豬巴氏桿菌病及其防控措施

朱 俠

（江蘇省連云港市贛榆區(qū)城頭農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心,江蘇連云港 222131）

豬巴氏桿菌病及其防控措施

朱 俠

（江蘇省連云港市贛榆區(qū)城頭農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心,江蘇連云港 222131）

對來就診發(fā)生以高熱、氣喘、急性敗血死亡為主要特征的18月齡病死懷孕母豬，根據(jù)病史及流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀、剖檢病變等臨床診斷，以及細(xì)菌分離培養(yǎng)，生化試驗等實驗室診斷。確診該豬群的發(fā)病死亡的原因是多殺性巴氏桿菌感染所致。藥敏試驗結(jié)果表明，分離菌對青霉素、羧芐青霉素、氨芐西林、氯霉素、頭孢氨芐、頭孢曲松鈉、頭孢噻肟、氟苯尼考、林可霉素、恩諾沙星高度敏感；對四環(huán)素、強力霉素中度敏感；而對復(fù)方新諾明、諾氟沙星、阿米卡星、卡那霉素、慶大霉素、新霉素、環(huán)丙沙星低敏。

懷孕母豬 多殺性巴氏桿菌 診斷

豬巴氏桿菌病是由多殺性巴氏桿菌引起的豬的一種常見急性、敗血性傳染病，又稱為豬肺疫，豬出血性敗血癥，俗稱為“鎖喉風(fēng)”。發(fā)病急，病程短，常呈窒息和敗血癥，并伴有大量鼻腔氣泡性分泌物，病死率高。近幾年，隨著對本病的重視，衛(wèi)生、預(yù)防等條件的增強，本病已得到有效緩解。

1 病原體

多殺性巴氏桿菌是多種動物的重要病原菌，巴氏桿菌屬。因Pasteur在1880年描述了一種能在家禽引起霍亂的病原菌，在培養(yǎng)特性方面與兔敗血癥、豬肺疫和某些牛肺炎的病原菌無法區(qū)分。由于這些細(xì)菌外觀上的一致性和它們在各種動物所致疾病的相似性，Hueppe于1886年將它們置于同一名稱，即出血性敗血病桿菌之下。而Trevisan于次年提出引起這幾種疾病的病原菌可認(rèn)為是不同的種，但它們均可歸為同一屬內(nèi)，為紀(jì)念巴斯德，將這一屬命名為巴斯德氏菌屬。雖然這一名字已被公認(rèn)，但根據(jù)1886年制定的Flugge氏分類法，由于這些細(xì)菌無法用已知的方法和試驗來區(qū)分，所以Rosenbusch和Merchant主張將該菌改稱為多殺巴斯德氏菌。這一名已被廣泛采用。現(xiàn)在亦稱為多殺性巴氏桿菌。

1.1 形態(tài)及染色

多殺性巴氏桿菌為球桿狀或短桿狀，兩端鈍圓，0.25～0.4μm×0.5～2.5μm，單個存在，有時成雙排列。無鞭毛，不形成芽孢。新分離的強毒株具有莢膜，但通常迅速喪失這種特性。在仔細(xì)染色的組織抹片中可見桿菌的兩端著色較中央部分為深，呈現(xiàn)出明顯的兩極染色外觀，這種特性在以培養(yǎng)物所作細(xì)菌抹片中并不如此顯著，且不論在組織抹片或培養(yǎng)物抹片中也常易被染色過度遮掩，為證明兩極染色性，最好使用瑞氏染色法。在未染色的新鮮病料中通常能見到兩極性形狀。革蘭氏染色顯陰性。

