用鹽酸小檗堿作為黃連等中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)探討臨床用藥的安全

安敬美273400山東省費(fèi)縣人民醫(yī)院

用鹽酸小檗堿作為黃連等中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)探討臨床用藥的安全

安敬美
273400山東省費(fèi)縣人民醫(yī)院

目的：以鹽酸小檗堿為對(duì)照依據(jù)，探討中藥質(zhì)量確定控制指標(biāo)的科學(xué)性，同時(shí)作為臨床安全用藥的憑據(jù)。方法：以HPLC對(duì)鹽酸小檗堿在黃連中的含量進(jìn)行檢測(cè)，然后通過對(duì)其在飲片、藥對(duì)以及復(fù)方制劑3種不同藥品中的含量、用藥合理性與療效對(duì)比，研究其在臨床用藥中的可靠性與有效性。結(jié)果：黃連及其藥對(duì)以及復(fù)方制劑中含鹽酸小檗堿（5.49±0.067）％～（0.12±0.007）％，而黃柏及其藥對(duì)以及復(fù)方制劑中含鹽酸小檗堿（3.37±0.064）％～（0.13±0.005）％。結(jié)論：中藥藥效得以發(fā)揚(yáng)主要依靠的是藥效組分物質(zhì)，本次研究中，鹽酸小檗堿在黃連、黃柏與其藥對(duì)還有復(fù)方制劑的含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于臨床用藥標(biāo)準(zhǔn)。

鹽酸小檗堿；黃連、黃柏及其藥對(duì)以及復(fù)方制劑；含量及安全性研究

本文以HPLC對(duì)鹽酸小檗堿在黃連中的含量進(jìn)行檢測(cè)，然后通過對(duì)其在飲片、藥對(duì)以及復(fù)方制劑3種不同藥品中含量情況以及各個(gè)藥物的療效情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，同時(shí)展開對(duì)比，現(xiàn)報(bào)告如下。

資料與方法

藥品選擇：鹽酸小檗堿對(duì)照樣品（中檢所，110713-200911）、黃連、黃柏、木香、梔子和蒼術(shù)。所有藥品均與《中國藥典》標(biāo)準(zhǔn)相符，復(fù)方劑：白頭翁湯，黃柏蒼術(shù)湯、葛根芩連湯以及黃連解毒湯。

儀器選擇：色譜儀（紫外線檢測(cè)儀器規(guī)格：SPD-15C；四元泵規(guī)格：LC-SC；自動(dòng)進(jìn)樣器規(guī)格：SIL-1OAF，電子天平（規(guī)格：BP110S與BT25S），冷凍干燥器（規(guī)格：NB4X Scientz1ON）。

實(shí)驗(yàn)方法：首先進(jìn)行溶液配制，可以分為對(duì)照組與試驗(yàn)組的溶液配制。即前者可以采用甲醇對(duì)鹽酸小檗堿進(jìn)行溶解，配比0.1g/L的溶液；后者需要配比醇提取物以及水提取物，醇提取物配比方法：以40mg的黃連以及黃柏粉溶解在甲醇鹽酸混合液中（比例100：1），過超聲半小時(shí)，待冷卻后取10mL放在量瓶中定容（采用甲醇）；水提取物的配比方法：取定量的黃連、黃柏與其藥對(duì)、復(fù)方制劑，加入10倍量的水以電熱套煎煮20min，濾掉殘?jiān)瑢?duì)濾液進(jìn)行低壓濃縮，同時(shí)把握壓縮溫度60℃左右，當(dāng)體積達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)后停止?jié)饪s，取兩種提取物溶液再次以甲醇進(jìn)行定容，完成以上所有步驟后，將定容完的溶液轉(zhuǎn)移至50mL大量瓶中。

