microRNA在中醫(yī)藥防治中風(fēng)中的研究進(jìn)展*

索慶芳，王 筠，趙海蘋，梁 媛

(1．北京王府中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，北京 100049;2．中國中醫(yī)科學(xué)院中醫(yī)基礎(chǔ)理論研究所，北京 100700; 3．首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院，北京 100053)

microRNA在中醫(yī)藥防治中風(fēng)中的研究進(jìn)展*

索慶芳1，王 筠2△，趙海蘋3，梁 媛2

(1．北京王府中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，北京 100049;2．中國中醫(yī)科學(xué)院中醫(yī)基礎(chǔ)理論研究所，北京 100700; 3．首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院，北京 100053)

中風(fēng)的發(fā)病率正在逐年上升，具有高致殘率、高病死率、高復(fù)發(fā)率的特征。小RNA(microRNA，miRNA)是一類長度為19～22個核苷酸的非編碼小分子RNA，參與了神經(jīng)系統(tǒng)的生理功能及病理改變，它們與其靶基因共同參與內(nèi)皮機(jī)能障礙、神經(jīng)與血管的異常調(diào)節(jié)、炎癥、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞外基質(zhì)重塑等導(dǎo)致中風(fēng)的重要環(huán)節(jié)。目前隨著對miRNA研究的深入，發(fā)現(xiàn)miRNA與中醫(yī)藥防治中風(fēng)的關(guān)系密切。故從microRNA與中風(fēng)中醫(yī)病因、中醫(yī)病機(jī)、中醫(yī)藥治療的關(guān)系3個方面系統(tǒng)闡述了miRNA在中醫(yī)藥防治中風(fēng)研究領(lǐng)域中的應(yīng)用。

microRNA;防治;中風(fēng);研究進(jìn)展

腦卒中是一類嚴(yán)重危害人類健康和生命安全的難治性疾病，具有高致殘率、高病死率、高復(fù)發(fā)率的特征，發(fā)病率逐年上升［1］。腦卒中屬于中醫(yī)“中風(fēng)”范疇，中醫(yī)藥在防治中風(fēng)方面有其自己獨(dú)特的、傳統(tǒng)的理論與方法。微小RNA(microRNA，miRNA)是真核生物中一類長度為19～22個核苷酸的參與基因轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控的非編碼小分子 RNA［2］。microRNA與神經(jīng)系統(tǒng)的生理功能及病理改變密切相關(guān)，已經(jīng)成為中風(fēng)病診斷、預(yù)防和治療的重要工具［3］。對microRNA的深入研究有可能突破中風(fēng)的中醫(yī)藥現(xiàn)代研究瓶頸，為中醫(yī)藥防治中風(fēng)提供新的思路和方法。

1 miRNA與中風(fēng)的中醫(yī)病因

自唐宋以前的倡導(dǎo)“外風(fēng)”立論，到金元時代突出以“內(nèi)風(fēng)”立論，到明清至近代對中風(fēng)病因?qū)W的認(rèn)識漸趨全面，中風(fēng)的中醫(yī)學(xué)病因在各種認(rèn)知中逐漸完善。筆者現(xiàn)從“正虛”和“邪聚”兩個角度闡釋miRNA與中風(fēng)中醫(yī)學(xué)病因的關(guān)系。

