5－氟尿嘧啶對(duì)老年鼻咽癌患者血漿EB病毒DNA水平的影響及臨床療效

5-氟尿嘧啶對(duì)老年鼻咽癌患者血漿EB病毒DNA水平的影響及臨床療效

蔣成義李多杰1汪洪濤2江濤許亞佳

(蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科，安徽蚌埠233004)

摘要〔〕目的探討5-氟尿嘧啶(5-FU)對(duì)老年鼻咽癌患者血漿EB病毒DNA水平影響及對(duì)老年鼻咽癌患者的臨床療效。方法收集90例Ⅲ期和Ⅳ期鼻咽癌患者，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組各45例。兩組均給予放射治療，實(shí)驗(yàn)組輔助給予5-FU治療，熒光定量PCR反應(yīng)監(jiān)測(cè)患者治療前后EB病毒DNA的變化，臨床檢查和MRI判斷患者治療后的臨床療效，進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組臨床有效率高(P=0.011)。對(duì)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者，實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組有效率高(P=0.000)。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組治療后EBV DNA均較治療前顯著降低，實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組降低更明顯(P<0.05)。結(jié)論5-FU能明顯降低老年鼻咽癌患者血漿EBV DNA水平，提高患者的臨床療效。

關(guān)鍵詞〔〕鼻咽癌；5-氟尿嘧啶；EB病毒DNA

中圖分類號(hào)〔〕R73〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

1蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院腫瘤放療科

2蚌埠醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室

第一作者：蔣成義(1975-)，男，碩士，副教授，副主任醫(yī)師，主要從事頭頸部腫瘤基礎(chǔ)及臨床研究。

EB病毒(EBV)與鼻咽癌關(guān)系非常密切〔1〕，其中血漿EBV DNA定量測(cè)定是近年發(fā)展起來的EBV血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)技術(shù)。研究證實(shí)不同時(shí)期的血漿EBV DNA拷貝數(shù)在鼻咽癌早期診斷臨床分期、療效監(jiān)測(cè)、預(yù)后判斷等方面有重要的臨床意義〔2〕。目前治療鼻咽癌的主要手段仍是放射治療，但治療效果很差。鼻咽癌對(duì)化療相對(duì)敏感，局部中、晚期的治療應(yīng)以綜合治療為主，治療可以顯著提高療效〔3〕。5-氟脲嘧啶(5-FU)是鼻咽癌化療中最常用的方案。本文旨在進(jìn)一步觀察老年鼻咽癌患者在使用化療藥物5-FU期間，血漿EBV DNA水平的動(dòng)態(tài)變化及其臨床療效。

1資料與方法

1.1臨床資料選取2011年4月至2013年5月我院耳鼻喉科通過病理檢測(cè)確診為鼻咽低分化鱗癌及未分化癌患者90例。年齡60～77〔平均(65.3±10.3)〕歲，其中男62例，女28例，按92分期〔3〕，Ⅲ期47例，Ⅳ期43例。隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組各45例。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均有40例患者有頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

1.2治療方法所有的患者均接受同期放療，放射治療按照臨床檢查和CT或磁共振成像(MRI)示腫瘤范圍設(shè)野，鼻咽部劑量為70～74 Gy，頸部治療劑量60～64 Gy，預(yù)防劑量50 Gy。其中實(shí)驗(yàn)組患者同時(shí)接受化療藥物5-FU治療，500 mg/ml，靜脈滴注，2次/w，連續(xù)6 w?；颊呋熐俺Ｒ?guī)預(yù)防應(yīng)用5-羥色胺(5-HT3)受體拮抗劑。出現(xiàn)外周血白細(xì)胞和血小板減少者，給予粒細(xì)胞集落刺激因子和白細(xì)胞介素11治療。

1.3血漿標(biāo)本采集分別抽取治療前(初診)、治療后(2～6 w)清晨空腹肘靜脈血5 ml，放入乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管中，16 000 r/min離心5 min，吸取管中上層血漿并轉(zhuǎn)移至另一抗凝管，-20℃保存，以便進(jìn)行下一步的處理。

1.4血漿DNA提取與熒光定量PCR反應(yīng)凍存的血漿置于4℃解凍，每例標(biāo)本取50 μl血漿，用QIAamp血液DNA提取試劑盒(德國Qiagen公司)抽提DNA。按試劑盒說明書進(jìn)行血液DNA的提取。血漿EBV DNA水平通過熒光定量PCR反應(yīng)進(jìn)行測(cè)定。用成都東方銳進(jìn)科技有限公司ABI-7300實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)過程按廠家說明的檢測(cè)步驟、結(jié)果判斷以及質(zhì)量控制方法進(jìn)行。