1.2 培養(yǎng)特性

多殺性巴氏桿菌為需氧或兼性厭氧菌，最適溫度為37℃，pH為7.2～7.4。在普通培養(yǎng)基上生長貧瘠，在麥康凱培養(yǎng)基上不生長。在加有血液、血清或微量血紅素的培養(yǎng)基上生長良好。血清瓊脂培養(yǎng)基上菌落為圓形、隆起、光滑、濕潤、邊緣整齊、灰白色的中等大小菌落，血液瓊脂培養(yǎng)基上菌落為濕潤的水滴樣菌落，菌落性豬肺炎病例分離的強毒菌，在血清瓊脂培養(yǎng)基上生長的菌落，于45°折光下觀察時，菌落呈藍綠色帶金光，邊緣有窄的紅黃光帶，稱為Fg型。從散發(fā)型豬肺疫病例中分離的毒力較弱的細(xì)菌菌落，在折光下呈桔紅色帶金光，邊緣或有乳白帶，稱為Fo型。不帶熒光的菌落為Nf型。在肉湯內(nèi)生長輕度混濁，有黏性沉淀，于其中滴加幾滴無菌血清則可促進其生長；在鮮血瓊脂培養(yǎng)基上可獲得最好的生長，一般不溶血。

1.3 菌株分型

本病病原為多殺性巴氏桿菌。其有5種莢膜血清型，即莢膜血清型A、B、D、E、F，我國豬群中主要流行為A、B、D三型。在豬高熱綜合征中A型與D型繼發(fā)感染頻率最高。特別是A型菌株毒力與致病力最強，并有很強的耐藥性，發(fā)病時可引起患豬出現(xiàn)嚴(yán)重的肺炎癥狀。D型菌除了引發(fā)肺炎，還會造成死亡，甚至導(dǎo)致母豬流產(chǎn)。

1.4 理化特性

多殺性巴氏桿菌對外界的抵抗力不強，在干燥的空氣中2～3d即死亡。加熱60℃經(jīng)10～20min即死亡。經(jīng)陽光直射10～15min可致死亡。本菌易自溶，在無菌蒸餾水和生理鹽水中迅速死亡。淺層土壤中可存活7～8d，糞便中可存活14d。一般消毒藥可在數(shù)分鐘內(nèi)將其殺死，如3%石炭酸和千倍升汞水在1min內(nèi)可殺菌，10%石灰乳及常用的福爾馬林3～4min可使之死亡。本菌在48h內(nèi)可分解葡萄糖、果糖、甘露糖和蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。大多數(shù)菌株可發(fā)酵甘露醇、山梨醇。一般對乳糖、楊苷、肌醇、側(cè)金盞花醇不發(fā)酵。可使硝酸鹽還原成亞硝酸鹽。大多數(shù)菌株能產(chǎn)生靛基質(zhì)、硫化氫、氨氣、過氧化氫酶、氧化酶、鳥氨酸脫羧酶。對青霉素、鏈霉素、土霉素、四環(huán)素、磺胺類及許多新的抗菌藥物敏感。

2 流行病學(xué)

2.1 傳染源

病豬和帶病豬是其主要傳染源。由于很大一部分豬都是潛在的帶菌者，所以感染不需有可以查出的病原傳入就能發(fā)生。

2.2 易感類群

多殺性巴氏桿菌能感染多種動物，如豬、牛、兔、雞、鴨、火雞、綿羊、山羊、鹿、鵝。豬為最易感動物，各個年齡階段都可能感染發(fā)病。

2.3 傳播途徑和流行特點

多殺性巴氏桿菌常存在于健康動物的呼吸道內(nèi)。病豬的分泌物、排泄物中含有大量病原菌，會污染飲水、土壤、飼料、用具等外界環(huán)境，這些被污染環(huán)境中的病原菌經(jīng)過健康豬的消化道進入體內(nèi)，進而引起外源性傳染。另外當(dāng)豬群處于不良的外部條件下，如冷熱交替、氣候劇變、潮濕、擁擠、通風(fēng)不良、營養(yǎng)缺乏、疲勞、長途運輸?shù)葢?yīng)激會致使豬抵抗力下降，并致病原菌大量繁殖也能引發(fā)內(nèi)源性傳染。還可通過患病豬咳嗽、噴嚏排出病原，通過飛沫進行呼吸道傳染。此外，蚊蟲叮咬皮膚及傷口也能導(dǎo)致本病的傳播。

