雙參活血膠囊中藥成分鑒定與丹參酮Ⅱa的測定分析

蘇園 許建中 羅燕 李瑩6500如皋市中醫(yī)院藥劑科000南京市中醫(yī)院藥劑科066遼寧陸軍預(yù)備役高射炮兵第一師醫(yī)院

雙參活血膠囊中藥成分鑒定與丹參酮Ⅱa的測定分析

蘇園1許建中1羅燕2李瑩3
226500如皋市中醫(yī)院藥劑科1
210001南京市中醫(yī)院藥劑科2
110166遼寧陸軍預(yù)備役高射炮兵第一師醫(yī)院3

目的：探究雙參活血膠囊中藥成分鑒定與丹參酮Ⅱa的測定。方法：使用HPLC對丹參酮Ⅱa的含量進行檢測，使用TLC法檢測藥物中人參和丹參的含量。結(jié)果：丹參酮Ⅱa濃度8～24μg/m L，線性關(guān)系良好。結(jié)論：雙參活血膠囊內(nèi)的有效成分為丹參酮Ⅱa，且為脂溶性，這項指標能夠當作藥品質(zhì)量監(jiān)控指標。

雙參活血膠囊；人參；丹參酮Ⅱa；成分鑒定

雙參活血膠囊為我國自主研發(fā)的中成藥[1]，主要由益母草、人參和丹參構(gòu)成。為了在根本上保證藥物質(zhì)量，結(jié)合實際情況，本實驗對該藥物使用TLC法進行全面鑒別，同時使用HPLC法檢測雙參活血膠囊內(nèi)丹參酮Ⅱa的具體含量，現(xiàn)報告如下。

資料與方法

本實驗使用美國Waters公司生產(chǎn)的高效液相色譜設(shè)備為實驗器材，電子天平為梅特勒公司生產(chǎn)，人參和丹參等對照藥物購自本市市面，人參皂苷Re和Rb1、Rg1與雙參活血膠囊由中國藥品生物鑒定所提供。蒸餾水和鹽酸小蘇堿和色譜純、蒸餾水由本院實驗室提供。

人參鑒別工作：選擇10顆雙參活血膠囊顆粒，碾壓均勻，加入乙氧基乙烷30mL，超聲波處理10min，過濾。待揮發(fā)干溶液后，加入水飽和正丁醇50mL，超聲處理半小時后過濾，在此濾液中加入0.5％的NaOH溶液，過濾堿液后，使用正丁醇飽和水將上述物質(zhì)洗至中性。提取出正丁醇溶液，蒸干殘渣后加入CH3OH 1mL進行溶解，將其當作供試品。選擇1 g人參作為對照樣本，使用同樣的方式制作對照藥材液。另外，選擇人參皂苷Re和Rb1、Rg1樣品加入甲醇制作成為對照品液體，依照雙參活血膠囊的制劑原則，對除卻人參的藥材進行稱取，制作成陰性成品，并制作出陰性對照液。吸取上述溶液4～6μL，并將其放置在硅膠材料G薄板中，使用三氯甲烷-甲醇水溶液，以10℃為環(huán)境，放置12 h，后將下層溶液取出，風(fēng)干后在表面噴上10％硫酸乙醇液，加熱至105℃。

丹參鑒定工作：選擇10顆雙參活血膠囊顆粒，碾壓均勻，加入乙氧基乙烷40mL，超聲波處理30min，過濾，殘渣中加入乙酸乙酯1mL溶解，將其當作供試品。后擇取1 g丹參為對照藥物，在其中加入75％乙醇30mL。在加熱回流1 h后，過濾處理，在殘渣中加入10mL熱水做溶解工作。并使用稀鹽酸，調(diào)節(jié)其pH酸堿度。后使用乙醚振蕩加以提取，將乙醚溶液合并處理，干后，在殘渣中加入乙酸乙酯溶解，將其當作對照藥材溶液。另外擇取丹參酮Ⅱa為對照品，在此中加入乙酸乙酯制作成對照品溶液，依照雙參活血膠囊的配置處方，將除卻丹參之外的藥材稱取，使用相同的方法，制作成陰性對照品。另外，也要制作成陰性對照液。吸取上述溶液4～6μL，并將其放置在硅膠材料G薄板中，使用氯仿作為展開劑，取出，風(fēng)干。