條件和方法：①色譜柱：C18（4.6 mm×250mm×5μm），波長：345 nm；流動(dòng)相：乙腈與0.05mol/L磷酸二氫鉀進(jìn)行（50：50）配比，此外每100mL配比溶液配比0.4 g十二烷基磺酸鈉，pH以磷酸調(diào)整為4.0左右，進(jìn)樣10μL。②測(cè)定與含量計(jì)算：分別取對(duì)照溶液、配比的醇、水提取物作為測(cè)定對(duì)象，進(jìn)樣后測(cè)定數(shù)據(jù)，再以外標(biāo)法進(jìn)行計(jì)算，結(jié)果顯示鹽酸小檗堿色譜的峰值時(shí)間12min，而鹽酸小檗堿色譜和鄰近色譜的譜峰有明顯區(qū)分，符合相關(guān)規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。③重復(fù)步驟2的測(cè)定與計(jì)算，同時(shí)得出結(jié)果，鹽酸小檗堿含量RSD 1.09％。④線性分析：取鹽酸小檗堿對(duì)照品，配比成五種不同濃度的溶液，濃度分別為0.0404 g/L、0.0606 g/L、0.0808 g/L、0.1010 g/L以及0.1212 g/L，過濾進(jìn)樣，通過計(jì)算峰面積，可得結(jié)果分別為：1559516、2255120、2888724、3777364以及4457654，由此推算 線 性 方 程 ：Y=36230297.0297X+60267.6（R2=0.9973）。⑤回收率實(shí)驗(yàn)：去6份黃連進(jìn)行分組，然后在其中加入稱量好的鹽酸小巢堿對(duì)照品，根據(jù)流程1的步驟完成溶液配比，同時(shí)獲取配比好的溶液1mL，在其中加入甲醇鹽酸混合液（比例100∶1），將溶液二次配比成10mL的3份不同濃度的溶液，濃度分別為0.0808 g/L、0.1010 g/L以及0.1212 g/L，依然遵循步驟2的進(jìn)樣過濾流程，最后獲得平均回收率100.01％，RSD值2.07％。⑥多次操作稀釋以上對(duì)照組溶液，過濾進(jìn)樣（標(biāo)準(zhǔn)：0.45μm），可測(cè)譜峰高是基線噪聲的10倍左右，定量限1.8mg。⑦用以上測(cè)量法分別測(cè)量對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組配比的溶液，統(tǒng)計(jì)鹽酸小檗堿含量。

結(jié)果

含量動(dòng)態(tài)分析：根據(jù)檢測(cè)結(jié)果，對(duì)于黃連、黃柏水提取物而言，鹽酸小檗堿溶出率分別為58.91％與34.78％，而兩者藥物的水提取物方面，溶出率分別為2.28％～14.93％與3.72％～13.60％；兩者混合的水提取物方面，溶出率27.06％；復(fù)方劑方面，兩者水提取物的鹽酸小檗堿溶出率分別為15.42％與5.95％，而混合復(fù)方劑方面，則為7.86％～24.18％。

中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)的合理性：傳統(tǒng)鹽酸小檗堿用量300～600mg/次，日用量不得超過3次。而黃連的日用量2～5 g，即包含61.4～153.5mg的鹽酸小檗堿（含水的提取率）；黃柏的日用量3～12 g，其中含35.4～141.6mg的鹽酸小檗堿。而本次研究結(jié)果表明：黃連、黃柏及其藥對(duì)以及復(fù)方制劑中的劑量僅為《中國藥典》標(biāo)準(zhǔn)的20％～50％左右，明顯低于用藥標(biāo)準(zhǔn)。

各類中藥中鹽酸小檗堿的藥效對(duì)比：以上檢測(cè)結(jié)果表明，黃連、黃柏及其飲片、藥對(duì)和復(fù)方制劑的鹽酸小檗堿的成分含量較低，而黃連及其藥對(duì)以及復(fù)方制劑中鹽酸小檗堿含量要低于目前規(guī)定用藥標(biāo)準(zhǔn)（有效成分5.5％以上）的5.1～45.8倍不等，若計(jì)算中考慮提取液的差異誤差，根據(jù)水提取率，預(yù)估其鹽酸小檗堿含量應(yīng)低于用藥標(biāo)準(zhǔn)含量的2.8～25.6倍；而對(duì)于黃柏及其藥對(duì)以及復(fù)方制劑中鹽酸小檗堿含量而言，也低于目前規(guī)定用藥標(biāo)準(zhǔn)，若計(jì)算中考慮提取液的差異誤差，根據(jù)水提取率[1]，預(yù)估其鹽酸小檗堿含量低于標(biāo)準(zhǔn)含量的1.2～9.07倍不等。此外，如果與單一藥物日服用標(biāo)準(zhǔn)量進(jìn)行對(duì)比，兩者的含量僅為該標(biāo)準(zhǔn)量的25％～83.33％。