該病發(fā)生無明顯季節(jié)性，所以一年四季都能發(fā)病，一般呈散發(fā)性或地區(qū)流行性。

3 臨床癥狀

豬巴氏桿菌病通常是一種纖維蛋白性肺炎，某些病例伴有敗血病，潛伏期12～24h。按照豬肺疫自然分離到的兩種巴氏桿菌菌落型，可分為Fg型巴氏桿菌和Fo型巴氏桿菌。流行性豬肺疫大都是由Fg型引起，全呈急性病程。散發(fā)性豬肺疫多由Fo型所致，也多呈急性病程，間有慢性。下文將按照病程長短將豬肺疫分為最急性型、急性型、慢性型這三種類型分別敘述臨床癥狀。

3.1 最急性型

該型發(fā)病急，常發(fā)生在本病開始爆發(fā)的最初階段，由于無法看到明顯癥狀就突然死亡，俗稱“鎖喉風(fēng)”。病程稍長的病豬可發(fā)現(xiàn)其體溫升高到41℃，甚至42℃以上，呼吸高度困難，繼之哮喘，張口露舌，煩躁不安，口鼻流出泡沫和清液。顯著特征是咽喉部和頸部發(fā)熱、紅腫、堅硬，嚴(yán)重者延至耳根、胸前。臨死前，食欲廢絕，全身衰弱，精神沉郁，心跳急速，呼吸極度困難，伸長頭頸，張口呼吸，可視黏膜發(fā)紺，在耳根、頸、腹等皮膚可見明顯的紫紅色斑，口鼻流出泡沫，很快窒息死亡。病死率達90%以上。

3.2 急性型

本病的主要病型，主要表現(xiàn)為纖維素性胸膜肺炎癥狀。病初體溫常升至40℃～41℃，發(fā)生短而干的痙攣性咳嗽，呼吸困難，有黏稠性鼻液，有時混有血液。之后濕咳，觸診胸部有劇烈的疼痛。病程嚴(yán)重后，呈犬坐姿勢，呼吸極度困難，可視黏膜發(fā)紺，皮膚有紫斑或小出血點。一般頸部不呈現(xiàn)紅腫。病豬機體消瘦，衰弱無力，瀉，心跳加快致心臟衰竭，多窒息而死。不死的病豬則會轉(zhuǎn)變成慢性型。

3.3 慢性型

該型多見于流行后期，主要表現(xiàn)為慢性肺炎或慢性胃腸炎癥狀。臨床呈現(xiàn)為精神沉郁，食欲減退，持續(xù)性咳嗽和呼吸困難，鼻流少許黏膿性分泌物。持續(xù)或間歇性腹瀉，進行性營養(yǎng)不良，極度消瘦，被毛粗亂，四肢無力，有時出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫脹、跛行。皮膚出現(xiàn)濕疹，有的患病豬會出現(xiàn)痂樣濕疹。治療不良者，3～6周后全身消瘦，衰竭而死。不死病豬則會發(fā)展為僵豬，一般交付屠宰，胴體常被拋棄，因為肺臟中被包圍的病灶，胸膜的粘連和多數(shù)轉(zhuǎn)移病變使得胴體變?yōu)闊o用。

4 病理變化

4.1 病理解剖學(xué)

4.1.1 最急性型

該型病程短，死亡急，主要表現(xiàn)為敗血癥變化，咽喉部急性炎癥。全身黏膜、漿膜和皮下組織有明顯出血點。咽喉部因炎性充血、水腫而增厚，致使呼吸極度困難，故多發(fā)生急性窒息死亡。全身淋巴結(jié)出血，切面呈紅色，以下頜、咽背和頸部淋巴結(jié)的變化最為明顯，切面潮紅多汁，嚴(yán)重者發(fā)生淋巴組織壞死。肺臟呈急性水腫和充血變化。脾臟不腫大。胃腸黏膜出血性炎性變化。皮膚有出血紅斑。

4.1.2 急性型

該型以纖維素性壞死性肺炎、漿液纖維素性胸膜炎和心包炎為特征。全身敗血癥，全身黏膜、漿膜以及實質(zhì)器官和淋巴結(jié)呈現(xiàn)出血性敗血癥。肺部有不同程度的肝變區(qū)，周圍常伴有水腫和氣腫，長病程的還會形成壞死灶，肺小葉間有漿液浸潤，切面呈大理石樣。胸腔、心包積液，氣管、支氣管黏膜發(fā)炎，有泡沫狀黏液。