丹參酮Ⅱa測定：①色譜條件：色譜柱類型為KramasilC18，預(yù)柱4 mm×18 mm，波長268 nm，流速1mL/min，進樣量20μL，柱溫30℃。處理方式為外標峰面積法。②溶液制作：選擇10粒雙參活血膠囊顆粒，另外選擇1 g精密稱量，后將其加入25mL的甲醇中，以超聲的方式進行處理，放冷后再次稱重，使用甲醇，將之前失去的重量補充，振蕩均勻后過濾處理，選過濾液為供試液，依照相關(guān)處方比例，對丹參之外的藥物加以稱取，制作成成品，使用相同的方式，制作陰性對照溶液。③干擾性實驗：稱取20μL供試品、對照品和陰性對照品，在供試品和對照品色譜上的相關(guān)位置將時間性色譜峰加以保留。④繪制曲線：稱量4mg丹參酮Ⅱa對照物，將其放置在10mL的量瓶中，加入甲醇溶液溶解定容，得出一定濃度的對照品。使用精密定量，分別稱取0.2～0.6mL共計5份樣本，分別將其置入定量瓶內(nèi)，加入適當甲醇溶液搖晃均勻，使用微孔濾膜加以全面過濾，將上述樣品取用20μL樣，對樣品濃度的峰面積加以測量。⑤精密度實驗：吸取20μL、124μg/mL丹參酮Ⅱa測量，時間間隔60min。測量次數(shù)5次。⑥重復(fù)性實驗：選擇同一種樣品，稱取5份，依照上文丹參方式將供試品溶液加以提取，重復(fù)5次，記錄結(jié)果。結(jié)果顯示RSD=0.67％。⑦穩(wěn)定性實驗：選擇同一樣品供試液，在12 h內(nèi)，每1 h取樣，容量20μL，次數(shù)5次，記錄穩(wěn)定性結(jié)果。⑧樣品測定：在5批次雙參活血膠囊內(nèi)取樣，使用精密度測量的方式，對供試品溶液加以制備，后精確稱量20μL，124μg/mL供試品和對照品取樣，將丹參酮Ⅱa的峰面積加以計算，使用外標法對丹參酮Ⅱa的含量加以計算。

結(jié)果

人參鑒定結(jié)果證實：在供試品的色譜內(nèi)和對照組藥物與色譜相對應(yīng)的位置中，出現(xiàn)了顏色相同的斑點，陰性對照組沒有斑點顯示。

丹參鑒定結(jié)果證實：在供試品的色譜內(nèi)和藥材與色譜相關(guān)的位置中，出現(xiàn)了紅色點狀物，陰性對照組無斑點。

丹參酮Ⅱa測定結(jié)果證明：①干擾性實驗：對照品和供試品的色譜對應(yīng)上保存相同時間色譜，陰性對照在該區(qū)間段不存在干擾現(xiàn)象。②線性關(guān)系：丹參酮Ⅱa 8～24μg/mL的線性關(guān)系好。③精密度和重復(fù)性實驗：RSD=0.67％。④穩(wěn)定性實驗：每粒含有丹參酮Ⅱa 0.215 mg。RSD面積0.7％，將樣品置于棕色小瓶中，該物質(zhì)在1 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。⑤樣品測定：在本批次的5個樣品中，每粒含量為0.215、0.219、0.216、0.222、0.221mg。

討論

雙參活血膠囊屬于中藥制劑，在治療心腦血管疾病中能夠發(fā)揮出良好的效果，該藥物有活血化瘀、疏經(jīng)通絡(luò)的效果。為了在根本上實現(xiàn)對該藥物的質(zhì)量控制，本實驗對該藥物中的丹參、人參使用TCL法進行鑒別，結(jié)果證實，在供試品色譜內(nèi)，藥物中的丹參、人參均在相對應(yīng)的位置上，斑點顏色一致，在此位置上，陰性對照品沒有斑點顯示，對丹參酮Ⅱa進行檢測，結(jié)果證明，每粒含量為0.215、0.219、0.216、0.222、0.221mg。

綜上所述，雙參活血膠囊內(nèi)的有效成分為丹參酮Ⅱa，且為脂溶性，這項指標能夠當作藥品質(zhì)量監(jiān)控指標。

[1]鐘世紅,古銳,王鈴鑫,等.HPLC同時測定獨一味中7種成分含量[J].中國中藥雜志, 2014,(22)：4373-4378.

Determ ination analysis of TanshinoneⅡa and the Chinesemedicine component identification of shuangshenhuoxue capsule

Su Yuan1,Xu Jianzhong1,Luo Yan2,LiYing3
DepartmentofPharmacy,the TraditionalChineseMedicine HospitalofRugao City 2265001
DepartmentofPharmacy,the TraditionalChinese Medicine HospitalofNanjing City 2100012
The FirstDivision HospitalofAntiaircraftArtillery in Liaoning Army Reserve 1101663

Objective：To study the determination of TanshinoneⅡa and the Chinese medicine component identification of shuangshenhuoxue capsule.Methods：The contentof TanshinoneⅡawas detectwith high performance liquid chromatography and the contentofginsengand danshenwasdetectwith thin layer chromagraphy.Results：The concentration of TanshinoneⅡawas8～24μg/mL,the linear relationship was good.Conclusion：The effective components of shuangshenhuoxue capsule was Tanshinone Ⅱa,and itwas lipid soluble,which could beused as thequality control index.

Shuangshenhuoxue capsule；Ginseng；TanshinoneⅡa；Componentidentification

10.3969/j.issn.1007-614x.2015.36.5