鹽酸小檗堿的用量與中藥標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)聯(lián)性分析：對(duì)于藥劑質(zhì)量控制來說，《中國藥典》雖然有明確指出于黃連的質(zhì)量由鹽酸小檗堿、表小檗堿、黃連堿、巴馬汀4種指標(biāo)影響，而黃柏則是由鹽酸小檗堿與黃柏堿進(jìn)行影響，但依舊已經(jīng)包含了藥效成本，而且檢測(cè)統(tǒng)計(jì)中顯示，黃連與黃柏兩種中藥及其藥對(duì)以及復(fù)方制劑中鹽酸小檗堿含量遠(yuǎn)低于《中國藥典》中的要求標(biāo)準(zhǔn)，而且也要對(duì)于臨床單一用藥的規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。

討論

作為生物堿的一種，鹽酸小檗堿可以有效治療腸炎、痢疾等嚴(yán)重病癥，而且其可以減少細(xì)菌的菌毛，減低其附著力，同時(shí)也可以作為鈣通道的拮抗劑。本次研究的側(cè)重點(diǎn)是以中藥傳統(tǒng)的黃連、黃柏及其飲片、藥對(duì)和復(fù)方制劑為標(biāo)準(zhǔn)[2]，通過研究其中鹽酸小檗堿的含量數(shù)據(jù)，并且與現(xiàn)今規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比，作為整體臨床安全用藥的依據(jù)，同時(shí)也是對(duì)于目前的臨床的有效性和安全性提供指導(dǎo)和提示依據(jù)，從而保證臨床用藥的規(guī)范性和有效性。

[1] 師永清,康淑荷,王愛軍.HPLC法同時(shí)測(cè)定黃連雙清丸中梔子、芍藥苷、黃芩苷、鹽酸小檗堿和大黃素的含量[J].藥物分析雜志,2013,9（9）：1612-1615.

[2] 侯藝輝,張貴君,徐蓓蕾.用鹽酸小檗堿作為黃連等中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)探討臨床用藥的安全性和有效性[J],中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2012,9（18）：129-132.

To discuss the safety of clinicalmedication with the quality evaluation index of berberine hydrochloride for Chinese goldthread and other Chinesemedicine

An Jingmei
The People'sHospitalofFeiCounty,Shandong Province 273400

Objective：Taking berberine hydrochloride as the reference,to explore the scientific nature of quality control index of Chinese medicine,at the same time,to provide the evidence of clinical safety medication.Methods：The content of berberine hydrochloride in Chinese goldthread was detected with HPLC,then,we compared the content,rationality and efficacy ofmedicine of it in pieces,coupletmedicines and compound preparation,to study the reliability and validity of the clinicalmedication.Results：The contentof berberine hydrochloride in Chinese goldthread and its coupletmedicines and compound preparation were（5.49± 0.067）％～（0.007±0.12）％.The content of berberine hydrochloride in golden cypress and its coupletmedicines and compound preparation were（3.37±0.064）％～（0.13±0.005）％.Conclusion：Chinesemedicine can carry forward.Itmainly depended on the drug substance,the content of berberine hydrochloride in Chinese goldthread and golden cypress and its coupletmedicines and compound preparationweremuch less than the standard ofclinicalmedication in this study.

Berberine hydrochloride；Chinese goldthread and golden cypress and its couplet medicines and compound preparation；Contentand safety studies

10.3969/j.issn.1007-614x.2015.28.6