4.1.3 慢性型

由于病程延長，肺肝變區(qū)擴大，有灰色或黃色壞死灶，外面為結(jié)締組織包囊，內(nèi)含干酪樣物質(zhì)，有的形成空洞。病死豬尸體高度消瘦。

4.2 病理組織學(xué)變化

4.2.1 充血水腫期

顯微鏡下可見到肺泡壁毛細(xì)血管顯著擴張并充血，肺泡腔內(nèi)有大量漿液性滲出液，其中有少量紅細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和脫落的肺泡上皮細(xì)胞。

4.2.2 紅色肝變期

顯微鏡下可見肺泡壁毛細(xì)血管充血仍然明顯，肺泡腔內(nèi)大量交織成網(wǎng)狀的纖維色和紅細(xì)胞，還有中性粒細(xì)胞和脫落的肺泡上皮細(xì)胞，支氣管周圍、小葉間和胸膜下組織發(fā)生炎性水腫時明顯增寬，其中充盈大量的漿液纖維性滲出物，還有一定數(shù)量的中性粒細(xì)胞，間質(zhì)中淋巴管擴張，其中充滿多量的炎性滲出物，有的淋巴管發(fā)生炎癥，形成淋巴栓。

4.2.3 灰色肝變期

肺泡壁充血消退，肺泡腔充滿纖維素網(wǎng)和許多中性粒細(xì)胞，紅細(xì)胞幾乎消失，間質(zhì)和胸膜的質(zhì)變與紅色肝變期相同。消散和修復(fù)期，鏡下中性粒細(xì)胞多發(fā)生壞死，纖維素被中性粒細(xì)胞崩解釋放出的蛋白質(zhì)溶解酶逐漸溶解，巨噬細(xì)胞明顯增多，并吞噬壞死組織和炎性產(chǎn)物。溶解的滲出物可經(jīng)支氣管排出，或被淋巴管吸收。隨著滲出物的吸收消散，肺泡壁毛細(xì)血管內(nèi)血流恢復(fù)，肺泡上皮細(xì)胞再生，肺泡腔重新充氣，則肺組織完全恢復(fù)其結(jié)構(gòu)和功能。但是家畜的纖維素性肺炎少見完全消散，這是因為在纖維素性肺炎過程中，淋巴管同時受害，從而阻礙了炎性滲出物的消散，同時肺組織也發(fā)生的較為嚴(yán)重的損傷。病灶通常由肺泡間隔和細(xì)支氣管壁新生的肉芽組織長入，逐漸將滲出物機化，使病變部呈肉樣，稱為肺肉變。另外，發(fā)生纖維素性肺炎的病畜多在患處與紅色肝變期或灰色肝變期時就由于窒息造成死亡。

5 診斷

5.1 一般診斷

病豬體溫一般高達41℃～42℃，呼吸困難，張口喘氣，呈犬坐姿勢，口鼻流白色泡沫和清液；頸部急劇腫大，發(fā)紅，發(fā)熱；口、鼻黏膜發(fā)紺，腹側(cè)、耳根及四肢內(nèi)側(cè)皮膚出現(xiàn)紫紅；全身黏膜和皮下組織有大量出血點，尤以咽喉部及周圍結(jié)締組織的出血性漿液浸潤為特征性癥狀；肺部出血，可見紅色肝變區(qū)，周圍有明顯水腫和氣腫，嚴(yán)重的可見肺和胸膜粘連；全身淋巴結(jié)出血，切面呈紅色；其他臟器有出血點，但脾不腫大。

5.2 實驗室診斷

在嚴(yán)密防止病原菌散播條件下進行解剖，采集病料（胸腔滲出液、肝臟、脾臟）。

5.2.1 細(xì)菌學(xué)檢查

將采集到的病料涂片，以堿性美蘭染色法或瑞氏染色法染色，革蘭氏染色法。鏡檢如見到卵圓形短桿菌、兩極濃染、革蘭氏陰性小球桿菌，即可初步判定為巴氏桿菌病。[9]分離培養(yǎng)可應(yīng)用普通肉湯增菌培養(yǎng)后，接種于血清瓊脂培養(yǎng)基。在血清瓊脂培養(yǎng)基上生長的菌落呈灰白色、圓形、微微隆起、半透明、濕潤、表面光滑、邊緣整齊。普通瓊脂培養(yǎng)基上生長貧瘠。麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上不生長。病死豬的各種器官很易培養(yǎng)出病原菌，而胸、腹液涂片比血片更易發(fā)現(xiàn)。若以喉腫部切口滲出液作涂片鏡檢，也易檢出病原菌，這樣結(jié)合癥狀加以判斷，即可確診。