《靈樞·九宮八風(fēng)》曰:“其有三虛而偏于邪風(fēng)，則為擊仆偏枯矣”等。張仲景認(rèn)為，中風(fēng)根由是因氣血不足、脈絡(luò)空虛、風(fēng)邪乘虛入中，致經(jīng)脈閉阻、瘀塞不通，以致氣血不能暢行、筋脈失卻濡養(yǎng)之故?！夺t(yī)林改錯》說:“中風(fēng)半身不遂，偏身麻木”是由“氣虛血瘀”而成。以上病因都以“正虛”特別是“氣血不足”為主要因素，這與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對中風(fēng)發(fā)病原因的認(rèn)識是一致的。miRNA與腦血管缺血的關(guān)系非常密切。在臨床水平，Sepramaniam等用TaqMan低密度表達(dá)芯片技術(shù)對68例急性期缺血性中風(fēng)患者進(jìn)行了microRNA組學(xué)檢測，并與健康人進(jìn)行對比，發(fā)現(xiàn)了一組包括hsa-let-7e、hsa-miR-1261、hsa-miR-182等在內(nèi)的32個特異性變化的 miRNA［4］，并將這組miRNA作為臨床急性期中風(fēng)的生物學(xué)標(biāo)識。在動物水平，Jeyaseelan發(fā)現(xiàn)大腦中動脈栓塞的模型在大鼠再灌注損傷后let-7、miR-7、miR-424等表達(dá)下調(diào)，而miR-210、miR-215、miR-451等表達(dá)上調(diào)［5］。在細(xì)胞水平，Yin等［6］發(fā)現(xiàn)氧糖剝奪的神經(jīng)元miR-497表達(dá)發(fā)生變化，并進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)miR-497表達(dá)下降抑制神經(jīng)元死亡，而miR-497表達(dá)上升使神經(jīng)元丟失增多，這一過程與抑制Bcl-2和Bcl-w的表達(dá)相關(guān)。

“邪聚”包括痰濕、熱毒等實(shí)邪的壅滯。如《素問·通評虛實(shí)論》曾明確指出:“仆擊、偏枯……甘肥貴人則膏梁之疾也?！薄夺t(yī)鑒》:“肥人多中風(fēng)者，以其氣盛于外，而歉于內(nèi)也，肺為氣出入之道。人肥則氣急，急則肺邪盛……故痰涎壅盛?！眒iRNA與脂質(zhì)代謝的關(guān)系非常密切。Zheng等［7］證實(shí)，miRNA-10b參與脂肪形成過程。劉擎等［8］進(jìn)一步闡釋了循環(huán)miRNA通過調(diào)控PPARγ促進(jìn)定向分化神經(jīng)干細(xì)胞。越來越多的實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明，miR-155是缺血中風(fēng)發(fā)生后誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)的主要分子之一。miR-155 是TLR通路的正向調(diào)控分子，在LPS或IL-1誘導(dǎo)的單核/巨噬細(xì)胞中表達(dá)增加，該過程主要通過對NF-κB通路的調(diào)控來實(shí)現(xiàn)。增加的miR-155反過來可激活I(lǐng)KK(IκB的激酶)和NF-κB及下游炎癥因子的表達(dá)［9］，通過這種途徑，miR-155與炎癥因子就形成了反饋環(huán)路，從而引發(fā)更嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)，而沉默miR-155則能減輕小鼠巨噬細(xì)胞炎癥因子的分泌［10］。

2 miRNA與中風(fēng)的中醫(yī)病機(jī)

“腦脈閉阻，腦髓失養(yǎng)”和“濁毒內(nèi)蘊(yùn)，損傷腦絡(luò)”是中醫(yī)學(xué)認(rèn)識中風(fēng)的兩個重要病機(jī)闡述［11］，而這兩大病機(jī)也始終貫穿miRNA的異常變化。腦為髓之海，由先天之精所化生，后天腎精及水谷精微所轉(zhuǎn)化，而腦髓生理功能的正常發(fā)揮有賴于氣血津液的充養(yǎng)?！把?dú)庹?，人之神?《素問·八正神明論》)，都說明氣血是腦神功能的物質(zhì)基礎(chǔ)。脈管是一個相對封閉的管道系統(tǒng)，氣血循行其中，由于脈管具有“壅遏營氣，令無所避”的功能，所以一旦腦脈閉阻、氣血不能上呈以充養(yǎng)腦髓，則其功能迅疾受損，發(fā)為中風(fēng)。Xin等［12］發(fā)現(xiàn)，來自中風(fēng)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的miR-133b可通過exosome(胞外體)的介導(dǎo)，促進(jìn)神經(jīng)元的軸突生長。“濁毒內(nèi)蘊(yùn)，損傷腦絡(luò)”的病機(jī)變化認(rèn)為，內(nèi)生毒邪是病理?xiàng)l件下機(jī)體功能失調(diào)，代謝產(chǎn)物不能得到清除，蘊(yùn)積體內(nèi)而化生的能對機(jī)體造成嚴(yán)重危害的病理物質(zhì)。中風(fēng)病腦缺血激活小膠質(zhì)細(xì)胞，活化后的小膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生大量的炎癥因子、趨化因子等，超過了機(jī)體自身對這些物質(zhì)的清除能力，成為有害的毒性物質(zhì)，形成“毒邪”的主要來源。“毒邪”難以疏解，通過各種作用途徑造成神經(jīng)元的嚴(yán)重?fù)p害，使得神經(jīng)元失去功能，戕害“腦神”，使神機(jī)失用。有研究表明，miR-424［13］及miR-181c［14］可通過抑制缺血損傷的小膠質(zhì)細(xì)胞增殖及其炎癥因子的分泌，從而對神經(jīng)元起到保護(hù)作用。