1.5療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)患者于第6周化療后第7天體檢和行MRI檢查。按實(shí)體瘤治療后評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(RECIST)對(duì)兩組患者的療效進(jìn)行評(píng)價(jià)，分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、穩(wěn)定(SD)和疾病進(jìn)展(PD)，有效率為CR+PR。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1兩組鼻咽癌患者臨床療效比較兩組患者完成6 w治療后，實(shí)驗(yàn)組有效率(84.4%)顯著高于對(duì)照組(60.0%)(P<0.05)，其中CR 5 vs 3例，PR 33 vs 24例，SD 7 vs 13例，PD 0 vs 5例。

2.2兩組頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶有效率比較實(shí)驗(yàn)組頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶有效率(95.0%)顯著高于對(duì)照組(62.5%)(P<0.05)，其中CR 14 vs 5例，PR 24 vs 20例，SD 2 vs 15例。

2.3兩組血漿EBV DNA水平比較兩組患者均完成6 w治療，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組治療后EBV DNA含量〔(31.23±17.34)×103拷貝/ml，(100.24±34.67)×103拷貝/ml〕均較治療前〔(162.47±50.23)×103拷貝/ml，(167.88±52.34)×103拷貝/ml〕下降(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組下降更明顯(P<0.05)。

3討論

鼻咽癌是頭頸部腫瘤中一種較特殊的腫瘤，有其很顯著的流行病學(xué)、病理學(xué)及治療方面的特點(diǎn)，是一種對(duì)放、化療均較敏感的腫瘤。目前鼻咽癌的傳統(tǒng)治療方案仍是以放射治療為主。雖然近年來由于技術(shù)和設(shè)備有很大的提高和改進(jìn)，但是晚期鼻咽癌單純放射治療5年生存率僅40%左右。因此一種新的治療方案被很多專家提出并逐漸用于臨床，即同期放療輔助化療的方式治療晚期鼻咽癌。5-FU是嘧啶類抗代謝藥物，臨床作為腫瘤的化療藥物已有30多年的歷史，目前是大多數(shù)腫瘤治療的常用藥物之一，并為頭頸部腫瘤治療的首選藥〔4〕。

鼻咽癌的發(fā)生與EBV密切相關(guān)。在鼻咽癌的發(fā)展過程中，EBV感染通過表觀遺傳變化和多種體細(xì)胞遺傳共同地破壞鼻黏部細(xì)胞功能，引起鼻咽癌的發(fā)生以及進(jìn)一步惡化〔5〕。腫瘤標(biāo)志物是指腫瘤細(xì)胞代謝過程中分泌到血漿或其他體液存在的一些生物化學(xué)物質(zhì)。近年來，很多研究者通過提取腫瘤(如鼻咽癌、肝癌)患者和正常健康對(duì)照者血漿、血清DNA，發(fā)現(xiàn)腫瘤患者血漿中存在一種不同于正常對(duì)照者DNA，稱為腫瘤性DNA，這可能是腫瘤細(xì)胞死亡時(shí)分泌到血漿中的生物化學(xué)物質(zhì)〔6〕。Lo等〔7〕認(rèn)為EBV DNA平均拷貝數(shù)可能與鼻咽癌患者病情有一定相關(guān)性。Wang等〔8〕通過研究34例轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)的晚期鼻咽癌患者化療后第1個(gè)月的血漿EBV DNA清除率及含量，發(fā)現(xiàn)均能較好地預(yù)測(cè)療效。朱超綱等〔2〕研究發(fā)現(xiàn)鼻咽癌TNM分期越晚，患者血漿中EBV DNA拷貝數(shù)越高，基本反映了臨床分期。

本研究表明對(duì)于臨床分期3期和4期鼻咽癌患者，在放療的基礎(chǔ)上，輔助化療藥物5-FU能明顯降低患者血漿EBV含量。從而改善患者的臨床癥狀，提高患者5年的生存率。另外，在放療的基礎(chǔ)上加用化療藥物5-FU可以明顯改善患者的臨床癥狀，使部分患者病情達(dá)到部分緩減、完全緩減、甚至病情消失。由于鼻咽癌的組織學(xué)類型具有區(qū)別于其他惡性腫瘤的獨(dú)特生物學(xué)特性：局部侵蝕力強(qiáng)，浸潤性擴(kuò)展，極易侵犯鄰近組織器官，區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高，造成腫瘤靶體積大而不規(guī)則；雖然對(duì)射線有較高的敏感性，但控制腫瘤要求的劑量高，且易復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。輔助化療藥物既可以降低患者血漿中EBV含量，并且改善患者臨床療效，可以彌補(bǔ)單純放療治療的不足。

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〔2014-10-06修回〕

(編輯袁左鳴/滕欣航)