5.2.2 動物接種試驗

將采集到的病料研磨成糊狀，以滅菌生理鹽水制成1：10的懸液，然后動物接種，將懸液皮下或腹腔接種小白鼠。觀察鑒定時，如病料中含有巴氏桿菌強毒菌，小白鼠最早在10h左右即死亡，一般在24～72h死亡；剖檢發(fā)現(xiàn)呼吸道及消化道黏膜有出血點，脾臟不腫大，肝臟充血、腫大及壞死；取出心血、肝、脾等臟器進行涂片鏡檢和培養(yǎng)，觀察形態(tài)。

5.2.3 生化反應(yīng)

將已經(jīng)純化的分離菌接種于各類生化發(fā)酵管中。由于細(xì)菌的分解代謝和合成代謝受其本身酶控制，例如豬巴氏桿菌有蔗糖轉(zhuǎn)化酶，所以該菌可以把蔗糖水解成葡萄糖和果糖，被細(xì)菌利用可出現(xiàn)反應(yīng)。細(xì)菌種類繁多，所以含有的酶也不同，因此可使用生化試驗方法鑒定多殺性巴氏桿菌，這是鑒定該菌的重要方法。[10]

5.2.4 藥敏試驗

將無菌操作采集的病料制成生理鹽水懸液，用滅菌棉簽均勻涂于平板上，貼上藥敏紙片。結(jié)果用敏感（S）或耐藥（R）報告。

5.2.5 多重PCR技術(shù)

多殺性巴氏桿菌多重PCR技術(shù)的建立，與傳統(tǒng)的Carter氏間接血球凝集試驗相比，縮短了鑒定時間，降低了工作難度。直接以菌落為模板進行菌落多重PCR，這與水浴煮沸法、SDS蛋白酶K裂解法等相比，也節(jié)省了大量時間。本方法的建立對于多殺性巴氏桿菌病的早期快速診斷，及時防治以減少經(jīng)濟損失具有重要的意義。

6 防控措施

6.1 治療方法

發(fā)病初期一般選用高免血清且效果良好，比如豬肺疫免疫血清，對癥狀尚不嚴(yán)重的初期病豬，劑量為每5kg體重注射2ml，最好以半量作靜脈注射，另一半作皮下注射或肌肉注射[11]。注射后若體溫未完全恢復(fù)正常，可再注射一次，劑量為每5kg體重2ml。病情嚴(yán)重的，劑量為每5kg體重注射3ml，1/3的量作靜脈注射，其余的量作皮下注射，由于血清效力不同，實際用量根據(jù)生產(chǎn)廠家的規(guī)定做出調(diào)整。[12]

采用抗生素（青霉素、鏈霉素、四環(huán)素、土霉素等）和磺胺類藥均可對豬巴氏桿菌病產(chǎn)生療效。青霉素第一次注射時，劑量為2000IU/kg，以后每隔3h按1000IU/kg，待體溫恢復(fù)正常后，再注射2～3次，如果與免疫血清同時注射或溶于血清中注射，效力更好。土霉素按照30～40mg/kg溶于4%的硼酸鈉水溶液中進行肌注，每天1次，病重時可一天二次，連用身體，還可用磺胺噻唑和磺胺嘧啶按0.05～0.1g/kg肌注，2次/d，連用三天

6.2 預(yù)防措施

6.2.1 加強飼養(yǎng)管理

加強飼養(yǎng)管理，關(guān)鍵在于增強豬群的抵抗力，應(yīng)做到合理搭配日糧，確保豬群的營養(yǎng)均衡，注意豬群的通風(fēng)、保暖、干燥性，減少應(yīng)激發(fā)生。

