈，易發(fā)展為重度肝損傷、重型肝炎、肝硬化。

乙型肝炎病毒；基因分型；HBV DNA

資料與方法

2011-2013年收治慢性乙型肝炎及肝硬化患者160例，經(jīng)檢測均為乙肝病毒(HBV)基因型，其中慢性乙肝83例，乙肝肝硬化77例。160例患者中，男113例，女47例，平均年齡(55.5±15.6)歲。所有患者均按照病毒性肝炎診斷標準(第十次全國病毒性肝炎會議修訂)診斷為乙型肝炎，并排除其他類型肝炎病例。

方法：所有納入患者均記錄詳細個人信息，包括患者年齡、性別、體重、工作職務(wù)、病程、病史及臨床表現(xiàn)等，同時留取血清標本做基因分型檢測。同時接受肝功能、乙肝兩對半和HBV DNA定量檢測。選測基因B型患者與基因C型患者對HBV DNA載量及臨床類型作比較。①HBV DNA定量檢測方法：本次研究采用熒光定量PCR技術(shù)檢測HBV DNA載量，所采用試劑和質(zhì)控液、標準液均購于儀器廠家。熒光定量基因擴增儀自帶分析軟件，可自行處理相關(guān)數(shù)據(jù)。按照HBV DNA＞103作為陽性判定標準，2次同為陽性，作為陽性者[1]。②HBV DNA基因分型方法：HBV基因分型采用微板核酸雜交試劑盒完成，檢驗對象均為HBV DNA定性檢測陽性者。具體操作方法：待測血清100 μL與等量處理液混勻，煮沸并離心，然后取上清液進行離心，最后進行預(yù)變性、循環(huán)和延伸。取擴增產(chǎn)物進行反應(yīng)，結(jié)果按P/N值(標本OD值/陰性參照OD值)判定。雜交孔中，呈現(xiàn)陽性結(jié)果的孔顯示名稱，為所檢測標本的病毒基因型[2]。

基因分型觀察標準：P/N值＜3.0為陰性，P/N值≥3.0為陽性。

統(tǒng)計學方法：本次研究采用SPSS 18.0統(tǒng)計學軟件分析所有數(shù)據(jù)，以(±s)表示計量資料，并采用t檢驗；采用χ2檢驗計數(shù)資料。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

結(jié)果

乙肝病毒基因分型的分布：檢測發(fā)現(xiàn)乙肝病毒基因B型64例(40.0%)，基因C型92例(57.5%)，其他類型4例(2.5%)。本次研究中，乙肝病毒基因B型及C型患者，構(gòu)成比97.5%，其他型僅2.5%。B、C型比例16:23。

乙肝病毒基因分型與HBV-DNA載量之間的關(guān)系：在HBV DNA載量方面，C型顯著高于B型，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表1。

乙肝病毒基因分型與臨床表現(xiàn)的關(guān)系：在慢性乙型肝炎(CHB)和肝硬化(LC)人數(shù)兩方面，C型均顯著高于B型，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，提示C型肝損害嚴重程度高于B型，見表2。

討論

乙肝病毒在進化中，從未停止基因突變，且基因突變率較高，這主要是因為乙肝病毒的逆轉(zhuǎn)錄過程轉(zhuǎn)錄方式和缺乏校對酶所造成的。乙肝病毒所形成的不同基因型是其自然感染時變異特點的真實反映，也是病毒進化的結(jié)果。當前，已確定了8種乙肝病毒基因型，按A～H型命名。當前，乙肝病毒基因型中，主要為B型及C型，D型及混合型均在2%左右，本次研究中檢測160例患者，發(fā)現(xiàn)乙肝病毒基因B型64例(40.0%)，基因C型92例(57.5%)，其他類型4例(2.5%)。乙肝病毒基因B型和C型患者，構(gòu)成比97.5%，其他型僅2.5%。B、C型比例16:23，約等于4:6。區(qū)映研等所作研究中發(fā)現(xiàn)基因分型分布B型29 例(26.9%)，C型51例(47.2%)，與本次研究結(jié)果存在一定差異，但是2次研究都顯示C型人數(shù)顯著高于B型，且高于其他型，造成數(shù)據(jù)差異的主要原因為研究對象的數(shù)量和個體差異[3]。

本次研究結(jié)果顯示，發(fā)現(xiàn)C型患者的各指標與B型差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，證明C型肝損害嚴重程度高于B型。同時，研究中還發(fā)現(xiàn)在HBV DNA載量方面及慢性乙型肝炎和肝硬化人數(shù)方面，C型均顯著高于B型，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，說明C型乙肝病毒基因患者易發(fā)展為慢性乙型肝炎和肝硬化[4]。

本次研究針對B型和C型的結(jié)果顯示：①B型：HBV DNA載量相對較低，病情活動相對緩和，臨床類型普通慢性乙型肝炎占多數(shù)，肝硬化比例少。②C型：HBV DNA載量高，病情活動較為劇烈，肝硬化、重度肝損傷、重型肝炎比例大，普通慢性乙型肝炎比例少[5]。提示在乙肝病毒基因C型患者HBV DNA載量高，病情活動相對劇烈，易發(fā)展為重度肝損傷、重型肝炎、肝硬化；而B型與C型相反。在臨床診斷中，可根據(jù)患者的乙肝病毒基因分型，制定治療方案，做好早期預(yù)防措施，使患者病情進展減慢。

The relationship between HBV genotypes and HBVDNA and clinical manifestations

Li Weikun
The Third Hepatic Department,the Third People's Hospital of Kunming City,Yunnan Province 650041

Objective:To explore the relationship between HBV genotypes and HBV DNA and clinical manifestations.Methods: 160 cases of chronic hepatitis B,liver cirrhosis patients were selected from 2011 to 2013.They were hepatitis B virus(HBV) genotype through detection.160 patients were given the genotypes.We compared HBV DNA load and clinical type in genotype B patients and genotype C patients.Results:In 160 patients,genotype B was in 64 cases(40%);genotype C was in 92 cases(57.5%);the other type was in 4 cases(2.5%).In the HBV DNA load and CHB and the number of LC,C type was significantly higher than that of B type,and the difference was statistically significant(P＜0.05).Liver damage of type C was more severe than the B type. Conclusion:HBV DNA load of HBV genotype C patients was high.The activity of disease was relatively severe.It was easy for the development of severe liver injury,severe hepatitis,liver cirrhosis.

Hepatitis B virus;Genotyping;HBV DNA

10.3969/j.issn.1007-614x.2015.8.66