3 miRNA與中風(fēng)的中醫(yī)藥治療

基于miRNA研究技術(shù)的完善和成熟，中醫(yī)藥治療中風(fēng)的miRNA機(jī)制引起越來越多學(xué)者的關(guān)注，開始從miRNA的角度對中醫(yī)藥治療中風(fēng)的機(jī)制進(jìn)行探索。鄭仕平［15］研究發(fā)現(xiàn)，通督調(diào)神針灸預(yù)處理可能通過調(diào)控miR-290、miR-494及miR-664的表達(dá)降低AQP4、MMP9相對表達(dá)量，誘導(dǎo)腦缺血耐受，減輕腦水腫。毛蕊異黃酮是中藥黃芪中提取的一個典型的植物雌激素。Yong等［16］的研究結(jié)果顯示，毛蕊異黃酮顯著減少腦梗死體積和腦水腫，改善神經(jīng)功能缺損，其機(jī)制可能與毛蕊異黃酮調(diào)控雌激素受體α與miR-375之間的正反饋有關(guān)。

4 結(jié)論與展望

miRNA已被公認(rèn)為是基因表達(dá)調(diào)控的核心因子之一，為中風(fēng)的診治提供了新的方向，也為解析中醫(yī)藥治療中風(fēng)的科學(xué)內(nèi)涵提供了新的思路。應(yīng)加強(qiáng)miRNA與中風(fēng)中醫(yī)證候?qū)W方面的研究，將miRNA引入中風(fēng)中醫(yī)證候，運(yùn)用miRNA芯片和生物信息學(xué)技術(shù)，建立與證候相關(guān)的miRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，有可能進(jìn)一步從轉(zhuǎn)錄后水平闡明中風(fēng)的中醫(yī)證候?qū)嵸|(zhì)。運(yùn)用生物信息學(xué)軟件可以預(yù)測出miRNA的靶基因，根據(jù)miRNA對靶基因調(diào)控作用和靶基因之間的相互作用，可能構(gòu)建出與中風(fēng)的中醫(yī)證候相關(guān)的miRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò);從miRNA解析中醫(yī)藥治療中風(fēng)的機(jī)制方面比較于腫瘤研究領(lǐng)域還處在初始階段。應(yīng)當(dāng)始終貫穿中醫(yī)學(xué)的整體觀念，恰如現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞-神經(jīng)元-膠質(zhì)細(xì)胞構(gòu)成的神經(jīng)血管單元是一個整體一樣，應(yīng)注重中醫(yī)藥通過調(diào)節(jié)miRNA從而對神經(jīng)組織不同細(xì)胞類型之間關(guān)系的調(diào)節(jié)作用，善于利用細(xì)胞之間的通訊，闡明中醫(yī)藥對miRNA的調(diào)節(jié)機(jī)制。

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R255．2

A

1006-3250(2015)10-1330-02

2015-03-10

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81473449，81102679，81201028)

索慶芳(1979-)，女，黑龍江人，主治醫(yī)師，醫(yī)學(xué)碩士，從事中醫(yī)藥治療腦病的臨床與研究。

王 筠，副研究員，從事中醫(yī)藥防治心腦血管疾病的基礎(chǔ)研究，Tel:010-64089029，E-mail:maggie．wj@126．com。