6.2.2 自繁自養(yǎng)與嚴(yán)格引種

實行封閉式的生產(chǎn)，堅持自繁自養(yǎng)原則，防治輸入感染豬。必須引入外界豬種時，應(yīng)選擇具有檢疫合格證明的健康豬種。新豬入圈前，應(yīng)該將圈舍消毒并隔離觀察一段時間，確定健康后方可與其他豬合群。

6.2.3 規(guī)范制度和定期消毒

建立健全的規(guī)?；B(yǎng)豬場防疫、免疫檔案和物品管理制度。定期對豬群進行檢測，及時淘汰感染豬。糞便和排泄物以及死亡的和撲殺的豬只尸體應(yīng)當(dāng)安全銷毀。建立和完善獸醫(yī)體系建設(shè)，加強基層獸醫(yī)人員的培訓(xùn)，讓他們及時了解該病的最新動向，提高解決問題的能力。定期對豬場進行消毒，消毒藥常用1%石炭酸，5%石灰乳及1%漂白粉，能于1min左右殺死病原菌。

6.2.4 免疫接種

由于巴氏桿菌血清型很多，必須選擇與當(dāng)?shù)爻Ｒ娧逍拖嗤木昊虍?dāng)?shù)胤蛛x菌株制成的疫苗進行免疫。對于一些重點地區(qū)，防疫與檢查督促結(jié)合，不留衛(wèi)生死角，真正落實防疫工作。我國已研制出有效的弱毒活菌苗和氫氧化鋁甲醛菌苗，供豬預(yù)防接種。此外還制成兩種高免血清，一為豬肺疫免疫血清，另一為抗出敗多肺疫的緊急預(yù)防，前者用于豬肺疫的緊急預(yù)防，按照1ml能保護5kg體重的原則進行防疫；后者用于牛、羊、豬、禽巴氏桿菌病的緊急預(yù)防。上述兩種高免血清作緊急預(yù)防時，一般于注射后14d內(nèi)有效。

[1] 黃青云.畜牧微生物學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2009：303-304.

[2] 李舫.動物微生物學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2006：284-285.

[3] W.A.黑根，D.W.布隆納爾.家畜傳染病[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1988：97-103.

[4] 李永洲，楊啟軍.豬多殺性巴氏桿菌的分離與鑒定[J].現(xiàn)代畜牧獸醫(yī)，2010，（7）：37-38.

[5] 格果.一起豬巴氏桿菌病的診治[J].青海畜牧獸醫(yī)雜志，2002，32（5）：40.

[6] 鄭杰，盧中華，楊霞，等.一例豬肺疫的診療報告[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2003，（4）：46-47.

[7] 倪博峰，朱家新，方蘭勇.等.多殺性巴氏桿菌的分離鑒定及藥敏試驗[J].浙江畜牧獸醫(yī)，2004，（3）：5-6.

[8] 黃宗森，左瑞華，王強，等.豬巴氏桿菌病-豬肺疫的診斷與防治[J].畜牧與飼料科學(xué)，2009，30（7-8）：103-106.

[9] 高靜薦，任靜柏.豬肺疫及臨床類證鑒別診斷[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊，2009，（6）：106.

[10] 李偉杰，趙耘，杜昕波，等.菌落多重PCR鑒定不同莢膜血清型的多殺性巴氏桿菌[J].動物醫(yī)學(xué)進展，2010，31（1）：6-9.

[11] 吳志強，姬生儉，張國華，等.豬巴氏桿菌病的診治[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊，2006，（4）：96.

[12] 朱明恩.規(guī)?；i場豬巴氏桿菌病綜合防治[J].四川畜牧獸醫(yī)，2010，（9）：49-50.

[13] 和紹典，和振興.豬肺疫的診治[J].云南畜牧獸醫(yī)，2012，（3）：3-4.

[14] 張立根.豬肺疫的流行及診治[J].養(yǎng)殖技術(shù)顧問，2011，（6）：160.

[15] 林太明，吳俊昕.豬巴氏桿菌病的防治[J].福建畜牧獸醫(yī)，2011，33（2）：46-47.

[16] 曹澍澤.獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)技術(shù)[M].北京農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，1992：34，52，108-112.