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    豬乙型腦炎病毒的乳膠凝集試驗(yàn)

    2015-01-25 14:51:12楊春貴
    中國畜牧獸醫(yī)文摘 2015年7期
    關(guān)鍵詞:乳膠乙型稀釋液

    楊春貴

    (云南景東彝族自治縣文井鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心,云南景東 676201)

    豬乙型腦炎病毒的乳膠凝集試驗(yàn)

    楊春貴

    (云南景東彝族自治縣文井鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心,云南景東 676201)

    豬日本乙型腦炎是由日本腦炎病毒引起的一種人畜共患傳染病。豬感染后表現(xiàn)為高熱、流產(chǎn)、產(chǎn)死胎及公豬睪丸炎。本病嚴(yán)重影響生豬生產(chǎn)的發(fā)展,并對人類的健康造成威脅。2014年,采用血清學(xué)的乳膠凝集試驗(yàn)對本病的病原體進(jìn)行了檢測,從文井鎮(zhèn)、錦屏鎮(zhèn)等5個規(guī)模豬場,采集豬血清76份進(jìn)行病原學(xué)檢測,檢出陽性血清19份,陽性率25.00%。

    1 材料

    1.1 儀器和試劑

    5 ml一次性真空負(fù)壓采血管、離心機(jī)、移液管、微量反應(yīng)板、載玻片等。試劑用武漢科前動物生物制品有限責(zé)任公司生產(chǎn)的豬乙型腦炎檢測試劑盒(包括陽性對照血清1瓶(2 ml/瓶)、陰性對照血清1瓶(2 ml/瓶)、乳膠抗原1瓶(2 ml/瓶)、稀釋液)。

    1.2 血清采集

    在文井鎮(zhèn)、錦屏鎮(zhèn)等5個規(guī)模豬場,隨機(jī)用5 ml一次性真空負(fù)壓采血管采集豬血清76份(其中能繁母豬36份,種公豬5份,育成豬35份)。填寫采血登記表,血樣置室溫 3 h,待血液在負(fù)壓采血管中充分凝固,3 000 r/min 離心20min,常規(guī)分離血清,冰凍保存待檢。

    2 用法與判定

    2.1 定性試驗(yàn)

    取被測樣品(血清或全血)陽性對照血清、陰性對照血清、稀釋液各一滴(20μl),分別置于玻片上,各加乳膠抗原一滴(20ul),攪拌混勻大小1cm,并搖動1~2min,于3~5min內(nèi)觀察結(jié)果。

    2.2 定量試驗(yàn)

    先將被測樣品在微量反應(yīng)板內(nèi)作連續(xù)稀釋,各取一滴(2μl)依次滴加于玻片上,另設(shè)對照同上,隨后各加乳膠抗原一滴(20μl),如上攪拌并搖動,判定。

    2.3 結(jié)果判定

    凝集反應(yīng)強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn):“++++”全部乳膠凝集,顆粒聚于液滴邊緣,液體完全透明;“+++”大部分乳膠凝集,顆粒明顯,液體稍混濁;“++”約50%乳膠凝集,但顆粒較細(xì),液體較混濁;“+”有少許凝集,液體呈混濁狀;“-”液滴呈原有的均勻乳狀。

    2.4 判定標(biāo)準(zhǔn)

    當(dāng)陽性對照血清加抗原呈“++++”凝集;陰性對照血清加抗原呈“-”凝集;抗原加稀釋液呈“-”凝集,以呈現(xiàn)“++”及其以上凝集反應(yīng)判為陽性。

    3 結(jié)果

    呈現(xiàn)“++”及其以上凝集反應(yīng)19份,陽性率25.00%,其中能繁母豬12份,占陽性的63.16%,種公豬2份,占10.53%,育肥豬26.31%。

    4 本病防控體會

    4.1 生物安全措施

    蚊是乙腦的傳播媒介,豬是擴(kuò)散宿主,夏秋季乙腦病毒在蚊→豬→蚊之間循環(huán)。因此在蚊滋生的夏秋季節(jié)進(jìn)行滅蚊。

    4.2 淘汰病豬,加強(qiáng)消毒

    確診病豬最好淘汰,豬圈及用具要經(jīng)常消毒。死胎、胎盤等進(jìn)行無害化處理。

    4.3 做好免疫接種

    特別是要按免疫程序做好繁殖母豬及種公豬的免疫接種,于每年3月份(蚊蟲出現(xiàn)前1個月),使用乙型腦炎疫苗間隔1個月免疫兩次。

    [1] 吳清民,蘇敬良.獸醫(yī)傳染病學(xué)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2001.

    [2] 蔡寶祥,沈正達(dá).家畜傳染病學(xué)[M].農(nóng)業(yè)出版社,1984.

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